细菌预成酶联合检测在阴道微生态评价中的应用价值

目的．探讨需氧菌性阴道炎（AV）、细菌性阴道病（BV）五项联合检测在阴道微生态评价中的应用价值。方法用传统方法对5000例健康体检者阴道分泌物进行清洁度、阴道pH、革兰染色检查作阴道菌群分析；同时应用AV、BV五项联合检测进行细菌预成酶测定。结果5000例体检者中传统方法检测阴道菌群正常2675例（53．5％），阴道菌群异常2325例（46．5％）；阴道菌群异常组细菌预成酶检测结果阳性率明显高于阴道菌群正常组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论AV、BV五项联合检测灵敏度高，操作简便，可以作为快速筛查方法应用于临床，结合阴道清洁度等指标可系统评价阴道微生态状况。

阴道分泌物常规和预成酶谱五项联合检测分析

目的探讨女性阴道分泌物常规（形态学）和预成酶谱五项联合检测分析对阴道炎诊断的临床价值。方法采集该院妇科门诊患者阴道分泌物进行常规检查（白细胞、上皮细胞、阴道毛滴虫、假丝酵母菌），同时采用阴道分泌物预成酶谱五项联合检测。结果1000例阴道分泌物标本常规检9n,4联合预成酶谱分析检测检出阳性患者620例，阳性率为62％（G20／1000），在阳性标本中以需氧菌阴道炎（AV）最为常见（59.2％），同时AV也是合并细菌性阴道病（BV）和假丝酵母菌阴道炎（VVC）的主要病原菌；本文统计显示H2O2阳性率为73.8％，提示健康妇女中有大部分处于乳酸杆菌减少或缺失，阴道微生态处于亚失调状态。结论对阴道炎患者阴道分泌物同时进行常规和预成酶谱五项联合检测，能更好反映阴道炎患者的病源体感染状况，有利于临床医生对症治疗。

厌氧菌预成酶在大鼠肠道菌群失调诊断应用

目的探讨厌氧菌预成酶作为快速诊断肠道菌群失调的可行性。方法以盐酸林可霉素灌胃实验大鼠造成其肠道菌群失调模型后,同时对肠道菌群及厌氧菌预成酶进行连续、定量分析。结果随着抗生素的灌胃,实验大鼠肠道内的正常菌群在数量上发生较大变化,尤其是优势厌氧菌双歧杆菌及乳酸杆菌的数量在抗生素灌胃的2、4、6d与正常对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);预成酶中除少数酶未发生改变,大多数酶随着抗生素的灌胃数量都在减少甚至消失,且与正常对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论厌氧菌预成酶作为快速诊断肠道菌群失调的方法有可行性,但仍需进一步的实验。

预成酶谱分析和涂片染色多功能检查在妇科感染诊治中的临床应用价值

目的研究基于预成酶谱分析和涂片染色多功能检查的阴道菌群多维度评价方法在妇科感染诊治中的临床应用价值。方法选取到该院做妇科白带检查的21175例患者作为研究对象，同一患者均同时采集白带标本做生化检查和涂片染色检查，生化检查采用新型预成酶谱分析技术检测，涂片染色多项检查采用妇科白带涂片多功能染色液染色镜检。结果预成酶谱生化五项阳性检出率：过氧化氢（H2O2）63．83％、唾液酸苷酶（SNa）7．73％、白细胞酯酶（LE）46．16％、β-葡萄糖醛酸苷酶（GUS）3．19％、凝固酶（GADP）46．16％；涂片染色多项检查的各项检出率：滴虫0．63％、念珠菌11．73％、淋球菌0．29％、纤毛菌2．63％、球菌1．82％、条件致病小杆菌17．00％、加特纳球杆菌24．89％、线索细胞17．18％、癌细胞0．23％、阴道清洁度Ⅲ-Ⅳ20．72％。结论联合妇科白带预成酶谱分析与涂片染色多功能检查可在短时间内检出女性常见下生殖道感染、宫颈炎、宫颈癌等异常情况，为全面诊断和治疗妇科疾病提供可靠依据，在大型妇科普查和癌症筛查方面具有重要的临床价值，尤其值得在基层医院推广应用。

