二甲双胍阻断乳腺癌细胞-间质细胞的交互作用:基于抑制肿瘤相关成纤维细胞缺氧诱导因子-1α的表达

目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(SDF-1)和白细胞介素-8(IL-8)等因子的表达变化以及Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用外源性SDF-1、IL-8干预后,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)shRNA或过表达质粒调节CAFs-HIF-1α的表达,以及AMPK-shRNA抑制AMPK的表达,并运用OG和2-OXO调节脯氨酸羟化酶的表达,及运用外源性TGF-β1干预后,Western blot及RT-qPCR检测CAFs中p-AMPK、HIF-1α、SDF-1、IL-8的表达,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果相较于对照组,Met干预组中CAFs的p-AMPK、SDF-1和IL-8的表达水平升高(P<0.05),HIF-1α表达水平下降(P<0.05),AMPK的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),Met组中乳腺癌细胞侵袭能力下降(P<0.05)。外源性SDF-1、IL-8干预可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用,增加乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05)。过表达HIF-1α及运用脯氨酸羟化酶抑制剂OG提高HIF-1α的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α、SDF-1及IL-8表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);运用HIF-1α-shRNA及运用脯氨酸羟化酶激活剂2-OXO抑制HIF-1α的表达后,降低乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05);运用AMPK-shRNA抑制p-AMPK的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);加入外源性TGF-β1后,可部分降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可部分降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论Met通过抑制CAFs-HIF-1α的表达进而发挥阻断乳腺癌细胞-间质细胞交互作用。

成纤维细胞生长因子受体1 抑制剂对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响

背景:课题组前期的研究表明靶向成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)可能是治疗类风湿性关节炎的有效靶点。目的:探讨FGFR1抑制剂(PD173074)对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响。方法:将25只雌性SD大鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、甲氨蝶呤组、PD173074低剂量组、PD173074高剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠建立Ⅱ型胶原诱导关节炎模型。造模成功后正常组及模型组大鼠腹腔注射无菌PBS,甲氨蝶呤组药物注射剂量为1.04 mg/kg,PD173074低剂量组和高剂量组药物注射剂量分别为5,20 mg/kg,1次/周。给药4周后取材,观察大鼠临床症状以及关节肿胀情况,踝关节Micro-CT三维重建及分析,观察踝关节病理变化,检测关节周围血管生成情况及核因子κB受体活化因子配体的表达,检测关节滑膜中p-FGFR1、血管内皮生长因子A、抗酒石酸酸性磷酸酶的表达,观察肝、脾、肾病理变化并计算肝、脾、肾指数。结果与结论:①PD173074能够减轻模型大鼠踝关节临床症状及关节肿胀,延缓骨质丢失,改善骨结构,减轻关节滑膜侵袭以及软骨骨侵蚀,降低关节周围破骨细胞数量,抑制关节滑膜组织中的血管生成,降低核因子κB受体活化因子配体的表达,抑制FGFR1磷酸化蛋白、抗酒石酸酸性磷酸酶和血管内皮生长因子A的蛋白表达。②大鼠肝、脾、肾病理观察表明经过PD173074治疗后无明显的毒副作用。③研究证明了FGFR1抑制剂能够延缓Ⅱ型胶原诱导关节炎模型大鼠关节炎症及骨破坏的进展,并抑制血管的生成。初步验证了PD173074在Ⅱ型胶原诱导关节炎模型中的治疗作用,其可能是通过抑制FGFR1磷酸化发挥作用,为寻找类风湿性关节炎新的治疗靶点提供了方向。

