成纤维细胞生长因子21对糖脂代谢调节作用的研究进展

成纤维细胞生长因子21（fibroblast growth factor， FGF-21）是众多成纤维细胞生长因子家族中的一新成员。与其他 FGF一样，FGF-21也有一个内核区，其中28个高保守的氨基酸残基中有10个可以与FGFR相互作用。小鼠 FGF-21编码的 cDNA含210个氨基酸，其中有一约由30个氨基酸组成的疏水性氨基末端，为一分泌型蛋白质的典型信号序列。人 FGF-21编码的 cDNA含209个氨基酸，其序列与鼠源约有75%的氨基酸相同[1]。经典的 FGF途径需要肝素的参与，而 FGF-21缺乏特异性的肝素结合区域，但它的共受体结合区域β-klotho 可以结合 FGFRs[2]。因此，FGF-21主要通过细胞表面受体发挥信号传导作用，该受体由经典的 FGF酪氨酸激酶受体和β-klotho构成。体外研究表明 FGF-21主要与FGFR1c/β-klotho结合，但也有研究表明 FGF-21可以通过4个 FGFR亚型发挥作用[3]。虽然 FGFR大量表达，但是β-klotho却特异性地在白色脂肪、胰腺、肝脏和睾丸中表达，因此 FGF-21主要集中在上述器官中发挥作用[4]。本文就 FGF-21的生物学功能、药理学作用及机制进行综述。

成纤维细胞生长因子21对1型糖尿病动物模型的肝糖代谢影响及机制研究

成纤维细胞生长因子(FGF)-21是FGF家族的成员之一.作为近年发现的一种新的糖代谢调节因子,大量研究表明,FGF-21是一种不依赖胰岛素,能够独立降糖的2型糖尿病治疗潜力型药物.但是,能否应用于1型糖尿病的治疗,国内外目前尚无报道.通过改良传统造模方法,诱导小鼠缓慢产生糖耐量异常,研究FGF-21对此类模型的糖代谢影响及肝糖代谢机制.通过检测FGF-21短期注射和长期注射后模型动物血糖的变化,研究FGF-21在模型动物上对血糖的调控效果.采用实时定量PCR检测FGF-21对模型动物肝脏中葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、4 mRNA的表达影响.利用蒽酮法检测模型动物肝脏中糖原合成量.实验结果显示,FGF-21能够调节1型糖尿病动物的血糖水平,并呈剂量依赖性.同时,首次在1型糖尿病动物模型上证实了低剂量FGF-21(0.125 mg/kg)与胰岛素的协同作用效果优于相同剂量FGF-21和胰岛素单独注射的效果.治疗结果表明,FGF-21能够维持1型糖尿病动物模型血糖在正常范围,效果优于胰岛素.实时定量PCR结果发现,与胰岛素上调GLUT4 mRNA表达量不同的是,FGF-21作用动物模型8周后,GLUT1 mRNA表达量显著提高,长期的FGF-21与胰岛素协同注射使GLUT1、4 mRNA表达量同时显著提高.长期FGF-21与胰岛素协同注射组和高剂量FGF-21注射均可显著提高模型动物肝糖原的合成.结果表明,FGF-21促进动物模型糖代谢机制与增加GLUT1表达、增加糖原合成作用有关.为临床应用FGF-21治疗1型糖尿病,增加胰岛素敏感性提供了理论依据.

扶正化瘀方对大鼠皮肤成纤维细胞增殖和胶原生成的抑制作用

目的：探讨扶正化瘀方抗肝纤维化的作用机制。方法：以10％的扶正化瘀方药物血清作用于大鼠皮肤成纤维细胞，通过[^3H]-TdR和[^3H]-Rroline掺入,观察药物血清对大鼠皮肤成纤维细胞增殖和胶原生成的影响。结果：药物血清组[^3H]-TdR掺入量明显少于正常大鼠血清组。药物血清组细胞内胶原的合成率和细胞外胶原的分泌率均低于正常大鼠血清组。结论：扶正化瘀方抑制了大鼠皮肤成纤维细胞的增殖和胶原的生成。

基因工程药物开发热点——成纤维细胞生长因子家族

成纤维细胞生长因子（f1ibroblast growth factor,FGF）是一类具有广泛生物学活性的肽类物质,是多能信号分子,具有参与细胞增殖、分化和游走等功能。FGF具有很强的促细胞生长作用和广泛的生物学作用,

