神经生长因子受体TrkA在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓表达差异的研究

为了探讨神经生长因子 ( NGF)受体 Trk A在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓的分布状况、进而分析 NGF的作用机制 ,用免疫组化技术检测了新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓 NGF受体 Trk A的表达。结果显示 ,新生鼠脊髓前角运动神经元只有胞核 Trk A表达明显 ,胞浆及胞膜无表达 ,中间带、背角均无表达。幼鼠前角运动神经元胞浆 Trk A表达明显 ,胞核少量表达 ,胞膜无表达 ;部分中间带、背角神经元胞浆有表达。成鼠前角运动神经元胞浆及部分胞膜都有 Trk A表达 ,胞核无表达 ,中间带、背角神经元胞浆以及胶质细胞也明显表达。推论 ,新生鼠时胞核中 Trk A可与配体结合引起神经元的生物效应 ;成鼠 Trk

成鼠骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤

目的:探讨成鼠骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的可行性。方法:实验于2004-06/2005-06在中国医科大学实验动物中心完成,选取Wistar大鼠40只,4只用于骨髓间充质干细胞的培养;细胞移植组12只,磷酸盐缓冲液组12只,空白对照组12只。首先分离、培养及通过免疫细胞化学方法鉴定骨髓间充质干细胞,传代后经5溴脱氧尿嘧啶标记,采用局部注射的方法移植于Wistar大鼠脊髓全横断损伤区,移植后第7,14,28天通过免疫组化方法检测标记的移植细胞是否存活,并通过辣根过氧化物酶示踪技术检测损伤区域的轴突是否再生。结果:①原代骨髓间充质干细胞呈圆形,迅速贴壁,伸展,重新变为梭形或扁平型细胞。②免疫细胞化学染色显示骨髓间充质干细胞表面抗原CD45呈阴性表达,CD90呈阳性表达。③成鼠骨髓间充质干细胞可由5溴脱氧尿嘧啶成功进行核标记,在采取局部注射的办法移植到损坏脊髓区域后可以检测到移植的细胞存活,光镜下5溴脱氧尿嘧啶标记的细胞呈棕黄色,以损伤区域为中心逐渐向头尾端迁移。④辣根过氧化物酶阳性反应物定位于神经元的胞浆,呈棕黄色颗粒,提示脊髓损伤处存在着轴浆运输以及轴突的再生,与对照组比较差别具有统计学意义。结论:骨髓间充质干细胞在移植后可存活于脊髓损伤区,并且促进轴突的再生。

成鼠耳皮成纤维细胞的体外培养

该研究为获取转基因研究所需的大量供体细胞 ,进行了以成鼠耳皮组织为材料的成纤维细胞的培养工作。实验改进了胰蛋白酶消化的程序 ,成功地分离和培养了成鼠耳皮成纤维细胞。细胞形态正常且生长迅速。

多种神经组织修复成鼠脊髓损伤的实验研究(英文)

背景:脊髓损伤后以游离周围神经片断(雪旺氏细胞)与胚胎脊髓联合移植能协同诱发宿主再生潜能,而带血管蒂周围神经移植后有更多的雪旺氏细胞存活,但其与胚胎脊髓协同作用的研究较少。目的:探讨不同神经组织移植修复成鼠急性脊髓损伤的能力。设计:单盲随机对照实验。地点和对象:实验在解放军第三军医大学大坪医院全军战创伤中心骨创伤科完成,研究对象为150只4月龄雌性Wistar属成年大鼠,由解放军第三军医大学实验动物中心提供。干预:成鼠胸髓损伤后,分别移植游离正中神经(FPN组)、带血管蒂正中神经(VPN组)、孕14天胚胎脊髓(FSC组)、游离正中神经加胚胎脊髓(P+F组)、带血管蒂正中神经加胚胎脊髓(V+F组)。主要观察指标:术后8周行神经解剖及电生理检查。结果:V+F组再生轴突和存活雪旺氏细胞数目、胚胎脊髓体积增长速度和神经元密度显著高于对照组(P<0.01),细胞分化较好,突触较成熟。SEP的P1,N1波潜伏期显著缩短(P<0.01)。结论:带血管蒂周围神经与胚胎脊髓联合移植,在解剖和电生理上均优于其他组织,对FSC的生长发育及损伤神经元的再生能力均有一定的促进作用。

胎鼠、成鼠和人胚的骨骼肌提取液及肌源神经营养因子的高效液相分析

大量的在体和离体实验证明，骨骼肌内存在着促进脊髓神经元存活和再生的物质。本研究采用高效液相分析方法对胎鼠、成鼠和人胚的骨骼肌提取液进行了分析。结果表明，三者在相同条件下尽管出现蛋白峰的数量不同，峰值也有所差异，但在相同的时间点出现两处４ 峰（Ⅰ、Ⅱ１、Ⅱ２、Ⅱ３）的基本波型。峰Ⅱ１ 的分子量为３５０００Ｄ，峰Ⅱ２ 的分子量为２２０００Ｄ，峰Ⅱ３ 的分子量为１８０００Ｄ。胎鼠和人胚的三峰呈中、低、高的形态分布，而成鼠的三峰呈低、中、高的形态分布。肌源神经营养因子（１０～３０ ｋＤ）位于峰Ⅱ。此结果使人们对肌源神经营养因子的存在产生了疑问，肌源神经营养因子究竟是一个新的营养因子（分子量究竟是多少？），还是已知的神经营养因子（ＣＮＴＦ，ＢＤＮＦ，ＮＴ３ 等）在骨骼肌组织中的分布？ 对此有必要进行分子生物学的研究来确定。

