重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合蒙脱石散对婴幼儿尿布疹的疗效观察与研究

目的探究重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)凝胶联合蒙脱石散对婴幼儿尿布疹的临床效果。方法选取2019年12月至2020年6月赣南医学院第一附属医院收治的72例婴幼儿尿布疹患儿作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组与实验组,每组36例。对照组给予rbFGF凝胶干预,实验组在对照组基础上联合蒙脱石散干预,比较两组干预效果、恢复情况、皮肤损伤程度、血清学指标及不良反应发生情况。结果实验组治疗总有效率为94.44%,高于对照组的72.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,两组皮肤发红、皮肤破裂面积及皮肤侵蚀程度评分均低于干预前,且实验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组不良反应发生率为5.56%,低于对照组的25.00%差异有统计学意义(P<0.05)。实验组尿布疹消退时间、住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,两组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)水平均低于干预前,干扰素-γ(IFN-γ)水平高于干预前,且实验组TNF-α、IL-4、IL-10水平低于对照组,IFN-γ水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论rbFGF凝胶联合蒙脱石散应用于婴幼儿尿布疹的疗效显著,可减轻皮肤损伤程度,改善机体炎症反应,缩短尿布疹消退时间,且不良反应少,值得临床推广应用。

复方桐叶烧伤油联合重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗喉癌术后咽漏的疗效研究

目的研究喉癌术后咽漏患者应用复方桐叶烧伤油联合重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶(rh-bFGF)治疗的疗效。方法选取2018年1月至2022年12月本院收治的行喉癌切除术后咽漏患者60例,采用随机数字表法分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组使用复方桐叶烧伤油联合rh-bFGF纱条进行局部换药,对照组仅使用rh-bFGF纱条进行局部换药。评估咽漏疗效、治愈时间和费用。结果治疗组患者显效率[46.67%(14/30)]、总有效率[96.67%(29/30)]与对照组[30.00%(9/30)和86.67%(26/30)]比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗组患者治疗后血清白细胞介素6水平[(16.56±4.26)pg/L]均低于治疗前[(53.96±6.28)pg/L]与对照组[(24.35±3.61)pg/L],术后住院费用[(57817.7±2203.7)元]明显少于对照组[(61915.5±1972.9)元],住院时间[(19.27±2.35)d]明显短于对照组[(24.77±2.16)d],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论复方桐叶烧伤油联合rh-bFGF治疗喉癌术后咽漏效果与常规使用rh-bFGF相当,可促进愈合,减轻炎症反应,且与常规使用rh-bFGF比较,可缩短住院时间和费用,具有较好的临床获益,值得推广应用。

成纤维细胞生长因子受体1 抑制剂对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响

背景:课题组前期的研究表明靶向成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)可能是治疗类风湿性关节炎的有效靶点。目的:探讨FGFR1抑制剂(PD173074)对胶原诱导关节炎模型大鼠骨破坏的影响。方法:将25只雌性SD大鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、甲氨蝶呤组、PD173074低剂量组、PD173074高剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠建立Ⅱ型胶原诱导关节炎模型。造模成功后正常组及模型组大鼠腹腔注射无菌PBS,甲氨蝶呤组药物注射剂量为1.04 mg/kg,PD173074低剂量组和高剂量组药物注射剂量分别为5,20 mg/kg,1次/周。给药4周后取材,观察大鼠临床症状以及关节肿胀情况,踝关节Micro-CT三维重建及分析,观察踝关节病理变化,检测关节周围血管生成情况及核因子κB受体活化因子配体的表达,检测关节滑膜中p-FGFR1、血管内皮生长因子A、抗酒石酸酸性磷酸酶的表达,观察肝、脾、肾病理变化并计算肝、脾、肾指数。结果与结论:①PD173074能够减轻模型大鼠踝关节临床症状及关节肿胀,延缓骨质丢失,改善骨结构,减轻关节滑膜侵袭以及软骨骨侵蚀,降低关节周围破骨细胞数量,抑制关节滑膜组织中的血管生成,降低核因子κB受体活化因子配体的表达,抑制FGFR1磷酸化蛋白、抗酒石酸酸性磷酸酶和血管内皮生长因子A的蛋白表达。②大鼠肝、脾、肾病理观察表明经过PD173074治疗后无明显的毒副作用。③研究证明了FGFR1抑制剂能够延缓Ⅱ型胶原诱导关节炎模型大鼠关节炎症及骨破坏的进展,并抑制血管的生成。初步验证了PD173074在Ⅱ型胶原诱导关节炎模型中的治疗作用,其可能是通过抑制FGFR1磷酸化发挥作用,为寻找类风湿性关节炎新的治疗靶点提供了方向。