转化生长因子β2对人眼Tenon囊成纤维细胞中赖氨酰氧化酶家族表达的诱导作用

背景研究表明，转化生长因子β2（TGF-β2）促进Tenon囊成纤维细胞（TFs）的活化，在青光眼滤过术后结膜下纤维化过程中发挥作用，但其作用机制尚未完全明了。赖氨酰氧化酶家族（LOXs）与细胞外基质重塑有关，了解青光眼术后滤过泡的纤维化过程中TGF-β2与LOXs活化的关系对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的防治具有重要意义。目的观察TGF-β2对体外培养的人眼TFs中LOXs蛋白表达变化的影响。方法将培养的第4～8代人TFs分为正常对照组和不同质量浓度TGF-β2培养组，分别在细胞培养液中添加终质量浓度为2、4、8和16ng／ml TGF-β2继续培养24h，采用Western blot法测定不同质量浓度TGF-β2培养组细胞中LOXs蛋白表达的变化，确定最适TGF-β2刺激质量浓度。用4ng／ml TGF-β2分别处理培养的TFs6、12、24和48h，采用Western blot法测定各时间点细胞中LOXs蛋白表达的变化。采用细胞免疫荧光法分别检测正常对照组和4ng／ml TGF-β2培养组TFs中LOX蛋白的表达及其在细胞中的分布。结果Western blot法检测显示，正常对照组及2、4、8和16ng／ml TGF-β2培养组人TFs中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白的表达强度均随TGF-β2质量浓度的升高而增加，各组间细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3和LOXL4蛋白相对表达量的总体比较，差异均有统计学意义（F=37．338、13．438、31．067、11．767、15．167，均P〈0．01）。细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白相对表达量的升高呈TGF-β2剂量依赖性。正常对照组及4ng／ml TGF-β2刺激人TFs后6、12、24和48h组，细胞中LOXL2蛋白的相对表达量分别为0．68±0．07、1．09±0．10、1．32±0．07、1．50±0．06和1．89±0．12，其表达强度呈时间依赖性，总体比较差异有统计学意义（F=82．832，P=0．000）。正常对照组人TFs中LOX蛋白表达强度较弱，主要位于细胞质中，TGF-β2培养组细胞中LOX蛋白的表达强度明显强于正常对照组，且表达LOX蛋白的细胞增多。结论正常人TFs中可见LOXs呈低表达，TGF-β2以剂量和时间依赖的方式上调人TFs中LOXs蛋白的表达。这个结果为青光眼术后滤过泡纤维化的相关防治研究提供了实验依据。

缓激肽β_2受体介导卡托普利抑制心脏成纤维细胞的增殖作用

目的探讨卡托普利(Captopril)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖中的作用及缓激肽(BK)β2受体对此作用的影响及机制。方法经差速贴壁法培养的新生大鼠CFs,随机分为6组:空白对照组,卡托普利组,AngⅡ组,AngⅡ+卡托普利组,Hoe140组和AngⅡ+卡托普利+Hoe140组。采用四氮唑盐(MTT)比色法测细胞数目,流式细胞仪技术(FCM)检测细胞周期,硝酸还原酶法和放射免疫分析技术分别测定培养CFs细胞上清液中NO含量和细胞内cGMP水平。结果与空白对照组比较,AngⅡ10-7mol/L孵育细胞48h后可显著增加CFsS期细胞百分率和MTT比色法测定的CFs吸光度(A490nm)值(分别P<0.01,P<0.05);ACEI类药物卡托普利10-5mol/L可明显降低AngⅡ作用下的CFsS期细胞百分率和A490nm值,而NO含量和细胞内cGMP水平均显著高于AngⅡ组(均P<0.05);缓激肽β2受体阻断剂Hoe14010-6mol/L可部分阻断卡托普利的作用。结论缓激肽β2受体部分介导了卡托普利抑制AngⅡ诱导的CFs增殖作用,BK该作用与NO、cGMP生成有关。

碱性成纤维细胞生长因子在内耳的生物学作用

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是多种细胞的促分裂剂,具有广泛的生理功能。bFGF对耳毒性药物或噪声引起的耳蜗毛细胞损伤具有保护作用,还能促进内耳损伤神经元的修复。本文就bFGF的生化特性及作用机制,在内耳中的分布,以及在内耳发育、毛细胞再生等方面的作用加以综述。

