扩增片段长度多态性(AFLP)技术及其在作物育种中的应用

在过去的十几年中,分子标记技术得到迅猛发展,其技术日趋成熟,标记种类不断增多,在农作物中应用最广的是RFLP、RAPD和SSR。RFLP的结果稳定,重复性好,可靠性高,适合于遗传作图,已经发表了很多RFLP的连锁图,如Causse等和Kurata等发表的水稻连锁图谱。但是,RFLP标记多态性不高,其连锁图中空间很大,不利于基因的图位克隆,而且费时,难以分析大量DNA,这都限制了它的发展。

利用扩增片段长度多态性(AFLP)研究坛紫菜的遗传变异

应用AFLP技术对浙江普陀列岛、渔山列岛和南麂列岛野生坛紫菜、福建野生厚型及薄型以及栽培坛紫菜的两个表型分化类型进行了研究。结果表明 :坛紫菜的遗传变异较为丰富 ,共记录了 5 2 8个位点 ,其中 16个为单态位点 ,其余的为多态位点 ,多态位点比例达到 96 97%。其遗传距离与地域分布正相关 ,说明不同的环境因素可能是造成坛紫菜遗传变异的主要因素。对遗传距离进行UPGMA和Neighbor joining聚类分析表明具有薄型叶片性状的浙江野生坛紫菜和福建野生薄型坛紫菜聚合 ,而福建野生厚型与栽培具厚型叶片 ,当地俗称为木耳菜的样本聚合。该结果基本清楚地反映了坛紫菜表型特征的分化。栽培薄型叶片俗称鸡毛菜样本在不同聚类方法中分别于外侧并入不同的分支。在福建野生坛紫菜与养殖坛紫菜的AFLP图谱中仅发现了三条与叶片性状相关的谱带 :具有厚型叶片性状的坛紫菜共有的ACC CAA(10 0 )和ACT CAG(2 32 ) ,具有薄型叶性状的坛紫菜共有的ACC CAA(490 )。

大豆DNA扩增片段长度多态性(AFLP)研究

本文研究 AFLP技术在大豆上的应用 ,在改进大豆种子 DNA提取方法的基础上 ,比较同位素与银染检测方法的效果 ,筛选适宜于大豆 AFLP分析的酶切和引物组合 ,从而建立了适用于大豆指纹图谱快速鉴定的 AFL P操作程序 ,并对我国野生大豆和栽培大豆代表性材料进行了

山东产丹参遗传多样性的扩增片段长度多态性指纹分析

目的研究山东产丹参的遗传多样性,初步探讨扩增片段长度多态性(AFLP)分子标记技术在丹参道地性鉴别上的应用。方法采用扩增片段长度多态性(AFLP)技术对山东产15个丹参样本进行DNA多态性分析。结果利用4对引物组合构建了15个丹参样本的DNA指纹图谱,通过相似性和聚类结果分析,丹参和白花丹参样本的遗传相似性较低,聚类结果也划分为两大类群,证明它们之间的亲缘关系较远,分化明显。临沂地区的野生和栽培丹参样本聚在一类,且栽培品种和野生品种之间具有一定的遗传差异。结论山东产丹参具有一定的遗传多样性,AFLP技术可用于丹参道地性鉴别。

辽宁地区伤寒沙门菌的扩增片段长度多态性分析

目的:分析辽宁省不同城市和大连地区2000～2004年伤寒沙门菌的同源性以及在遗传学上的关系.方法:实验采用EcoRI/MseI型限制性内切酶、选择7种引物组合对25株不同地区和不同时间的伤寒沙门菌菌株进行AFLP分型.结果:25株伤寒沙门菌分为16个基因类型,不同来源的菌株呈现多态性分布;大连地区不同年份的15株菌存在多达14个多态型性;而其他3个城市共10株菌仅存在2个多态性,且遗传距离非常相近.结论:AFLP可以通过对内切酶组合的选择和特异性引物上选择性碱基组合的设计优化实验条件;AFLP是伤寒沙门菌的分子流行病学研究中一种十分有效的手段.

扩增片段长度多态性技术在动物遗传多样性研究中的应用

扩增片段长度多态性(AFLP)是一种有效的分子遗传标记方法,具有快速、经济、简便、模板需要量少、重复性高、结果可靠等优点。目前AFLP在动物方面的应用还不是很多,处于初级阶段,主要用于鉴定分类关系、种群遗传多样性分析、遗传连锁图谱构建等方面。

扩增片段长度多态性分析及其在微生物学中的应用

目前建立了多种对原核和真核生物鉴定分型的DNA分析技术 ,其中最新的、最有前途的DNA技术之一为扩增片段多态性 (AFLP)分析 ,AFLP分析把广泛的适用性与高分辨力和高重复性有机地相结合 ,已在动植物遗传学、医学诊断、微生物分型和种系发育研究中广泛应用。本文介绍AFLP分析原理。

扩增片段长度多态性技术对淋球菌的基因分型

目的 :评价扩增片段长度多态性技术 ( AFL P)分析对淋球菌分离株进行基因分型的能力。方法 :2 6株淋球菌分离株基因以 Eco RI和 Mes I酶切及 AFL P分析。结果 :同一地区的淋球菌分离株之间存在相当大的 DNA多态性。结论 :AFL P是鉴别淋球菌临床分离株有用而敏感的分子技术 ,有助于了解菌株来源。

