环境变化对水稻osfh1突变体成蛋白家族表达的影响

水稻成蛋白基因成员OsFH1在水稻根毛的生长发育中起着关键作用,这一过程受到环境因素的调控,当前的研究对环境因素如何与OsFH1互作调控水稻根毛的机制尚未阐明。为探索水稻成蛋白成员是否在环境因素介导的osfh1突变体根毛表型恢复中发挥作用,该研究使用1/2 MS液体培养液与1/2 MS固体培养基处理osfh1突变体,通过qRT-PCR技术分析成蛋白家族成员表达量,并对成蛋白家族进行生物信息学分析。结果表明:(1)与野生型相比,在液培中osfh1突变体主根根毛缺失,地上部分较短,侧根数量增加,在固体培养中osfh1突变体根毛缺失表型得到恢复。(2)与野生型相比,当osfh1突变体从液培到固培环境时,OsFH16表达量下降,OsFH17表达量上升,并且差异显著。(3)OsFH1、OsFH16、OsFH17都是第一类成蛋白亚家族成员,都具有生长素、赤霉素以及厌氧等与环境胁迫相关顺式作用元件,并且预测到OsFH1、OsFH16和OsFH17定位于质膜行使功能。(4)OsFHs在不同组织的表达模式分析表明,OsFH1在根部表达水平较高,而OsFH16、OsFH17在根部表达量相对较低。综上认为,由于OsFH16、OsFH17、OsFH1之间亲缘关系较高,调控模式相近且三者都可能在细胞质膜上行使功能,因此OsFH16、OsFH17可能参与环境因素与osfh1共同改变根毛表型这一过程。该研究结果为解析环境与osfh1基因共同调控水稻根毛发育机制奠定了一定理论基础,为探索植物成蛋白基因功能提出了新方向。

骨形态形成蛋白-7／成骨蛋白-1在肾脏的表达及其作用

骨形态形成蛋白-7／成骨蛋白-l(bone mephogenetic protein-7／osteogenic protein-l，BMP-7／OP-l，下文中均称为：BMP-7)，属于TGFβ超家族中的一员。由于最初发现时认为它的作用是刺激体内骨骼系统外的异常骨及软骨形成而得名。20世纪90年代以后，人们逐渐认识到这组蛋白具有调节多种类型细胞生长及分化的作用[1].BMP-7在成人的很多组织中都有表达，而肾脏表达的水平最高。目前认为BMP-7参与胚胎期肾脏的形成以及肾脏形态和功能的保护。本文就BMP-7在肾脏的细胞定位及其在胚胎发育和肾脏保护方面的作用加以综述。

稳定表达骨形成蛋白Ⅱ型突变受体的NIH3T3细胞的建立及鉴定

目的：建立稳定表达 ＢＭＰｓ Ⅱ型突变受体的 ＮＩＨ３Ｔ３细胞株。方法：用 ＦｕＧＥＮＥ６ ＴｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎＲｅａｇｅｎｔ Ｋｉｔ真核转染试剂盒将携带ＢＭＰｓ Ⅱ型突变受体的 ｃＤＮＡ的真核表达载体转染 ＮＩＨ３Ｔ３细胞。结果；得到抗Ｇ－４１８的阳性细胞克隆转染细胞，ｎｅｏ基因原位杂交阳性。结论：成功建立了稳定表达ＢＭＰｓⅡ型突变受体的ＮＩＨ３Ｔ３细胞株。

