猪卵母细胞化学辅助手工去核及手工核移植胚胎发育能力因素的研究

本研究在筛选猪化学辅助手工去核最佳脱羰秋水酰碱(Demecolcine,DC)浓度的基础上,探讨了各种因素对手工重构胚发育的影响,以期建立高效的猪手工体细胞核移植技术体系。观察不同成熟时间卵母细胞在不同DC浓度下的去核效率,并进一步比较了化学辅助手工去核法和荧光染色去核法、不同类型的供体细胞(颗粒细胞、新生巴马肌肉成纤维细胞和胎儿成纤维细胞)和供体细胞的不同处理方法(70%～80%汇合、血清饥饿法和100%接触抑制法)对重构胚发育能力的影响。结果表明:(1)利用DC诱导去核,对体外成熟培养44h的卵母细胞以浓度0.4μg.mL-1作用0.5～1h为宜。(2)用DC化学辅助手工去核与用荧光染色去核的重构胚囊胚发育率差异不显著(13.11%vs 9.25%,P>0.05)。(3)以胎儿成纤维细胞、颗粒细胞和新生巴马小型猪肌肉成纤维细胞为供体构建的重构胚的融合率、卵裂率及囊胚率均差异不显著(P>0.05)。(4)用70%～80%汇合(对照组)组、接触抑制组和血清饥饿组的细胞作供体构建的重构胚,在融合率上,接触抑制组显著高于对照组(P<0.05);在分裂率与囊胚率上,各组之间均无显著差异(P>0.05)。研究结果表明,化学辅助手工去核法在实际生产中可以替代荧光染色去核法,能省去去核过程中荧光染色及紫外光照射去核等步骤,从而简化了猪手工体细胞核移植程序,提高了猪手工体细胞核移植效率,能为高效的猪手工体细胞核移植技术体系的建立提供参考。

成人亚急性手镜细胞型急性白血病1例

通过对1例手镜细胞型急性白血病患者临床资料进行回顾性分析,发现手镜细胞型急性白血病存在亚急性的病变过程。

手绘细胞形态结合CBL教学法在实验诊断教学中的应用探讨

目的探讨手绘细胞形态结合CBL教学法在实验诊断教学中的应用效果,为今后实验诊断教学方法提供参考依据。方法选取2018年9月—2018年12月齐齐哈尔医学院2018级影像专业本科生共77名,根据不同学年分为研究组(n=39)和传统组(n=38)。传统组本科生给予传统教学授课模式,研究组本科生实施手绘细胞形态结合CBL教学法,两组本科生均教学实践一学期。教学工作结束后,对两组带教效果进行比较,并比较两组学生对教学模式的接受程度和教学满意度。结果经不同教学方法实践,研究组学生理论成绩和实践操作成绩均高于传统组学生,差异有统计学意义(t=7.109、10.984,P<0.001)。研究组学生对教学模式的兴趣度、认可度和参与度均明显高于传统组,差异有统计学意义(t=7.943、7.333、5.767,P<0.001)。研究组学生对带教满意度(97.44%)明显高于传统组(84.21%),差异有统计学意义(χ^(2)=7.789,P=0.007)。结论手绘细胞形态结合CBL教学法在实验诊断教学中的应用效果较好,可有效提高学生理论和实践技能,提高学生兴趣度和参与度,学生接受程度高,对该教学方法满意度更强,值得在实验诊断教学中进一步推广使用。

手绘细胞形态与CBL教学法结合在实验诊断教学中的应用效果研究

目的研究实验诊断教学过程中采取手绘细胞形态与基于问题学习法(case based learning,CBL)结合教学模式的应用效果。方法选取2020年1月—2021年7月齐齐哈尔医学院2018级影像科本科学生77名,于2020年1—7月实施传统教学法(对照组,37名),于2021年1—7月实施手绘细胞形态联合CBL教学法(观察组,40名),观察不同教学方法的应用效果。结果较之对照组,观察组基础知识[(46.68±3.31)分vs(35.46±4.33)分]、问题分析[(26.94±3.71)分vs(21.76±3.84)分]、问题解决[(17.24±2.75)分vs(12.34±1.64)分]的考核成绩均较对照组更高,差异有统计学意义(P<0.05);观察组对教学模式各方面的满意度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论将手绘细胞形态与CBL教学法结合使用在实验诊断教学过程中,其教学效果更加显著,还能明显提升教学工作质量以及工作效率,学生对此种联合教学方式的满意度与接受度均更高。

