不同方式抽取的新西兰白兔骨髓中成纤维细胞集落形成单位数量差异观察

目的 观察不同方式抽取的新西兰白兔骨髓中成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)数量差异。方法通过计数在体外培养条件下定量接种骨髓的CFU-F克隆数量观察了新西兰白兔胫骨、股骨、坐骨上三个穿刺点抽取的骨髓中CFU-F在下述情况中的数量差异：1．同一部位分别抽取不同量骨髓(0．2m1、2m1、2ml、1m1)：2．同一部位前后两次(间隔一周)抽取同量骨髓(2m1)；3．不同性别；4．不同年龄(4-6个月、1-1．5岁、2．5-3岁)。结果1．与首次抽取骨髓(0．2m1)比较，各穿刺点第二次抽取的骨髓(2m1)CFU—F数量虽略有下降，但变化不明显，继续抽取骨髓(分别为2ml、1m1)其CFU—F值均比前一次抽取的骨髓明显下降。通过检测股骨上穿刺点每次抽取前的骨髓像变化证实这种现象是穿刺部位骨髓被外周血稀释的结果：2．胫骨骨髓中CFU-F数量略低于股骨和坐骨骨髓；，3．同一部位后次抽取的骨髓CFU-F数量明显低于前次；4．雄性兔骨髓CFU-F数量略低于雌性兔，但差异无显著性；5．上述三个年龄组骨髓中CFU-F数量无明显差异。结论在研究兔骨髓基质细胞时，若实验要求应用较为纯净的骨髓，抽取骨髓量应在2m1以内为宜或多处取材，避免短期内在同一部位重复取材。

缓释的碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影响。方法制备分别含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝胶,分为A、B 2组。同时包埋EPCs,流式细胞仪检测培养7 d后的细胞存活率,倒置显微镜观察EPCs的生长及长入水凝胶的情况并计数,分析b FGF、VEGF对EPCs存活率的影响。培养7 d后用定量实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测总RNA量,并检测PECAM1、CD34、KDR、Angiopoietin-2、pcdh12基因的表达。然后用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测2组去水凝胶的培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,并用荧光法检测水凝胶的降解速度,b FGF、VEGF对EPCs释放MMP的影响。最后以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术检测含有b FGF、VEGF的水凝胶体外诱导血管新生的作用。结果 A组水凝胶,消化7 d后,流式细胞仪检测发现39.43%的EPCs尚存,B组4.14%;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。水凝胶表面种植EPCs可观察到的细胞数A组为378.333 3,B组为302.333 3;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测2组中MMP-2、MMP-9的表达,发现水凝胶中MMP-2和MMP-9随时间推移在72 h内持续释放,A组较B组释放浓度显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光法检测水凝胶的降解发现,从第1天开始,A组水凝胶降解百分比急速升高,之后增长速度减缓,而B组呈继续增长之势,差异有统计学意义。定量RT-PCR检测发现A组较B组基因Ct值高,且差异有统计学意义(P<0.05)。CAM技术检测发现A组(空白组)、B组(不含b FGF、VEGF组)、C组(含b FGF、VEGF组)的新生血管总数分别为9、25、36;两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外研究证实,缓释的b FGF、VEGF不仅能促进水凝胶中EPCs增殖、分化、成熟,以及血管化,还能刺激血管新生。

