丁酸梭菌扩大培养干燥工艺及菌粉贮存稳定性研究

该研究以丁酸梭菌(Clostridium butyricum)BLCC1-0022为研究对象,采用生物发酵罐扩大培养,利用真空冷冻干燥法和喷雾干燥法制备菌粉,并以菌株存活率为评价指标,对其温度耐受性及贮存稳定性进行研究。结果表明,该菌株种子液传代次数在3次以内,扩大培养至18 h时制备的冻干菌粉活菌数(4.1×1010CFU/g)高于喷干菌粉(3.7×109CFU/g);喷干菌粉和冻干菌粉耐受高温条件(100℃、10 min),活菌数分别为3.96×109CFU/g、3.10×1010CFU/g,存活率分别为96.34%和73.81%;耐受模拟储运条件(45℃、8 h),活菌数分别为2.80×109CFU/g、1.93×1010CFU/g,存活率分别为68.29%、45.09%;4℃、-20℃和室温条件下贮存180 d,活菌数分别在1010CFU/g和109CFU/g水平,存活率均>73.08%,在37℃下贮存不宜超过60 d。因此,冻干菌粉活菌数更高,而喷干菌粉的温度耐受性和存贮稳定性更高。

荚膜红假单胞菌应用型扩大培养液的优化试验

采用正交设计试验 ,探讨基础营养培养液中醋酸钠、酵母膏、蛋白胨等 5种成分对荚膜红假单胞菌 (Rhodopseudomonacapsulata)生长繁殖的影响 ,优化应用型扩大培养液配方。结果表明 ,醋酸钠和酵母膏对荚膜红假单胞菌生长繁殖具有显著的影响。荚膜红假单胞菌应用型扩大培养液可为 :在 1L的养殖水体中添加 6g醋酸钠和 0 1

单针藻(Monoraphidium dybowskii C29)扩大培养条件优化

为优化单针藻（Monoraphidium dybowskii C29）扩大培养的条件,研究温度、光照强度、氮源、补料方式以及扩大培养的接种量对单针藻生长和油脂积累的影响。结果表明,单针藻在温度为25℃,光照强度12 000 lx,尿素为氮源,以分批补料方式添加营养盐时生长和油脂积累最佳。利用管道式生物反应器在优化条件下进行扩大培养,温度控制在25-30℃,采取遮光处理控制光照强度在20 000 lx以内,接种量为15%时,单针藻生物量及油脂积累高于接种量为10%时的量。最终在最佳条件下生物量为1.15 g/L,油脂产量为0.39 g/L。研究结果为单针藻的扩大培养提供参考,也为单针藻开发利用奠定基础。

1株斜生栅藻扩大培养条件的优化

为了促进微藻快速生长、提高微藻生物量,在试验室条件下对1株含油量相对较高、长势较好的斜生栅藻进行10 L扩大培养,并通过单因素和正交试验对4种主要营养盐进行优化。结果表明,在扩大培养的10 L反应器中,斜生栅藻的最适生长条件为:Na NO31.0 g/L、K2HPO4·3H2O 0.10 g/L、Mg SO4·7H2O 0.100 g/L、Fe Cl3·6H2O0.008 g/L,斜生栅藻在该优化后的10 L培养基中生长情况良好,且最大生物量(D680 nm)可达1.91,分别是10 LBG11、250 m L-BG11条件下的1.20、1.28倍。

甲烷八叠球菌扩大培养及固定化方法

以首都师范大学生物系实验室富集的甲烷八叠球菌浓缩物作为接种物,用10L反应器对其进行扩大培养,得到了含甲烷八叠球菌为2.31010个/mL扩大培养浓缩物.设计正交试验,以固定化甲烷八叠球菌菌球的成球性、菌球在产气高峰时的沉降性、产甲烷活性、寿命为指标,选择出聚乙烯醇(P)、海藻酸钠(A)和充填物(F)混合包埋载体的最佳配比P8A1F40,P8A1F40法制备的固定化甲烷八叠球菌成球容易、具有高的产甲烷活性、良好的脱气性和沉降性,较高的机械强度(发酵过程中不胀、不黏)和较长的寿命.

