扶正养肝合剂对药物性肝损伤的保护作用研究

该研究制备了对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠药物性肝损伤(DILI)模型,探讨了扶正养肝合剂对DILI的保护作用和机制。小鼠随机分为空白组,模型组,阳性药组,扶正养肝合剂高、低剂量组(0.24,0.12 g·kg^-1)。小鼠连续灌胃给药21 d,最后一次给药16 h后,一次性腹腔注射APAP(600 mg·kg^-1),建立急性DILI小鼠模型,观察扶正养肝合剂对DILI小鼠肝脏质量和肝重比的影响;考察血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量以及肝组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)及还原型辅酶Ⅱ(NADPH)水平;用Q-PCR法测定肝组织中ptgs2 mRNA水平;用Western blot法检测肝脏中SLC7A11和GPX4蛋白水平;并用HE染色、免疫组化、TUNEL法检测肝脏切片病理学变化。结果表明,扶正养肝合剂能够缓解APAP诱导的小鼠肝脏肿大及肝重比增加,降低DILI小鼠血清中ALT和AST含量,同时抑制MDA产生,升高NADPH及GSH水平,下调ptgs2 mRNA水平,上调SLC7A11和GPX4蛋白水平。结果表明,扶正养肝合剂通过抑制ferroptosis发挥对DILI的保护作用。

扶正养肝合剂抑制NLRP3炎症小体活化缓解肝损伤作用

本研究采用痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes,P.acnes)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠急性肝损伤模型,研究扶正养肝合剂(Fuzheng Yanggan Fomula,FYF)缓解急性肝损伤的作用及机制。通过建立P.acnes/LPS小鼠急性肝损伤模型,考察FYF对小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量,以及肝组织中丙二醛(malonaldehyde,MDA)、抗氧化能力指数(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;应用免疫印迹法检测肝脏Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体相关通路中NLRP3蛋白、半胱天冬酶募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,caspase-1)和IL-1β蛋白水平;应用苏木素-伊红(hematoxylinendash-eosin,HE)染色和免疫组化实验方法检测肝脏切片病理学变化和炎症情况;应用末端脱氧核苷酸转移酶标记(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL)方法检测肝脏切片细胞凋亡情况。动物福利和实验过程均遵循暨南大学动物伦理委员会的规定。实验结果显示,FYF能够缓解P.acnes/LPS诱导的急性肝损伤小鼠肝组织病理损伤和炎症细胞浸润,降低其血清中ALT、AST和IL-1β含量,同时抑制MDA产生,升高ORAC及GSH水平,下调caspase-1和IL-1β蛋白水平。上述研究结果表明,FYF通过抑制NLRP3炎症小体通路的激活,缓解P.acnes/LPS诱导的小鼠急性肝损伤,可为肝损伤疾病的预防和治疗提供理论依据和新的药物作用靶点。