慢性粒单核细胞白血病患者骨髓成纤维集落形成单位功能及意义

背景:研究表明,异常的骨髓微环境可能参与慢性粒单核细胞白血病的发生,成纤维集落形成单位(colony formingunit-fibroblast,CFU-F)代表了一组具有多系分化潜能的间充质干细胞,其功能、数量状态具有评价骨髓基质微环境状态的意义。目的:评估慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞形成CFU-F的能力与成骨分化潜能,探讨CFU-F指标与患者外周血细胞计数、疾病表现型等指标的相关性。方法:①收集广东省人民医院血液科收治、资料齐全的慢性粒单核细胞白血病患者15例与对照组志愿者10例,比较两组间骨髓形成CFU-F的功能与分化潜能;②分析慢性粒单核细胞白血病患者骨髓CFU-F数量与初诊时外周血细胞计数、临床表现型、骨髓原始细胞及患者基因突变的相关性。实验方案得到广东省人民医院(广东省医学科学院)伦理委员会批准,批件号:[2018]002号。结果与结论:①15例慢性粒单核细胞白血病患者CFU-F数量低于对照组(P=0.04),其中67%(10/15)的慢性粒单核细胞白血病患者骨髓CFU-F数量显著降低(P=0.00),33%(5/15)患者CFU-F水平接近对照组(P=0.14);②全组慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞成骨转录因子Osterix及RUNX2的表达量显著降低(P <0.05),成骨分化潜能显著下降(P=0.00);③慢性粒单核细胞白血病患者CFU-F数量与初诊时外周血白细胞、中性粒细胞以及单核细胞计数呈负相关,与外周血小板计数呈正相关;④在CFU-F数量显著降低的10例患者中,90%(9/10)外周血白细胞计数均升高(≥13×10~9L^(-1),P=0.01),50%(5/10)患者携带有NRAS/KRAS基因位点突变。⑤结果表明:慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞功能受损,形成的CFU-F数量降低,CFU-F数量与外周血细胞计数以及患者临床特征具有相关性,提示了CFU-F指标具有潜在的临床价值。

几种细胞因子对骨髓基质成纤维细胞集落形成的影响及意义

目的 :观察细胞因子粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、干细胞因子 (SCF)、白细胞介素 3(IL 3)、肿瘤坏死因子 (TNF)及其联合应用对骨髓基质成纤维细胞集落生成单位 (CFU F)形成的作用。方法 :应用体外骨髓基质细胞贴壁培养的方法 ,分别加入不同的细胞因子 ,进行培养 2周时的CFU F计数和培养 4周时贴壁细胞的增殖状态观察。结果 :GM CSF、SCF及TNF对骨髓基质细胞的增殖有明显的促进作用。结论 :体外加入某些细胞生长因子对骨髓基质细胞具有明显的扩增作用 ,提示基质细胞在体外适当细胞因子作用下扩增后进行回输 。

转化生长因子β1对长波紫外线照射皮肤成纤维细胞胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子表达的影响

背景:研究认为衰老和光老化状态下生长因子的表达不一定一致,生长因子与皮肤老化的关系越来越受到重视。目的:验证转化生长因子β1对长波紫外线照射体外培养的皮肤成纤维细胞胰岛素样生长因子1、角质细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子表达的影响。设计、时间及地点:以体外培养细胞为观察对象,随机重复实验,于2006-07/2008-03在解放军第四军医大学全军整形外科研究所进行。材料:成纤维细胞来自解放军第四军医大学整形外科门诊患者包皮,采用组织块法培养获得。方法:通过酶联免疫法(ELISA)使用不同剂量长波紫外线(0,5,10,20J/cm2)照射体外培养的皮肤成纤维细胞,测定上清液中胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子的质量浓度;以长波紫外线15J/cm2为照射剂量,选择不同剂量转化生长因子β1即小剂量组(0.1μg/L)、中剂量组(1μg/L)、大剂量组(10μg/L)对培养的皮肤成纤维细胞进行干预。主要观察指标:不同剂量长波紫外线照射、以及转化生长因子β1处理后皮肤成纤维细胞胰岛素样生长因子1、血管内皮细胞生长因子、角质形成细胞生长因子的表达。结果:长波紫外线照射体外培养的皮肤成纤维细胞导致胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子分泌水平下降,血管内皮细胞生长因子分泌升高;转化生长因子β1处理后,转化生长因子β1剂量依赖性地提高长波紫外线照射体外培养的皮肤成纤维细胞分泌的3种细胞因子的水平。转化生长因子β1大剂量组胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子含量明显高于长波紫外线照射组(P<0.01)。结论:长波紫外线照射抑制体外培养成纤维细胞中胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子表达,促进血管内皮细胞生长因子表达。转化生长因子β1可提高长波紫外线照射体外培养的皮肤成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子3种细胞因子的水平,有利于真皮内结构的恢复和重建。

