麻黄碱对映异构体的柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分

建立了一种用柱前手性衍生化 -反相高效液相色谱法分析麻黄碱对映异构体的方法;以( -)_氯甲酸薄荷醇酯作为手性衍生化试剂 ,( -)_麻黄碱与( +)_麻黄碱衍生化后生成一对非对映异构体,选用HypersilC18柱 ,以乙腈 -水 -乙酸 -三乙胺 (体积比29∶20∶0.2∶0.01)为流动相 ,在254nm下检测,色谱流分经电喷雾离子阱多级质谱分析验证;非对映异构体色谱峰的保留时间分别为17.1min和18.3min ,分离度为1.6;该法操作简单、快速、重现性好 ,可用于药品质量控制和对映体选择性药物动力学研究。

反相高效液相色谱手性柱前衍生化法分离DL-丙氨酸对映体

大多数氨基酸存在D型和L型两种对映体，两者的生理作用不同，只有L型对映体能被人体直接利用，D型对映体必须在体内被转化为L型才能被吸收利用，而人工合成或水解提取的氨基酸常为外消旋体。因此，把两者分开才更有实用价值。

柱前手性衍生化-正相高效液相色谱法拆分甲基麻黄碱对映异构体

目的 建立一种用柱前手性衍生化 正相高效液相色谱法分析甲基麻黄碱对映异构体的方法。方法 以 (- ) 氯甲酸薄荷醇酯作为手性衍生化试剂 ,(- ) 甲基麻黄碱与 (+) 甲基麻黄碱衍生化后生成一对非对映异构体。选用LichrosorbSi 6 0柱 ,以正己烷 异丙醇 三乙胺 (体积比为 94∶6∶0 .0 2 )为流动相 ,在 2 2 0nm下检测。结果 非对映异构体色谱峰的保留时间分别为 3.6min和 4 .3min。经电喷雾离子阱多级质谱分析验证了衍生物结构。结论 本方法操作简单、重现性好 。

高效液相色谱法手性色谱柱分离β-阻滞剂对映体

目的 :对两种 β-阻滞剂进行对映体分离。方法 :采用高效液相色谱法手性色谱柱对 β-阻滞剂阿替洛尔和盐酸普萘洛尔进行对映体拆分。结果 :两种药物均能达到较好的分离效果。结论 :该法简单方便 ,适用于对β-阻滞剂对映体的分离 。

柱前衍生化高效液相色谱手性固定相法拆分手性氰醇

利用正相高效液相色谱法在多糖衍生物手性固定相(OJ-H、OD-H、AD-H或AS-H)上成功地分离了一系列(31个)氰醇对映体的乙酰化或丙酰化衍生物,并拆分了3个脂肪族氰醇对映体的乙酰化衍生物。探讨了这些外消旋体在这四支手性柱上的色谱行为,通过考察流动相组成、流速、进样浓度和温度等因素对对映体拆分效果的影响,优化了色谱分离条件。方法已应用于脂肪酶催化转酯化拆分反应中手性氰醇衍生物的光学纯度的鉴定。

高效液相色谱进展（五）——HPLC手性固定相和色谱柱近年的发展

液相色谱手性固定相和色谱柱是HPLC的重要课题，近年受人们高度重视，因为在生物和药物领域有大量的手性化合物存在，需要识别和拆分它们，HPLC是一种首选的方法。本文综述了HPLC手性固定相和色谱柱最近几年的发展，着重讨论了应用较多的一些手性固定相和色谱柱。