自体浓缩生长因子联合牛碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶在创面修复中的应用

目的探讨自体浓缩生长因子(CGF)联合牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)外用凝胶深度烧伤患者创面修复的应用效果。方法选取2021年2月至2023年8月九江市第一人民医院收治的64例深度烧伤患者作为研究对象,按随机数字表法分为凝胶组(32例)与联合组(32例),凝胶组采用bFGF外用凝胶修复治疗,联合组采用CGF联合bFGF外用凝胶修复治疗,比较两组患者的创面恢复、炎症因子水平[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞计数(WBC)]、疼痛、瘢痕及治疗效果。结果联合组患者的总有效率高于凝胶组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组患者CRP、IL-6、WBC水平低于本组治疗前,且联合组低于凝胶组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者疼痛评分的组间比较、时间点及交互作用比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗7 d、14 d后,联合组患者的疼痛评分均低于凝胶组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,联合组患者的瘢痕色素沉着、血液循环、瘢痕质地、瘢痕厚度及温哥华瘢痕量表(VSS)总评分均低于凝胶组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论将CGF联合bFGF外用凝胶应用在烧伤创面修复中,不仅能加快皮肤创面愈合修复,降低血清炎症因子水平,减轻患者的疼痛感,还可以减少瘢痕增生。

胶原蛋白肽对人牙周膜成纤维细胞损伤的保护作用

文章以脂多糖(LPS)为致病因子,通过刺激人牙周膜成纤维细胞(h PDLFs)建立模型,研究胶原蛋白肽(CP)对口腔的保护作用及其可能机制。结果表明,100 mg/mL以上质量浓度的CP能有效降低LPS对hPLDFs的毒性,显著提高h PLDFs的增殖能力,同时也能有效降低TLR4和NF-κB的表达量,对炎症因子的分泌产生明显的影响。作用机理可能是,CP作为一种信号分子作用于TLR4,通过抑制TLR4和NF-κB的表达来抑制LPS引起的炎症反应,从而促进hPDLFs增殖。

七叶洋地黄双苷滴眼液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶治疗青光眼患者药源性干眼症的临床观察

目的探究七叶洋地黄双苷滴眼液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶治疗青光眼患者药源性干眼症的临床疗效。方法按照随机数字表法将2020年10月~2023年11月期间收治并确诊的青光眼药源性干眼症患者60例分为对照组(重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶,n=30)和研究组(重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶+七叶洋地黄双苷滴眼液,n=30)。评估两组治疗效果、泪液动力学水平、生活质量。结果研究组总有效率(96.67%)高于对照组(73.33%)(P<0.05);治疗4周后,研究组泪液动力学、生活质量各指标水平均优于对照组(P<0.05)。结论七叶洋地黄双苷滴眼液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶治疗青光眼患者药源性干眼症可有效缓解症状,改善泪液动力学水平,提高生活质量。

探讨外用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)凝胶对超脉冲CO2点阵激光治疗痤疮瘢痕的临床疗效

探讨外用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)凝胶对超脉冲CO2点阵激光治疗痤疮瘢痕的临床疗效。方法 选取2023年1月-2023年11月本院收治的痤疮瘢痕患者84例纳入研究,均予以超脉冲CO2点阵激光治疗,随机分组(各42例),对照组用莫匹罗星软膏,观察组加用bFGF,对比效果。结果 观察组总有效率,结痂及红斑持续时间,优于对照组(P<0.05);痤疮基底深度、瘢痕体征评分、瘢痕权重干预后,低于对照组(P<0.05);不良反应率也比对照组低(P<0.05)。结论 对痤疮瘢痕的治疗,CO2点阵激光后辅助bFGF凝胶,能提高疗效,改善瘢痕体征,缩短恢复时间,不良反应少。

