Cdk5活性抑制肽对2型糖尿病小鼠模型血糖和体重的影响

目的观察Cdk5抑制短肽(TFP5)对2型糖尿病小鼠模型体重和血糖的干预作用。方法早期干预:分为正常小鼠生理盐水组(1 m L·只-1,组1),正常小鼠注射TFP5组(200 mmol,1 m L·只-1,组2),db/db小鼠注射生理盐水组(1 m L·只-1,组3),db/db小鼠注射TFP5(200 mmol,1 m L·只-1,组4)。从第5周开始每日注射1次,以后均为隔日注射1次,注射至第8周,共注射3周,第8周时处死小鼠。晚期干预:分db/db小鼠注射生理盐水组(组5)和db/db小鼠注射TFP5(400 mmol,组6),从第15周开始每日注射1次,第16周改为隔日1次,第17周停止注射1周,18周处死。注射方式均为腹腔注射,由第5周时体重每周测2次,处死之前测体重,取血送血糖监测。结果 2组正常小鼠的血糖和体重差异均无统计学意义(P<0.05);db/db小鼠注射生理盐水组血糖明显高于注射TFP5组(P<0.05),6周后db/db小鼠注射生理盐水组体重明显高于注射TFP5组(P<0.05);2组在第18周时,体重及血糖均差异无统计学意义(P>0.05)。结论应用TFP5能够降低T2DM模型小鼠的血糖及体重,但其治疗效果可能受到治疗时机、疗程的长度等的影响。

周期蛋白依赖性激酶-5抑制肽通过上调神经生长因子缓解高糖环境对人肾足细胞凋亡的影响

目的探究截短型周期蛋白依赖性激酶5(Cdk5)抑制肽(TFP5)对高糖(HG)条件下人肾足细胞损伤和凋亡的影响,及其作用机制。方法将人肾足细胞分为低糖组(LG,1.0 g·L^(-1))、HG组(4.5 g·L^(-1))、HG+Scramble组(4.5 g·L^(-1)+100.0 nmol·L^(-1))、HG+TFP5组(4.5 g·L^(-1)+100.0 nmol·L^(-1))和HG+联合组(4.5 g·L^(-1)+50.0 ng·mL^(-1)K252a+100.0 nmol·L^(-1)TFP5)。用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞凋亡基因和神经生长因子(NGF)及Cdk5的表达水平,用荧光红染料法和DCFH探针法分别检测H_(2)O_(2)和活性氧(ROS)的水平,用流式细胞术检测细胞的凋亡情况。结果LG组和HG组的B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA分别为(0.04±0.02)×10^(-2)和(0.09±0.01)×10^(-3),Cdk5 mRNA分别为(0.04±0.01)×10^(-1)和(0.07±0.01)×10^(-1),细胞凋亡比率分别为(1.61±0.25)%和(3.77±0.17)%,H_(2)O_(2)分别为0.56±0.27和2.94±1.15,ROS分别为0.51±0.28和1.04±0.07,Cdk5酶活力分别为0.14±0.06和2.11±0.02,差异均有统计学意义(均P<0.01)。LG组、HG+Scramble组和HG+TFP5组的H_(2)O_(2)分别为1.13±0.20、2.49±0.38和1.08±0.18,ROS分别为0.87±0.18、2.61±0.71和0.83±0.22,Bcl-2 mRNA分别为(0.07±0.02)×10^(-2)、(0.01±0.03)×10^(-2)和(0.04±0.06)×10^(-2),NGF mRNA分别为(0.15±0.53)×10^(-1)、0.04±0.06×10^(-1)和0.22±0.08×10^(-2)。HG+Scramble组的上述指标和HG+TFP5组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。HG+Scramble组、HG+TFP5组和联合组的NGF mRNA分别为0.04±0.01×10^(-1)、0.05±0.01×10^(-1)和0.01±0.03×10^(-1),Bcl-2 mRNA分别为(0.05±0.03)×10^(-2)、(0.01±0.00)×10^(-1)和(0.03±0.02)×10^(-2),NGF蛋白相对表达水平分别为1.14±0.07、1.69±0.44和0.48±0.06,HG+TFP5组的上述指标和联合组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论TFP5可通过Cdk5-NGF调控轴显著降低HG培养条件下人肾足细胞内的氧化应激压力和细胞凋亡。