复合骨形成蛋白和碱性成纤维细胞生长因子的双相陶瓷样生物活性骨修复指骨缺损

背景:复合骨形成蛋白和碱性成纤维细胞生长因子的双相陶瓷样生物活性骨既有骨传导功能,又能诱导干细胞向成骨方向分化,已经成为用于骨缺损修复的理想骨移植替代材料之一。目的:初步观察复合骨形成蛋白和碱性成纤维细胞生长因子双相陶瓷样生物活性骨在临床修复指骨缺损的能力。方法:选取10例手指内生软骨瘤患者,平均年龄33岁。肿瘤大小为0.3cm×0.3cm×0.3cm^1.0cm×0.5cm×0.5cm;肿瘤均位于患指指骨,行肿瘤刮除术,瘤腔用双相陶瓷样生活性物骨填充,伤口常规缝合;术后观察伤口愈合情况,局部炎性反应,排斥反应,全身毒性,瘤腔愈合和患肢功能的恢复情况。结果与结论:术后无伤口感染,伤口均甲级愈合。局部炎性反应轻微,无排斥反应和全身毒性反应。术后全部获随访6个月,术后3个月可见新骨长入复合骨形成蛋白和碱性成纤维细胞生长因子双相陶瓷样生物活性骨填充区。手指在术后1个月可完成日常活动。提示复合骨形成蛋白和碱性成纤维细胞生长因子双相陶瓷样生物活性骨修复材料具有良好成骨性、生物安全性和相容性,可用于骨缺损的修复。

碱性成纤维细胞生长因子对胚胎干细胞来源集落形成细胞的作用

背景：有研究表明,在卵黄囊造血、胎肝造血和在胚胎干细胞向造血干细胞分化过程中,碱性成纤维细胞生长因子可强烈表达。目的：在拟胚体培养阶段施加碱性成纤维细胞生长因子,验证碱性成纤维细胞生长因子对集落形成细胞产生的调控作用。方法：购买小鼠胚胎干细胞D3细胞系,取第3~5代小鼠原代胚胎成纤维细胞,加入新配制含丝裂霉素C的DMEM生长培养基孵育2.5h,使饲养层细胞失去增殖能力;加入胰酶消化适度,离心后制成单细胞悬液,以10×104个/cm2的密度种至用明胶包被的培养瓶中,放入孵箱内培养24h之后使用。复苏胚胎干细胞D3细胞并将其接种于饲养层细胞之上。在拟胚体培养阶段按培养基成分不同分为2组：对照组（标准培养基＋血管内皮生长因子＋干细胞因子组）、实验组（标准培养基＋血管内皮生长因子＋干细胞因子＋碱性成纤维细胞生长因子组）。各组于培养3,6d时分别计数克隆形成数,通过免疫荧光法检测Flk-1＋细胞表达情况,并用IMAGE-PROPLUS图像分析系统统计阳性细胞数及平均吸光度值。结果与结论：与对照组比较,在拟胚体培养阶段加入碱性成纤维细胞生长因子可显著增加集落形成细胞的数量（P〈0.01）,Flk-1阳性细胞数及平均吸光度值也显著增加（P〈0.01）。证明碱性成纤维细胞生长因子能够有效地促进胚胎体的扩增以及成血管血液干细胞的产生与增殖。

重组人骨形成蛋白-2对正常人骨髓成纤维样基质细胞的影响

目的:研究重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对正常人骨髓成纤维样基质细胞系HFCL的影响。方法:Western Blot检测HFCL细胞PCNA表达的改变,并用软件对Western Blot结果进行密度扫描,计算量的变化。瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态变化和计算细胞核分裂像指数。流式细胞仪检测细胞周期及CD11b、CD14细胞表面抗原进一步鉴定细胞分化。结果:经过rhBMP-2作用24h后,HFCL细胞PCNA表达下降,经灰度扫描下降幅度为0.65倍;瑞氏-吉姆萨染色后发现细胞核分裂像减少,分裂指数下降,但细胞形态没有变化;HFCL细胞S期中的细胞数量减少,G1期数量增多,出现G1期阻滞;rhBMP-2作用没有使HFCL细胞向髓系或单核方向分化的趋势。结论:rhBMP-2可抑制HFCL细胞的增殖,但对HFCL细胞向髓系或单核方向分化影响不大。