负压引流技术联合牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶冲洗治疗糖尿病足溃疡的效果

目的:分析负压引流技术联合牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶冲洗治疗糖尿病足溃疡的效果。方法:选取2018年12月-2023年1月于龙口市人民医院治疗的糖尿病足溃疡患者60例为研究对象,采用随机数字法分为常规组和试验组,各30例。常规组采取常规负压引流技术联合生理盐水冲洗治疗,试验组采取负压引流技术联合牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶冲洗治疗。比较两组治疗效果、时间指标、疼痛情况、创面异常发生率。结果:试验组治疗效果总有效率高于常规组,差异有统计学意义(P<0.001)。试验组创面清洁时间、创面愈合时间、肉芽组织出现时间、住院时间短于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前和治疗后3d,两组视觉模拟评分(VAS)比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后7、14d,试验组VAS评分低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组创面异常发生率低于常规组,差异有统计学意义(P=0.003)。结论:负压引流技术联合牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶冲洗治疗糖尿病足溃疡的治疗效果显著,可促进创面愈合,减轻疼痛程度,降低创面异常的发生率。

PTEN介导紫草素抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的胶原沉积

目的从PTEN角度探讨紫草素对人增生性瘢痕成纤维细胞胶原沉积的影响。方法苏木精-伊红染色(HE染色)和马松染色(Masson染色)鉴定增生性瘢痕组织,免疫荧光鉴定人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFBs);Western blot检测人增生性瘢痕(HS)和同一个体正常皮肤(NS)组织中PTEN表达水平;将HSFBs随机分组为:DMSO组、shikonin组、control组、si-NC组、si-PTEN组、shikonin+si-NC组和shikonin+si-PTEN组;Western blot检测各组中PTEN和胶原相关蛋白(Col1、Col3、α-SMA)的表达。结果与正常皮肤组织相比,PTEN在增生性瘢痕组织中呈低表达(P<0.05);用IC50浓度(13.46μmol/L)的紫草素干预人增生性瘢痕成纤维细胞24 h后,人增生性瘢痕成纤维细胞中Col1、Col3和α-SMA的表达降低(P<0.05),而PTEN的表达升高(P<0.05);转染si-PTEN后,与si-NC组相比,人增生性瘢痕成纤维细胞中Col1,Col3和α-SMA的表达升高(P<0.05);共转染shikonin+si-PTEN后,与shikonin+si-NC组相比,人增生性瘢痕成纤维细胞中Col1、Col3和α-SMA的表达升高(P<0.05)。结论紫草素可通过上调PTEN的表达抑制增生性瘢痕成纤维细胞的胶原沉积。

水凝胶递送碱性成纤维细胞生长因子对氧糖剥夺后NIH3T3细胞功能的影响

目的:探讨水凝胶递送碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对氧糖剥夺(OGD)后小鼠成纤维NIH3T3细胞功能的影响,并阐明负载bFGF的水凝胶对OGD条件下成纤维细胞氧化应激反应的改善作用。方法:制备bFGF明胶水凝胶,将对数生长期NIH3T3细胞分为空白组、20%明胶组和20%明胶+戊二醛组,采用CCK-8法检测6、12和24 h水凝胶浸出液共培养的NIH3T3细胞活性。将NIH3T3细胞分为对照组、OGD组和OGD+不同质量bFGF负载组(OGD+1 ng bFGF组、OGD+10 ng bFGF组和OGD+100 ng bFGF组)。采用Western blotting法检测各组细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达水平。检测各组细胞中丙二醛(MDA)水平和乳酸脱氢酶(LDH)及超氧化物歧化酶(SOD)活性。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测bFGF体外释放率。结果:CCK-8法检测,与空白组比较,不同浸出时间20%明胶组和20%明胶+戊二醛组NIH3T3细胞活性差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,OGD组NIH3T3细胞中α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与OGD组比较,OGD+1 ng bFGF组、OGD+10 ng bFGF组和OGD+100 ng bFGF组NIH3T3细胞中α-SMA蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),Ⅰ型胶原蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性。与对照组比较,OGD组NIH3T3细胞中MDA水平和LDH活性升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05)。与OGD组比较,OGD+1 ng bFGF组NIH3T3细胞中MDA水平和LDH活性降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05)。ELISA法检测,在4 h内约10%bFGF由水凝胶中释放,在12 h内约15%bFGF由水凝胶中释放,在24 h内约21%bFGF由水凝胶中释放。结论:负载bFGF的水凝胶可以调控OGD条件下成纤维细胞的转化,抑制成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白表达,并改善细胞氧化应激反应,且该系统具有一定的持续释药能力。