幼鼠早期癫痫持续状态与成鼠后海马硬化关系的研究

目的探讨幼鼠早期癫痫持续状态与成鼠后海马硬化之间的关系.方法健康生后15～20天的Wistar幼鼠54只,随机分为生理盐水对照组、地西泮干预组和实验组,采用锂-匹罗卡品腹腔注射制成幼鼠癫痫持续状态模型,并持续追踪至成鼠阶段,进行海马结构的常规病理、超微结构以及Timm组织化学染色观察.结果一些幼鼠早期癫痫持续状态引起的海马结构损伤可持续到成鼠阶段,CA3区苔藓纤维发芽现象较幼鼠更为明显,一些致痫幼鼠发育至成鼠阶段后未见到海马结构的损伤性改变.生理盐水对照组和地西泮干预组未见有海马结构的病理性改变.结论幼鼠早期痫性发作造成的海马结构损伤性改变可持续至成鼠阶段;幼鼠早期长时间的痫性发作与成鼠后海马硬化有关.一些致痫幼鼠发育至成鼠后并无海马硬化现象,说明海马硬化的形成可能与个体的遗传易感性有关.

原代培养的成人及成鼠心肌细胞对松胞素D的反应

成人心房和成鼠心房与心室的长期原代培养心肌细胞均用10μM松胞素D(CD)处理,处理期为0.5,1,6,12,24及48小时。有的培养皿按预定时间除去含CD培养液,换以不含CD培养液,继续培养48小时。对照组均用CD的溶剂DMSO处理。所有材料均先用罗达明-Phalloidin显示F-肌动蛋白,然后用异氰酸荧光素标记的抗微管蛋白单克隆抗体显示微管。新分离的及变圆的心肌细胞对CD无反应,而铺浆细胞的反应十分明显。在铺浆细胞周边胞质中的肌动蛋白细丝束折断、碎裂,呈细粒状或聚集成团块,一些聚集团块附着在肌膜的内侧面。肌原纤维间或肌原纤维行程上的某些部位可见小空泡。心房铺浆细胞尤其是成人心房铺浆细胞的CD反应远较心室铺浆细胞者强烈。CD作用后换无CD液再培养48小时的细胞未恢复正常。微管均不直接受CD影响。空泡出现之处微管让位于空泡。对照组对DMSO均无反应。上述结果提示:培养的成年心肌细胞对CD的敏感性存在种间差异;同种个体的培养中心房细胞和培养中的心室细胞可收缩结构也存在敏感性差异。

海狸鼠可能酿成鼠害

海狸鼠可能酿成鼠害调查表明，一度被炒得“火爆”的海狸鼠，如今在有些地方已变成“鼠害”．去年以来，其身价一跌再跌，从数百元一对降到几十、几元钱都无人问津。过去发广告兜售海狸鼠的所谓“公司”、“养殖场”，眼看形势不妙；纷纷抛款潜逃。苦了众多做发财梦的养殖...

谨防猫蜕变成鼠

谨防猫蜕变成鼠舒予最近，某市在查处一起走私大案时，挖出一个涉及到经济执法部门、司法机关和边防警察部队共５人（其中３名为主要负责人）的犯罪团伙。这些「猫们」从接受「鼠」巨额贿赂开始，逐渐发展到效仿「鼠」的劣行，形成猫鼠勾结猫鼠合伙搞走私。由于少数猫成鼠...

胚鼠室管膜及成鼠骨髓神经干细胞分离培养及分化鉴定实验研究

目的 :探寻胚鼠室管膜和成鼠骨髓分离培养神经干细胞 (NSC)的可行性。方法 :将分离的胚脑室管膜组织或成年骨髓细胞分别特殊培养。以细胞克隆及免疫细胞化学方法判断NSC增殖并鉴定NSC、神经元和神经胶质细胞。结果 :两种组织来源细胞在相应培养条件下NSC均有快速增殖。可得到具有长突起并建立有网状联系的神经元及胶质细胞。结论

带血管蒂周围神经在联合移植修复脊髓损伤中的作用

目的 :探讨带血管蒂周围神经促进胚胎脊髓修复成鼠脊髓损伤的能力。方法 :成鼠胸段脊髓损伤后 ,分别移植带血管蒂正中神经 (VPN组 )、孕 14天胚胎脊髓 (FSC组 )、带血管蒂正中神经加胚胎脊髓 (V +F组 )。术后 8周行组织学及电生理检查。结果 :V +F组移植神经与脊髓连接紧密 ,有较多新生轴突长入 ,雪旺氏细胞大量存活和增殖 ,神经丝蛋白、10 0 %饱和硫蛋白阳性反应均明显高于VPN组 (P <0 0 1) ;胚胎移植物与受体融合佳 ,体积增长速度、神经纤维和神经元数目显著高于FSC组 (P <0 0 1) ,大部分细胞分化较好 ,突触较成熟 ;SEP检查示P1、N1波潜伏期显著缩短 (P <0 0 1)。结论 :带血管蒂周围神经与胚胎脊髓联合移植 ,对FSC的生长发育。