活血通络法对激素性股骨头坏死囊性变患者血清骨吸收/成血管/成骨蛋白调节作用的研究

背景激素性股骨头坏死(SIONFH)中囊性变具有“双刃剑”作用,活血通络法对早期激素性股骨头坏死疗效佳,但对囊性变骨吸收/成血管/成骨蛋白调节作用尚未明确。目的探讨活血通络法对激素性股骨头坏死囊性变患者血清骨吸收/成血管/成骨蛋白作用的影响。方法纳入2019年1月—2021年1月在广州中医药大学髋关节研究中心收治的60例SIONFH患者为研究对象,按随机数字表法分成两组,对照组和治疗组各30例。另选取同时期在医院体检正常且无激素使用史30例志愿者作为正常组。治疗组给予活血通络胶囊(2 g/次,3次/d)及碳酸钙(600 mg/次,1次/d)治疗,对照组给予等量碳酸钙治疗,两组患者疗程均为12个月,同时患肢加以限制性负重。采集空腹血清,采用酶联免疫吸附试验检测血清核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、骨保护素(OPG)、钙黏蛋白相关蛋白(CTNNB1)的表达水平,以门诊复诊方式分别于患者出院后第6、12个月进行2次随访,以股骨头塌陷定义为终点事件。以髋关节疼痛视觉模拟评分(VAS)、髋关节功能(Harris)评分和坏死面积评分进行疗效评估。结果3组研究对象基线RANKL、PDGF-BB、OPG、CTNNB1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),组间比较结果显示,对照组、治疗组RANKL、PDGF-BB均高于正常组,OPG、CTNNB1均低于正常组(P<0.05)。重复测量方差分析结果示,时间和组别对RANKL、PDGF-BB、VEGFA、OPG、CTNNB1水平存在交互作用(P<0.05),时间和组别对RANKL、PDGF-BB、VEGFA、OPG、CTNNB1水平主效应显著(P<0.05)。其中第6个月治疗组RANKL水平高于对照组,第12个月治疗组PDGF-BB水平高于对照组,第6、12个月VEGFA、OPG、CTNNB1水平高于对照组(P<0.05)。治疗后第12个月治疗组髋关节VAS评分、坏死面积评分低于对照组,髋关节Harris评分高于对照组(P<0.05)。组内比较结果显示,治疗后第12个月治疗组髋关节VAS评分、坏死面积评分低于治疗前,髋关节Harris评分高于治疗前(P<0.05),对照组髋关节VAS评分、髋关节Harris评分高于治疗前(P<0.05)。结论活血通络法能上调激素性股骨头坏死患者RANKL、PDGF-BB、VEGFA、OPG和CTNNB1蛋白表达水平,有效促进SIONFH患者骨修复及改善临床症状,推测该疗法通过“骨吸收/成血管/成骨”三元修复网络促进囊性变骨修复作用。

成纤维细胞活化蛋白高表达致结肠癌预后不良的潜在机制分析

目的分析成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)基因在结肠癌中的表达情况,并探究其表达与结肠癌患者预后的相关性及潜在机制,为结肠癌的发病机制、诊断、治疗及预后提供新思路。方法下载基因表达综合数据库和癌症基因组图谱数据库中结肠癌组织样本和癌旁正常组织样本的表达数据,分析FAP基因在结肠癌组织样本和癌旁正常组织样本中的表达情况。对Kaplan-Meier plotter数据库中结肠癌患者的生存资料进行生存分析,探究FAP基因表达与患者总生存率的相关性。使用GEPIA2数据库分析FAP基因在结肠癌患者中的表达及其对预后的作用。下载基因表达综合数据库和癌症基因组图谱数据库中结肠癌的临床相关数据,分析FAP基因在不同临床分期中的表达情况。通过基因集富集分析探索FAP基因与结肠癌发生、发展相关的分子作用通路。免疫相关性分析(CIBERSORT)用于探索FAP基因与免疫细胞浸润、免疫检查点表达的相关性。结果FAP基因在结肠癌组织中的表达较癌旁正常组织上调(P<0.05)。结肠癌患者中FAP基因的表达水平在不同分期之间存在差异(P<0.05)。生存分析结果显示,高表达FAP基因患者的总生存率低于低表达FAP基因患者(P<0.05)。FAP基因通过多种通路影响结肠癌的发生发展。在结肠癌中,FAP基因与CD4^(+)记忆T细胞、浆细胞的浸润水平呈负相关,与常见免疫检查点表达呈正相关。结论FAP基因在结肠癌中高表达,与患者不良预后显著相关。此外,FAP基因可通过多种细胞功能、化学通路以及免疫浸润等方式促进肿瘤的进展,是治疗结肠癌的潜在靶点。