预成酶谱分析技术诊断女性需氧菌阴道炎的临床价值

目的:探讨预成酶谱分析技术在女性需氧菌阴道炎(AV)诊断中的临床价值。方法:采用Donders湿片镜检法和预成酶谱分析技术分别对300例疑似AV患者的阴道分泌物进行检测分析。结果:300例就诊患者,使用Donders湿片镜检法检出AV患者181例,预成酶谱分析技术检出AV患者178例,两种方法检出AV阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。以Donders湿片镜检法为诊断标准,预成酶谱分析技术诊断AV的敏感性为94.9%(169/178)、特异性为90.2%(110/119),二者的符合率为93.0%(279/300)。结论:预成酶谱分析技术诊断AV具有很好的敏感度和特异度,与Donders湿片镜检法符合率高,且该方法操作简便、反应快速,值得妇科门诊及社区医院使用。

红杉醇对2型糖尿病大鼠心肌NADPH氧化酶亚单位p22phox、p47phox及iNOS蛋白表达的影响

目的:探讨红杉醇(sequoyitol,Seq)对2型糖尿病大鼠心肌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚单位p22phox、p47phox及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠100只,分为正常组、模型组、Seq(12.5、25、50mg/kg)及阿卡波糖(Aca,20mg/kg)组,采用小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)联合高糖高脂饲料建立2型糖尿病大鼠模型,HE染色观察心肌病理变化,Western Blot法检测心肌组织iNOS、p22phox及p47phox蛋白表达,比色法检测心肌组织一氧化氮(NO)、过氧化氢(H2O2)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(T-AOC)的含量。结果:与对照组相比,模型组大鼠空腹血糖明显升高,心肌肥厚明显加重,心肌组织iNOS、p22phox及p47phox的表达水平及NO、H2O2含量显著升高,而SOD和T-AOC水平明显降低。与模型组相比,Seq各剂量组和Aca组能不同程度地降低大鼠血糖,改善糖尿病大鼠心肌损伤,下调心肌iNOS、p22phox和p47phox的表达,降低心肌NO、H2O2含量,升高SOD、T-AOC水平。结论:Seq可能通过抑制心肌p22phox、p47phox及iNOS所介导的氧化应激损伤,进而对糖尿病心肌损伤起到保护作用。

急性冠脉综合征患者循环血单核细胞产生明胶酶增加

目的 :探讨单核细胞产生两种明胶酶 (MMP2 ,MMP9)与急性冠脉综合征 (ACS)发病间的关系。方法 :分离 38例不稳定心绞痛 (UA)、16例心肌梗死 (AMI) ,2 2例稳定性心绞痛 (SA)及 18例正常对照 (CONT)循环血单核细胞 ,在体外无血清培养 2 4h ,测定上清液中MMP2、MMP9蛋白含量 ,并观察心肌缺血及心肌梗死对其的影响。结果 :UA、AMI组MMP2分别高于CONT组 (2 6 5 8 5 2± 5 33 42和 1842 34± 317 17,P <0 0 0 1,单位为 μg/L ,下同 ;2 6 43 0 4± 6 41 47和 1842 34± 317 17,P <0 0 0 1)和SA组 (2 6 5 8 5 2± 5 33 42和 1919 16± 2 89 38,P <0 0 0 1;2 6 43 0 4± 6 41 47和 1919 16± 2 89 38,P <0 0 0 1)。UA、AMI组MMP9也分别高于CONT组 (481 41± 5 2 5 6和 30 1 2 6± 30 17,P <0 0 0 1;486 34± 37 48和 30 1 2 6± 30 17,P <0 0 0 1)和SA组 (481 41± 5 2 5 6和 2 98 86± 42 2 4,P <0 0 0 1;486 34± 37 48和 2 98 86± 42 2 4,P <0 0 0 1)。心肌缺血发作前后MMP2、MMP9无显著变化 ,心肌梗死 72h内仍保持在发病初期水平 ,梗死后多个时间点及其最大值与CK或Ck MB相应时间点及其最大值间无线性相关。结论 :急性冠脉综合征患者循环血单核细胞产生MMP2、MMP9增加 ,MMP2。