对细菌型腐乳生产中菌种扩大培养工艺的探讨

文章分析了影响细菌型腐乳扩大培养的因素,探讨了藤黄球菌扩大培养工艺的操作要点,提出了解决藤黄球菌培养工艺中的条件及提高产品质量的措施。

食醋酿造酒母扩大培养条件初探

试验以K字酵母为原菌,麦芽汁为培养基,采用3因素3水平正交设计,考察接种量、培养温度、pH值对酒母扩大培养的影响。结果表明,酒母扩大培养的最佳培养条件为:接种量10%,培养温度29℃,pH4.4条件下,菌体数可达1.35亿个/mL。

一种酿酒用工业微生物简易扩大培养装置的设计与应用

提供发酵产量高、生产性能稳定、数量充足且不被杂菌污染的生产菌种,是种子制备工艺的关键;其中,扩大培养装置的设计与应用在微生物扩大培养种子制备过程中起到重要作用,直接关系到种子制备的质量与效率。探讨了一种酿酒用工业微生物简易扩大培养装置的设计与应用,该简易培养装置包括1 m3小培养罐和5 m3扩大培养罐,并配备有罐体保温罩、空气压缩机、搅拌器、循环盘管、温度传感器和液位计等;该装置的罐体呈圆柱体,分别开启蒸汽、搅拌机、循环水等对应管线或装置,可实现蒸汽加热杀菌、搅拌、冷却或保温、温度及液位监测等,提高酿酒用工业微生物扩大培养的效率,尤其适用于复合己酸菌液的培养。该装置可基本实现酿酒用工业微生物的密闭连续性扩大培养、有效避免杂菌污染,且微生物生长旺盛、酶活较传统扩大培养方式大为提高,生产应用效果较好。

单胞藻扩大培养技术的研究进展

对单胞藻的扩大培养技术进行综述,并对贝类育苗生产过程中的单胞藻培养实践经验进行总结,为大规模单胞藻培养提供参考。

一株驯化啤酒酵母的分离鉴定及扩大培养条件的优化

为筛选一株驯化啤酒酵母,并对发酵罐扩大培养工艺进行优化,为今后大规模生产提供试验数据。于麦芽汁培养基分离挑选某株具有较好生长力的酵母菌,进行形态学、生化及分子生物学鉴定。应用正交试验设计,从摇瓶温度、pH、取样时间及发酵罐的转速、装液量、接种量等方面进行优化。结果表明,驯化酵母菌株形态学、生化鉴定证明该菌株属于酵母属;发酵罐扩大培养最佳工艺为:转速200r/min,接种量50mL/L,装液量4.5L,此条件下酵母活菌含量为2.8×10~8 CFU/mL。驯化前后表现一致,没有发生变异。优化啤酒酵母菌的发酵罐扩大培养工艺,为下一步规模化生产提供理论参考。

山羊转人乳铁蛋白基因成纤维细胞和乳腺上皮细胞单克隆的制备及扩大培养

[目的]为探索单个转基因阳性细胞快速扩大培养成为细胞克隆的技术体系。[方法]对转染人乳铁蛋白(Human lactoferrin,hLF)基因乳腺特异性表达载体pBLM-C1的单个山羊胎儿成纤维细胞(Fetal Fibroblasts,FF)和乳腺上皮细胞(Mammary Gland Epithelial,MGE)细胞进行克隆。在96孔板中,首先用3种浓度(V/V:0、50%和100%)的适应性条件培养基对单个转染细胞进行细胞单克隆的制备,进而把转染细胞单克隆与非转染细胞共培养进行扩大培养,neo基因被用于筛选基因,以PCR方法鉴定转染细胞基因组DNA。并对单克隆细胞进行染色体核型分析。[结果]与非适应性条件培养基相比,100%适应性条件培养基能够显著提高细胞单克隆存活率;与对照相比,转染细胞单克隆与非转染细胞共培养,显著提高了转染细胞单克隆扩大培养后的比率(FF:53.33%vs.10.00%;MGE:33.33%vs.6.670%),且明显缩短了扩大培养汇合时间(20～30 d);PCR鉴定结果表明,上述方法获得的克隆细胞整合有hLF目的基因;核型分析表明,大部分细胞克隆染色体正常。[结论]该研究可为分离转基因细胞、理想载体的插入及诊断提供一种可靠的方法,并能节省转基因动物生产的及费用时间。

啤酒酵母扩大培养的研究

啤酒酵母的好坏直接影响啤酒的质量,而啤酒酵母的扩大培养又是微生物工作的核心,本文从酵母菌株的选择等几个方面研究了啤酒酵母扩大培养的关键所在,从而保证啤酒的质量。

种子扩大培养过程对类人胶原蛋白规模化生产的影响

为了建立最优的类人胶原蛋白(HLC)的种子扩大培养过程,考察了三级种子培养过程中不同移种阶段和不同种子培养基对发酵过程的影响。结果表明,在对数期后期移种,HLC产率最高;当种子培养基中葡萄糖浓度为20 g.L-1时,其后发酵过程所需的培养时间较短,HLC表达量较高,HLC平均产率最高,达到0.518 g.L-1.h-1。