贻贝启发接枝骨形态发生蛋白2成骨活性肽的介孔生物玻璃修复股骨髁缺损

背景:骨形态发生蛋白2在胚胎发育、骨骼形成和再生修复中具有重要作用,但高剂量应用与癌症发病密切相关。骨形态发生蛋白2成骨活性段L20能够有效减少癌症等不良反应,并可显著促进骨组织再生。目的:将骨形态发生蛋白2活性肽段以贻贝衍生肽模拟策略接枝在介孔生物玻璃表面,探究其对组织工程成骨性能的影响。方法:(1)采用模板法合成介孔生物玻璃纳米颗粒,采用一步法合成负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20的介孔生物玻璃纳米颗粒,表征负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔活性玻璃纳米颗粒的形貌与体外缓释性能。(2)分离提取SD大鼠骨髓间充质干细胞,传2代后分别与PBS(空白组)、介孔生物玻璃纳米颗粒(对照组)、负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒(实验组)共培养,采用细胞活死荧光染色和CCK-8法检测细胞毒性和细胞增殖,扫描电镜观察细胞黏附;成骨诱导分化后,进行碱性磷酸酶染色、茜素红S染色与成骨相关基因表达检测。(3)取15只SD大鼠,建立双侧股骨髁缺损模型,采用随机数字表法分为3组:空白组(n=5)不植入任何材料,对照组(n=5)植入介孔生物玻璃纳米颗粒,实验组(n=5)植入负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒。术后8周,进行股骨Micro-CT扫描与组织形态观察。结果与结论:(1)扫描电镜下可见负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒为球形、单分散颗粒,透射电镜下可见其具有多孔结构,平均粒径为(268.10±0.58) nm,体外可缓释L20。(2)负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒无细胞毒性,并且可促进骨髓间充质干细胞的增殖与黏附;与空白组、对照组相比,实验组碱性磷酸酶活性与细胞外基质矿化能力均升高(P <0.05),碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素mRNA表达升高(P <0.05)。(3)股骨Micro-CT扫描结果显示,与空白组、对照组相比,实验组新生骨量与骨密度均升高(P <0.05);苏木精-伊红与Masson染色结果显示,与空白组、对照组相比,实验组新骨生成与胶原纤维均增加。(4)结果表明,负载骨形态发生蛋白2活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒具有良好的生物相容性及体内外促成骨性能,可促进SD大鼠股骨髁缺损的再生修复。

靶向成纤维细胞激活蛋白分子影像的临床研究与应用进展

[背景]肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞(CAF)在肿瘤生物行为中起重要作用,成纤维细胞激活蛋白(FAP)作为CAF的特异性标志物,在90%的上皮肿瘤中均有表达.近年来,FAP抑制剂(FAPI)正电子发射断层成像(PET)在肿瘤疾病与非肿瘤疾病中的临床研究和应用进展迅速,成为领域内的前沿热点.[进展]FAPI PET/计算机断层扫描(CT)在包括头颈部肿瘤、肺癌、消化系统肿瘤、肉瘤等多种肿瘤的诊断评价中显示出克服其氟代脱氧葡萄糖(FDG)PET/CT的不足、显著提升诊断效能的优点.同时,以FAPI为载体的放射性核素诊疗一体化研究也引起关注.本文对FAPI PET/CT在肿瘤与非肿瘤疾病的临床研究和应用进展以及基于FAPI的放射性核素诊疗一体化研究动向进行综述.[展望]未来随着FAPI分子探针药动学的进一步提升,更多前瞻性大样本量的临床研究系统性评价FAPI分子影像在肿瘤疾病和非肿瘤疾病中的价值,以及不同治疗方式的联合,FAP有望成为重要的诊疗一体化靶点,为肿瘤治疗提供全新的策略.

