AGM区基质细胞促进小鼠胚胎干细胞向成血-血管干细胞分化的实验研究

目的探讨主动脉-性腺-中肾(AGM)区来源的基质细胞诱导胚胎干细胞(ESC)向成血-血管干细胞分化的促进作用。方法从孕11 d的小鼠胚胎AGM区分离、培养基质细胞,鉴定后用作支持细胞,与小鼠胚胎干细胞共同培养,通过原始细胞集落(BL-CFC)的形成情况及流式细胞仪检测CD34+/Flt-1+细胞比例,评价AGM区基质细胞对小鼠ESC-D3细胞系向成血-血管干细胞的定向诱导作用。结果在AGM区基质细胞的支持下,由ESC来源的CD34+细胞由(12.71±1.76)%增加到(39.71±3.76)%,并且CD34+/Flt-1+细胞比例明显提高,达到(26.59±1.77)%;同时由ESC来源的代表成血-血管干细胞的BL-CFC集落增加了3倍。结论AGM区基质细胞可促进胚胎干细胞向成血-血管干细胞分化,探明其机制对研究造血及血管发育机制有积极意义。

成血-血管干细胞的研究进展

在胚胎发育过程中,造血细胞系和内皮细胞系的发生在时间和空间上联系紧密。造血细胞和内皮细胞具有共同的祖细胞成血血管干细胞。已有实验分别分离、纯化和鉴定了胚胎和成人的成血血管干细胞,并且发现Flk 1,SCL和Runx1等多种因子对其分化起调控作用。有证据支持成人体内成血血管干细胞在多种生理和病理活动中发挥作用。

成人和3种成体哺乳动物血管组织动力学研究

目的:观察正常成人、犬、大鼠和家兔大中血管壁组织结构及其演化关系,探讨血管的组织动力学过程。方法:5例成人尸检大动脉和中动脉标本、5只家犬主动脉和股动脉标本、12只大鼠大动脉至髂动脉标本、3只家兔大动脉标本,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察。结果:正常成人与成体犬、大鼠、家兔大中血管壁一般包括内膜、中膜、外膜和鞘膜4层。血管内膜内皮表面可见成血-血管干细胞归巢和内化与血液沉积物及其表面内皮化;内膜与中膜之间可见内膜细胞与膜平滑肌细胞演化序列;中膜与外膜之间可见平滑肌退变序列;外膜外有神经源的鞘膜。植物神经末端可演化形成滋养血管。结论:正常成人、犬、大鼠和家兔大中血管壁主要由归巢和沉积方式来源于成血-血管干细胞形成的内膜细胞演化而成,内膜细胞演化形成中膜平滑肌,平滑肌退化而成外膜。

造血干细胞发生的研究进展

哺乳动物个体的发育起源于受精卵的形成，受精卵是个体的第1个全能干细胞。受精卵的分裂和分化逐步形成相对定向的胚胎阶段的多种干细胞及组织特异性的成体干细胞,包括成体造血干细胞（hematopoietic stem cells，HSCs）在内。已有充分的证据表明在人和小鼠中，HSC是成体内各系造血细胞的来源，单个HSC即可在合适的宿主体内重建整个造血系统。

Sonic hedgehog信号通路对AGM区来源的成血-血管细胞增殖、迁移和分化作用

目的探讨 Sonic hedgehog(shh)信号通路对小鼠主动脉-中肾-肾上腺(AGM)区来源的成血-血管细胞增殖、分化和迁移的影响。方法联合应用抗小鼠 CD34、Flk1单克隆抗体(单抗)的磁珠,从孕11 d BALB/c 鼠胚胎 AGM 区分离培养成血-血管干细胞,并同时培养 AGM 区来源基质细胞,用流式细胞术对所分离细胞进行表型鉴定。用免疫组织化学法检测基质细胞表达 Shh 蛋白的情况;借助 Transwell 细胞共培养体系,观察在 AGM 的基质细胞共培养体系中,不同浓度的 Shh 活性肽及其单抗对成血-血管干细胞增殖、细胞周期、迁移及向内皮细胞定向分化的影响。结果 AGM 区基质细胞高表达 Shh 蛋白(阳性率高达90%以上),并可促进成血-血管干细胞增殖,其增殖效应可被10.00 μg/mlShh 单抗阻断;0.10～10.00 μg/ml 外源性 Shh 活性蛋白与 AGM 区基质细胞共培养的成血-血管干细胞,可使成血-血管干细胞长时间增殖,并促进细胞迁移,但并不诱导细胞凋亡与分化;而当0.10～10.00 μg/ml 外源性 Shh 活性蛋白作用于单独培养的成血-血管干细胞,细胞经过短时间增殖后,随后发生凋亡并向内皮细胞分化。结论 Shh 信号通路参与了成血-血管干细胞的增殖、分化、凋亡及迁移等生物学特性的调控,但其具体作用存在时空的差异,AGM 区微环境对 Shh 信号通路具有整合和调试的作用。

成人和成体羊心脏心内膜的组织动力学观察

目的:观察并比较正常成体羊和人心脏心内膜细胞,探讨心内膜的一般组织动力学过程。方法:取12只山羊和6例人尸检心脏组织标本,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察。结果:正常成体羊与成人心脏均发现内皮细胞无丝分裂相。内膜细胞来自成血-血管内皮干细胞归巢和内化及内皮细胞增生迁移。内膜细胞可以演化形成心肌细胞。结论:正常成体心脏一般组织动力学特征是内膜细胞以多种方式来源于成血-血管干细胞,内膜细胞可通过多种途径演化为心肌细胞。

替罗非班联合美托洛尔治疗急性心肌梗死的疗效及机制研究

目的探讨替罗非班联合美托洛尔治疗急性心肌梗死的疗效及其作用机制。方法 90例急性心肌梗死患者随机分为试验组45例和对照组45例。对照组给予美托洛尔口服治疗,试验组给予替罗非班静脉和美托洛尔口服治疗,治疗7d后观察两组患者的临床疗效,彩色多普勒超声心动图测定血流动力学,心脏彩超检测心功能,ELISA检测血清基质金属蛋白酶9,免疫透射比浊法检测血清C反应蛋白,流式细胞仪检测患者循环血管内皮祖细胞。结果试验组的总有效率95.56%显著高于对照组的80.00%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。试验组的血流动力学参数左房平均压、平均二尖瓣压力差、肺动脉平均压改善程度优于对照组,心脏超声相关指标改善程度显著优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清基质金属蛋白酶9水平和C反应蛋白降低,且试验组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。试验组患者的循环血管内皮祖细胞明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论替罗非班联合美托洛尔治疗急性心肌梗死的临床疗效良好,可有效改善血流动力学参数和心脏超声相关指标,可能与降低患者基质金属蛋白酶9和C反应蛋白的表达水平,提高循环血管内皮祖细胞的数量有关。

An updated view on the differentiation of stem cells into endothelial cells

Endothelial cells form the internal barrier between circulating blood and the vessel wall.They regulate arterial activity and mediate pathological reactions to vascular injuries such as atherosclerosis and balloon angioplasty.The development and differentiation of endothelial cells is a complex and coordinated process involving multiple levels of signaling and transcriptional and post-transcriptional regulation.Elucidating the mechanism of endothelial differentiation will not only enhance our understanding of vascular disease pathogenesis,but also facilitate our ability to produce vessels cells from pluripotent stem cells for regeneration purposes.In this review,we discuss the current understanding of how stem cells differentiate into endothelial cells at the level of signaling,transcription and microRNA regulation.