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碱性成纤维细胞因子对猪弹性软骨细胞增殖和成软骨能力的影响
被引量:
8
1
作者
丁小邦
夏万尧
+4 位作者
陈兵
崔磊
刘伟
商庆新
曹谊林
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第6期573-574,I004,共3页
目的 研究碱性成纤维细胞因子 (b FGF)对体外培养的弹性软骨细胞增殖和成软骨能力的影响 ,探讨b FGF对软骨组织工程的意义。方法 细胞取自猪耳软骨 ,用含 1 0、2 5、50 μg/L3种浓度b FGF的培养液 ,体外培养至第 3代 ,从细胞形态、数...
目的 研究碱性成纤维细胞因子 (b FGF)对体外培养的弹性软骨细胞增殖和成软骨能力的影响 ,探讨b FGF对软骨组织工程的意义。方法 细胞取自猪耳软骨 ,用含 1 0、2 5、50 μg/L3种浓度b FGF的培养液 ,体外培养至第 3代 ,从细胞形态、数量和基质分泌等方面进行研究。结果 含b FGF组细胞贴壁呈类成纤维细胞样 ,撤去b FGF ,细胞形态可恢复正常 ;含b FGF各组在第 3代 ,细胞总数是无b FGF组的 60~ 70倍 (P <0 .0 1 ) ,但 3种不同浓度b FGF对细胞增殖差异无显著性 ;培养液氨基糖氨多糖 (GAG)含量测定各组差异无显著性 ;免疫组织化学和原位杂交示各组第 3代软骨细胞仍有Ⅱ型胶原表达。结论 应用b FGF能在 3周内从少量软骨组织获取大量软骨细胞 ,且未改变细胞表型和功能 ,对软骨组织工程有重要意义 ;在 1 0、2 5、50 μg/L 3种浓度中 ,1 0μg/L为b
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关键词
碱性
成
纤维细胞因子
猪
弹性
软骨
细胞
成软骨能力
组织工程
细胞增殖
原文传递
环氧化酶2基因沉默不影响人骨髓间充质干细胞定向分化的能力
被引量:
5
2
作者
赫天
张海宁
+3 位作者
项金瑜
刘相萍
邓继红
王英振
《中国组织工程研究》
CAS
CSCD
2014年第14期2140-2146,共7页
背景:目前环氧化酶2基因沉默在干细胞中的研究还处在初级阶段。目的:构建携带环氧化酶2基因沉默的慢病毒载体,观察其在人骨髓间充质干细胞中的表达,以及其定向分化潜能变化情况。方法:应用重组慢病毒技术构建携带沉默环氧化酶2基因和绿...
背景:目前环氧化酶2基因沉默在干细胞中的研究还处在初级阶段。目的:构建携带环氧化酶2基因沉默的慢病毒载体,观察其在人骨髓间充质干细胞中的表达,以及其定向分化潜能变化情况。方法:应用重组慢病毒技术构建携带沉默环氧化酶2基因和绿色荧光蛋白的慢病毒载体,并用其转染体外培养第3代的人骨髓间充质干细胞,以无目的基因的慢病毒转染人骨髓间充质干细胞的实验组和未做处理的人骨髓间充质干细胞分别作为阴性对照组和空白组进行对比。转染后7 d分别提取各组细胞的总RNA和蛋白检测环氧化酶2表达量。对环氧化酶2基因沉默的人骨髓间充质干细胞和正常人骨髓间充质干细胞定向诱导,观察环氧化酶2基因沉默对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力的影响。结果与结论:慢病毒转染3 d后,荧光显微镜下可见人骨髓间充质干细胞发出绿色荧光,阴性对照组转染效率可达90%以上,实验组转染效率达85%以上。RT-PCR和Western blot检测结果显示,环氧化酶2基因在人骨髓间充质干细胞中的基因水平和蛋白水平均得到了明显抑制。环氧化酶2基因转染对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力无明显影响。
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关键词
人骨髓间充质干细胞
环氧化酶2
成软骨能力
基因沉默
细胞定向分化
WESTERNBLOT
绿色荧光蛋白
慢病毒载体
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职称材料
骨形态发生蛋白对兔骨髓间充质干细胞成软骨分化的定向诱导作用
被引量:
9
3
作者
汪健
李小飞
+2 位作者
田苗
邓三明
卢强
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第7期829-831,共3页
目的研究骨形态发生蛋白(BMP)对兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的定向诱导作用,探讨MSCs的成软骨能力。方法分离并培养兔MSCs,BMP诱导MSCs向软骨细胞分化,观察其形态学改变及碱性磷酸酶(ALP)活性。将诱导后的MSCs接种PGA无纺网体外培养2周,将...