血清微小RNA-325-3p和成纤维细胞生长因子10表达水平对急性胰腺炎病情及预后评估的价值

目的 探讨急性胰腺炎血清微小RNA-325-3p(miR-325-3p)和成纤维细胞生长因子10(FGF10)表达水平对病情严重程度及预后的评估价值。方法 2021年6月~2022年10月我院诊治的急性胰腺炎病人265例,分为轻症急性胰腺炎组(100例)、中重症急性胰腺炎组(70例)和重症急性胰腺炎组(95例);同期260例健康体检志愿者为对照A组,260例慢性胰腺炎病人为对照B组。根据重症病人入院28天的生存情况,将病人分为生存组(68例)和死亡组(27例)。比较各组病人miR-325-3p和FGF10水平。分析急性胰腺炎病人血清miR-325-3p、FGF10水平与急性生理和慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分的相关性以及miR-325-3p与FGF10的相关性;对影响重症急性胰腺炎病人预后的因素进行Logistic回归分析;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-325-3p、FGF10水平对重症急性胰腺炎病人预后的预测价值。结果 与对照A、B组相比,轻症、中重症、重症急性胰腺炎组病人血清miR-325-3p水平依次显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),FGF10水平依次明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);急性胰腺炎病人血清miR-325-3p与FGF10水平、APACHEⅡ评分均呈负相关(APACHEⅡ:r=-0.664,P<0.05;FGF10:r=-0.687,P<0.05)。FGF10与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.676,P<0.05)。与生存组相比,死亡组身体质量指数(BMI)、APACHEⅡ评分、FGF10水平均明显升高(P<0.05),miR-325-3p水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析发现,BMI、APACHEⅡ评分、FGF10是影响重症急性胰腺炎病人预后的危险因素(P<0.05),miR-325-3p是影响重症病人预后的保护因素(P<0.05);miR-325-3p、FGF10联合预测重症急性胰腺炎病人预后的ROC曲线下面积(AUC)为0.972,均优于其各自单独预测(Z二者联合-miR-325-3P=1.984,P=0.047;Z二者联合-FGF10=2.219,P=0.027)。结论 急性胰腺炎病人血清miR-325-3p水平降低,FGF10水平升高,与病人病情严重程度及预后相关。

含重组人碱性成纤维细胞生长因子和重组人骨形态发生蛋白-2骨水泥在骨质疏松性腰椎压缩性骨折治疗的应用价值

目的:探讨含重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF)和重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)骨水泥在骨质疏松性腰椎压缩性骨折(osteoporotic vertebral compression fracture,OVCF)患者经皮椎体后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)治疗的应用价值。方法:回顾性分析2018年1月至2021年1月收治的103例行PKP手术治疗的OVCF患者,男40例,女63例;年龄61~78(65.72±3.29)岁。受伤原因:滑倒33例,跌倒42例,提重物受伤28例。根据填充骨水泥不同分为3组:磷酸钙组34例,男14例,女20例,年龄(65.1±3.3)岁,填充磷酸钙骨水泥;rhBMP-2组34例,男12例,女22例,年龄(64.8±3.2)岁,填充含rhBMP-2的骨水泥;rhbFGF+rhBMP-2组35例,男14例,女21例,年龄(65.1±3.6)岁,填充含rhbFGF和rhBMP-2的骨水泥。比较3组Oswestry功能障碍指数(Oswestry dysfunction index,ODI)、骨密度、椎体前缘丢失高度、伤椎前缘压缩率、疼痛视觉模拟评分(visual simulation score,VAS)及再骨折发生率。结果:所有患者获得12个月随访。3组术后ODI、VAS呈下降(P<0.001),骨密度增高(P<0.001),椎体前缘丢失高度、伤椎前缘压缩率呈先下降后缓慢上升趋势(P<0.001),rhbFGF+rhBMP-2组术后第1、6、12个月ODI、VAS均低于rhBMP-2组和磷酸钙组(P<0.05),术后第6、12个月骨密度大于rhBMP-2组和磷酸钙组(P<0.05)。rhbFGF+rhBMP-2组术后第6、12个月椎体前缘丢失高度、伤椎前缘压缩率均低于rhBMP-2组和磷酸钙组(P<0.05)。3组再骨折发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:含rhbFGF和rhBMP-2骨水泥可更有效地增加OVCF患者骨密度,获得术后满意的临床和放射学效果,显著改善临床症状。

iRoot BP Plus应用于年轻恒牙血运重建术对患者牙根发育及龈沟液血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、白细胞介素-8、白细胞介素-1β水平的影响