大黄灵仙方调控胆管细胞炎症的作用及机制研究

目的 观察大黄灵仙方调控白细胞介素-1受体相关激酶(interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK)-1和IRAK-4以及成纤维生长因子-3激活酶1MAP3K7结合蛋白2(TGF-3 activator 1 map3k7-binding protein 2,TAB2)的表达水平,探讨其缓解胆管细胞炎症的作用机制,为预防肝胆管结石的形成及术后复发提供理论依据。方法 将45只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为9组,空白组、模型组、大黄灵仙颗粒组、激活核转录因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)阻断剂组、p38丝裂活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)阻断剂组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂组、NF-κB阻断剂+大黄灵仙颗粒组、p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组,每组大鼠5只。除空白组以外,其余各组大鼠于胆总管处一次性注射5 mg/kg内毒素脂多糖以构建肝内胆管感染动物模型。第7天灌胃结束后取材,取大鼠完整胆管树组织,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测IRAK-1、IRAK-4、TAB2蛋白及mRNA表达量。结果 (1)与空白组比较,模型组IRAK-1、IRAK-4、TAB2蛋白及mRNA表达量升高(P<0.05);(2)与模型组比较,大黄灵仙颗粒组、NF-κB阻断剂组、p38MAPK阻断剂组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂组、NF-κB阻断剂+大黄灵仙颗粒组、IRAK-1、IRAK-4、TAB2的蛋白及mRNA表达量降低(P<0.05),NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组IRAK-1、IRAK-4、TAB2蛋白及TAB2 mRNA表达量均显著下降(P<0.05);(3)与大黄灵仙颗粒组比较,NF-κB阻断剂+大黄灵仙颗粒组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组IRAK-1、IRAK-4、TAB2的蛋白表达量和NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂组的IRAK-1、IRAK-4、TAB2 mRNA表达量均下降(P<0.05)。结论 大黄灵仙方可缓解内毒素脂多糖诱导的大鼠胆管炎症反应,抑制炎症因子的异常表达,促使胆道恢复至非炎症状态,从而达到预防肝胆管结石的形成及术后复发的目的,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB/MAPK信号通路下游IRAK-1、IRAK-4和TAB2因子的活化有关。

需氧菌性阴道炎的临床及微生态特征分析

目的:探讨妇科门诊需氧菌性阴道炎(aerobic vaginitis,AV)的临床及微生态特征。方法:回顾性分析4019例妇科门诊不同症状就诊者阴道微生态评价检测指标(菌群密集度、多样性、优势菌、病原体、AV评分、Nugent评分及五项菌群功能及炎症反应指标)及诊断结果。结果:4019例被检查者中AV占3.11%(125/4019)。AV患者中单纯AV占24.00%(30/125),AV混合感染占76.00%(95/125),其中AV合并外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)占44.80%(56/125),AV合并滴虫阴道炎(TV)占27.20%(34/125),AV合并细菌性阴道病(BV)占2.40%(3/125),AV合并TV、VVC占0.80%(1/125),AV合并BV、TV占0.80%(1/125)。125例AV患者阴道乳杆菌功能均异常伴阴道炎症反应,其中优势菌群异常占84.80%(106/125)。结论:AV为常见阴道感染,易合并其他感染,尤以合并VVC及TV多见。微生态特征为需氧菌增多,乳杆菌功能异常或优势菌群被替代伴明显阴道炎症反应。因此,应用阴道微生态评价系统诊断AV时,注意微生态状况及有无合并其他类型阴道感染。

需氧菌阴道炎联合测定试剂盒的临床诊断价值

目的探讨需氧菌阴道炎（AV）联合测定试剂盒（AV法）对AV的诊断效能及临床价值。方法用AV法和AV评分标准法对妇科门诊就诊1150例患者的阴道分泌物进行测定，结果做对比分析。结果以AV评分标准法作为金标准，AV法检测AV的敏感度为90．30％，特异度为97．93％，准确度为97．04％，阳性预测值为85．21％，阴性预测值为98．71％，经z。检验，结果差异无统计学意义（x^2=1．44，P〉0．05），二种方法的检测结果一致性较高（Kappa值为0．86）。结论AV法简便、快速，其结果与AV标准法有很好的一致性，是一种值得推广的临床诊断AV的常规方法。

女性下生殖道感染病原菌检测方法的结果分析

目的探讨白带常规镜检法、细菌预成酶谱分析法及联合法3种方法在鉴别诊断女性常见下生殖道感染疾病中的作用。方法分别采用白带常规镜检法和细菌预成酶谱分析法对来我院就诊的4130例就诊者的阴道分泌物进行检测,检测结果结合临床表现和治疗效果进行汇总分析比较。结果采用白带常规镜检法检出阳性者1976例(检出率47.8%、准确率71.6%);采用细菌预成酶谱分析法检出阳性者1302例(检出率为31.5%、准确率58.1%);采用联合法检出阳性者2622例(检出率63.5%、准确率91.1%)。结论联合法集取白带常规镜检法和细菌预成酶谱分析法的优点,能一次采样即可准确鉴别5种女性常见下生殖道感染疾病。