柱前手性荧光衍生反相高效液相色谱法分离甲状腺素对映体

以R(-)-4-N,N-二甲基磺酰胺-7-(3-异氰酸吡咯烷)-2,1,3-苯并氧杂咪唑(R(-)-DBD-PyNCS)为手性荧光衍生化试剂,成功地拆分了甲状腺素对映体D,L-四碘甲状腺原氨酸(T4)和L-三碘甲状腺原氨酸(T3)。在反应温度为40℃、反应时间为20min时,R(-)-DBD-PyNCS在碱性介质中可与甲状腺素对映体生成稳定的非对映体衍生物。该衍生物在以乙腈-水-醋酸(体积比为60∶40∶1)为流动相,流速为1.0mL/min,色谱柱为Intersil(-ODS-3C18柱(150mm×4.6mm,5μm)的色谱条件下得到了充分的分离。采用荧光检测器在激发波长460nm、发射波长550nm下检测。D,L-T4和L-T3分别在0.016～0.30μg/μL和0.0067～0.22μg/μL范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r>0.999)。D,L-T4和L-T3的最低检出限分别为0.02μg/mL和0.85μg/mL(S/N=3)。在D-T4、L-T4、L-T3质量浓度分别为0.10μg/μL下测得峰面积的相对标准偏差分别为3.40%,1.63%,3.30%(n=7)。该方法成功地应用于甲状腺片中T4和T3的含量测定。

柱前衍生化高效液相色谱法分析当归多糖的单糖组成

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化反相高效液相色谱(HPLC)法,建立了9种常见单糖的分离模式,并成功地用于当归多糖的单糖组成分析,具有良好的重复性。结果表明,当归多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖7种单糖组成,其摩尔比为0.57∶1.00∶0.13∶3·06∶8.16∶7.17∶12.69。该HPLC方法是简单、快速、灵敏、方便的分析技术,可用于当归多糖的质量控制。

分子印迹整体柱在高效液相色谱和电色谱手性分离中的应用

在常规不锈钢色谱管中以甲基丙烯酸为功能单体,采用原位聚合法制备了(5S,11S)-特罗格尔碱(S-TB)的印迹整体柱。考察了流动相中添加不同量的醋酸和水对分离的影响,结合台阶梯度洗脱模式在S-TB整体柱上实现了对TB消旋体的快速分离。另外,以碱性单体2-二甲基乙基胺甲基丙烯酸酯(DAMA)为功能单体,在毛细管中采用原位聚合法制备了毛细管分子印迹整体柱,用于在毛细管电色谱(CEC)中对消旋体1,1′-联-2-萘酚(BNL)进行手性分离。结果表明,以DAMA为功能单体可以制备其他酸性模板的分子印迹聚合物,从而扩大了分子印迹聚合物(MIP)在CEC分离中的应用范围。

高效液相色谱法对泡菜中L-乳酸和D-乳酸的手性分离和测定

采用高效液相法和手性分离柱对泡菜发酵上清液中的L-乳酸和D-乳酸进行分离和测定。泡菜的培养上清液用8000r/min离心20min,再用0.45μm滤膜过滤。滤液用配备二极管阵列检测器的高效液相系统检测,检测波长为254nm。检测色谱柱为手性柱Chirex3126(D)-penicillami(4.6mmi.d×250mmL,5μm),流动相为2mmol/LCuSO4溶液(溶剂为5%的异丙醇溶液)。L-乳酸和D-乳酸的标准曲线在2.5-20.0g/L范围线性良好,两者的线性相关系数都为0.999。泡菜滤液的L-乳酸和D-乳酸的回收率分别是99.82%和100.02%。该方法操作简便,精密度和准确度高,适用于泡菜中L-乳酸和D-乳酸的测定。

高效液相色谱柱后化学衍生法测定食品中的VB_1及叶酸含量

研究柱后化学衍生荧光检测高效液相色谱分离测定食品中维生素B1和叶酸的方法。采用C18柱 ,以含有 3.5 %乙腈的pH5 .0磷酸盐缓冲溶液 (0 .0 5mol/L)作为流动相反相分离。色谱流出液在柱后与 0 .4 %的过二硫酸钾溶液在线汇合后流经一Teflon管化学反应器时 ,维生素B1和叶酸转化为强荧光产物 ,由荧光检测器测定。在最佳条件下 ,进样 2 0 μL ,维生素B1和叶酸工作曲线的线性范围分别为 0 .2 1～ 4 .2mg/L和0 .10～ 2 .0mg/L ,峰面积的相对偏差均为 2 .0 % ,回收率及实际样品测定结果满意。