不同来源血清和细胞因子对骨髓基质细胞成纤维细胞集落形成的影响

目的观察SD大鼠骨髓基质细胞(BMSC)体外培养的生物学特性并加以鉴定,并探讨不同来源血清和细胞因子对其成纤维系祖细胞(CFU-F)产率的影响。方法取SD大鼠骨髓,进行BMSC原代培养,传代后分别观察其生长特性,绘制贴壁率,测定生长曲线,并应用流式细胞仪鉴定细胞表型;采用体外长期液体培养法观察CFU-F的产率。结果原代培养的BMSCs生长良好,倍增时间约为40小时,传代后12小时贴壁率达85%以上;胎牛血清较脐血清和马血清能促进CFU-F的增值和分化。与未加细胞因子对照组相比,单用细胞因子SCF,SDF-1均可促进CFU-F的增殖,但二者之间差异无显著性(P>0.05),同时加入SCF,SDF-1可明显的促进CFU-F的增殖,并优于单用SCF和SDF-1(P<0.05)。结论体外培养的BMSCs生长稳定,传代后细胞适应性强;胎牛血清中可能较脐血清和马血清存在较多的对CFU-F有促进作用的生长因子;SCF可协同SDF-1促进CFU-F的增殖。

联合应用胰岛素样生长因子-I和骨形成蛋白-2促小鼠成骨样细胞及成纤维细胞增殖和分化的效应

目的探讨重组人胰岛素样生长因子-I(rhIGF-I)和重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)单独及联合应用对MC3T3-E1和NIH3T3细胞增殖和分化的影响。方法单独或联合应用不同浓度rhIGF-I和rhBMP-2作用于MC3T3-E1和NIH3T3细胞后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测细胞分化情况,放射免疫法检测细胞分泌的骨钙素(OC)水平。结果1～75ng/mlrhIGF-I与10～100ng/mlrhBMP-2作用于MC3T3-E1和NIH3T3细胞后,均能显示明显的促细胞增殖(P<0.01)及使ALP活性增高(P<0.05)的作用。各浓度rhIGF-I或rhBMP-2对MC3T3-E1及NIH3T3细胞作用8、24和48h的MTT检测结果相似。rhIGF-I和rhBMP-2联合作用后,对两种细胞的促增殖、增强ALP活性的作用均较各自单独作用更为明显(P<0.05)。单独或联合应用不同浓度rhIGF-I和rhBMP-2对细胞分泌的OC水平均无显著影响(P>0.05)。结论rhIGF-I和rhBMP-2具有明显的促细胞增殖及早期分化的协同作用,但对成骨末期细胞分化影响不大,其活性主要与使用剂量有关。

苯和二甲苯对骨髓成纤维细胞克隆形成单位（CFU－F）的联合作用

本实验用苯和二甲苯在３０ｍｇ／ｋｇ和６０ｍｇ／ｋｇ两个浓度下对近交系ＢＡＬＢ／ｃ小鼠进行腹腔注射染毒。结果发现，经一周连续腹腔注射染毒，在两个浓度下苯染毒组骨髓ＣＦＵ－Ｆ均显著减少，且有明确的剂量反应关系。而二甲苯染毒组没有显著变化，苯、二甲苯联合染毒组也没有显著变化。该实验提示苯对骨髓ＣＦＵ－Ｆ有抑制作用，而在苯和二甲苯联合染毒时，该抑制作用又表现得不明显，故作者认为两者对ＣＦＵ－Ｆ的联合作用是相减的。