放射性核素标记成纤维细胞激活蛋白抑制剂在肝癌诊疗中的临床应用进展

肝癌在全球具有较高的发病率和死亡率,传统形态学影像可为其诊疗提供重要的疾病解剖信息,而结合PET显像所反映的功能信息可进一步提升肿瘤的诊断准确度并辅助治疗决策。成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activation protein,FAP)是肿瘤相关成纤维细胞的标志性蛋白,在多种上皮来源的恶性肿瘤中高表达,是肿瘤诊治的重要靶点。相较于常规应用的^(18)F-氟代脱氧葡萄糖PET显像,FAP抑制剂PET显像具有图像对比度高和不受血糖影响等优势。近年来,靶向FAP的多种放射性药物在不同肝癌类型的诊断、分期及靶向治疗等方面得到了持续拓展,本文对其相关应用进展进行综述。

68Ga标记成纤维细胞活化蛋白抑制剂PET/CT假阳性原因分析

目的 探讨^(68)Ga标记的成纤维细胞活化蛋白抑制剂(^(68)Ga-FAPI-04)PET/CT显像出现假阳性的原因。方法 回顾性收集西南医科大学附属医院核医学科2020年9月至2021年5月547例行^(68)Ga-FAPI-04 PET/CT检查患者的影像学资料,由2名有经验的核医学诊断医师根据患者临床资料、相关影像学检查、实验室检查、病理及随访结果对假阳性病例进行分析。结果 547例^(68)Ga-FAPI-04 PET/CT显像中共发现假阳性99例(18.1%),其中男56例,女43例。13例经术后病理诊断,包括甲状腺炎1例、肺结核2例、骨结核1例、肺炎性假瘤2例、肺结节病1例、肺良性纤维瘤1例、机化性肺炎1例、肾血管平滑肌脂肪瘤2例、肿块型胰腺炎1例及胰腺黏液囊腺瘤1例;86例经病史、相关影像学检查及长期随访证实,其中颈部8例(9.3%)、胸部13例(15.1%)、腹部5例(5.8%)、骨关节57例(66.3%)、皮肤3例(3.5%)。假阳性显像中与炎症有关的摄取83例(83.8%),以关节炎(23例)和骨赘(29例)最多见;与成纤维细胞有关的摄取16例(16.2%)。结论^(68)Ga-FAPI-04 PET/CT会出现非恶性肿瘤性假阳性显像,主要与炎症及成纤维细胞有关。

DIAPH3对cagA^(+)Hp诱导的胃黏膜上皮GES-1细胞EMT及紧密连接蛋白表达的影响

目的研究Diaphanous相关成蛋白3(DIAPH3)对细胞毒素相关蛋白A(cagA^(+))幽门螺杆菌(Hp)诱导的胃黏膜上皮GES-1细胞上皮间质转化(EMT)及紧密连接蛋白表达的影响。方法H.pylori J99毒株(cagA^(+)Hp)与GES-1细胞株共培养,使用DIAPH3干扰片段对细胞进行干预。观察细胞增殖、侵袭、凋亡情况,并检测EMT相关蛋白和紧密连接蛋白变化。结果显微镜下显示cagA^(+)Hp共培养的GES-1细胞大小不一,形态发生异变。与对照组比较,模型组、DIAPH3-NC组和DIAPH3组干预后不同时间的OD_(570)值、侵袭细胞数量均增加,凋亡率降低,N钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)相对表达量升高,E-钙黏附蛋白(E-cadherin)和紧密连接蛋白(occludin、claudin-1、ZO-1)相对表达量降低(P<0.05);与模型组、DIAPH3-NC组比较,DIAPH3组的OD_(570)值、侵袭细胞数量均降低,凋亡率增加,N-cadherin、Vimentin相对表达量降低,E-cadherin、occludin、claudin-1、ZO-1相对表达量升高(P<0.05)。结论抑制NIAPH3表达能抑制胃黏膜上皮GES-1细胞的EMT,阻止细胞的侵袭和转移,提高凋亡率,上调紧密连接蛋白表达。

