人脑胶质瘤细胞株中RIZ1基因启动子甲基化状态的研究

目的:检测4种人脑成胶质细胞瘤细胞株中成视网膜细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1(retinoblastoma protein-interacting zinc finger gene1,RIZ1)基因启动子区的甲基化状态,进一步认识RIZ1在胶质瘤发病机制中的作用。方法:应用甲基化特异性PCR法(methylation specific PCR,MSP)检测4种人脑成胶质细胞瘤细胞株U87、U251、A172和T98中RIZ1基因启动子区的甲基化水平,其中U87细胞发生甲基化,被选为后续实验对象。RT-PCR检测U87细胞经5-Aza-CdR处理前后RIZ1 mRNA表达量的变化,MTT检测5-Aza-CdR对U87细胞生长增殖的影响。结果:4种人脑成胶质细胞瘤细胞株中U87和U251细胞中检测到RIZ1基因启动子区域发生甲基化;U87细胞经5-Aza-CdR处理后其RIZ1 mRNA的表达量上调;MTT法检测显示5-Aza-CdR能抑制U87的生长增殖,且与5-Aza-CdR的浓度和作用时间呈负相关。结论:RIZ1基因启动子高甲基化是人脑成胶质细胞瘤细胞株中RIZ1基因表达下调的重要机制。

Rb基因和p53基因表达与胃癌预后的关系

目的 探讨Rb基因和p53基因表达与胃癌临床病理学特点及预后的关系。 方法 采用原位杂交和免疫组织化学技术对85例进展期胃癌切除标本中Rb基因和p53基因产物表达和p53基因突变进行检测和分析。 结果 p53基因突变率为30%(6/20);Rb基因和p53基因产物表达为7294%(62/85)和4941%(42/85),其阳性分级与胃癌术后生存期呈显著相关(P<001和P<005),与淋巴结转移呈显著正相关(P<001),后者还与浸润深度呈显著正相关(P<005)。 结论 Rb基因和p53基因表达与淋巴结转移。

婴幼儿退化期及增生期皮肤血管瘤组织中PTEN、Rb蛋白表达变化及意义

目的观察婴幼儿增生期及退化期皮肤血管瘤组织中人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)和成视网膜细胞瘤基因(Rb)蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法皮肤血管瘤患儿49例,血管瘤切除术中留取血管瘤组织标本,根据Mulliken分类标准,增生期组织24例,退化期组织25例;另取正常皮肤组织5例作对照。采用免疫组化SABC法检测各组PTEN、Rb蛋白。结果 Rb蛋白在增生期、退化期血管瘤组织及正常皮肤组织中的表达量分别为0.49±0.88、0.40±0.36、0.38±0.40,三组两两相比,P均<0.05。PTEN蛋白在增生期、退化期血管瘤组织及正常皮肤组织中的表达量分别为1.07±0.83、0.66±0.88、0.88±0.76,三组两两相比,P均<0.05。结论婴幼儿皮肤血管瘤组织中均有PTEN、Rb蛋白表达,且二者在增生期组织中的表达水平高于退化期组织;PTEN、Rb蛋白可能在血管瘤的生长过程中起重要作用。

Barrett’s化生进展到食管癌的细胞和分子机制

Barrett's化生为一癌前病变,为发生食管腺癌的危险因素之一.过去20年由它引起的食管腺癌发生率有所增加.早期研究指出,Barrett's化生病人比一般人群发生食管腺癌的危险性增加30～125倍.

置换变异的RB基因可抑制前列腺癌

以前证实,将正常的成视网膜细胞瘤基因RB导入成视网膜细胞瘤细胞内可以抑制肿瘤表现型的一些特点,包括裸鼠的致癌性,从而直接证实了RB的癌抑制功能。为了检测在常见的成人肿廇中是否具有类似的活性,加利福尼亚大学医学院分子遗传学中心的研究人员对前列腺癌3株细胞的RB表达进行了检查。其中DU145系包含一种从RB信使RNA转录物译码的异常小的蛋白。

维尔姆斯瘤的遗传病因学

加拿大多伦多消息:加拿大与美国研究人员合作领先发现了能“开启”维尔姆斯瘤的两个基因。这两个基因是肿瘤抑制基因,在此基因缺失或机能障碍时才使肿瘤细胞的生长脱离控制而成为致死的肿瘤。经鉴定认为这两个基因是约5％维尔姆斯肿瘤的发病原因。上述研究人员的研究工作是在多伦多大学儿科和医学遗传学教授Bryan William博士领导下进行的,并与美国Michigan大学癌瘤中心的研究人员协作,研究结果已在《Science》

PTC下游翻译重启导致NMD途径的逃逸

无义突变介导的mRNA降解（nonsense-mediated mRNA decay,NMD）途径是真核生物体内一种重要的mRNA监督质控机制,它降解含有由无义突变、错误剪接、移码突变等产生的提前终止翻译密码子（premature translation termination codon,PTC）的mRNA,从而防止这种mRNA翻译产生的截短型蛋白质对机体造成的伤害.研究发现,一些含有PTC的mRNA发生了NMD途径逃逸,但具体机制仍不清楚.本研究将成视网膜细胞瘤基因1（retinoblastoma gene 1,RB1）作为NMD途径的靶基因,构建mini-RB1基因,包括外显子1-14（cDNA）、内含子14-外显子15-内含子15和外显子16-27（cDNA）的三部分序列,将其构建到真核表达载体pcDNA 3.1（-）中.根据人类基因组突变数据库选择3个突变位点W99X、G310X和R467X,构建相应无义突变体.分别将mini-RB1基因野生型和无义突变体转入HeLa细胞进行表达.用qRT-PCR检测发现,W99X无义突变体与野生型相比mRNA的水平无显著差异.为了进一步证实mini-RB1（W99X）发生了NMD逃逸,利用NMD途径抑制剂放线菌酮和转录抑制剂放线菌素D,分别处理转入野生型的mini-RB1基因及其无义突变体mini-RB1（W99X）的哺乳动物细胞,发现mini-RB1基因无义突变体的mRNA水平与野生型无明显差异,说明含有W99X无义突变的mini-RB1基因的mRNA发生了NMD逃逸.Western印迹检测mini-RB1基因的蛋白质表达发现,在无义突变位点W99X下游重新起始了蛋白质的翻译,因此,PTC下游蛋白质翻译的重新起始可能是导致无义mRNA逃逸NMD途径监控的主要原因.