优化分离及培养骨髓间充质类成纤维样集落细胞的实验研究

[目的]探讨分离培养骨髓间充质类成纤维样集落细胞的最佳条件，并观察其生物学活性。[方法]采用优化分离方法，常规细胞培养、传代技术，光镜技术及细胞增殖活性检测法，观察不同浓度血清、不同接种密度对骨髓间充质类成纤维样集落细胞生长、增殖、形态及集落形成率的影响，观察培养细胞的生物学特性并将该类细胞向成骨细胞诱导分化。[结果]以差速贴壁法，加入10％进口胎牛血清、接种密度为5×10^4个／ml的培养条件为最适宜细胞生长；在此条件下，具有快速增殖的能力及较高的集落形成率；光镜下细胞呈梭状或类成纤维状，2～8代的细胞呈均质状；诱导后的成骨细胞AKP检测成阳性。[结论]明确了骨髓间充质类成纤维样集落细胞培养所需的细胞接种密度，血清培养浓度，该类细胞具有干细胞特性，为进一步深入研究该类细胞的应用打下了基础。

全反式维甲酸对骨髓纤维细胞集落形成的影响

本文主要通过纤维细胞集落的培养,观察了急性早幼粒细胞性白血病的骨髓纤维细胞集落,结果急性早幼粒细胞白血病的骨髓纤维细胞集落形成单位(CFU-F)较正常者明显低下4.3±4.9/2×~510细胞(n=9);完全缓解后,则上升为12.4±5.7/2×10~5(n=5)正常水平。体外试验结果显示维甲酸对 CFU-F 具有抑制作用。加入维甲酸之后,CFU-F 则降为3.11±3.5/2×10~5细胞,P【0.05。维甲酸诱导急性早幼粒细胞性白血病,外周血白细胞总数先出现高峰,然后进入低谷,后者可能与白血病细胞浸润有关外,还可能与骨髓纤维细胞被抑制有关.

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨髓间质干细胞增殖的影响

【目的】研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠骨髓基质干细胞(MSC)增殖的影响。【方法】用α-MEM冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞悬液,接种在塑料培养瓶中,经体外扩增、纯化,观察其生长特性,用免疫组织化学SABC法检测波形蛋白和纤粘连蛋白的表达,并研究不同浓度bFGF对MSC生长曲线和克隆形成率的影响。【结果】原代培养时形成由基质干细胞组成的细胞集落,细胞集落14d时接近融合,传代后细胞体积变大,约5～7d传代1次;免疫组化显示MSC呈波形蛋白阳性,而纤粘连蛋白阴性。浓度10ng/mL和20ng/mLbFGF组的MSC的细胞数和克隆形成率比5ng/mLbFGF组和对照组(无bFGF)明显增加,具有高度显著性(P<0.01)。【结论】bFGF可明显促进MSC的增殖。

表皮生长因子对非黏附骨髓间充质干细胞克隆形成效率的影响

背景：目前普遍认为骨髓间充质干细胞是一类高度黏附的成纤维样细胞，但也有研究显示处于非黏附状态的骨髓间质细胞也具有自我复制及多向分化潜能。目的：探讨表皮生长因子对骨髓中存在的非黏附骨髓间充质干细胞产生成纤维细胞集落形成单位的影响。设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2007-07／12在南京医科大学骨与干细胞研究中心完成。材料：4周龄雄性C57／BL6小鼠6只，由南京医科大学实验动物中心提供。表皮生长因子为美国Sigma公司产品。方法：全骨髓法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞，调整细胞浓度为2×10^9L^-1。收集第3代细胞，分别接种于向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞分化的培养液中进行诱导。取30mL骨髓间充质干细胞悬液，平均分到两管中，表皮生长因子处理组加入终浓度为10μg／L表皮生长因子，空白对照组加入普通完全培养基，采用反复转移非黏附骨髓细胞培养法，每天将非黏附骨髓细胞转移到新的培养皿，原来的皿中为总骨髓来源的贴壁细胞，转移第1次定义P01，第2次为P02，依次类推，培养12d终止。主要观察指标：骨髓间充质干细胞的鉴定结果，亚甲基蓝染色显示每皿细胞克隆的形成情况，计算克隆形成区域占皿底面积的百分比及克隆数目。结果：非黏附骨髓间充质细胞在第4天转移到新的培养皿后，继续培养仍能够贴壁生长，并逐渐扩增形成克隆；诱导后能够分化为脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞。给予表皮生长因子处理后，无论是总骨髓来源的贴壁细胞，还是反复转移的非黏附骨髓间充质干细胞，均能够不断产生成纤维细胞集落形成单位，且数量明显多于空白对照组（P〈005）。表皮生长因子处理组总骨髓来源的贴壁细胞、P01-P05非黏附骨髓间充质干细胞所形成的贴壁细胞数分别是空白对照组的1．54倍，4．25倍，2．51倍，1．56倍，1.25倍，2.01倍：所产生的克隆数分别是空白对照组的12倍，18倍，1．4倍，1．4倍，1．1倍。结论：表皮生长因子能有效促进骨髓中的非黏附骨髓间充质干细胞在悬浮状态下增殖，明显提高了骨髓间充质干细胞的富集效率。

