树木中提取的天然扁柏醇的抗菌和保鲜效果

托酚酮（Ｔｒｏｐｏｌｏｎｅ）被认为具有优良的抗菌效果，树木中提取的天然扁柏醇（β－Ｔｈｕｊａｐｌｉｃｉｎ）则为托酚酮的一族。现今发现的天然扁柏醇主要在青森扁柏（Ｔｈｕｊｏｐｓｉｓｄｏｌｅｂｒａｔａｖａｒ．ｈｏｎｄａｅ）中。我们研究并讨论了利用青森扁柏提取天然扁柏醇的商业方法，天然扁柏醇作为一种食品防腐剂和发芽抑制剂的应用潜力。

扁柏醇联合氯喹对人肺腺癌细胞凋亡的影响

目的探讨扁柏醇(Hinokitiol)联合氯喹对人肺腺癌(H1975)细胞凋亡的影响。方法选用人肺腺癌H1975细胞系,应用MTT法检测扁柏醇和(或)氯喹对H1975细胞活性的影响,Western blot法检测扁柏醇和(或)氯喹对H1975细胞凋亡通路相关蛋白(Cleaved PARP、Cleaved Caspase-3、Bax)表达水平的影响。结果 0、2.5、5、10μmol/L扁柏醇作用H1975细胞24 h后,呈剂量依赖性地抑制H1975细胞增殖,H1975细胞凋亡相关蛋白(Cleaved PARP、Cleaved Caspase-3、Bax)表达水平升高。当氯喹和扁柏醇联合应用时,与单用扁柏醇相比,显著降低H1975细胞存活率,并提高H1975细胞凋亡率,凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-3表达水平显著增加。结论氯喹增加扁柏醇诱导人肺腺癌H1975细胞凋亡。

扁柏醇与托酚酮抑菌活性的初步研究

采用滤纸片扩散法测定了扁柏醇和托酚酮对大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,扁柏醇和托酚酮均对供试菌种有抑制作用,扁柏醇对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的MIC分别为300和100μg/mL,MBC均为300μg/mL;托酚酮对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的MIC分别为100和50μg/mL,MBC分别为300和100μg/mL。通过不同浓度的扁柏醇和托酚酮对供试菌的抑制作用比较,推测其活性基团为羟基和酮基。

扁柏醇合成工艺研究

以普通化工原料CPD(环戊二烯)和NaH为原料,经Wurtz取代反应、【2+2】环加成反应和Beckmann重排反应三步骤合成高纯度扁柏醇,反应条件温和,原料廉价易得,经检测纯度可稳定达到99.8%左右。该方法优于其它反应步骤较多、合成条件苛刻的全合成工艺和传统提取工艺,可实现工业大规模生产。

扁柏醇体外对肾癌细胞的影响

[目的]探讨扁柏醇对肾癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响及其可能作用机制。[方法 ]以人肾癌786-0细胞为模型,应用MTT法检测扁柏醇对786-0细胞生长抑制,应用流式细胞术检测经扁柏醇处理后786-0细胞周期变化,应用Annexin V/PI双染法检测扁柏醇诱导肾癌细胞凋亡的发生,用western blot方法分析PARP、JNK蛋白表达和活性的变化。[结果 ]扁柏醇对786-0细胞的生长有明显抑制作用,呈浓度依赖性和时间依赖性;随着扁柏醇浓度的增加,处于S期的细胞逐渐增加,而G2/M期的细胞逐渐减少;扁柏醇作用后凋亡细胞也明显增加,并伴随着cleaved-PARP的表达增加;p-JNK蛋白含量随着扁柏醇的浓度增加而升高,而JNK蛋白含量无明显变化。[结论]扁柏醇能明显抑制人肾癌786-0细胞的生长,可能与扁柏醇将细胞阻滞于S期和通过激活SPAK/JNK信号通路诱导细胞凋亡有关。

扁柏醇合成工艺研究

扁柏醇合成方法有很多,但大多不适合规模化生产。本研究采用环戊二烯和氢氧化钾为原料,经Wurtz取代反应、[2+2]环加成反应和Beckmann重排反应合成了高纯度扁柏醇。该方法反应步骤简单、原料易得、环境污染小,可制得纯度较高的扁柏醇,适合工业规模化生产。