幼鼠致痫后海马区神经元损伤及苔藓纤维发芽的实验研究(英文)

背景:成鼠癫痫持续状态(statusepilepticus,SE)后出现海马CA1区、CA3区及齿状回广泛的神经元脱失和苔藓纤维发芽已成为大量实验的共识,但有关幼鼠该方面研究得出的结论不一。目的:观察幼鼠致痫后海马区神经元的组织病理学改变。设计:随机对照实验研究。地点和对象:实验地点:北京大学人民医院实验动物中心进行。健康生后15～20dWistar幼鼠54只。随机分成3组,每组18只。生理盐水对照组,地西泮干预组,实验组。每组中用于光镜检查、电镜检查和Timm染色各6只。干预:实验组幼鼠采用氯化锂-毛果芸香碱腹腔注射制成幼鼠癫痫持续状态模型,生理盐水对照组以相同液体量的生理盐水取代毛果芸香碱。地西泮干预组在给予毛果芸香碱30min前给予地西泮腹腔注射。在光镜下观察海马结构的形态学改变。透射电镜下进行超微结构观察。Timm法观察苔藓纤维发芽情况。主要观察指标:①各组大鼠海马区的神经元形态学改变。②各组大鼠超微结构改变。③各组大鼠苔藓纤维发芽情况。结果:实验组CA1区和CA3区及齿状回可见许多神经元发生变性和固缩性坏死。CA2区未见明显改变。电镜下海马区神经元胞体浓缩变性,粗面内质网增生,内质网的核糖体脱落,胶质细胞可见有空泡变性。生理盐水对照组和地西泮干预组无明显的超微结构改变。Timm染色见?

严重联合免疫缺陷小鼠的免疫重建及其在HIV-1研究中的应用

严重联合免疫缺陷小鼠的免疫重建及其在ＨＩＶ－１研究中的应用张梅英秦英（综述）王太一（审校）（中国医科大学实验动物部，沈阳）ＳＣＩＤ小鼠（ＳｅｖｅｒｅＣｏｍｂｉｎｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｔＭｉｃｅ）即严重联合免疫缺陷小鼠，为一种先天性Ｔ和Ｂ细胞...

鼠年与猫的做派

狗年歌颂犬的忠诚,猪年赞美肥猪浑身都是宝,鼠年唱啥?老鼠动作灵敏溜得快?小白鼠在医学实验中的牺牲精神?鼠年还是站在猫的立场比较神气。 1996年的鼠年股市,是猫鼠搏斗的股市。也许把股市看成鼠窝,大多数时间持币不持股,才是猫的派头? 我本人非鼠非猫,是股市的局外人。

澳大利亚堂姐给我的教子启示

“我不是妈妈的孩子”我的一个堂姐,二十世纪90年代移民澳大利亚,后来找了一个澳大利亚老公。2005年10月中旬,堂姐带着老公韦尔和13岁的儿子塔塔回国探亲。

打假:谨防灭鼠“负效应”

在开展灭鼠运动中,在灭鼠不力的地区,会出现一种灭鼠“负效应”,即由于该地灭鼠不力,致使“鼠军突进”,造成鼠灾更重的局面,在“打假”中,也会出现类似的“负效应”。由于一些地区打假不力,导致假冒伪劣泛滥更为严重。

甲基强的松龙对大鼠颅脑损伤后细胞间黏附分子-1的影响

目的 观察甲基强的松龙对大鼠颅脑损伤后脑组织中细胞间黏附分子 (ICAM ) 1含量的影响 ,探讨其作用机制。方法 将 5 5只SD大鼠随机分为 3组 ,采用骨窗形成后硬膜外打击法造成鼠脑挫裂伤模型 ,正常组 5只 ,麻醉后 ,只行开颅手术 ,不作头颅打击 ;治疗组致伤后腹腔内注射 3 0mg/kg体重甲基强的松龙 ,对照组腹腔内注射 3 0mg/kg体重生理盐水。对照组和治疗组分别在伤后 6、2 4、48、72、96h断头取脑 ,对脑组织中ICAM 1含量进行检测。结果 治疗组脑皮质中的ICAM 1活性在伤后 6h较对照组升高 (P <0 .0 1) ,48h达高峰后开始下降 ,96h降至基础水平。甲基强的松龙治疗组在伤后 6～ 48hICAM 1活性较对照组明显降低 (P <0 .0 5 )。结论 颅脑损伤后 ,受损脑组织中ICAM 1含量升高 ,甲基强的松龙可通过抑制损伤后ICAM 1活性 ,起到保护创伤神经元的作用。