骨折合并颅脑外伤患者血清bFGF、IGF-Ⅰ、SEMA 3水平与骨痂形成时间相关性研究

目的探究骨折合并颅脑外伤患者血清碱性成纤维生长因子(b FGF)、胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)和信号素3A(SEMA 3A)水平与骨痂形成时间的相关性,为骨折合并颅脑外伤患者加速骨折修复提供理论及临床依据。方法根据是否存在颅脑外伤,分为骨折合并颅脑外伤实验组与单纯骨折对照组,每组60例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测单纯骨折患者与骨折合并颅脑外伤患者血清b FGF、IGF-Ⅰ及SEMA 3A水平,采用X线检测骨痂形成情况。分析血清b FGF、IGF-Ⅰ及SEMA 3A水平与骨痂形成时间的相关性。分析血清b FGF、IGF-Ⅰ、SEMA 3A水平与反映颅脑外伤程度的GCS评分的相关性。结果与对照组单纯骨折患者相比,实验组骨折合并颅脑外伤患者血清b FGF水平在1周及2周均明显升高(P<0.05),且2周时有上升趋势;实验组IGF-Ⅰ水平及SEMA 3A水平1周时明显升高(P<0.05),2周时有降低的趋势,且与对照组无显著差异,说明血清b-FGF水平在骨折前两周持续升高,而血清中IGF-Ⅰ及SEMA 3A水平在骨折1周时达到高峰;与对照组相比,实验组骨痂形成时间明显缩短(P<0.05),且血清b FGF、IGF-Ⅰ和SEMA 3A水平和骨痂形成时间呈正相关;实验组血清b FGF、IGF-Ⅰ和SEMA 3A水平与GCS评分呈正相关。结论骨折合并颅脑外伤患者血清b FGF、IGF-Ⅰ、SEMA 3A水平与骨痂形成时间呈正相关,血清b FGF、IGF-Ⅰ和SEMA 3A水平与GCS评分呈正相关,说明颅脑外伤程度越高,上述指标分泌越多,从而缩短骨痂形成时间,加速骨折愈合。