硒和维生素E对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成代谢的影响

目的:探讨硒(Se)和维生素E(VE)对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成代谢的影响。方法:用不同浓度的Se和(或)VE作用于体外培养的Wistar大乳鼠心肌成纤维细胞,测定培养上清液中羟脯氨酸及Ⅰ型胶原的含量。结果:①低、中和高浓度Se(0.05、0.1和0.2 mg.L-1)均可抑制NE(0.2 mg.L-1)的促成纤维细胞(CFbs)胶原合成的作用(P<0.05),以高浓度Se最为明显(56.13±1.31,P<0.05);②不同浓度VE(1、10和100 mg.L-1)均降低NE对CFbs胶原合成的促进作用,以1和100 mg.L-1的VE对羟脯氨酸含量的影响最显著(P<0.05);③Se和VE的联合应用(0.05 mg.L-1Se+10 mg.L-1VE),对CFbs的胶原合成的抑制作用更明显(41.34±1.73,0.39±0.04,P<0.05)。结论:Se和VE对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成代谢有抑制作用。

胰岛素样生长因子-1对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞的促生长作用

背景甲状腺相关眼病（TAO）是一种自身免疫性疾病，目前对其发病机制的研究主要集中在共同抗原上。胰岛素样生长因子-1（IGF．1）功能的发挥需要IGF-1受体（IGF-1R）的参与，IGF-1在促甲状腺激素受体（TSHR）的信号传导通路中也起着重要作用。目的探讨IGF-1对TAO患者眼眶成纤维细胞（OFs）增生及IGF-1R、TSHR表达的影响，探讨IGF-1在TAO发病机制中的作用。方法收集2016年3-6月于四川大学华西医院行TAO眼眶脂肪切除术取得的眶组织标本17例17份及正常人美容手术取得的眼眶组织4人4份，采用含体积分数5％胎牛血清的DMEM／F12培养液培养OFs。分别于培养液中加入不同质量浓度（O、50、100、125μg／L）的IGF-1，采用MTS比色法绘制OFs生长曲线，评估IGF-1对TAO和正常来源OFs增生的影响；采用流式细胞术测定不同质量浓度IGF-1对TAO和正常来源OFs中IGF-1R、TSHR表达水平的影响。结果TAO患者与正常人来源的OFs均生长良好，呈梭形，细胞质丰富，TAO患者与正常人来源的OFs形态学特点一致。培养的OFs波形蛋白呈阳性反应，结蛋白、S-100、肌红蛋白和角蛋白均呈阴性反应。不同质量浓度IGF-1作用后TAO组和正常组OFs增生均呈逐渐上升趋势，总体比较差异有统计学意义（F分组=219．639，P〈0．001；F质量浓度=17．752，P〈0．001），以100μg／LIGF-1的促进作用最强。0、50、100、125μg／LIGF-1作用后TAO组OFs中IGF-1R表达量分别为（0．0091±0．0087）％、（0．0953±0．0233）％、（0．0837±0．0227）％和（0．0709±0．0241）％，正常组OFs中IGF-1R表达量分别为（0．0023±0．0006）％、（0．0093±0．0012）％、（0．0073±0．0015）％和（0．0083±0．0012）％，其中50、100和125μg／LIGF-1作用后各组OFs中IGF-1R表达量均高于无添加IGF-1者，TAO组OFs细胞中IGF-1R的表达量均明显高于正常组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；0、50、100和125μg／LIGF-1作用后TAO组和正常组OFs中TSHR表达量的总体比较差异均无统计学意义（F分组=0．133，P〉0．05；F质量浓度=0．004，P〉0．05）。结论IGF-1对TAO患者和正常人OFs的生长均有促进作用并能上调OFs中IGF-1R的表达，但其对OFs中TSHR的表达变化无明显影响。

人成纤维细胞生长因子19的代谢调节功能

成纤维细胞生长因子家族（fibroblast growth factors，FGFs）作为一类最早发现其具有促进成纤维细胞生长的活性物质，迄今在人或鼠的体内共鉴定出23个家族成员。研究发现，FGFs作为一种重要的细胞间信号分子在胚胎发育、细胞生长、器官形成、组织修复、炎症反应和血管形成等生理过程中均可发挥重要作用。其中人类的FGF19（在啮齿动物中为FGF15），作为新近的研究热点，发现其具有重要的代谢调节作用，本文就FGF19研究的相关进展做一综述。

