ISO15189质量管理体系在临床基因扩增实验室运行的重点与难点

该文通过对临床基因扩增实验室在运行ISO15189质量管理体系时的重点与难点进行详细陈述,为同行进一步提升临床基因扩增实验室的管理效率、提高检验质量提供参考。陈述的内容主要包括以下几个方面:质量管理体系的建立与文件的实施;人员管理;实验室资质、设施环境的管理;实验室质量控制;生物安全、个人防护等。

临床基因扩增实验室的质量控制

本中心临床聚合酶链式反应（PcR）实验室是通过了ISO15189的实验室，而且一直在临床检测工作中差错率也非常低，作者依据ISO15189质量体系和PCR实验室特殊的《医疗机构临床扩增实验室管理办法》的要求，结合自己的工作进行总结，探讨如何做好临床PCR实验室的质量控制。

ISO15189认可在临床基因扩增实验室规范化管理中的应用

随着分子生物学和基因诊断技术的不断发展，基因检测在临床诊疗中发挥越来越大的作用。临床基因扩增实验室和分子病理实验室以前只有在三级甲等医院才拥有的，现在很多二甲医院也都在逐步开展，但规范化管理程度也不尽相同。

临床基因扩增实验室空气培养结果与实验假阳性的相关性分析

目的研究实验室污染程度与假阳性结果之间量化关系。方法用HBV标准试剂盒的阴性标准随日常标准一起进行处理检测．得出PCIK扩增结果；用标准的空气培养流程，对标本处理间进行空气采样，血平板48h培养得出每立方空气茵落数。结果假阳性结果的测定值与空气菌落数呈正相关，r=0。615，P〈0．05，有统计学意义。结论空气培养可以作为评估实验室污染程度的可靠指标。

探讨基因扩增实验室的质量控制

目的探讨基因扩增实验室内外部质量控制的重要因素和关键环节,及时发现和消除实验室检测结果存在的系统误差和影响因素。方法通过对室内质量控制(包括技术人员、仪器设备、检测方法、环境设施、试剂材料等)和室间质量控制(包括能力验证、室间质评、测量审核等)这两方面的诸多环节进行分析和归纳。结果根据日常工作的总结,基因扩增实验室检测结果的准确与否不仅要依靠先进的检测设备和检测技术,还要高度重视实验室质量控制环节。保证实验室生物安全从而降低自身风险,促进和提高检验人员的专业技术水平,确保实验数据的准确性及可靠性。结论为保证检测结果有效性、可信度及可溯源性,必须要重视实验室内外部质量控制,使基因实验室更好地在临床诊断、公共卫生监测和动植物检验检疫等多检测领域中得到广泛、高效的应用,为社会发展贡献一份力量。

温州市基因扩增实验室生物安全风险评估

目的了解并分析温州市基因扩增实验室设立单位的生物安全风险,为进一步落实实验室生物安全管理要求和措施提供依据。方法编制“基因扩增(PCR)实验室生物安全风险评估表”,设置3类共60个风险评估指标,总分值为100分。组织市级专家对全市56家基因扩增实验室设立单位进行生物安全风险评估,并对评估结果进行统计分析。结果基因扩增实验室设立单位组织管理和实验内务管理工作完成较好,而设施设备管理、消毒灭菌、人员管理、危险材料(样本)管理和应急处置等方面的工作较为薄弱。生物安全低风险33家,中风险18家,高风险4家,极高风险1家;县级公立医疗机构、其他机构生物安全风险较高。结论各实验室设立单位应该关注实验室生物安全管理,采取风险管理措施,减少和避免实验室生物安全事故的发生,提升实验室生物安全管理水平。

多举措扩增高中生物学实验课促进学生形成高阶思维能力

生物学是一门重视实验的学科,通过有效的实验教学,学生不仅可以提高实践能力,还能在实验过程中学会探索、思考并勇于质疑。这有助于学生深入思考实验原理和方法,从而形成高阶思维能力。高阶思维能力在学生的未来发展中具有举足轻重的作用。本文旨在利用高中生物学实验课,通过丰富实验内容、多样化实验形式、优化实验方法促进学生形成高阶思维能力。