玉屏风散对紫外线照射的人皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成的影响

目的探讨玉屏风散(Yupingfeng Powder,YPF)通过核转录因子NF-E2相关因子2/抗氧化反应元件(nuclear factor erythroid 2-related factor 2/antioxidant response element,Nrf2/ARE)信号通路对紫外线照射的人皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成的影响。方法体外培养人皮肤成纤维ESF-1细胞,紫外线照射建立细胞老化模型,MTT法检测各组细胞活力,比色法、蛋白免疫印迹法检测胶原合成。结果与紫外线组相比,YPF组的细胞活力、羟脯氨酸含量和胶原蛋白含量显著增加,同时也显著增加胶原蛋白I(Collagen I)、胶原蛋白Ⅲ(CollagenⅢ)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(metalloproteinase tissue inhibitor-1,TIMP-1)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(metalloproteinase tissue inhibitor,TIMP-2)、Nrf2/ARE信号通路蛋白表达,降低基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP-1)蛋白表达。与UV+YPF-H+siRNA组相比,UV+YPF-H+Nrf2 siRNA组的细胞活力、羟脯氨酸含量和胶原蛋白含量及Nrf2、Collagen I、CollagenⅢ、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达降低,MMP-1蛋白表达增加。结论玉屏风散通过抑制Nrf2/ARE信号通路促进紫外线照射的ESF-1细胞胶原蛋白合成。

小牛血去蛋白提取物眼用凝胶与重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶在角膜损伤修复中的临床效果

目的:比较小牛血去蛋白提取物眼用凝胶与重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶在角膜损伤修复中的临床效果,为验证临床治疗的实用性与可靠性提供依据。方法:回顾性分析2020年1月—2021年5月信阳市眼科医院收治的230例角膜损伤患者的一般资料,根据不同治疗方案将患者分为研究组(n=115)和对照组(n=115),对照组给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶,研究组给予小牛血去蛋白提取物眼用凝胶,疗程均为14 d。对比两组患者治疗前后不同时间的眼部功能指标[泪液分泌试验(Schirmer test,SIt)、角膜荧光染色(corneal fluorescein staining,CFS)、泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT)]、临床症状评分[眼表疾病指数量表(ocular surface disease index,OSDI)]及不良反应发生情况。结果:治疗后研究组SIt高于对照组,CFS低于对照组,差异有统计学意义(t=2.743、2.079,P<0.05);治疗7 d、14 d、30 d研究组OSDI均低于对照组,差异有统计学意义(t=3.389、5.042、4.651,P<0.05);两组患者总不良反应率研究组为5.22%,略高于对照组为4.35%,两组患者不良反应比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.096,P>0.05)。结论:小牛血去蛋白提取物眼用凝胶与重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗角膜损伤的疗效显著且安全性均较高,但小牛血去蛋白提取物眼用凝胶疗效更佳,可有效改善患者眼部功能,降低临床症状评分。