目的研究骨形态发生蛋白(BMP)对兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的定向诱导作用,探讨MSCs的成软骨能力。方法分离并培养兔MSCs,BMP诱导MSCs向软骨细胞分化,观察其形态学改变及碱性磷酸酶(ALP)活性。将诱导后的MSCs接种PGA无纺网体外培养2周,将MSCsPGA无纺网复合体植入裸鼠背部皮下,2个月后取材,进行组织学观察。结果经BMP诱导后,MSCs的形态由长梭形向多角形和三角形转化,群体倍增时间约为3.0d。诱导5、10d后,ALP活性为0.282±0.015,0.502±0.012,明显高于对照组0.265±0.010,0.315±0.021(P<0.01),ALP染色阳性。MSCsPGA无纺网复合体植入裸鼠后,组织学可见软骨陷窝,陷窝内可见核蓝染的成软骨细胞,证实MSCs具有体内成软骨能力。结论经BMP诱导的MSCs向软骨细胞分化和增殖,在裸鼠体内可形成软骨组织。
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关键词
骨髓间充质干细胞
骨形态发生蛋白
诱导作用
成
软骨
分化
定向
软骨
细胞分化
MSCs
成软骨能力
兔
群体倍增时间
碱性磷酸酶
形态学改变
组织学观察
ALP活性
成
软骨
细胞
BMP
体外培养
软骨
组织
复合体
PGA
裸鼠
三角形
对照组
原文传递
题名
碱性成纤维细胞因子对猪弹性软骨细胞增殖和成软骨能力的影响
被引量:
8
1
作者
丁小邦
夏万尧
陈兵
崔磊
刘伟
商庆新
曹谊林
机构
第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第6期573-574,I004,共3页
基金
国家重点基础研究发展规划资助项目 (G19990 54 30 4 )
文摘
目的 研究碱性成纤维细胞因子 (b FGF)对体外培养的弹性软骨细胞增殖和成软骨能力的影响 ,探讨b FGF对软骨组织工程的意义。方法 细胞取自猪耳软骨 ,用含 1 0、2 5、50 μg/L3种浓度b FGF的培养液 ,体外培养至第 3代 ,从细胞形态、数量和基质分泌等方面进行研究。结果 含b FGF组细胞贴壁呈类成纤维细胞样 ,撤去b FGF ,细胞形态可恢复正常 ;含b FGF各组在第 3代 ,细胞总数是无b FGF组的 60~ 70倍 (P <0 .0 1 ) ,但 3种不同浓度b FGF对细胞增殖差异无显著性 ;培养液氨基糖氨多糖 (GAG)含量测定各组差异无显著性 ;免疫组织化学和原位杂交示各组第 3代软骨细胞仍有Ⅱ型胶原表达。结论 应用b FGF能在 3周内从少量软骨组织获取大量软骨细胞 ,且未改变细胞表型和功能 ,对软骨组织工程有重要意义 ;在 1 0、2 5、50 μg/L 3种浓度中 ,1 0μg/L为b
关键词
碱性
成
纤维细胞因子
猪
弹性
软骨
细胞
成软骨能力
组织工程
细胞增殖
Keywords
Chondrocytes
Tissue engineering
Basic FGF
分类号
R318 [医药卫生—生物医学工程]
原文传递
题名
环氧化酶2基因沉默不影响人骨髓间充质干细胞定向分化的能力
被引量:
5
2
作者
赫天
张海宁
项金瑜
刘相萍
邓继红
王英振
机构
青岛大学医学院附属医院山东省创伤骨科研究所
青岛大学附属烟台毓璜顶医院肿瘤科
青岛大学医学院附属医院
双鸭山市人民医院检验科
出处
《中国组织工程研究》
CAS
CSCD
2014年第14期2140-2146,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(81171774,81272056)~~
文摘