目的:探讨iRoot BP Plus应用于年轻恒牙血运重建术对牙根发育及龈沟液血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平的影响。方法:选取88例年轻恒牙血运重建术患儿作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组(44例,44颗牙)和试验组(44例,44颗牙)。对照组使用无机三氧化物聚合物(MTA)作为填充材料,试验组选择iRoot BP Plus作为填充材料,两组术后均随访1年。比较两组随访1年后的疗效、牙根发育情况,术前、随访1年后的牙根长度、根管壁厚度、咬合功能、咀嚼功能、疼痛程度、牙周指数,术前、术后1周的龈沟液VEGF、bFGF、IL-8、IL-1β水平及随访期间的不良反应发生情况。结果:随访1年后,试验组总有效率及牙根发育Ⅰ型患儿占比分别为95.45%、47.73%,高于对照组的79.55%、25.00%(均P<0.05)。与术前比较,随访1年后,两组牙根长度、根管壁厚度增加,试验组高于对照组(均P<0.05);两组咬合功能、咀嚼功能、视觉模拟评分法(VAS)、牙周袋深度(PD)、牙龈指数(GI)、龈沟出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)评分降低,试验组低于对照组(均P<0.05)。与术前比较,术后1周,两组龈沟液VEGF、bFGF水平升高,试验组高于对照组(均P<0.05);两组龈沟液IL-8、IL-1β水平降低,试验组低于对照组(均P<0.05)。随访期间,试验组不良反应总发生率为4.55%,低于对照组的22.73%(P<0.05)。结论:与MTA比较,iRoot BP Plus应用于年轻恒牙血运重建术中可调节患儿龈沟液VEGF、bFGF、IL-8、IL-1β水平,减轻炎症,促进牙根生长发育,并可减轻患儿疼痛程度,改善咬合功能、咀嚼功能及牙周状况,进而有利于提高疗效,且具有较好的安全性。

非酒精性脂肪性肝病合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21和分泌型卷曲相关蛋白5水平变化及其临床意义探讨

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21(FGF21)和分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平变化及其临床意义。方法2020年5月~2023年3月我院诊治的NAFLD患者101例【单纯性脂肪肝(NAFL)64例、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)25例和肝硬化(LC)12例】和NAFLD合并T2DM患者81例(NAFL 58例、NASH 16例和LC 7例),检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用ELISA法检测血清FGF21和SFRP5水平。结果NAFLD合并T2DM患者FBG、血清FINS、HOMA-IR和血清FGF21水平分别为(8.7±1.4)mmol/L、(28.9±5.8)μIU/mL、(11.1±2.7)和(304.8±36.0)pg/mL,均显著高于NAFLD患者【分别为(5.5±1.2)mmol/L、(20.8±4.1)μIU/mL、(5.1±1.5)和(267.6±34.5)pg/mL,P<0.05】,而血清SFRP5水平为(6.8±1.2)pg/mL,显著低于NAFLD患者【(10.3±2.2)pg/mL,P<0.05】;NAFLD合并T2DM患者血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平分别为(6.7±1.0)mmol/L、(3.7±0.6)mmol/L、(1.3±0.2)mmol/L和(3.4±0.8)mmol/L,与NAFLD患者【分别为(6.2±0.9)mmol/L、(4.1±0.5)mmol/L、(1.3±0.3)mmol/L和(3.2±0.7)mmol/L】比,差异无统计学意义(P>0.05);T2DM合并NAFL、合并NASH和合并肝硬化患者血清SFRP5水平分别为(7.8±1.1)pg/mL、(6.4±0.8)pg/mL和(5.1±0.7)pg/mL,显著低于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(11.9±2.1)pg/mL、(9.8±1.6)pg/mL和(8.4±1.1)pg/mL,P<0.05】,而血清FGF21水平分别为(295.6±31.2)pg/mL、(316.8±32.9)pg/mL和(353.6±36.7)pg/mL,显著高于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(255.1±32.5)pg/mL、(279.5±33.4)pg/mL和(309.7±35.8)pg/mL,P<0.05】。结论NAFLD合并T2DM患者血清FGF21水平显著升高,而血清SFRP5水平显著降低,可应用于对病情严重程度的评估,值得深入研究。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合蒙脱石散对婴幼儿尿布疹的疗效观察与研究

目的探究重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)凝胶联合蒙脱石散对婴幼儿尿布疹的临床效果。方法选取2019年12月至2020年6月赣南医学院第一附属医院收治的72例婴幼儿尿布疹患儿作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组与实验组,每组36例。对照组给予rbFGF凝胶干预,实验组在对照组基础上联合蒙脱石散干预,比较两组干预效果、恢复情况、皮肤损伤程度、血清学指标及不良反应发生情况。结果实验组治疗总有效率为94.44%,高于对照组的72.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,两组皮肤发红、皮肤破裂面积及皮肤侵蚀程度评分均低于干预前,且实验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组不良反应发生率为5.56%,低于对照组的25.00%差异有统计学意义(P<0.05)。实验组尿布疹消退时间、住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,两组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)水平均低于干预前,干扰素-γ(IFN-γ)水平高于干预前,且实验组TNF-α、IL-4、IL-10水平低于对照组,IFN-γ水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论rbFGF凝胶联合蒙脱石散应用于婴幼儿尿布疹的疗效显著,可减轻皮肤损伤程度,改善机体炎症反应,缩短尿布疹消退时间,且不良反应少,值得临床推广应用。