成纤维细胞激活蛋白抑制剂显像在心血管疾病中的研究进展

心肌慢性重构是心血管疾病的重要机制,心脏成纤维细胞(CF)在心肌重构中发挥重要作用。成纤维细胞激活蛋白(FAP)特异性表达于CF,通过检测FAP可早期识别心脏损伤。成纤维细胞激活蛋白抑制剂(FAPI)可与FAP靶向结合,不同放射性核素标记的FAPI可特异性识别和量化心肌纤维化。该文介绍FAPI正电子发射断层显像(PET)在心肌梗死、心力衰竭、肿瘤治疗相关心脏毒性和心肌病等心血管疾病中的应用以及FAPI摄取与心血管危险因素的关系。

成纤维细胞激活蛋白抑制剂用于PET/CT诊断肿瘤研究进展

成纤维细胞激活蛋白(FAP)是癌相关成纤维细胞的重要分子标志,在恶性肿瘤中呈高表达,而在正常组织及良性肿瘤中表达极低。标记FAP抑制剂(FAPI)对于明确诊断多种肿瘤、肿瘤分期及判断恶性肿瘤复发等具有重要意义。本文就FAPI用于PET/CT诊断肿瘤研究进展进行综述。

MiR-30a-5p靶向成纤维蛋白-1抑制胰腺导管腺癌增殖和迁移作用

目的 探讨microRNA-30a-5p (miR-30a-5p)对胰腺导管腺癌(PDAC)细胞增殖和迁移的影响及对成纤维细胞活化蛋白-1 (FAP-1)的调控作用。方法 反转录聚合酶链反应、免疫印迹法分别检测PDAC细胞及胰腺正常细胞中miR-30a-5p和FAP-1的表达。生物信息学网站预测miR-30a-5p、FAP-1基因存在结合位点,FAP-1在正常细胞与癌细胞表达存在差异;miR-30a-5p模拟物、抑制物,阴性对照物转染PDAC细胞系,反转录聚合酶链反应检测转染效率,蛋白质印迹法检测FAP-1的蛋白表达水平;CCK-8法检测PDAC细胞的增殖;划痕实验、细胞迁移实验检测PDAC细胞的迁移作用。结果 MiR-30a-5p在胰腺正常细胞系中的表达高于PDAC细胞系(P<0.05);FAP-1在胰腺正常细胞系中的表达低于PDAC细胞系(P <0.05)。MiR-30a-5p、FAP-1基因有连接位点,转染miR-30a-5p模拟物后miR-30a-5p表达量增高,FAP-1的表达量显著降低(P <0.05),PDAC细胞的增殖和迁移能力下降(P <0.05);转染miR-30a-5p抑制物后miR-30a-5p表达量降低,FAP-1的表达量显著增加(P <0.05),PDAC细胞增殖和迁移能力增强(P <0.05)。FAP-1、miR-30a-5p与胰腺癌患者临床病理特征之间的关系表明:FAP-1与肿瘤TNM分期相关,FAP-1与饮酒习惯相关;miR-30a-5p与肿瘤TNM分期相关(P <0.05)。结论 MiR-30a-5p可能靶向抑制FAP-1蛋白,抑制PDAC增殖、迁移。

成纤维细胞激活蛋白抑制剂PET显像诊断非恶性疾病研究进展

成纤维细胞激活蛋白(FAP)可在活化的成纤维细胞中过度表达。近年来,放射性核素标记的FAP抑制剂(FAPI)已继^(18)F-FDG之后成为核医学领域中的重要新型正电子显像剂,越来越多地用于非恶性疾病。本文就FAPI PET显像用于诊断非恶性疾病研究进展进行综述。