背景:目前环氧化酶2基因沉默在干细胞中的研究还处在初级阶段。目的:构建携带环氧化酶2基因沉默的慢病毒载体,观察其在人骨髓间充质干细胞中的表达,以及其定向分化潜能变化情况。方法:应用重组慢病毒技术构建携带沉默环氧化酶2基因和绿色荧光蛋白的慢病毒载体,并用其转染体外培养第3代的人骨髓间充质干细胞,以无目的基因的慢病毒转染人骨髓间充质干细胞的实验组和未做处理的人骨髓间充质干细胞分别作为阴性对照组和空白组进行对比。转染后7 d分别提取各组细胞的总RNA和蛋白检测环氧化酶2表达量。对环氧化酶2基因沉默的人骨髓间充质干细胞和正常人骨髓间充质干细胞定向诱导,观察环氧化酶2基因沉默对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力的影响。结果与结论:慢病毒转染3 d后,荧光显微镜下可见人骨髓间充质干细胞发出绿色荧光,阴性对照组转染效率可达90%以上,实验组转染效率达85%以上。RT-PCR和Western blot检测结果显示,环氧化酶2基因在人骨髓间充质干细胞中的基因水平和蛋白水平均得到了明显抑制。环氧化酶2基因转染对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力无明显影响。
关键词
人骨髓间充质干细胞
环氧化酶2
成软骨能力
基因沉默
细胞定向分化
WESTERNBLOT
绿色荧光蛋白
慢病毒载体
Keywords
stem cells
mesenchymal stem cells
cyclooxygenase 2
genes
分类号
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
下载PDF
职称材料
题名
骨形态发生蛋白对兔骨髓间充质干细胞成软骨分化的定向诱导作用
被引量:
9
3
作者
汪健
李小飞
田苗
邓三明
卢强
机构
第四军医大学唐都医院胸外科
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第7期829-831,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(39970707)
文摘
目的研究骨形态发生蛋白(BMP)对兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的定向诱导作用,探讨MSCs的成软骨能力。方法分离并培养兔MSCs,BMP诱导MSCs向软骨细胞分化,观察其形态学改变及碱性磷酸酶(ALP)活性。将诱导后的MSCs接种PGA无纺网体外培养2周,将MSCsPGA无纺网复合体植入裸鼠背部皮下,2个月后取材,进行组织学观察。结果经BMP诱导后,MSCs的形态由长梭形向多角形和三角形转化,群体倍增时间约为3.0d。诱导5、10d后,ALP活性为0.282±0.015,0.502±0.012,明显高于对照组0.265±0.010,0.315±0.021(P<0.01),ALP染色阳性。MSCsPGA无纺网复合体植入裸鼠后,组织学可见软骨陷窝,陷窝内可见核蓝染的成软骨细胞,证实MSCs具有体内成软骨能力。结论经BMP诱导的MSCs向软骨细胞分化和增殖,在裸鼠体内可形成软骨组织。
关键词
骨髓间充质干细胞
骨形态发生蛋白
诱导作用
成
软骨
分化
定向
软骨
细胞分化
MSCs
成软骨能力
兔
群体倍增时间
碱性磷酸酶
形态学改变
组织学观察
ALP活性
成
软骨
细胞
BMP
体外培养
软骨
组织
复合体
PGA
裸鼠
三角形
对照组
Keywords
Bone marrow
Messenchymal stem cells
Bone morphogenetic protein
Differentiation
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R68 [医药卫生—骨科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
碱性成纤维细胞因子对猪弹性软骨细胞增殖和成软骨能力的影响
丁小邦
夏万尧
陈兵
崔磊
刘伟
商庆新
曹谊林
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
8
原文传递
2
环氧化酶2基因沉默不影响人骨髓间充质干细胞定向分化的能力
赫天
张海宁
项金瑜
刘相萍
邓继红
王英振
《中国组织工程研究》
CAS
CSCD
2014
5
下载PDF
职称材料
3
骨形态发生蛋白对兔骨髓间充质干细胞成软骨分化的定向诱导作用
汪健
李小飞
田苗
邓三明
卢强
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
9
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