季铵盐壳聚糖三维支架复合GNDF载间充质干细胞向神经样细胞分化

背景:壳聚糖类水凝胶因其良好的生物相容性、可降解性及对药物的缓释作用,作为支架材料近年来在组织损伤修复领域逐渐成为研究热点。目的:探索大鼠骨髓间充质干细胞在季铵盐壳聚糖温敏凝胶支架上生长、向神经样细胞定向分化的可行性,为治疗神经系统损伤寻找理想的组织工程材料。方法:季铵盐壳聚糖与β-甘油磷酸钠复合制成温敏凝胶,扫描电镜观察凝胶的三维结构,MTT法评价凝胶浸提液对骨髓间充质干细胞活力的影响;将牛血清白蛋白加载于凝胶支架,紫外光谱吸收法分析凝胶支架对牛血清白蛋白的缓释效果。接种大鼠骨髓间充质干细胞于凝胶支架,扫描电镜观察在支架缓释胶质细胞源性神经营养因子作用下,骨髓间充质干细胞的生长、分化情况,免疫荧光技术检测神经元烯醇化酶的表达。结果与结论:季铵盐化壳聚糖与甘油磷酸钠复合所得凝胶支架,其多孔性特点明显,有温敏特性,对蛋白的缓释效果良好,承载大鼠骨髓间充质干细胞后,对其增殖无明显不利影响。在凝胶支架缓释的胶质细胞源性神经营养因子作用下,骨髓间充质干细胞呈现神经样细胞形态,表达神经元特异性标记物神经元烯醇化酶。说明季铵盐壳聚糖温敏凝胶对胶质细胞源性神经营养因子的缓释效果良好,其凝胶支架具有多孔径、良好生物相容性特点,可承载大鼠骨髓间充质干细胞体外生长和向神经元定向分化。

椭圆波束对非均匀手征分层粒子的俘获特性研究

非均匀手征分层粒子的俘获特性研究在化学工程、生物医药、光镊、微纳米加工等领域都有着重要的应用.为了有效地俘获及操控手征分层球形粒子,本文对椭圆高斯波束照射下手征分层球形粒子的辐射俘获力展开研究.从广义米理论出发,将入射椭圆高斯波束用矢量球谐函数展开,根据波束散射理论及电磁场动量守恒定理,得出椭圆高斯波束对手征分层球形粒子辐射俘获力的级数表达式,并对椭圆高斯波束入射分层手征细胞时的轴向及横向俘获力进行了数值模拟,讨论了手征参数、极化状态、束腰宽度、损耗以及最外层厚度对俘获情况的影响.研究表明:手征参数的引入会降低非均匀手征粒子的轴向俘获特性,但是选择合适的极化态入射时,可以有效地实现对非均匀手征粒子的稳定俘获.对于内层损耗小的手征多层球形粒子,当内层折射率大于最外层时,最外层厚度大的非均匀手征粒子在光轴上更容易俘获;反之内层折射率小于最外层时,最外层厚度小的粒子在光轴上有更强的束缚;同时与传统圆高斯波束相比,椭圆高斯波束的强会聚性更容易实现对非均匀手征分层细胞的三维俘获,具有良好的应用前景.

白血病抑制因子影响人子宫内膜间质细胞血管内皮生长因子表达的体外研究

目的探讨白血病抑制因子(LIF)在体外条件下对人子宫内膜间质细胞(hESCs)血管内皮生长因子(VEGF)生成的影响,以及VEGF在体外诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)形成管腔的能力。方法体外培养分泌期hESCs,加不同浓度LIF处理24h。半定量RT-PCR方法检测hESCsVEGF mRNA的表达;Western blot方法检测hESCs细胞沉淀中VEGF蛋白的表达以及培养上清中VEGF蛋白的分泌;收集各组hESCs的培养上清,加入在Matrigel上平铺生长的HUVECs细胞中,观察HUVECs在体外形成管腔的能力。结果与对照组相比,LIF处理组能明显增加hESCs VEGFmRNA水平的表达,明显增加hESCsVEGF蛋白的表达和分泌;hESCs经LIF处理后的培养上清,能明显增加HUVECs形成新生血管的能力。结论LIF可能通过增加hESCsVEGF的表达参与调控胚胎着床过程中的血管形成。