阿片类药物成瘾的生化代谢和病理学变化的研究进展

综合性论述阿片类药物成瘾的生化代谢和病理学变化的研究进展

成纤维细胞生长因子21对1型糖尿病动物模型的肝糖代谢影响及机制研究

成纤维细胞生长因子(FGF)-21是FGF家族的成员之一.作为近年发现的一种新的糖代谢调节因子,大量研究表明,FGF-21是一种不依赖胰岛素,能够独立降糖的2型糖尿病治疗潜力型药物.但是,能否应用于1型糖尿病的治疗,国内外目前尚无报道.通过改良传统造模方法,诱导小鼠缓慢产生糖耐量异常,研究FGF-21对此类模型的糖代谢影响及肝糖代谢机制.通过检测FGF-21短期注射和长期注射后模型动物血糖的变化,研究FGF-21在模型动物上对血糖的调控效果.采用实时定量PCR检测FGF-21对模型动物肝脏中葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、4 mRNA的表达影响.利用蒽酮法检测模型动物肝脏中糖原合成量.实验结果显示,FGF-21能够调节1型糖尿病动物的血糖水平,并呈剂量依赖性.同时,首次在1型糖尿病动物模型上证实了低剂量FGF-21(0.125 mg/kg)与胰岛素的协同作用效果优于相同剂量FGF-21和胰岛素单独注射的效果.治疗结果表明,FGF-21能够维持1型糖尿病动物模型血糖在正常范围,效果优于胰岛素.实时定量PCR结果发现,与胰岛素上调GLUT4 mRNA表达量不同的是,FGF-21作用动物模型8周后,GLUT1 mRNA表达量显著提高,长期的FGF-21与胰岛素协同注射使GLUT1、4 mRNA表达量同时显著提高.长期FGF-21与胰岛素协同注射组和高剂量FGF-21注射均可显著提高模型动物肝糖原的合成.结果表明,FGF-21促进动物模型糖代谢机制与增加GLUT1表达、增加糖原合成作用有关.为临床应用FGF-21治疗1型糖尿病,增加胰岛素敏感性提供了理论依据.

重组人酸性成纤维细胞生长因子皮肤用药的药代动力学

目的 研究rhaFGF在健康及破损皮肤用药的药代动力学特征。方法 在兔健康及破损皮肤上均匀涂抹1 2 5I rhaFGF 180U·cm- 2 后 ,在不同的时间测血浆及组织中的放射性计数 ,结合纸层析的方法测定组织和血浆中的1 2 5I rhaFGF的含量。结果 破损皮肤用药后 ,血中rhaFGF原型物浓度呈快速上升状态 ,0 5h达最大值 ( 73 0 3pg·mL- 1 ) ,其后迅速下降 ,3h后接近 0。1 2 5I rhaFGF给药后 96h ,放射性主要浓集于皮肤 ,其次是肾 ,大脑最少。结论 rhaFGF不能通过健康皮肤进入体内 ,可通过破损皮肤进入血循环 ,但吸收量少 ,原形物半衰期短 ,无蓄积作用 ;吸收后的rhaFGF对皮肤有较大亲和力 ,可分布于远处皮肤 。

成纤维细胞生长因子21作为代谢性疾病非药物干预靶点研究进展

代谢性疾病是一类以代谢异常为主要特征的疾病,包括糖尿病、肥胖、高血压和高脂血症等,已经成为当今社会严重的健康挑战。这些疾病不仅会对个体的生活质量产生负面影响,还对我国的公共卫生系统和经济造成巨大的压力,因此寻找新的治疗和预防方法变得至关重要。其中,非药物干预手段被认为是预防、控制以及治疗代谢性疾病的关键策略.