一株对氯甲苯降解菌株种子扩大培养基的优化

以细胞浓度为菌体生长指标,探索并优化对氯甲苯降解菌株Bacillus licheniformis ycsd01种子培养基中碳源、氮源、主要无机盐等培养基组分及其用量,最终获得菌株适宜的培养基配方。结果表明:对氯甲苯降解菌株的最佳种子培养基配方为2.0 g·L-1对氯甲苯,8.0 g·L-1葡萄糖,2.5 g·L-1NH4Cl,4.5 g·L-1K2HPO4,2.0 g·L-1KH2PO4,0.2 g·L-1MgSO4,0.05 g·L-1MnSO4,0.01 g·L-1FeSO4·7H2O和0.03 g·L-1CaCl2·2H2O。菌株在优化后较优化前的生长曲线延滞期缩短,指数期和稳定期变长,更晚地步入衰亡期,各生长时期的细胞数量均显著增加,有望用于大规模生产。

乳酸菌在西藏的扩大培养和发酵试验

将保加利亚乳酸杆菌和嗜热链球菌在液体培养基中进行扩大培养,通过离心,加入固形物,冷冻干燥等序列过程,生产出适合本地的菌种产品,并对该产品进行发酵和菌种试验。

微型啤酒厂种子液简易扩大培养技术

通过啤酒酵母实验室扩大培养的简易方法实验,确定关键控制点,为微型啤酒厂生产啤酒提供优质种子液。

菌核寄生菌盾壳霉扩大培养和孢子保存方法的研究

盾壳霉(Coniothyriumminitans)可以在脱皮高粱米上扩大培养,为了获得大量菌料,本文规范了扩大培养的程序,研究了菌料的获得方法、时间对产孢量的影响及孢子在不同的保存条件下的存活情况。结果显示:培养最适含水量高粱米与水的体积比为4:1,最适的培养条件是18～20℃,PH3.5～4.5,时间为20～40天,每天至少用力摇动三次。菌料粉碎处理的孢子量最多,为表皮处理的10～25倍。干燥保存的菌料孢子活性最高,其萌发率为35.7%(48小时),与对照35.5%没有明显差异,且分别为矿物油(汽油)中保存的孢子(8.6%)和灭菌蒸馏水中保存的孢子(5.2%)萌发率的4.2倍和6.9倍。不同保存时间内干燥保存的孢子萌发率之间没有明显差异。

Vero细胞两阶段扩大培养工艺研究

两阶段珠到珠转移方法（包含最初8h的间歇搅拌和接下来的连续搅拌阶段）可以实现Vero细胞的扩大培养，按照新老载体2：1的比例放大，载体空载率能从最初的66．7％降到3．5～6．3％。在间歇搅拌阶段，转速对新载体建桥率没有显著影响，但在连续搅拌阶段，60r／min转速仅能使载体空载率降低到28．9％，甚至比35r／min连续搅拌产生的空载率还高8％。在新老载体1：1放大过程中，5eg／mL的胰酶不能促进细胞在载体Cytodex-3间的转移，最后的载体空载率仍高达10．8％。这些研究结果为Vero细胞通过珠到珠转移方式在其他系统或以更大扩增倍数进行的放大培养过程提供了重要信息。

烟曲霉素发酵条件的初步优化及其扩大培养

为了获得适宜的烟曲霉素发酵条件,提高烟曲霉素产量。以烟曲霉CEA-1701为生产菌株,运用HPLC测定烟曲霉素含量。通过单因素试验确定各因素范围,进一步运用Plackett-Burman(PB)和Central-Composite Design(CCD)设计优化适合烟曲霉CEA-1701产烟曲霉素的发酵条件,最后对优化的结果进行5L罐的扩大培养。PB试验表明,温度和p H是影响烟曲霉素产量的主要因素;CCD优化得到的产烟曲霉素的发酵条件为:温度32℃、培养基初始p H 6.24、装液量50/250m L、接种量1%(v/v)、玻璃珠添加量5颗。以优化后的条件进行摇瓶和5L发酵罐发酵,烟曲霉素的产量分别提高了18.7%和34.6%,达到73.58mg/L和83.42mg/L。试验优化了烟曲霉CEA-1701产烟曲霉素的发酵条件,初步得到了5L发酵罐的发酵参数,扩大培养显著提高了烟曲霉素的产量。为烟曲霉素的进一步发酵生产提供了依据。