临床基因扩增检验实验室的室内质控

目的：临床基因扩增检验实验室的室内质控是基因扩增检验质量的重要保证，本文从基因扩增检测室内质量控制的实验室人员、试剂耗材、环境和设施、仪器设备、室内质控、防污染措施等方面，来探讨如何做好临床基因扩增检验实验室的室内质控。

分析临床基因扩增检验实验室的质量控制

聚合酶链反应(PCR)是一种体外核酸扩增技术,模拟自然DNA复制过程,通过重复高温变性、低温退火、中温延伸等简单的3个温度循环,将靶DNA扩增百万倍,显示极高的敏感性,因此在临床检测和科研中有着广泛的运用。做好PCR质量控制是保证检测结果准确性的关键步骤,该文就临床基因扩增检验实验室在实验前、中、后期中涉及的质量控制问题进行分析。

噬菌体生物扩增法在关节结核诊治中的临床应用研究

目的探讨噬菌体生物扩增法(phage amplified biologically assay,PhaB)快速检测关节结核脓液中结核分枝杆菌的临床应用价值。方法采用PhaB技术对关节结核患者36例,非结核性关节炎患者20例关节液中的结核分枝杆菌进行检测,同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养。结果 36例关节结核积液,PhaB阳性率为47.2%(17/36)、涂片抗酸染色阳性率为2.7%(1/36)、罗氏培养阳性率为5.5%(2/36)。20例非结核性关节炎患者PhaB、涂片抗酸染色、罗氏培养特异性均为100.0%。结论 PhaB法检测关节积液中结核分枝杆菌只需2d,操作简便、灵敏度高、特异性强,不需要特殊仪器设备,可作为诊断关节结核的一种好方法。

兽用生物安全二级实验室建设及管理要求探讨

为满足动物抗体监测、非洲猪瘟实时荧光定量PCR检测等更多试验需求,按照兽用生物安全实验室建设标准技术规范,并根据实验室各功能间要求,设计和建设符合生物安全的二级实验室。在试验过程中生物安全被更多的人重视。因此,文章针对设施要求、核酸扩增实验室以及实验室安全制度等内容进行阐述,为相关实验室提供信息参考。

EasyQ方法检测HIV-1病毒载量的质量控制

目的探讨采用NucliSens EasyQ核酸扩增检测分析系统检测HIV-1病毒载量的可行性和质量控制,分析提高检测质量而采取的措施。方法采用NucliSens EasyQ核酸扩增检测分析系统检测HIV-1病毒载量,汇总和分析检测情况。结果检测了2 090例血浆标本,第1次检测结果为有效结果的有1 992例,占95.3%;第1次检测结果为无效结果的有98例,占4.7%。在98例第1次检测结果为无效结果中,错误编码1(1例,1%),错误编码3(1例,1%),错误编码4(37例,38%),错误编码8(1例,1%),错误编码9(50例,51%),错误编码10(8例,8%)。结论NucliSensEasyQ核酸扩增检测分析系统是检测HIV-1病毒载量的一种可靠方法之一,严格执行质量控制措施可大大提高检测的准确度和有效性。

脑脊液端粒酶检测在脑肿瘤诊断中的意义

目的 检测端粒酶在脑部肿瘤的表达情况。方法 应用高灵敏度的以 PCR技术为基础的端粒重复扩增实验 ( TRAP)定量测定了 4 8份脑脊液标本的端粒酶水平 ,其中包括神经系统疾病患者和非神经系统疾病患者。结果 脑脊液端粒酶检测对于脑脊液恶变细胞的诊断特异性和灵敏度分别为 95 %和 72 %。结论 运用TRAP方法检测脑脊液端粒酶是对传统脑脊液细胞学检查的一个重要补充 ,在鉴别诊断良。