碱性成纤维细胞生长因子与脑膜瘤细胞增殖活性的关系

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在脑膜瘤中的表达及其与细胞增殖活性间的关系,探讨bFGF在脑膜瘤发生和发展中的作用。方法:用免疫组化LSAB法检测38例脑膜瘤组织中bFGF与增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,分析在bFGF不同病理级别脑膜瘤中的表达及其与PCNA标记指数(PCNA-L I)的关系。结果:本组38例中有22例bFGF染色阳性,阳性率为86.84%。在良性组29例中,有24例检测到bFGF的表达,阳性率为82.76%;非典型组和恶性组均有表达。与良性组比较,非典型组和恶性组的bFGF表达强度高,其差异具有显著性。PCNA-L I在良性组、非典型组和恶性组的标记指数分别为13.71±6.1%,31.72±10.7%,47.87±14.0%。非典型型组和恶性组PCNA-L I均高于良性组。bFGF的表达强度与PCNA-L I相关,随着bFGF表达强度的升高,PCNA-L I随之增加。结论:bFGF自分泌环在脑膜瘤的发生和发展过程中起重要作用,bFGF的表达与脑膜瘤细胞增殖活性有关。

丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1抑制血管紧张素Ⅱ刺激的血管成纤维细胞活化

目的 :观察丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶 1 (mitogen activatedproteinkinasephosphatase 1 ,MKP 1 )对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激的血管成纤维细胞增殖及胶原合成和分泌的影响。方法 :用磷酸钙共沉淀的方法向血管成纤维细胞转染MKP 1的基因 ;测定培养的血管成纤维细胞内丝裂素活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase ,MAPK)活性、3H 胸腺嘧啶 (3H TdR)及3H 脯氨酸参入。结果 :1 0 7mol·L 1 AngⅡ刺激培养的血管成纤维细胞后其MAPK活性及3H TdR参入较对照组增加 2 93 % (P <0 .0 1 )及 1 90 % (P <0 .0 1 ) ;胶原的合成和分泌较对照组分别增加 1 4 6 % (P <0 .0 1 )和 50 2 % (P <0 .0 1 )。而转染了MKP 1野生型基因的细胞与未转染时相比 ,AngⅡ诱导的MAPK活性和3H TdR参入分别低 65 % (P <0 .0 1 )和 67% (P <0 .0 1 ) ;参入细胞内及介质中的3H 脯氨酸分别低65 % (P <0 .0 5)和 80 % (P <0 .0 1 )。转染MKP 1突变型及MKP 1空载体基因的细胞对于AngⅡ的上述各种刺激作用均无明显抑制。结论 :MKP 1具有抑制AngⅡ刺激的血管成纤维细胞MAPK激活、成纤维细胞增殖及胶原合成和分泌的作用 ,提示MKP

胰岛素样生长因子-1对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞的促生长作用

背景甲状腺相关眼病（TAO）是一种自身免疫性疾病，目前对其发病机制的研究主要集中在共同抗原上。胰岛素样生长因子-1（IGF．1）功能的发挥需要IGF-1受体（IGF-1R）的参与，IGF-1在促甲状腺激素受体（TSHR）的信号传导通路中也起着重要作用。目的探讨IGF-1对TAO患者眼眶成纤维细胞（OFs）增生及IGF-1R、TSHR表达的影响，探讨IGF-1在TAO发病机制中的作用。方法收集2016年3-6月于四川大学华西医院行TAO眼眶脂肪切除术取得的眶组织标本17例17份及正常人美容手术取得的眼眶组织4人4份，采用含体积分数5％胎牛血清的DMEM／F12培养液培养OFs。分别于培养液中加入不同质量浓度（O、50、100、125μg／L）的IGF-1，采用MTS比色法绘制OFs生长曲线，评估IGF-1对TAO和正常来源OFs增生的影响；采用流式细胞术测定不同质量浓度IGF-1对TAO和正常来源OFs中IGF-1R、TSHR表达水平的影响。结果TAO患者与正常人来源的OFs均生长良好，呈梭形，细胞质丰富，TAO患者与正常人来源的OFs形态学特点一致。培养的OFs波形蛋白呈阳性反应，结蛋白、S-100、肌红蛋白和角蛋白均呈阴性反应。不同质量浓度IGF-1作用后TAO组和正常组OFs增生均呈逐渐上升趋势，总体比较差异有统计学意义（F分组=219．639，P〈0．001；F质量浓度=17．752，P〈0．001），以100μg／LIGF-1的促进作用最强。0、50、100、125μg／LIGF-1作用后TAO组OFs中IGF-1R表达量分别为（0．0091±0．0087）％、（0．0953±0．0233）％、（0．0837±0．0227）％和（0．0709±0．0241）％，正常组OFs中IGF-1R表达量分别为（0．0023±0．0006）％、（0．0093±0．0012）％、（0．0073±0．0015）％和（0．0083±0．0012）％，其中50、100和125μg／LIGF-1作用后各组OFs中IGF-1R表达量均高于无添加IGF-1者，TAO组OFs细胞中IGF-1R的表达量均明显高于正常组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；0、50、100和125μg／LIGF-1作用后TAO组和正常组OFs中TSHR表达量的总体比较差异均无统计学意义（F分组=0．133，P〉0．05；F质量浓度=0．004，P〉0．05）。结论IGF-1对TAO患者和正常人OFs的生长均有促进作用并能上调OFs中IGF-1R的表达，但其对OFs中TSHR的表达变化无明显影响。