扩增片段长度多态性(AFLP)在动物遗传育种中的应用进展

AFLP是一种新的分子遗传标记技术,它结合了RFLP和PCR技术的优点,具有RFLP的稳定性和PCR的高效性,被称为"最有威力的分子遗传标记"或"下一代分子标记"。相对于国外而言,我国在这方面的研究还比较少。本文综述了扩增片段长度多态性(AFLP)这种遗传标记的原理、技术特点、技术发展及其在动物遗传多样性、种质鉴定、遗传图谱构建、基因定位和标记辅助育种等研究中的应用。

扩增片段长度多态性（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）技术基本涵义

本刊讯：扩增片段长度多态性（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）技术，该技术是由Vos等1995年建立的一项分子标记技术，其基本原理是选择性扩增带有人工接头的DNA酶切片段。因不同个体的DNA的酶切片段存在差异，从而产生扩增片段的长度多态性。AFLP技术具有不需要预先知道被研究物种的基因组DNA序列信息，

扩增片段长度多态（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）是一种十分理想的分子标记技术

扩增片段长度多态性（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）标记技术是Zabean和Vos等科学家发展起来的一种新的分子标记技术。于1993年获得欧洲专利局专利。它是继限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP）、随机扩增多态性DNA（Random Amplified Polymorphic DNA，RAPD）之后的第三代标记技术。

扩增片段长度多态性（AFLP）分子标记技术在鱼类遗传学研究中的应用

随着扩增片段长度多态性分子标记技术的不断改进和深入研究，在鱼类遗传学研究中将会得到更广泛的应用，主要表现在以下几个方面：

半滑舌鳎雌性特异扩增片段长度多态性标记的筛选与应用

半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis Gtinther）为东北亚特有的名贵冷温性比目鱼类，为我国养殖业的新宠。半滑舌鳎雌鱼生长速度是雄性的2～3倍，若能实现单雌化养殖将大大提高养殖业的经济效益。本研究利用扩增片段长度多态性（AFLP）技术，应用64个引物组合，检测了半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis Giinther）雌雄基因组DNA的多态性，筛选与半滑舌鳎性别相关的AFLP分子标记。实验经过3轮筛选和验证，4个引物组合扩增出7个雌性个体出现频率为100％的DNA片段，我们认为这7个标记是半滑舌鳎雌性特异的AFLP标记，分别命名为CseF382、CseF575、CseF783、CseF464、CseFl36、CseF618和CseF305。同时，将标记CseF382成功转化为SCAR标记，测定了该标记的DNA序列，建立了半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR技术，为半滑舌鳎性别决定机制的研究和性别控制奠定了重要基础。

扩增片段长度多态性的研究进展

扩增片段长度多态性(AFLP)是一种建立在PCR基础上的分子标记技术。近年来已广泛应用于遗传图谱构建、重要基因定位、遗传多样性分析、分子标记辅助育种及生物系统分类等方面的研究。本文对AFLP的原理、基本操作程序及其应用作了简要的描述。

短串联重复(STR)位点扩增片段长度多态性及其在法医学中的应用

短串联重复（ＳＴＲ）位点扩增片段长度多态性及其在法医学中的应用闫威，贾静涛，姜先华，吕世惠中国医科大学法医学系；沈阳１１０００１辽宁省刑事科学技术研究所；沈阳１１００３２将分子遗传学的方法和技术应用于个人识别和亲子鉴定是本世纪法医学所取得的重大进展之...

cDNA-AFLP技术在植物表达分析上的应用

阐述了一种mRNA指纹图谱技术 ,即cDNA_AFLP技术的原理和程序 ;该技术具有重现性高、准确可靠、效率高等特点 ,可广泛应用于植物遗传标记分析、基因表达特性研究以及分离植物基因等 ,具有良好的发展前景。

限制性片段长度多态性聚合酶链反应法检测人细胞色素氧化酶2D6药物代谢相关基因位点多态性

目的建立测定人细胞色素氧化酶2D6(CYP2D6)基因多态性的限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR RFLP)检测方法。方法通过增加PCR扩增体系中DNA模板上样体积、降低引物浓度以及减少限制性内切酶的用量等方法改进、优化实验条件,建立以PCR RFLP法为基础的肝药酶CYP2D6基因型检测方法。结果采用PCR RFLP法能够检测CYP2D6?2、CYP2D6?10和CYP2D6?14基因型,且过程简便,经济实用。结论该方法检测CYP2D6药物代谢相关基因位点基因型具有简便、高效、准确和经济的特点,可在临床及实验室推广使用。

AFLP技术在鱼类种群分析中的应用

文章介绍了扩增性片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)技术的原理和应用程序,概述了AFLP技术在鱼类种质资源、种群鉴别和地理分化及种群自我恢复能力等分析研究中的应用现状和应用前景。并期望AFLP种群分析技术也将在鱼类洄游、捕捞量配额分配及生态学等研究中有重要应用。

NGAL基因不同长度片段的克隆及其顺式作用元件定位分析

NGAL(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin)是lipocalin家族的一个新成员,可能是人类的一种新癌基因,但其在肿瘤中的表达调控机制尚不清楚。应用生物信息学手段对NGAL(X99133,包括外显子和内含子)进行分析发现,此区域内含有许多潜在的顺式作用元件,其中主要为增强子元件。对此设计了以下实验:应用PCR技术从食管癌细胞SHEEC基因组DNA中扩增不同长度的NGAL基因片段,将其连接到PGEMT-eacy载体中进行扩增,并测序。NCBI/BLAST分析确认扩增片段为NGAL基因所有,与实验所设计相吻合。在此基础上并应用KEGG/MOTIF检索分析系统对NGAL基因的上述区段进行了顺式作用元件定位分析,结果共鉴定出5个Score值=100分的顺式作用元件位点。这为NGAL基因增强子的鉴定提供了新线索。