基于核酸检测的微流控芯片设计与传热分析

为了解决传统数字聚合酶链式反应(PCR)扩增过程中移液操作产生的问题以及升降温速率慢的弊端,设计了一种连续流数字PCR微流控芯片,能对包含PCR反应体系的微滴进行快速扩增,可以提升核酸检测过程中的扩增效率。用COMSOL对芯片微通道内部的温度分布和两相流体的共轭传热进行了数值模拟。结果表明,芯片内部能产生95、55和72℃的均匀温区,各个温区的温度变化均在±2℃以内,可以满足PCR的温度要求。微通道内中心区域流体流速最高,且由0.1~20 mm/s变化时,微滴在目标温区的停留时间减少,扩增效率降低。根据仿真结果进行了流速为5、10、15和20 mm/s的实验,仅流速为5 mm/s时符合扩增要求,微流控芯片的扩增效率为PCR扩增仪的98%,扩增时间缩短为扩增仪的18.9%。为进一步开发集微滴生成、扩增和检测于一体的数字PCR设备提供了一种可行的技术手段。

胸腺瘤组织中端粒酶活性检测的意义

目的:观察胸腺瘤组织及瘤旁组织端粒酶的活性,探讨其临床意义。方法:用改良的TRAP法检测18例侵袭性胸腺瘤、39例非侵袭性胸腺瘤和瘤旁组织以及20例正常胸腺组织端粒酶活性,用Tecan酶免分析仪连续测定其450-630nm的OD值。结果:18例侵袭性胸腺瘤及其瘤旁组织端粒酶阳性率及活性强度OD明显高于非侵袭性胸腺瘤。结论:端粒酶的检测有可能作为判别胸腺瘤良、恶性的新指标。

膀胱癌组织中端粒酶活性检测的意义

目的探讨膀胱癌组织端粒酶活性与膀胱癌病理参数的关系及其临床意义。方法应用改良的TRAP法对40例膀胱癌组织、20例膀胱癌癌旁2cm膀胱组织和10例正常膀胱组织进行端粒酶活性的检测,用Yecan酶免分析仪连续测定其450～630nm的OD值。结果40例膀胱癌组织端粒酶活性强度OD值为0.567±0.251。正常膀胱组织无端粒酶活性存在。癌组织端粒酶活性强度OD值高于癌旁组织OD值(P<0.01)。端粒酶活性强度OD值Ⅲ级>Ⅱ级>Ⅰ级(P<0.05),OD 值在膀胱癌中随分级的增加呈上升趋势。浸润性膀胱癌端粒酶活性OD值明显高于浅表性膀胱癌端粒酶活性OD值(P<0.01)。淋巴结转移的膀胱癌端粒酶活性OD值明显高于无淋巴结转移的膀胱癌端粒酶活性OD值(P<0.05)。复发膀胱癌端粒酶活性OD值明显高于原发膀胱癌端粒酶活性OD 值(P<0.05)。结论膀胱癌组织中端粒酶阳性率及端粒酶活性强度OD值显著高于正常膀胱组织。端粒酶阳性率与膀胱癌病理分级、临床分期、淋巴结是否转移以及是否复发无关。但端粒醇活性强度OD值与膀胱癌的分级、分期、淋巴结转移以及复发有关。膀胱癌各病理参数中端粒酶阳性率经统计学比较差异无显著性,用端粒酶活性强度OD值作为比较可能更能显示其真正的临床意义。

RADIOFREQUENCY ABLATION USING HYPERTONIC SALINE SOLUTION INSTILLATION: AN EX VIVO STUDY

Objective To determine whether radiofrequency ablation using hypertonic saline solution instillation can increase the extent of thermally mediated coagulation in ex vivo pig liver tissue. Methods Fifty-six radiofrequency ablation lesions were produced in fresh ex vivo pig’s liver. According to different saline solutions, the lesions were divided into six groups: 25% acetic acid, 18% NaCl, 10% NaCl, 5% NaCl, 0.9% NaCl, and distilled water. After radiofrequency ablation, the lesions size and morphology were measured and compared.Results Using different instillation, the volume of coagulation necrosis was different: 25% acetic acid >18% NaCl >10% NaCl >5% NaCl >0.9% NaCl>distilled water. Conclusion Radiofrequency ablation using hypertonic saline solution instillation can increase the volume of radiofrequency ablation induced necrosis.