扩张柱床吸附层析回收纯化灌流培养生产的单克隆抗体

用扩张柱床吸附层析技术 ,一步回收纯化连续灌流培养的单克隆抗体。用StreamlineSP阳离子交换介质在固定床柱XK16 2 0上进行条件摸索 ,扩张床柱Streamline 2 5和 50分别用于小规模条件优化和中试规模放大。培养液中的低浓度单抗经此步处理 ,浓缩 10倍以上 ,纯度提高 5～ 7倍 ,回收率 >90 % ,制备周期比固定柱床层析缩短一半以上。根据培养液中单抗浓度的不同 ,一次处理量为 18～ 50L ,纯化规模由实验室水平 (40 0mg)扩大至中试水平(2g) ,生产成本和工艺复杂性大为降低。应用扩张柱床吸附层析技术 ,建立单克隆抗体回收纯化工艺 ,具有经济、简便。

扩张柱床吸附层析与固定柱床层析纯化单克隆抗体的比较

为满足Ⅰ类新药二期临床的药品需求量 ,单抗生产由实验室规模扩大到中试规模 ,在目标产品的下游纯化工艺中 ,采用扩张柱床吸附技术代替一期临床实验室规模方法中的澄清、浓缩、和最初的疏水层析 ,其后的纯化步骤保持不变。由于采用新的纯化路线 ,使得制备周期缩短 2 3,处理能力由 1 0 0ml小鼠腹水扩大至 1 8～ 5 0L杂交瘤细胞培养液 ,回收率提高2 0 %以上 ,并很容易根据需要线性放大规模 ,为单抗的的产业化提供了更为简便和高效的下游纯化模式。