高效液相色谱手性流动相法拆分甲状腺素对映体

运用高效液相色谱手性流动相法（ＨＰＬＣ－ＣＭＰ）对影响甲状腺素对映体（Ｄ－，Ｌ－Ｔ４）分离方法的因素：三乙胺（ＴＥＡ）浓度，流动相ｐＨ值，铜离子（Ｃｕ２＋）浓度，Ｌ－脯氨酸（Ｌ－ｐｒｏ）浓度，柱温以及流动相的流速进行了系统的研究。同时，考察了色谱方法分离Ｔ４对映体的线性关系，精密度和准确度。线性响应范围为０．６～３．２ ｎｍｏｌ （Ｄ－，Ｌ－Ｔ４），线性相关系数为ｒＤ－Ｔ４＝０．９９８０，ｒＬ－Ｔ４＝０．９９９０，日内和日间的精密度分别为ＲＳＤ＜２．３％（ｎ＝６），ＲＳＤ＜３．１５％（ｎ＝５）。结果表明本实验所得的色谱条件较文献报道的优越，分离条件简单，重现性好。ＨＰＬＣ－ＣＭＰ法测定甲状腺素对映体其意义在于该方法可为定量测定药品及人体血液中Ｄ－，Ｌ－Ｔ４两种异构体，为治疗药物监测（ＴＤＭ）和药物不良反应监测（ＡＤＲｓ）提供了依据。

高效液相色谱手性流动相法拆分布洛芬对映体

目的:建立 HPLC 手性流动相法拆分布洛芬对映体。方法:选用 Agilent Eclipse XDB-C_8柱(4.6mm×250mm,5μm);Lab Alliance C_8保护柱(4.6mm×10mm);流动相:水-甲醇-乙腈(78:17:5,含80.0 mmol·L^(-1)羟丙基-B-环糊精、0.2%磷酸,pH 4.50);流速:1.0mL·mm^(-1);紫外检测波长:265nm,进量样:20μL;柱温:室温。结果:建立了羟丙基-β-环糊精动态手性流动相法分离布洛芬对映体的方法。结论:该方法分离度好,简便,且比手性固定相经济。

高效液相色谱柱后衍生法测定食品中的V(_K_1)

应用高效液相色谱柱后衍生法测定食品中的维生素K1,样品经过均质、酶解后 ,用正己烷萃取 ,再经水洗涤、浓缩、过滤 ,以 10 0mL二氯甲烷 +90 0mL甲醇 (包含 10mmol氯化锌 ,5mmol冰醋酸 ,5mmol无水乙酸钠 )做流动相 ,利用锌粉柱进行柱后衍生 ,在Ex =2 43nm ,Em =430nm下进行荧光检测 ,外标法定量。该方法比国家标准中紫外检测灵敏度提高了 10 0倍 ,在 0 1～ 10 μg/mL的浓度范围内 ,线性相关系数达到 0 999,相对标准偏差为 4 1% ,回收率为10 0 2 %。

高效液相色谱柱前衍生法测定食品中的营养型和非营养型抗坏血酸

应用高效液相色谱柱前衍生法分离测定食品中的营养型 (L型 )和非营养型抗坏血酸 (D异型 )总量。样品中的抗坏血酸经活性炭脱氢 ,在 pH值 5 0的醋酸盐缓冲液中与邻苯二胺进行柱前衍生 ,用磷酸氢二钠、V [二乙胺的水溶液 (pH =7 0 ) ]∶ V (乙腈 ) =90∶10作为流动相 ,在InertsilODS 3柱上得以完全分离 ,经荧光检测器Ex=3 46nm ,Em=42 8nm下检测 ,外标法定量。试验结果表明 ,各组分在 2～ 2 0 μg/mL的浓度范围内 ,线性相关系数均为0 999,RSD值为 3 5 % ,回收率可达 99%～ 10 1%。