血清成纤维细胞生长因子-21、基质金属蛋白酶-9与儿童过敏性紫癜性肾炎的关系

目的探讨血清成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与儿童过敏性紫癜性肾炎(HSPN)的关系。方法选取2020年1月至2022年12月成都市妇女儿童中心医院收治的125例过敏性紫癜(HSP)患儿为研究对象,将37例由HSP继发为HSPN的患儿设为HSPN组,其余88例HSP患儿设为单纯HSP组。对比两组患儿临床症状及血清FGF-21、MMP-9水平变化,分析血清FGF-21、MMP-9水平与肾功能指标[血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)]的关系。结果单因素分析显示,HSPN组患儿血清FGF-21、MMP-9水平也明显高于单纯HSP组(P<0.05)。HSPN患儿血清FGF-21、MMP-9水平与Scr、BUN、UA水平均呈正相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,血清FGF-21及MMP-9水平的升高为诱发HSPN的独立危险因素(P<0.05)。由于两项指标的特异度相对较低,故采用FGF-21与MMP-9串联的方式联合检测对HSPN进行诊断,其诊断敏感度为78.38%,特异度为81.82%,联合检测的特异度显著高于单一指标(P<0.05),同时灵敏度损失较小,并且诊断结果与实际结果具有中高度一致性(Kappa>0.4),具有临床应用价值。结论血清FGF-21及MMP-9与儿童过敏性紫癜性肾炎有关系,参与了HSPN病理过程;两项指标联合试验有助于提高HSPN的诊断效能。

人脐带间充质干细胞对大鼠肺成纤维细胞分泌Smad2结缔组织生长因子的影响

目的探究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的过程及结局的影响。方法从10只健康雌性无特定病原体级(SPF级)大鼠中提取肺成纤维细胞,用5 ng/mLTGF-β处理大鼠原代肺成纤维细胞的同时,给予不同浓度的hUC-MSCs对其共培养,其中A组(模型组,加入40μL 5 TGF-β)、B组(5×10 hUC-MSCs治疗组,加入40μL TGF-β和1 mL 5×10^(5)6个hUC-MSCs)、C组(2×10 hUC-MSCs治疗组,加入40μL TGF-β和1 mL 2×10^(6)个hUC-MSCs)、D组[正常组,加入磷酸盐缓冲液(PBS)40μL],采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞内胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)蛋白表达量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组细胞内结缔组织生长因子(CTGF),Smad2 mRNA的相对表达量。用5 ng/mL TGF-β处理大鼠原代肺成纤维细胞48 h后,将其诱导转化为肌成纤维细胞,再和不同浓度的hUC-MSCs共培养24 h,其中A组(模型组,加入40μL 5 TGF-β)、B组(5×10 hUC-MSCs治疗组,加入1 mL5×10^(5)个hUC-MSCs)、C 6组(2×10 hUC-MSCs治疗组,加入1 mL2×10^(6)个hUC-MSCs)、D组(正常组,不用40μLTGF-β诱导,加入PBS 40μL),采用蛋白免疫印迹法检测各组肌成纤维细胞内CollagenⅠ、a-SMA蛋白表达量;采用RT-PCR检测各组肌成纤维细胞CTGF、Smad2 mRNA的相对表达量。结果在TGF-β诱导的大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化过程中,A、B、C、D组大鼠CollagenⅠ和a-SMA的蛋白表达量均呈现降低趋势(均P<0.05);A、B、C、D组大鼠CTGF和Smad2 mRNA的相对表达量均呈现逐渐降低趋势(均P<0.05);大鼠原代肺成纤维细胞诱导转化为肌成纤维细胞后与不同浓度的hUC-MSCs共培养中,A、B、C、D组小鼠CollagenⅠ蛋白相对表达量和a-SMA蛋白相对表达量均呈现降低趋势(均P<0.05),但A组和B组小鼠CollagenⅠ蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);A、B、C、D组大鼠CTGF和Smad2 mRNA的相对表达量均呈现逐渐降低趋势(均P<0.05),但B组和C组大鼠Smad2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(均P<0.05)。结论hUC-MSCs可减少TGF-β诱导大鼠肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞过程中表达Collagen、a-SMA蛋白及CTGF、Smad2 mRNA,降低肌成纤维细胞表达CollagenⅠ、a-SMA蛋白及CTGF、Smad2 mRNA,且高浓度的hUC-MSCs效果最显著。