基于肠道菌群平衡分析微生态制剂联合浙贝黄芩汤对急性淋巴细胞白血病大剂量化疗后患者的临床影响

目的探讨微生态制剂联合浙贝黄芩汤对急性淋巴细胞白血病(ALL)大剂量化疗后患者粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)、粒单系集落形成单位(CFU-GM)、肠道菌群及红系爆式集落形成单位(BFU-E)的影响。方法选取延安大学附属医院2019年6月至2022年12月收治的ALL患者130例作为研究对象,根据治疗方法将患者分为A组、B组、C组,3组患者均接受大剂量化疗,化疗结束48 h后A组患者实施常规治疗,B组患者单纯浙贝黄芩汤治疗,C组给予微生态制剂联合浙贝黄芩汤治疗,治疗12 d后,对3组患者G-CSFR、CFU-GM、BFU-E表达情况及血细胞数量进行检测。结果治疗后,C组血红蛋白、白细胞、血小板[(79±6)g/L、(3.8±0.4)×10^(9)/L、(66.4±3.6)×10^(9)/L]与A组[(59±7)g/L、(3.2±0.4)×10^(9)/L、(52.6±2.8)×10^(9)/L]、B组[(61±7)g/L、(3.1±0.3)×10^(9)/L、(52.8±2.6)×10^(9)/L]对比,差异有统计学意义(P<0.05)。C组G-CSFR(5.35±0.16)pg/ml和白细胞介素-11受体(IL-11R)(6.38±0.54)μg/kg水平均高于A组[(2.23±0.13)pg/ml和(1.49±0.24)μg/kg]和B组[(2.31±0.16)pg/ml和(2.31±0.49)μg/kg]差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,C组患者7 d CFU-GM(18.5±6.0)个和14 d BFU-E(83.5±7.5)个高于A组[7 d CFU-GM(9.5±2.0)个和14 d BFU-E(59.5±6.5)个]和B组[7 d CFU-GM(12.0±6.5)个和14 d BFU-E(63.5±5.0)个],差异有统计学意义(P<0.05)。7 d后,C组双歧杆菌(12.56±3.25)lgCFU/g、乳酸杆菌(13.56±2.58)lgCFU/g、肠杆菌(5.12±1.45)lgCFU/g、肠球菌(5.14±0.58)lgCFU/g高于A组[(9.26±1.03)lg CFU/g、(8.65±0.84)lg CFU/g、(8.08±0.64)lgCFU/g、(8.15±0.46)lgCFU/g]和B组[(11.35±1.36)lg CFU/g、(12.43±1.14)lgCFU/g、(6.49±0.55)lgCFU/g、(6.66±0.43)lgCFU/g],差异有统计学意义(P<0.05)。结论微生态制剂联合浙贝黄芩汤治疗可以有效提高ALL大剂量化疗后患者的G-CSFR、CFU-GM、BFU-E水平,可能更好地改善化疗引起的患者骨髓抑制情况,改善肠道菌群,具有临床研究价值。

不同培养体系对脐血造血干细胞粒细胞-巨噬细胞集落形成单位的影响

目的比较H4534与GF-H4434两种甲基纤维素培养基对脐血生成粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)的影响。方法从新鲜脐血标本中分离出造血干细胞,接种于H4534和GF-H4434培养基,于37℃、5%二氧化碳饱和湿度条件下培养14～16d。结果在样本中CD34+细胞百分率和有核细胞总数检测结果相似的情况下,H4534与GF-H4434培养条件下CFU-GM集落数分别为(55.71±28.24)/105与(66.28±31.99)/105,两者比较差异有统计学意义(u=4.16,P<0.05)。GF-H4434培养条件下还产生了红细胞爆裂型集落形成单位(64.89±34.95)/105和粒细胞-红细胞-巨噬细胞-单核细胞集落形成单位(2.53±2.08)/105。结论 GF-H4434甲基纤维素培养基中脐血样本CFU-GM集落形成能力更强,更适合脐血质量鉴定。

肝星形细胞具有干细胞样特性

肝星形细胞（hepatic stellate cells，HSC），又称Ito细胞、维生素A储存细胞、脂细胞（1ipocyte）、窦周细胞（perisinusoidalcell）等，在肝纤维化的发生发展过程中处于中心地位。作为肝的一种间质细胞，HSC同时兼有成纤维细胞、脂肪细胞和肌细胞的特征，能产生多种细胞外基质（extracellular matrix，ECM）组分。既往研究过于重视HSC在肝纤维化形成中的生物学效应，忽略了其他方面的特征。近来很多研究显示HSC与干细胞（stemcells，SC）在多个方面有着惊人的相似。于是干细胞与HSC的关系以及肝纤维化形成中的干细胞机制开始受到人们的关注，现就近年国内外的相关研究进展做以下综述。