槲皮素对体外培养人青光眼术后瘢痕成纤维细胞增殖的影响

青光眼已成为全世界致盲的第2位原因眼病,导致不可逆性盲。相关流行病学资料显示,20世纪初全球约有7 280万原发性和继发性青光眼患者,其中约有670万患者因青光眼致盲。滤过性手术仍是临床主要的经典的抗青光眼术式,而由于巩膜表层、Tenon囊和球结膜之间成纤维细胞过度增殖,使滤过通道瘢痕化,导致手术失败。现在临床上术中使用抗代谢药物、皮质类固醇激素等抑制成纤维组织瘢痕增殖,提高手术成功率。

增生性瘢痕差异表达基因及小分子药物预测的生物信息学分析与验证

背景:增生性瘢痕是以成纤维细胞过度增殖、表皮增厚和角质层功能不良为特征的皮肤纤维化疾病,目前其具体发病机制仍不清楚。目的:基于生物信息学筛选增生性瘢痕相关数据集的核心(Hub)基因及重要信号通路,再用细胞实验加以验证,预测对其可能有治疗作用的小分子药物。方法:从基因表达综合数据库搜索增生性瘢痕相关的数据集,通过R软件筛选差异表达基因,对差异表达基因进行基因本体论和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Gnomes,KEGG)富集分析,使用String在线平台构建差异表达基因的蛋白质相互作用网络,然后分别利用Cytoscape软件中的Cytohubba和MCODE插件筛选出蛋白质相互作用网络中的关键基因和核心模块,进一步将上述关键基因和构成核心模块的基因求交集得到Hub基因,通过荧光定量PCR验证Hub基因mRNA在人增生性瘢痕与正常皮肤表皮干细胞中的表达差异,并利用人类蛋白图谱中组织学数据验证Hub基因编码蛋白在2种组织中表达量和分布的差异,最后用connectivity map数据库预测针对增生性瘢痕的潜在作用药物。结果与结论:①筛选出的差异表达基因中上调基因102个、下调基因702个,基因本体论和KEGG分析结果显示,富集的信号通路及生物学过程主要涉及紧密连接、花生四烯酸代谢、细胞外基质受体交互、表皮发育和角质化等;②取交集得到8个Hub基因与调控胆固醇代谢的甲羟戊酸途径密切相关,分别是HMGCS1、DHCR7、MSMO1、FDPS、MVK、HMGCR、MVD和ACAT2;③荧光定量PCR结果显示,相比正常皮肤组,增生性瘢痕组HMGCS1、DHCR7、MSMO1、FDPS、HMGCR、MVD和ACAT2 mRNA的表达均显著下降(P<0.05),而MVK mRNA的表达无明显变化(P>0.05);④除MVK外,其余Hub基因编码蛋白在正常皮肤组织中表达水平均高于增生性瘢痕组织(P<0.05);⑤评分排列前10的候选药物包括蛋白激酶A抑制剂(H-89)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(Dabigatran-Etexilate)、FLT3抑制剂(舒尼替尼)等,其中白藜芦醇和β-谷甾醇均为植物来源;⑥提示与甲羟戊酸代谢途径密切相关的Hub基因可能通过调控脂质代谢影响表皮结构与功能,这可能是增生性瘢痕的重要发病机制之一,此次研究筛选的小分子化合物可作为治疗增生性瘢痕的候选药物。