弥漫大B淋巴瘤血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、白介素-6水平与预后的关系

目的探讨弥漫大B淋巴瘤血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、白介素-6(IL-6)水平与预后的关系。方法选取2020年2月至2022年2月佛山市第一人民医院收治的100例弥漫大B淋巴瘤患者作为观察组,按照临床分期的不同分为Ⅰ~Ⅱ期(20例)和Ⅲ~Ⅳ期(80例),按照分子亚型的不同分为N-GCB(60例)、GCB型(40例)。选取同期的100例健康体检者作为对照组。经过治疗后,根据患者治疗效果分为治疗有效组、治疗无效组,对患者VEGF、bFGF、IL-6水平进行测定,分析弥漫大B淋巴瘤患者的VEGF、bFGF、IL-6水平与预后的关联性。结果观察组的IL-6、VEGF、bFGF水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前后,观察组Ⅰ~Ⅱ期患者的IL-6、VEGF、bFGF水平均低于Ⅲ~Ⅳ期,GCB患者的IL-6、VEGF、bFGF水平低于N-GCB患者,治疗有效组患者(n=80)的IL-6、VEGF、bFGF水平低于治疗无效组(n=20),差异有统计学意义(P<0.05);弥漫大B淋巴瘤患者的VEGF、bFGF、IL-6水平与预后均呈负相关(r=-0.625、-0.741、-0.779,P<0.05)。结论弥漫大B淋巴瘤VEGF、bFGF、IL-6水平能够反映患者病情,能够判断患者病理分期以及预后情况,具有一定的指导价值。

扶正减毒方联合GLF方案治疗晚期食管癌患者的疗效及对其血清碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子-1水平的影响

目的 探讨扶正减毒方联合GLF方案治疗晚期食管癌的疗效及对血清碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor, bFGF)、胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)水平的影响。方法 选取2016年1月—2021年11月期间河南省郑州市中医院收治的晚期食管癌患者87例,采用随机数字表法分为对照组42例和治疗组45例。对照组采用GLF方案化疗,治疗组在对照组基础上采用扶正减毒方治疗,3周为1个周期,用药至疾病进展或毒性不能耐受,最多治疗6个周期。观察比较两组患者临床疗效及毒副作用发生率,血清bFGF、IGF-1水平的变化及生活质量改善稳定率。结果 治疗后治疗组总有效率64.44%(29/45)高于对照组40.48%(17/42),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清bFGF、IGF-1水平较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组血清bFGF、IGF-1水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组生活质量改善稳定率71.11%(32/45)高于对照组50.00%(21/42),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组毒副作用发生率4.44%(2/45)低于对照组23.81%(10/42),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 扶正减毒方联合GLF化疗治疗晚期食管癌的疗效显著,能明显改善患者生活质量,降低血清bFGF、IGF-1水平,减少化疗毒副作用。

成纤维细胞生长因子与缺氧诱导因子在慢性肾脏病血管钙化的研究进展

目前,流行病学调查显示,慢性肾脏病的发病率逐年上升,越来越多的临床数据表明,血管钙化是慢性肾脏病及终末期肾病病死率的独立预测因子,循环中成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor 23,FGF23)水平升高与血管钙化有着密不可分的关系。目前发现,缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)是FGF23在慢性肾脏病血管钙化的新成员,本综述旨在介绍FGF23、HIF与慢性肾脏病血管钙化的关系及目前针对FGF23、HIF引起慢性肾脏病血管钙化的治疗进展。

