HPLC-ELSD法测定化学药物成盐离子含量准确性的影响因素探讨

目的：探讨用混合模式离子交换柱建立HPLC-ELSD法测定化学药物成盐离子含量准确性的影响因素。方法：采用新型混合模式离子交换柱Acclaim Trinity P1（3.0 mm×100 mm,5μm）,以30 mmol·L-1醋酸铵缓冲液（取醋酸铵4.59 g,加水1900 mL使溶解,用冰醋酸调节pH至5.2,加入乙腈100 mL）-乙腈（50∶50,v/v）为流动相,流速0.3 mL·min-1,柱温25℃;以蒸发光散射检测器检测,漂移管温度90℃,氮气作为载气,流速2.6 L·min-1。建立HPLC-ELSD法测定奥美拉唑钠中钠离子含量并进行方法学验证;同时选择奥美拉唑钠、头孢曲松钠、盐酸博宁霉素,分别代表药物分子在色谱过程中不保留、强保留和不洗脱3种状态,进行准确度、精密度试验,以数据统计软件SPSS 19.0进行统计分析,考察药物分子洗脱状态对成盐离子含量准确性（准确度、精密度）的影响。结果：钠离子浓度在1.94-77.48μg·mL-1范围内与峰面积呈二项式相关关系（r=0.9999）;加样回收率（n=3）分别为104.5%、101.7%、102.6%,RSD分别为1.3%、3.7%、2.2%;奥美拉唑钠中钠离子平均含量（n=8）为6.23%,与理论钠离子含量（6.24%）无显著性差异（t-检验,α=0.05）;药物分子洗脱状态对钠离子测定的中间精密度、重复性结果以及氯离子测定的重复性有影响（ANOVA分析,α=0.05）,药物分子很难洗脱以及不洗脱将导致精密度偏低。结论：采用新型混合模式离子交换柱,用HPLC-ELSD法测定化学药物中成盐离子含量时,方法通用性好,专属性强,线性范围宽,耐用性好,但药物分子很难洗脱或者不洗脱在色谱填料上将导致精密度偏低。