细胞因子对肺纤维化的影响及机制研究进展

肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)是一种由吸烟、病毒感染、环境污染、遗传易感性和药物等多种因素导致的慢性进行性纤维化疾病,其病理学特点主要是弥漫性炎症细胞浸润、成纤维细胞灶形成、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)异常沉积、肺泡结构严重破坏。PF患者的病情往往呈进行性发展,轻度PF主要表现为劳力性呼吸困难,严重时发展为进行性呼吸困难,晚期患者多因心肺功能衰竭而死亡。目前对PF的发病机制尚不明确,临床上亦缺乏有效治疗药物,且预后较差[1]。因此加强对PF发病机制的研究及相关治疗药物的研发至关重要。近年来,国内外科学家对PF的研究越来越多,且大量研究结果表明,细胞因子在肺纤维化的进展中起关键作用。因此,本文对近年来多种细胞因子在PF进程中的作用和机制研究进展做一综述。

成纤维细胞生长因子的药物研究进展

成纤维细胞生长因子(FGF)是生物体内一类重要的多肽生长因子,FGF系统由多个配体与受体组成,广泛存在于机体的多种组织和器官内。FGF通过旁分泌或内分泌的方式调节多种生理活动,参与机体内的血管生成、组织修复、胚胎发育等过程,维护机体组织的正常结构和功能,并且在细胞增殖、分化和迁移等方面发挥重要的作用。随着分子生物学等技术的不断进步,生物科学家们对FGF的研究不断深入,FGF有望成为一种新的治疗手段。已有研究表明,FGF在创伤修复、代谢调控和抗肿瘤等领域都具有广泛的应用前景。该综述详细介绍了近年来国内外对FGF的药物研究进展,展望FGF在生理、病理研究方面的应用前景,为FGF生长因子类药物的开发提供参考。

成纤维细胞生长因子21与糖脂代谢的研究进展

成纤维细胞生长因子（FGF）具有激素样作用，人类的FGF家族包括22个成员，按种系和序列又分为7个亚科，大部分FGF因子对细胞的生长和分化具有调节作用。成纤维细胞生长因子21（FGF-21）是新近发现的FGF家族新成员，是在细胞因子功能高通量筛查以发掘新型糖尿病治疗药物的研究中被首次发现，其全长209个氨基酸，

影响生长代谢机能药物

0047191 糖皮质激素在自由活动的大鼠中通过其对氧化氮释放的效应可提高白介素-1诱导的加压反应/Watanabe T//JPharmacol Exp Ther.-1999,289(1).-24～30 医科情0047192 肿瘤坏死因子α对 stromelysin基因表达的诱导作用可在滑膜成纤维细胞中被地塞米松、水杨酸盐和 N-乙酰半胱氨酸抑制/Morin I//J Pharmacol Exp Ther.-1999,289(3).-1634～1640

脂多糖对人皮肤成纤维细胞胶原代谢的影响

目的探讨脂多糖（1ipopolysaccharide，LPS）对人皮肤成纤维细胞胶原代谢的影响，以了解LPS在增生性瘢痕形成中的生物学作用。方法取正常皮肤行成纤维细胞培养后，分为1个对照组及6个实验组。实验组分别与终浓度为0．005、0．010、0．050、0．100、0．500和1．000μg／ml大肠杆菌LPS（Ecoli055：B5）培养，对照组DMEM培养。用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA及胶原酶mRNA的表达，并以同一个体相同代数的瘢痕组织成纤维细胞做对照。结果与对照组比较，LPS刺激浓度在0．005-0．1μg／ml时，促进正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达（0．323±0．041，0．303±0．063，0．391±0．071，0．344±0．086，0．488±0．059，0．401±0．087，0．616±0．107，0．434±0．084，0．823±0．092，0．542±0．082），抑制胶原酶mR-NA表达（0．598±0．068，0．556±0．049，0．441±0．043，0．372±0．083，0．260±0．027），且呈一定的剂量依赖性；当LPS刺激浓度为0．5μ／ml，上述作用下降（0．451±0．063，0．374±0．072，0．360±0．062）；而当LPS刺激浓度到达1．0μg/ml时，抑制正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达（0．162±0．025，0．171±0．061），促进胶原酶mRNA表达（0．444±0．114）。LPS刺激浓度在0．1μg／ml时，成纤维细胞（0．823±0．092，0．542±0．082，0．260±0．027）Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达与同一个体增生性瘢痕组织成纤维细胞（0．829±0．049，0．569±0．038，0．277±0．059）近似。结论LPS对人皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA的表达，其直接调节可能是参与增生性瘢痕形成的重要机制。