重组人酸性成纤维细胞生长因子皮肤用药的药代动力学

目的 研究rhaFGF在健康及破损皮肤用药的药代动力学特征。方法 在兔健康及破损皮肤上均匀涂抹1 2 5I rhaFGF 180U·cm- 2 后 ,在不同的时间测血浆及组织中的放射性计数 ,结合纸层析的方法测定组织和血浆中的1 2 5I rhaFGF的含量。结果 破损皮肤用药后 ,血中rhaFGF原型物浓度呈快速上升状态 ,0 5h达最大值 ( 73 0 3pg·mL- 1 ) ,其后迅速下降 ,3h后接近 0。1 2 5I rhaFGF给药后 96h ,放射性主要浓集于皮肤 ,其次是肾 ,大脑最少。结论 rhaFGF不能通过健康皮肤进入体内 ,可通过破损皮肤进入血循环 ,但吸收量少 ,原形物半衰期短 ,无蓄积作用 ;吸收后的rhaFGF对皮肤有较大亲和力 ,可分布于远处皮肤 。

DNA去甲基化引起人二倍体成纤维细胞端区缩短并加速衰老进程

目的 :研究DNA甲基化水平变化对细胞衰老进程和端区长度的影响。方法 :从细胞形态和Southern印迹杂交测定端区长度两方面观察 5 氮胞苷处理对人胚肺二倍体成纤维细胞衰老进程的影响。结果 :5 氮胞苷处理使老年细胞衰老表型更为突出 ,其端区长度缩短较年轻细胞亦为显著 (约为对照细胞的 96 % )。结论

地塞米松对特发性眼眶炎性假瘤体外培养成纤维细胞增生的抑制及其机制

背景特发性眼眶炎性假瘤（IOIP）是一种常见的眼眶疾病，病因和发病机制尚未完全阐明，以糖皮质激素为主的治疗效果欠佳。目的观察地塞米松对IOIP组织体外培养成纤维细胞的作用，探讨糖皮质激素在IOIP治疗中可能的作用机制。方法收集2011年11月至2012年1月在北京同仁医院眼科中心切取的6例6眼IOIP组织（IOIP组）和3例因泪腺脱垂行泪腺复位术患者的眶部结缔组织（对照组），采用组织块培养法对2种组织进行体外培养以获取眼眶成纤维细胞，对培养的细胞进行组织形态学观察，采用免疫组织化学法检测培养细胞表面生物标志物的表达；采用WST-8法观察2个组培养的成纤维细胞的增生情况，并绘制生长曲线。将培养的细胞接种至96孔板，将不同浓度地塞米松（O、1×10-3、1×10-4、1×10-5和1×10-6mol／L）加入培养板分别作用24、48和72h，采用WST-8法观察地塞米松对细胞增生的影响；采用ELISA法检测各组成纤维细胞中ICAM-1的相对表达量。结果IOIP组织和正常眼眶体外培养的成纤维细胞均呈长梭形，两端有较长突起；免疫细胞化学染色可见2种组织中培养的细胞中vimentin呈阳性表达，而desmin、S-100、细胞角蛋白（CK）均呈阴性表达。与正常眼眶组织培养的成纤维细胞相比，IOIP组织培养的细胞生长速度较快。随着地塞米松浓度的增加，成纤维细胞的增生值（A值）逐渐下降，0、1×10-3、1×10-4、1×10-6和1×10-6mol／L地塞米松组成纤维细胞增生值的总体比较差异有统计学意义（F浓度=36．27，P=0．00），随着地塞米松作用时间的延长，成纤维细胞增生值逐渐下降，总体比较差异有统计学意义（F时间=3．69，P=0．00）。无地塞米松培养组培养24、48和72h，成纤维细胞中比较ICAM-1表达量分别为0．298±0．008、0．312±0．003和0．319±0．011，表现为逐渐升高的趋势，而不同浓度地塞米松作用后随着时间延长ICAM-1表达量均逐渐降低，总体比较差异有统计学意义（F时间=3．11，P=0．00），随着地塞米松浓度的增加，ICAM-1表达量均逐渐下降，总体比较差异有统计学意义（F浓度=75．17，P=0．00）。结论IOIP的发生和发展可能与眼眶成纤维细胞中ICAM-1表达增强有关，地塞米松可能通过下调细胞中ICAM-1的表达而抑制眼眶成纤维细胞的增生，从而发挥抗炎和治疗作用。

重组人干扰素α-2b对腭裂术后瘢痕成纤维细胞影响的实验研究

目的探讨重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)对体外培养的腭裂术后裸露骨面瘢痕来源的成纤维细胞生物学作用的影响。方法制作兔腭裂术后裸露骨面瘢痕动物模型,利用体外细胞培养技术,通过MTT法、3H-TDR渗入法、流式细胞术等方法观察、分析rhIFNα-2b对腭裂术后瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响,数据采用方差分析及q检验处理。结果与对照组比较,实验组加入rhIFNα-2b后,腭裂术后瘢痕成纤维细胞的生长趋势及增殖活性及被明显抑制,G1期细胞百分数明显增高。结论rhIFNα-2b对腭裂术后瘢痕成纤维细胞的生长趋势及增殖活性具有明显抑制作用,说明在防治腭裂术后裸露骨面瘢痕的形成中有一定的应用价值。