机械应力对人子宫旁韧带成纤维细胞增殖及胶原代谢的影响

目的探讨人子宫旁韧带成纤维细胞增殖及胶原代谢受到机械应力的影响。方法选取2020年2月-2020年5月于上海市第一妇婴保健院医院妇科因良性肿瘤行子宫全切手术的5例患者,年龄43~49岁,均无盆底功能障碍疾病,均未绝经,使用酶消化法获得人子宫旁韧带成纤维原代细胞并鉴定。对子宫旁韧带成纤维细胞进行不同时间(12 h及24 h)及不同大小(6%、12%及18%)周期性拉伸应力加载,检测成纤维细胞的增殖能力及细胞胶原代谢相关基因MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ及LOXL1的RNA水平的表达变化,以未加力细胞组作为对照组,进行对照分析。结果与对照组相比,6%、12%及18%的拉伸应力都可以抑制成纤维细胞的增殖能力,且在一定范围内随着应力增加(6%~12%)及作用时间延长(12~24 h)其抑制作用增加。与对照组相比,6%的拉伸应力使成纤维细胞MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ及LOXL1的RNA水平出现轻度上调趋势,但差异不显著(P>0.05)。12%及18%的拉伸应力使成纤维细胞MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ及LOXL1的RNA水平下调。且随作用力加大(12%~18%),MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ及LOXL1 mRNA表达都有进一步下降的趋势,其中LOXL1 mRNA表达有明显的下降(P<0.05);随着作用时间延长(12~24 h),MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠmRNA的表达明显下降(P<0.05),而CollagenⅢ及LOXL1 mRNA的表达差异无统计学意义。在各基因中,CollagenⅢ和MMP-2 mRNA表达水平的最大下调幅度为21.1%和24.8%,TIMP-1、CollagenⅠ及LOXL1 mRNA分别达到43.6%、40.1%及47.9%。结论较短时间的轻度的拉伸应力似乎具有促进子宫骶韧带成纤维细胞的增殖及上调胶原相关基因表达的趋势,但仍需进一步实验验证;较大及较长时间的拉伸应力可以抑制成纤维细胞的增殖并使胶原相关基因表达下调,但各基因的下调具有不一致性。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合磺胺嘧啶银乳膏及拜尔坦泡沫敷料在Ⅱ期压疮管理中的应用分析

目的 分析重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合磺胺嘧啶银乳膏及拜尔坦泡沫敷料在Ⅱ期压疮管理中的应用价值。方法 将2021年8月~2022年6月我院收治的90例中晚期肿瘤Ⅱ期压疮患者按随机数字表法分为对照组、观察A组与观察B组,每组30例。对照组给予莫匹罗星软膏涂抹后,予以无菌纱块覆盖;观察A组给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶与磺胺嘧啶银乳膏混合涂敷创面后,予以无菌纱块覆盖;观察B组给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶与磺胺嘧啶银乳膏混合涂敷创面后,予以拜尔坦泡沫敷料覆盖。观察比较3组的临床疗效、创口愈合时间、疼痛情况及患者满意度。结果 观察B组的总有效率、患者满意度均明显高于观察A组和对照组,且观察A组明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。3组患者的创口愈合时间比较,观察B组均明显短于观察A组和对照组,且观察A组明显短于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗后第1、7、14天时,观察B组的疼痛评分明显低于观察A组和对照组,且观察A组的疼痛评分明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合磺胺嘧啶银乳膏及拜尔坦泡沫敷料覆盖治疗Ⅱ期压疮的疗效显著,能有效缩短创口愈合时间,减轻疼痛程度,提高了患者的满意度。

成纤维细胞胶原凝胶培养研究

目的：建立一种成纤维细胞的三维培养方法。方法：将胶原、成纤维细胞、血清和培养基在正确的比例下混合，便可形成凝胶。结果：在凝胶中成纤维细胞具有良好的活力，使之形成有一定弹性和抗拉伸能力的凝胶块。结论：真皮替代物培养是研究成纤维细胞与细胞外基质间相互作用的良好模型。

牛肌腱胶原凝胶体在人牙髓成纤维细胞等原代培养中的应用

在铺有牛肌腱胶原玻璃培养瓶中进行人牙髓和牙周组织原代培养，牙髓和牙周组织的成功率分别为９／２１和５／１５，与不铺胶原的对照组（１／２１和０／１５）相比有显著差异（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。这可能是细胞特异的高亲和力受体与胶原结合，使两者成为一个整体，增加了组织块贴壁率和细胞培养的成功率。本研究提示牛肌腱胶原铺制技术可以大大提高人牙髓和牙周组织培养的成功率。

芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的研究芦荟凝胶(aloe gel,AG)对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSFb)的增殖及胶原蛋白合成的影响。方法原代培养人皮肤成纤维细胞,传代培养后加入不同浓度的芦荟凝胶作用后,应用流式细胞仪检测细胞周期变化,应用碱水解法检测培养液中羟脯氨酸的含量变化,应用免疫组化法检测芦荟凝胶对成纤维细胞Ⅰ型前胶原合成的影响。结果细胞周期时项分析结果显示5%、10%浓度芦荟凝胶处理组细胞周期S+G2/M期细胞百分率及增殖指数PI值较对照组增高(P<0.05),但在不同时间点检测的细胞周期差异无统计学意义(P>0.05)。各浓度芦荟组在不同时间段时其成纤维细胞培养液中羟脯氨酸含量均明显高于空白对照组(P<0.05)。经10%浓度芦荟凝胶处理后的成纤维细胞Ⅰ型前胶原表达增加(P<0.05)。结论芦荟凝胶能有效促进人皮成纤维细胞的增殖和胶原的合成。

细胞因子TGFβ1,CTGF和IFN-γ对系统性硬皮病克隆成纤维细胞胶原代谢的影响

目的研究细胞因子(TGFβ1,CTGF和IFN-γ)对系统性硬皮病具有不同胶原合成能力的克隆成纤维细胞胶原代谢的影响。方法采用实时荧光定量RT-PCR法检测细胞因子(TGFβ1,CTGF和IFN-γ)对系统性硬皮病具有不同胶原合成能力的克隆成纤维细胞Ⅰ型前胶原和MMP-1 mRNA水平的影响情况。结果 TGFβ1(5ng/mL)作用48h仅使具有低胶原合成能力的系统性硬皮病克隆成纤维细胞的Ⅰ型前胶原mRNA水平上升(1.20±0.50vs0.04±0.04,P=0.001);CTGF(20ng/mL),IFN-γ(100ng/mL)作用48h使系统性硬皮病克隆成纤维细胞MMP-1 mRNA水平下降(F=6.221,P=0.034;F=53.505,P=0.000),且具有高胶原合成能力的克隆成纤维细胞MMP-1 mRNA水平下降幅度大(F=8.817,P=0.016;F=8.092,P=0.019)。结论系统性硬皮病具有不同胶原合成能力的克隆成纤维细胞Ⅰ型前胶原和MMP-1 mRNA水平对细胞因子的反应存在异质性。

人参皂苷Rg3对血管紧张素Ⅱ诱导小鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的 研究人参皂苷Rg3对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的小鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与胶原合成的影响,探讨人参皂苷Rg3是否具有对抗心肌纤维化的作用。方法 用胰酶消化,差速贴壁、分离纯化CFs,用波形蛋白(Vimentin)免疫荧光法鉴定CFs;建立AngⅡ诱导的CFs增殖模型。实验分为正常对照组(无血清DMEM),模型组(AngⅡ),人参皂苷Rg3组共3组;人参皂苷Rg3预处理1 h,加入AngⅡ共同作用24 h,采用EdU试剂盒检测CFs的增殖情况;羟脯氨酸法检测细胞胶原分泌水平;Western印迹检测CFs中增殖细胞核抗原(PCNA)、胶原蛋白(Col)Ⅰ的表达情况。结果 成功提取新生大鼠原代CFs, Vimentin显著阳性;与正常对照组比较,模型组CFs增殖和胶原分泌明显增加,PCNA、ColⅠ蛋白表达水平明显升高;与模型组相比,人参皂苷Rg3组CFs增殖和胶原分泌水平较明显降低,PCNA、ColⅠ蛋白表达水平明显降低。结论 人参皂苷Rg3通过抑制AngⅡ诱导的CFs增殖和胶原蛋白合成,进而发挥抗心肌纤维化作用。

三维立体培养中不同浓度的胶原凝胶对成纤维细胞生长的影响

目的 :研究在三维立体培养中不同浓度胶原对成纤维细胞生长状态的影响。方法 :分离 1～ 2dSD新生鼠背部皮肤的成纤维细胞 ,分别种入 6 4、5 3、4mg/ml的胶原中 ,光镜观察立体培养条件下成纤维细胞的生长状态和细胞数量 ,并进行统计分析。结果 :6 4mg/ml胶原中细胞的生长状态良好 ,细胞突起明显 ,和二维条件下的形态相似。 5 3mg/ml组中 ,部分细胞出现了空泡和颗粒 ,细胞的生长状态趋于不良。4mg/ml中细胞的大部分突起消失 ,细胞核固缩、溶解 ,部分细胞类似凋亡细胞。 结论 :6 4mg/ml浓度的胶原最适宜于成纤维细胞的生长。