氧化苦参碱对高糖诱导乳鼠原代心肌成纤维细胞转分化的作用及机制

目的探讨氧化苦参碱(OMT)对高糖(HG)诱导乳鼠原代心肌成纤维细胞(CFBs)增殖和转分化的作用及机制。方法Sprague-Dawley(SD)乳鼠20只,取乳鼠心脏的心尖部分分离与培养原代CFBs,取对数生长期CFBs细胞分为空白(Control)组、40 mmol/L甘露醇(Mannitol)组、不同浓度(30、35、40、45及50 mmol/L)HG组及不同浓度(25、50、100、200、400 mg/L)OMT组,采用噻唑蓝比色法(MTT)法检测细胞的增殖情况并确定后续实验OMT的保护浓度;按前述OMT的保护浓度结果,取对数生长期CFBs细胞分为空白(Control)组、40 mmol/L甘露醇(Mannitol)组、40 mmol/L HG(HG)组、40 mmol/L HG+50 mg/L OMT(OMT低剂量)组、40 mmol/L HG+100 mg/L OMT(OMT中剂量)组及40 mmol/LHG+200 mg/L OMT(OMT高剂量)组,采用天狼星红和苏木素-伊红(HE)染色法观察各组细胞的胶原纤维表达及形态变化,采用羟脯氨酸(Hyp)试剂盒检测法和免疫荧光染色法检测各组细胞Hyp及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,采用流式细胞术检测各组细胞的周期分布比例,采用Western blot检测CFBs中α-SMA、结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、血管内皮生长因子A(VEGFA)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的表达。结果与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组CFBs细胞活力下降(P<0.05);与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组CFBs细胞形态发生变化,细胞数量变少;与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组CFBs内Hyp含量减少,细胞在S期分布比例降低(P<0.05);与Control组相比,HG组CFBs细胞数量增多,α-SMA表达增多;与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组CFBs细胞数量减少,α-SMA表达减少;与HG组相比,50、100及200 mg/L OMT组HIF-1α、VEGFA、α-SMA、CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢ及FN表达下调(P<0.05)。结论OMT可抑制乳鼠CFBs增殖并诱导细胞转分化,其机制可能与调节HIF-1α信号相关。

德莫林皮肤创面无机诱导活性敷料联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗放射性皮肤损伤的临床效果分析

目的探讨德莫林皮肤创面无机诱导活性敷料联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)治疗放射性皮肤损伤的临床效果。方法选取2019年1月至2021年12月于甘肃省肿瘤医院行放疗期间发生放射性皮肤损伤的126例头颈部肿瘤患者作为研究对象,根据美国肿瘤放疗协作组织急性放射性皮肤损伤标准将患者分为Ⅱ期(51例)、Ⅲ期(45例)、Ⅳ期(30例),将各分期患者完全随机分为N组、FGF组和FGF+D组,各42例(包括Ⅱ期17例、Ⅲ期15例、Ⅳ期10例)。N组在常规护理基础上予碘伏喷擦创面,FGF组在常规护理基础外予rb-bFGF外用溶液喷涂创面,FGF+D组在常规护理基础上使用德莫林皮肤创面无机诱导活性敷料(粉剂)溶解于rb-bFGF外用溶液涂抹于创面,均为3次/d。最长观察期为28 d,记录放射性皮肤损伤的愈合情况,比较3组总有效率、创面感染、住院费用、生活质量等临床资料。结果治疗第14、28天,在Ⅲ期患者中,FGF+D组、FGF组总有效率均高于N组;在Ⅳ期患者中,FGF+D组和FGF组总有效率均高于N组,且FGF+D组均高于FGF组(均P<0.05)。FGF+D组总换药次数少于FGF组和N组,FGF+D组和FGF组住院天数、有效时间、显效时间、创面感染率均短于/低于N组[(14±6)、(18±7)d比(26±10)d,(4.2±0.9)、(5.9±1.0)d比(10.0±1.7)d,(9.9±1.0)、(13.9±1.4)d比(20.6±2.2)d,2.4%(1/42)、11.9%(5/42)比28.6%(12/42)],且FGF+D组均短于/低于FGF组(均P<0.05)。FGF+D组和FGF组创面愈合率、欧洲癌症质量与研究组织生活质量问卷评分均高于N组,且FGF+D组均高于FGF组(均P<0.05)。结论德莫林皮肤创面无机诱导活性敷料联合rb-bFGF对放射性皮肤损伤的治疗效果优于单独使用rb-bFGF,可为放疗的顺利进行提供保障。

桦木酸通过Wnt/β-catenin信号通路调控瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、侵袭和胶原合成

目的研究桦木酸(betulinic acid,BA)对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、侵袭和胶原合成的影响并探讨分子作用机制。方法收集临床切除的瘢痕疙瘩组织,采取组织块贴壁法分离培养成纤维细胞。细胞分为3组:空白对照组、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)处理组(溶剂对照组)和BA处理组。细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞生长。5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)法检测细胞增殖。流式细胞术检测细胞凋亡。Transwell法测细胞侵袭。荧光素酶报告基因实验检测Wnt/β-catenin信号通路活性。实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测c-myc和cyclin D1 mRNA表达。Western blot检测Ⅰ型胶原(Collagen typeⅠ,ColⅠ)、β-catenin、c-myc和cyclin D1蛋白表达。结果与空白对照组和DMSO处理组相比,BA处理组瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖降低,细胞凋亡率上升,细胞侵袭水平下降,胶原合成减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组和DMSO处理组相比,BA处理组瘢痕疙瘩成纤维细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性降低,β-catenin、c-myc和cyclin D1表达水平减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论桦木酸通过下调Wnt/β-catenin信号通路抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、侵袭和胶原合成。