高效液相色谱(HPLC)法分析大米红曲中的桔霉素

本文探讨了大米红曲色素中桔霉素的高效液相色谱检测方法,并研究了影响红曲中桔霉素含量的一些因素。结果表明:红曲色素经预处理后以2%冰醋酸水和甲醇为流动相(2%冰醋酸水:甲醇=70:30)时,桔霉素能很好地与其他红曲色素成分分开;选育得到的15株红曲菌种中,11号和14号菌株产生的红曲色素中没有检测到桔霉素;液体发酵产物中桔霉素含量显著低于固体发酵法;干燥方法对桔霉素含量有一定的影响,但没有达到显著性差异。

高效液相色谱纤维素类手性固定相法拆分麻黄碱对映体

目的:用手性固定相拆分麻黄碱对映体,并建立检测麻黄碱对映体光学纯度的高效液相色谱法。方法:采用 CHIRAL-CEL OD-H(250 mm×4.6 mm,5 μm)手性柱,柱温为22℃,以正己烷-异丙醇-二乙胺(96:4:0.2)为流动相,流速0.5 mL·min^(-1),在257 nm 检测。结果:麻黄碱对映体拆分效果好,分离度大于2.5,最低检测限分别为5 ng 和10 ng。麻黄碱浓度在0.001～0.25 mg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999)。结论:该方法操作简单,快速,重复性好,可有效地控制药品质量。

柱前衍生化高效液相色谱法准确测定2-氯丙酸的光学纯度

用1-萘胺对2-氯丙酸进行柱前衍生化,衍生化反应在30℃条件下进行10min或更长时间。选择ChiralcelOD-H色谱柱和正己烷-醇类为流动相,考察了流动相组成和柱温的变化对2-氯丙酸衍生物对映体拆分效果的影响。确定流动相为V(正己烷):V(甲醇):V(乙醇)=50:45:5,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长224nm为较优分析条件,分离因子2.5,8min内出峰。现有文献和试剂手册提供的2-氯丙酸的比旋光度标准值之间相差很大,在实际测量和计算中无准确标准可依。柱前衍生化结合手性固定相色谱方法灵敏度高,重现性好,操作较简单,可用于准确测量2-氯丙酸的光学纯度,并准确给出一定条件下2-氯丙酸的比旋光度和光学纯度的对应关系([α]D20-13.94(neat,d1.2547),e.e.97.9%)。

高效液相色谱手性流动相添加法拆分阿卓乳酸对映体

采用C18反相色谱柱,以磺丁基醚-β-环糊精(SBE-β-CD)作为手性流动相添加剂,建立了阿卓乳酸对映体的高效液相色谱拆分方法。考察了环糊精衍生物类型、手性添加剂浓度、流动相pH、流速和柱温对手性分离的影响,同时探讨了高效液相色谱采用磺丁基醚-β-环糊精分离阿卓乳酸对映体的分离机制及包结常数,确定了色谱条件为YMC-Pack ODS-A C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为含25 mmol/L SBE-β-CD的0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH2.68)-乙腈(90∶10,v/v),流速为0.6 mL/min,柱温为30℃,紫外检测波长为220 nm。对映体的保留时间分别为26.65和28.28 min,分离度为1.68。本方法分离度好,简便易行,且比使用手性固定相分离更加经济。

PICA法制备用于高效液相色谱的锆胶基质柱填料

The methods for producing inorganic particles with a narrow particle size distribution, which are useful as chromatographic packing materials for high performance liquid chromatography（HPLC）, are provided. These methods are based on improvements in the polymerization induced colloid aggregation（PICA） process described. These improved methods involved both synthesis of zirconium oxide colloid and sintering method. Colloid is an important factor in the PICA process. The reaction factors of the aqueous sol colloid of zirconium oxide are studied. We use sintering procedure to sinter zirconium oxide colloid, the average particle size is 5 μm. Owing to different sintering procdure, the average pore size is between 7.0 32 nm and the average surface area is between 4487 m 2/g. [WT5HZ]