一株抗人BLys单克隆抗体的制备及其生物学功能研究

研究以稳定高表达BLys的基因转染细胞L-BLys为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,L-BLys细胞和天然表达BLys的HL60细胞为抗体筛选阳性细胞株,经免疫荧光标记分析反复筛选和以有限稀释法反复克隆化培养。将获得的克隆4F7培养细胞注射入经致敏的小鼠体内,-抽取的腹水经Protein G亲和层析柱纯化。将纯化所得的抗体作用于经BLys分子刺激的扁桃体B细胞,3H-TdR检测细胞的增殖效率。结果获得1株持续、稳定分泌鼠抗人BLys单克隆抗体的杂交瘤细胞株。该细胞株所分泌的抗体能阻断膜型和可溶性BLys分子对扁桃体B细胞的促增殖作用。对这株单克隆抗体生物学功能的研究表明,这株单抗能特异性识别人BLys分子及阻断膜型和可溶性BLys发挥生物学活性。

rhTNF-α对TB-LCL趋化作用的研究

目的研究重组人TNF-α(recomb inant hum an tumor necrosis factor-,αrhTNF-α)对扁桃体B原淋巴细胞(tonsil B lymphob lastoid cellline,TB-LCL)的趋化作用,建立一个模型以研究细胞因子与B细胞相互间的作用。方法用EB病毒(Epste in-Bar virus,EBV)转化扁桃体B细胞建立TB-LCL系,以小室法研究rhTNF-α)对TB-LCL的趋化作用。结果rhTNF-α对TB-LCL有明显趋化作用,并呈剂量依赖关系。这种作用能为抗TNF-α的单抗E6所阻断。结论以上为研究细胞与细胞因子间的相互作用提供了有用而简便的模型。

成人原发扁桃体弥漫大B细胞淋巴瘤预后预测模型的构建及其临床意义

目的:分析成人原发扁桃体弥漫大B细胞淋巴瘤(PTDLBCL)的临床特征,构建预后预测模型。方法:从美国SEER数据库获取2004—2015年诊断为PTDLBCL患者的临床资料、治疗记录及生存信息进行分析,共纳入符合条件的PTDLBCL患者711例。对这些患者的数据进行COX模型逐步回归分析筛选预后因素,采用rms R软件包拟合COX回归方程并建立列线图模型,利用Bootstrap法进行模型的内部验证,通过计算Harrell’s C指数验证模型的区分度,通过绘制校准曲线和计算Brier评分评价模型的准确度。结果:逐步回归分析结果显示,高龄(≥66岁)、Ann Arbor分期达Ⅲ或Ⅳ期、有B症状及未接受放化疗为PTDLBCL患者预后的不良影响因素。将5个预后因素纳入cph R软件函数构建的回归方程,据此绘制列线图,计算Harrell’s C指数为0.759,Brier分数为0.121。利用Bootstrap法重复抽样1000次进行内部验证得到Harrell’s C指数为0.753,Brier分数为0.124,3年、5年生存率校准曲线均接近理想曲线,表明该模型的精准度、区分度良好。结论:构建的PTDLBCL预后预测模型具有良好的预测价值,可协助临床对PTDLBCL患者的生存预后进行个体化分析。