放射性标记成纤维活化蛋白抑制剂PET/CT在心脏疾病诊断中的应用进展

活化的心肌成纤维细胞(CF)与心室重构直接相关,而成纤维活化蛋白(FAP)在活化的CF中高表达,它可以作为CF的标志物。靶向FAP PET/CT成像在心脏疾病的诊断和疗效评价等方面具有很大的应用潜力。就靶向FAP PET/CT分子探针及其在心肌梗死、肿瘤心脏病、心力衰竭、肺动脉高压、心肌病和心肌淀粉样变等心脏疾病中的应用予以综述。

靶向成纤维细胞活化蛋白通过影响肿瘤相关成纤维细胞的外泌体抑制内皮细胞间质转化

目的探讨特异性抑制成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)是否能够通过影响肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)的外泌体(exosomes,exo)抑制内皮细胞间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)并探究其机制。方法提取原代CAFs和癌旁成纤维细胞(peri-tumor fibroblasts,PTFs),收集CAFs-exo和PTFs-exo,特异性FAP抑制剂(3.3 nmol·L^(-1)SP13786)处理CAFs 24 h后收集的外泌体命名为Anti-FAP-exo。将内皮细胞HMEC-1分别以等体积的RPMI 1640、PTFs-exo、CAFs-exo及Anti-FAP-exo孵育并命名为control组、PTF组、CAF组及Anti-FAP组。划痕实验、Transwell侵袭实验、血管生成实验检测各组HMEC-1细胞的迁移、侵袭及血管生成能力;免疫荧光、免疫组化和Western blot检测EndMT相关蛋白表达水平。结果CAF组HMEC-1细胞的迁移、侵袭及血管生成能力较PTF组明显增强,Anti-FAP组HMEC-1细胞迁移、侵袭及血管生成能力较CAF组明显减弱,与PTF组比较无差异。与PTF组相比,CAF组HMEC-1细胞高表达α-SMA、SM22α、p-Stat3和Snail,低表达CD31和VE-cadherin;与CAF组相比,Anti-FAP组HMEC-1低表达α-SMA、SM22α、p-Stat3和Snail,高表达CD31和VE-cadherin。结论特异性抑制FAP会通过影响CAFs外泌体间接抑制血管内皮细胞的迁移侵袭与成管能力,Stat3-Snail-EndMT可能是其潜在机制。

成纤维细胞激活蛋白在妇科恶性肿瘤中的作用研究进展

卵巢癌、子宫内膜癌、宫颈癌是妇科三大恶性肿瘤,严重危害着女性的生命健康。肿瘤的发生与发展是一个复杂过程,与肿瘤微环境密切相关。肿瘤相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境的重要组成部分,具有分泌多种细胞因子及合成细胞基质蛋白的能力。成纤维细胞激活蛋白(FAP)是CAF最具潜力的分子标志物之一,能够促进肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭,重塑细胞外基质,诱导肿瘤新生血管生成,是参与肿瘤发生、发展必不可少的因素。FAP作为肿瘤诊断示踪剂及作为靶向药物的研究也取得了一定进展,为妇科恶性肿瘤的诊治研究提供了新方向。

心血管成纤维细胞显像的现状和展望

心肌纤维化是众多心血管疾病共同的基础病理改变,与心脏不良预后密切相关。目前临床上评价心肌纤维化的技术存在有创、特异性欠佳、无法早期诊断等不足。近年来,靶向活化成纤维细胞的核素显像因其在检测心肌纤维化以及在评估疾病进展和治疗反应方面的潜力而受到人们的关注。本文结合现有研究,重点介绍其应用现状、优势和局限性,探讨其在心血管疾病中的前景,旨在为进一步推动靶向活化成纤维细胞的核素显像在心血管疾病中的应用提供参考和启示。