CATA结合蛋白-6、碱性成纤维细胞生长因子基因在垂体瘤组织中的表达及与临床病理特征关系

目的:探讨CATA结合蛋白-6(GATA-6)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因在垂体瘤组织中的表达及与临床病理特征关系。方法:选取手术治疗的82例垂体瘤患者作为研究对象,收集手术切除的瘤组织与瘤旁正常组织,其中瘤组织设立为垂体瘤组,瘤旁正常组织设立为瘤旁正常组,对比不同组织的GATA-6、bFGF mRNA表达,观察不同临床特征垂体瘤患者的GATA-6、bFGF mRNA表达差异,并采用分层回归模型分析临床病理特征与GATA-6、bFGF mRNA的关系。结果:垂体瘤组的GATA-6、bFGF mRNA表达高于瘤旁正常组(均P<0.05)。垂体瘤组患者的激素分泌功能、垂体瘤形态、生长类型、Hardy-Wilson分级、生物学行为等不同临床特征的GATA-6、bFGF mRNA水平比较差异具有统计学意义(均P<0.05)。分层回归分析显示,生长类型、Hardy-Wilson分级、生物学行为对GATA-6 mRNA产生显著的负向影响关系(均P<0.05);激素分泌功能、Hardy-Wilson分级、生物学行为对bFGF mRNA产生显著的负向影响关系(均P<0.05)。结论:GATA-6、bFGF mRNA在垂体瘤组织中呈异常表达,且其表达水平会受生长类型、Hardy-Wilson分级、生物学行为、激素分泌功能等临床病理特征的影响。

核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体-成纤维细胞生长因子19通路、枯否细胞极化的影响

目的 :探究核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体(FXR)-成纤维细胞生长因子19(FGF19)通路、枯否细胞极化的影响。方法 :选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、核苷(酸)类似物(核苷酸)组、聚乙二醇干扰素(干扰素)组、联合组。除正常组外,均采用腹腔注射乙型肝炎病毒进行慢性乙型肝炎建模。建模成功后,对核苷酸组灌胃10 mg/kg拉米夫定,对干扰素组皮下注射5μg/kg聚乙二醇干扰素,对联合组给予拉米夫定联合聚乙二醇干扰素治疗,正常组、模型组同期灌胃同体积生理盐水。酶联免疫吸附法检测血清病毒,全自动生化分析仪检测肝功能,H-E染色法检测肝组织病理形态,免疫印迹法检测FXRFGF19通路蛋白表达,免疫组织化学法检测枯否细胞极化。结果 :与正常组相比,模型组血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎E抗原(HBeAg)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)含量、iNOS、CD163阳性表达率显著升高,肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著降低。与模型组相比,核苷酸组、干扰素组、联合组血清HBsAg、HBeAg、ALT、AST、TBIL含量、iNOS、CD163阳性表达率显著降低。肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著升高,联合组比干扰素组降低显著。结论 :核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素,可显著激活FXR-FGF19通路,并抑制枯否细胞M1极化,促进枯否细胞M2极化,对慢性乙型肝炎大鼠具有改善作用。

碱性成纤维细胞生长因子、血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3表达与血液透析患者动静脉内瘘失功的关系