半边旗5F对瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的通过对天然药物半边旗5F对瘢痕成纤维细胞凋亡作用的研究,以期探寻新的治疗病理性瘢痕的有效药物。方法以四甲基偶氮唑(MTT)法、流式细胞术和原位末端标记技术检测半边旗5F对成纤维细胞增殖和凋亡的影响。结果半边旗5F对成纤维细胞的增殖具有显著的抑制作用,且呈现浓度和时间依赖性。采用流式细胞术和TUNEL法检测凋亡指数,均呈剂量依赖性增高(P<0.05)。结论半边旗5F对瘢痕成纤维细胞的增殖具有显著的抑制作用,并且能够诱导其发生凋亡,为寻找有效治疗增生性瘢痕的药物进行了新的尝试。

白及胶对体外培养兔胆管成纤维细胞形态及活性的影响

目的观察白及胶对成纤维细胞形态及活性的影响。方法分离培养日本大耳白兔胆管成纤维细胞,加入不同浓度白及胶进行共同培养,在光镜下观察日本大耳白兔胆管成纤维细胞形态的改变,用MTT法比色法检测日本大耳白兔胆管成纤维细胞活性。结果白及胶组成纤维细胞胞体较小,胞突少,多呈圆形,胞核较小。白及胶组0.1、1.0、10.0mg/mL白及胶在作用72h时成纤维细胞活性与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论白及胶对日本大耳白兔胆管成纤维细胞形态的影响及白及胶对日本大耳白兔胆管成纤维细胞活性的抑制作用,可能是白及胶防治日本大耳白兔腹腔粘连的机制之一。

代谢型谷氨酸受体5亚型在成瘾药物中的作用

药物成瘾是以强迫用药为特征的慢性复发性脑疾病，其成瘾过程涉及到多个脑区以及脑区之间各种神经递质和受体的相互作用。谷氨酸（Glu）能神经元在药物成瘾中发挥着重要作用，其中代谢型谷氨酸受体5亚型（mGluR5）在各种药物滥用、觅药行为以及逆转因药物成瘾而导致的认知障碍中都有调节作用。

碱性成纤维细胞因子和骨形成蛋白联合应用对骨髓干细胞的生物学效应

目的:观察不同剂量的碱性成纤维细胞因子和重组人骨形成蛋白2单独或交互作用对成人骨髓干细胞增殖、碱性磷酸酶和总蛋白含量合成的影响。方法:实验于1999-09/2002-07在解放军总医院口腔科实验室完成。取在解放军总医院体检的一名健康自愿者骨髓组织,将培养的骨髓干细胞暴露于不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子或(和)重组人骨形成蛋白2中,①检测骨髓干细胞增殖能力,用酶联免疫检测仪490nm波长测光吸收值。②检测骨髓干细胞碱性磷酸酶活性,用酶联免疫检测仪410nm波长测光吸收值。③检测骨髓干细胞内蛋白质的含量,用酶联免疫检测仪595nm波长测光吸收值。结果:①骨髓干细胞增殖能力:浓度为10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子与浓度为100μg/L重组人骨形成蛋白2联合使用时较对照组显著增加(0.28±0.03,0.14±0.02,P<0.01)。②骨髓干细胞碱性磷酸酶活性:浓度为10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子与浓度为100μg/L重组人骨形成蛋白2联合使用时较对照组显著增加(0.70±0.05,0.51±0.02,P<0.01)。③骨髓干细胞内蛋白质的含量:浓度为10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子与浓度为100μg/L重组人骨形成蛋白2联合使用时较对照组显著增加(0.37±0.05,0.20±0.01,P<0.01)。结论:碱性成纤维细胞生长因子可明显促进骨髓干细胞的增殖,但却抑制碱性磷酸酶和总蛋白含量;重组人骨形成蛋白2对骨髓干细胞的碱性磷酸酶活性、蛋白质含量均有明显的促进作用,且呈剂量依赖性,重组人骨形成蛋白2对骨髓干细胞的增殖也有一定促进作用;而二者交互联合应用对骨髓干细胞的增殖和分化有协同作用。