脂多糖对人正常皮肤成纤维细胞增殖周期及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

目的观察大肠杆菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激后，皮肤成纤维细胞增殖周期和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达变化规律。方法体外培养正常人皮肤成纤维细胞，加入不同浓度（0．005～1．0μg／m1）的大肠杆菌LPS（Ecoli055：B5），于LPS加入后第7天细胞处于对数生长期时，采用流式细胞术观察细胞增殖周期；用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA及胶原酶mRNA的表达。结果LPS刺激浓度在0．005～0．1μg／ml时，S期细胞比例随着刺激浓度增加而增高，且呈浓度依赖性；当LPS浓度为0．5μg／ml时，上述作用开始降低，但仍高于空白对照；当浓度达到1．0μg／ml时，s期细胞比例均低于空白对照；LPS刺激浓度在0．005～0．1μg／ml时，促进正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达，抑制胶原酶mRNA表达，且呈一定的剂量依赖性；当LPS刺激浓度为0．5μg／ml，上述作用下降；而当LPS刺激浓度到达1．0μg/ml时，抑制正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达，促进胶原酶mRNA表达。结论在一定浓度范围内LPS促进皮肤成纤维细胞增殖和胶原合成，而过高浓度LPS则呈现抑制效应。

癌相关成纤维细胞对乳腺癌细胞株MCF-7耐药基因MDR1、GST-π、TOPO-Ⅱ表达的影响

目的 观察乳腺癌相关成纤维细胞（CAFs）对乳腺癌细胞耐药基因表达的影响,探讨微环境对乳腺癌化疗耐药的作用.方法 取10例乳腺癌患者新鲜手术后标本进行原代间质细胞的分离、培养及纯化,并行免疫组化鉴定CAFs.收集CAFs培养上清（CM）与乳腺癌细胞株MCF-7间接共培养,应用免疫组化法检测与CAFs共培养的乳腺癌细胞株MCF-7及单独培养的MCF-7中耐药蛋白P-糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽-S转移酶（GST-π）和DNA拓扑异构酶Ⅱ（TOPO-Ⅱ）表达情况.结果 经免疫组化α-SMA鉴定为纯化的CAFs;与CAFs共培养的MCF-7中耐药基因P-gp、GST-π表达较单独培养的MCF-7中的表达明显增强（P＜0.05）,而TOPO-Ⅱ的表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 肿瘤微环境在介导乳腺癌的化疗耐药过程中起了一定的作用.

丙戊酸钠对人肝癌细胞株Bel-7402增殖及VEGF、bFGF表达的影响

目的探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制作用及其机制。方法采用MTT比色法检测VPA对Bel-7402细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞术(FCM)检测药物作用细胞后细胞凋亡率的变化;通过RT-PCR技术和Western Blot方法检测药物作用细胞后血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在mRNA和蛋白水平表达量的改变。结果 VPA对Bel-7402细胞的生长抑制作用呈现时间和剂量依赖性;经0、1、2和4mmol/L VPA作用细胞72小时后,细胞的凋亡率由处理前的(2.78±0.32)%,上升为(8.79±0.53)%、(18.65±1.02)%和(36.41±1.93)%,RT-PCR和Western Blot技术发现VPA作用细胞72小时后,可明显降低VEGF和bFGF的表达,并呈浓度依赖性(P<0.05)。结论 VPA通过下调Bel-7402细胞VEGF和bFGF的表达,对Bel-7402细胞的增殖起抑制作用。