女性常见阴道感染的3种检验方法的效果对比

目的比较3种检验女性常见阴道感染的检验方法的效果。方法随机采集432例女性患者的阴道分泌物,用白带常规镜检和预成酶谱五项联合检测法检测阴道感染情况。结果白带常规镜检,432例受检者中,阴道清洁度Ⅰ-Ⅱ度133例,Ⅲ-Ⅳ度299例,检出滴虫性阴道炎33例,外阴念珠菌病99例,细菌性阴道病104例,混合感染3例。预成酶谱五项联合检测,432例受检者中,细菌性阴道病130例,需氧菌阴道炎52例,混合感染5例。白带常规镜检＋预成酶谱五项联合检测检出滴虫性阴道炎33例,外阴念珠菌病99例,细菌性阴道病104例,混合感染24例。结论白带常规镜检结合预成酶谱五项联合检测法准确性高,检出率高,可以指导临床有效地针对病原体进行对症治疗。

杭菊黄酮醇合酶基因的原核表达与重组蛋白体外活性研究

从杭菊转录组数据库中筛选并通过RACE技术克隆出1条黄酮醇合酶基因（暂命名Cm FLS）,简单序列分析表明Cm FLS基因全长1 235 bp,包含1个1 008 bp的开放阅读框（ORF）,编码335个氨基酸。预测得到的Cm FLS编码的蛋白相对分子质量为37.96 k Da,等电点（p I）为5.41,构建进化树发现Cm FLS与菊科其他种植物同源性很高。利用原核表达技术成功诱导出大小43 k Da左右的重组融合蛋白,同时使用Ni-NTA树脂分离纯化出重组融合蛋白,并确定使用含250 mmol·L-1咪唑的Ni-native buffer洗脱效果最好。将纯化后的重组融合蛋白进行体外催化反应,然后将反应的产物萃取后进行HPLC分析,结果显示Cm FLS重组融合蛋白在特定缓冲液及反应条件下能够将二氢槲皮素催化生成槲皮素,表明Cm FLS编码的功能性蛋白在杭菊黄酮生物合成途径中具有双加氧酶活性。以上研究结果为进一步研究Cm FLS的功能、阐明FLS酶的功能机制奠定了基础,同时为从分子水平调控杭菊黄酮醇成分代谢及体外催化合成黄酮醇提供新思路。

890例疑似细菌性阴道病患者阴道分泌物检测结果与分析

目的探讨BV三项检测法在阴道感染诊断中的价值。方法对890例阴道分泌物进行常规检查和BV三项检测。结果 890例疑似细菌性阴道病患者中,BV三项检测法检出BV患者772例(占总数的86.74%),常规镜检(Am sel标准法)检出BV患者763例(占总数的85.73%),二者的符合率为93.40%,具有中度一致性(Kappa=0.746,P<0.05)。890例疑似细菌性阴道病患者中,BV合并VVC感染患者129例(占总数的14.49%),BV合并TV感染患者41例(占总数的4.61%),混合感染(BV+VVC、BV+TV)的发病率达到了19.10%(170/890)。结论 BV三项检测法不仅可初筛混合感染,而且与Am sel标准法在诊断BV方面具有较高的一致性,该检测方法快速准确,适宜临床推广与应用。

诊断需氧菌性阴道炎的指标优化及灵敏度分析

目的筛选并优化诊断需氧菌性阴道炎的几个指标,评价其诊断价值。方法 474例疑似需氧菌性阴道炎患者经Donders AV评分和5种预成酶联合检测2种方法诊断。ROC曲线分析5种预成酶、p H值、WBC计数诊断需氧菌性阴道炎的价值。筛选并优化p H值、H2O2浓度、WBC计数的不同组合诊断需氧菌性阴道炎的价值。结果 Donders AV评分诊断患需氧菌性阴道炎患者387例。p H值、WBC计数、H2O2浓度是诊断需氧菌性阴道炎的3个较好指标。以p H>4.5、H2O2浓度<2μmol/L且WBC计数≥1+/hpf为诊断标准或H2O2浓度<2μmol/L且WBC计数≥2+/hpf为诊断标准,诊断需氧菌性阴道炎的特异性为100.0%,灵敏度也高达97.4%。此标准与Donders AV评分诊断需氧菌性阴道炎阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论将p H值、H2O2浓度、WBC计数组合诊断需氧菌性阴道炎的方法简便、实用、快速、灵敏度高,对临床需氧菌性阴道炎诊治有较好的指导作用。