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3(SGK3)表达与血液透析(HD)患者动静脉内瘘(AVF)失功的关系。方法选择2019年1月至2021年12月在洛阳市东方人民医院接受HD的80例患者为研究对象(观察组),另选择同期入院体检健康者30例作为对照组。根据是否伴有AVF失功将观察组患者分为AVF失功组(n=31)和AVF未失功组(n=49)。采用酶联免疫吸附法检测所有受试者血清中b-FGF水平,采用免疫组织化学法检测血清中SGK3水平;并比较观察组和对照组受试者血清中b-FGF、SGK3水平。收集观察组患者的临床资料,采用单因素和多因素logsitic回归分析HD患者发生AVF失功的危险因素,并重点观察血清b-FGF、SGK3水平与HD患者AVF失功的关系。绘制受试者操作特征(ROC)曲线评估b-FGF、SGK3对HD患者发生AVF失功的预测价值。结果观察组患者血清中b-FGF、SGK3水平显著高于对照组(P<0.05)。单因素分析结果显示,AVF失功组与AVF未失功组患者的年龄、透析时间、透析频率、白细胞(WBC)计数、血细胞比容(Hct)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、血小板(PLT)计数及b-FGF、SGK3、空腹血糖(FPG)、肌钙蛋白T(TnT)、降钙素原(PCT)、血尿酸(UA)、高密度脂蛋白(HDL)水平和糖尿病史、抽烟史占比比较差异有统计学意义(P<0.05);logistic回归分析结果显示,高b-FGF、SGK3、NLR、PLR水平及透析频率和长时间透析是HD患者发生AVF失功的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清b-FGF预测HD患者发生AVF失功的灵敏度、特异度分别为85.96%、69.57%,血清SGK3预测HD患者发生AVF失功的灵敏度、特异度分别为87.72%、73.91%;二者联合检测预测HD患者发生AVF失功的灵敏度、特异度分别为91.53%、85.71%。结论HD导致AVF失功患者血清中b-FGF、SGK3水平升高,二者联合检测对HD患者发生AVF失功具有较高的预测效能,可将其作为预测HD患者AVF失功的有效因子,为临床预防、优化治疗措施提供帮助。

血清成纤维细胞生长因子-23及可溶性α-Klotho水平对冠状动脉病变预后的相关性分析

目的:观察急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清成纤维细胞生长因子-23(fibroblast growth factor-23, FGF-23)和α-Klotho表达水平与冠状动脉病变及临床预后相关性。方法:入选200例我院行冠状动脉造影患者,根据病史、相关检查及冠状动脉造影结果分为:不稳定型心绞痛组(UAP组,共104例)、急性心肌梗死组(AMI组,69例)和造影正常组(对照组,27例)。检测患者血清FGF-23及α-Klotho水平并对所有患者进行平均1年的随访,评估两组患者主要心脏不良事件(major adverse cardiovascular and cerebrovascular events,MACCE)的发生情况。结果:UAP组和AMI组中血清α-Klotho水平低于对照组(P <0.05);AMI组血清FGF-23水平高于对照组和UAP组(P <0.05)。多支病变组血清FGF-23高于单支和双支病变组(P <0.05);Pearson相关分析显示:血清FGF-23水平与Gensini评分呈线性正相关(r=0.029,P=0.002);随访平均1年后发现MACCE组患者的Gensini评分、SCr及血清FGF-23水平高于非MACCE组,二元Logstic回归分析显示,血清FGF-23、Gensini评分及SCr水平为ACS患者MACE事件的危险因素(P<0.05)。结论:血清FGF-23和α-Klotho与ACS病情和血管病变程度有相关性,血清FGF-23为ACS患者MACCE的危险因素。

妊娠期糖尿病患者血清葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽、成纤维细胞生长因子-23水平与产后糖代谢异常的关系

目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽(GIP)、成纤维细胞生长因子-23(FGF23)水平与产后糖代谢异常的关系。方法 选取82例确诊GDM患者为研究对象,并采集静脉血检测血清GIP、FGF23水平。产后12周采用75 g葡萄糖耐量试验(OGTT)评估患者糖代谢状态,并根据结果将GDM患者分为糖代谢正常组66例和糖代谢异常组16例。采用多因素Logistic回归模型分析影响GDM患者产后糖代谢异常的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清GIP、FGF23预测GDM患者产后糖代谢异常的价值。结果 糖代谢异常组血清GIP水平低于糖代谢正常组,FGF23水平高于糖代谢正常组,差异有统计学意义(P<0.01)。孕前高体质量指数(BMI)、高FGF23是GDM患者产后糖代谢异常的危险因素(P<0.05),高GIP是保护因素(P<0.05)。GIP、FGF23、孕前BMI预测GDM患者产后糖代谢异常的曲线下面积(AUC)分别为0.717、0.625、0.699, GIP、FGF23、孕前BMI联合预测GDM患者产后糖代谢异常的AUC为0.890,高于GIP、FGF23、孕前BMI单独预测价值(P<0.05)。结论 GDM产后糖代谢紊乱患者血清GIP水平降低,FGF23水平增高,且与产后糖代谢异常有关。血清GIP和FGF23可预测GDM患者产后糖代谢异常风险。