目的探讨截断型(trauncated)载脂蛋白(Apo)E对β-淀粉样蛋白代谢的影响。方法对N2a细胞进行培养,利用pEGFP-ApoE4或pEGFP-T-ApoE4质粒进行转染后制备条件培养基,利用荧光法检测全长ApoE4和truncated-ApoE4与Aβ42的结合能力,并对与Aβ4...目的探讨截断型(trauncated)载脂蛋白(Apo)E对β-淀粉样蛋白代谢的影响。方法对N2a细胞进行培养,利用pEGFP-ApoE4或pEGFP-T-ApoE4质粒进行转染后制备条件培养基,利用荧光法检测全长ApoE4和truncated-ApoE4与Aβ42的结合能力,并对与Aβ42结合复合物对SDS的稳定性进行检测,利用荧光显微镜对truncated-ApoE4和全长ApoE4对影响N2a细胞结合和摄取Aβ42情况进行观察。结果当Aβ42浓度≤100 nmol/L时,truncated-ApoE4组荧光强度均低于全长ApoE4组;进行含SDS聚丙烯凝胶电泳时,两组均在6 k D的位置处出现条带,而在43 k D处的条带明显变窄,truncated-ApoE4组大约是原来的30%,ApoE4组大约为原来的55%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);truncated-ApoE4组N2a细胞结合和摄取Aβ42数量均少于全长ApoE4组(P<0.05)。结论 truncated-ApoE4与Aβ42结合能力减弱,形成的复合物稳定性降低,可以显著影响N2a细胞对Aβ42的结合和摄取作用,抑制truncated-ApoE4产生为AD预防和治疗提供新的研究方向。展开更多
文摘目的探讨截断型(trauncated)载脂蛋白(Apo)E对β-淀粉样蛋白代谢的影响。方法对N2a细胞进行培养,利用pEGFP-ApoE4或pEGFP-T-ApoE4质粒进行转染后制备条件培养基,利用荧光法检测全长ApoE4和truncated-ApoE4与Aβ42的结合能力,并对与Aβ42结合复合物对SDS的稳定性进行检测,利用荧光显微镜对truncated-ApoE4和全长ApoE4对影响N2a细胞结合和摄取Aβ42情况进行观察。结果当Aβ42浓度≤100 nmol/L时,truncated-ApoE4组荧光强度均低于全长ApoE4组;进行含SDS聚丙烯凝胶电泳时,两组均在6 k D的位置处出现条带,而在43 k D处的条带明显变窄,truncated-ApoE4组大约是原来的30%,ApoE4组大约为原来的55%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);truncated-ApoE4组N2a细胞结合和摄取Aβ42数量均少于全长ApoE4组(P<0.05)。结论 truncated-ApoE4与Aβ42结合能力减弱,形成的复合物稳定性降低,可以显著影响N2a细胞对Aβ42的结合和摄取作用,抑制truncated-ApoE4产生为AD预防和治疗提供新的研究方向。