需氧菌阴道炎快速诊断的一种新方法

目的比较目前需氧菌阴道炎(AV)诊断标准法与需氧菌阴道炎/细菌性阴道病五项联合检测法在需氧菌阴道炎诊断中的应用价值。方法对242例疑似AV患者进行现行AV标准法和需氧菌阴道炎/细菌性阴道病五项联合检测法检测结果进行对比分析。结果采用AV/BV五项联合测定法对242例疑似AV患者进行检测,以过氧化氢+白细胞酯酶+β-葡萄糖醛酸酶/凝固酶阳性为诊断标准,共检出阳性患者107例,敏感性为94.03%、特异性为87.80%,二者的符合率为92.98%(Kappa=0.767,P<0.05),二者呈中度一致性。结论 AV/BV五项联合测定对AV诊断具有很高的敏感度和特异度,与目前临床使用的AV诊断标准符合率高,而且该方法操作简便、快速、不用仪器设备,适于各级医疗保健机构,特别是社区医院,是一种值得临床推广的鉴别诊断阴道疾病的方法。

624例宁波市基层地区女性阴道感染调查分析

目的调查宁波市基层地区女性阴道感染的分布情况,为基层卫生医疗机构制订规范的阴道感染诊治方案提供参考。方法采用生理盐水涂片法和预成酶谱生化检测对624例基层女性患者的阴道分泌物进行联合检测,并记录患者的年龄、职业等情况。结果检出阴道感染患者425例,随着清洁度数的升高,各种阴道感染的检出率呈明显递增趋势,清洁度I^II患者BV、VVC、BV+VVC的检出率明显低于清洁度III^IV的患者;单纯感染患者295例(69.41%),其中VVC患者105例(24.70%),BV患者88例(20.70%),厌氧菌增殖52例(12.24%),TV患者24例(5.65%),其他感染患者26例(6.12%)。混合感染患者130例(30.59%),其中BV+VVC患者109例(25.65%),BV+TV患者21例(4.94%);不同年龄组阴道感染发病率比较差异有统计学意义,20岁以下年龄组检出率最低,21~40岁年龄段检出率最高,尤其是BV、VVC、BV+VVC患病率明显高于其他年龄组。结论基层地区各种阴道感染的发病率均处于较高水平,应加强基层地区女性阴道感染防治的健康教育,规范基层医疗机构的诊治方案,常规涂片镜检联合预成酶谱生化检测技术操作简单、快速、准确,可给临床医生提供科学明确的诊断依据,特别适宜在基层地区广泛推广。

634例疑似需氧菌阴道炎患者阴道分泌物检测分析

目的探讨预成酶分析技术诊断需氧菌阴道炎的临床价值。方法分别采用预成酶分析法和Donders湿片镜检法对634例疑似AV患者阴道分泌物进行筛查。结果预成酶分析法检出阳性患者569例,Donders湿片镜检法检出阳性患者571例,两种方法的符合率为97.48%,二者呈高度一致性(Kappa=0.834,P>0.05)。结论预成酶分析法对需氧菌阴道炎的诊断具有很高的灵敏度和特异度,且该方法操作方便、反应快速,适宜基层医疗机构、社区医院推广使用。

中国荷斯坦奶牛乳腺炎相关基因IRAK2基因诊断方法的研究

为了研究奶牛乳腺炎相关基因IRAK2第7外显子SNP基因多态性,试验根据GenBank中IRAK2基因序列设计引物,PCR扩增得到281 bp和279 bp的IRAK2基因片段,将所得的片段经PCR-SSCP方法和RsaⅠ内切酶酶切检测后均出现3种基因型。结果表明:获得的基因型与NCBI中报道的一致。说明用PCR-SSCP联合酶切方法建立IRAK2基因快速诊断方法是可行的。