扶正化结汤对二乙基亚硝胺诱导的肝细胞癌模型大鼠肝组织保护机制研究

目的观察扶正化结汤对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的肝细胞癌模型大鼠肝组织的保护作用,并探讨其作用机制。方法SPF级雄性WISTAR大鼠30只随机数字表法分为正常对照组、模型组和治疗组,每组10只。各组大鼠均以普通饲料喂养。模型组和治疗组予以DEN皮下注射50 mg/kg·次,每周1次,连续17周,建立肝细胞癌模型。正常对照组予以生理盐水0.4 mL/100 g腹腔注射,每周1次。造模开始即连续灌胃给药干预,正常对照组和模型组均给予生理盐水1 mL/100 g灌胃,1天1次;治疗组给予扶正化结汤按1 mL/100 g灌胃,每天1次,连续17周。检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白介素6(IL-6)、甲胎蛋白(AFP)及核转录因子κB(NF-κB)水平,比较各组体质量、肝质量、肝脏系数,分析病理学表现,实时荧光定量RT-PCR检测大鼠肝组织NF-κB表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠体质量下降[(262.78±27.61)g比(389.51±29.48)g,P<0.01],肝脏质量及肝脏系数上升[(21.31±2.84)g比(8.25±0.84)g、(8.10±0.42)%比(2.12±0.08)%,P均<0.01]。模型组ALT、AST、IL-6、AFP、NF-κB水平均明显升高[(225.60±21.77)U/L比(36.64±4.07)U/L、(248.36±26.26)U/L比(84.56±3.75)U/L、(100.26±14.88)pg/mL比(64.11±18.30)pg/mL、(10.83±1.15)ng/mL比(9.01±1.32)ng/mL、(12.54±1.74)ng/mL比(10.15±1.29)ng/mL,P均<0.01]。与模型组比较,治疗组大鼠体质量无明显变化[(254.10±23.06)g比(262.78±27.61)g,P>0.05],肝脏质量及肝脏系数显著下降[(17.11±2.56)g比(21.31±2.84)g、(6.74±0.74)%比(8.10±0.42)%,P<0.01];治疗组ALT、AST、IL-6、AFP、NF-κB水平均有下降[(176.49±29.09)U/L比(225.60±21.77)U/L、(203.70±49.49)U/L比(248.36±26.26)U/L、(80.81±22.55)pg/mL比(100.26±14.88)pg/mL、(8.22±1.45)ng/mL比(10.83±1.15)ng/m、(9.90±1.74)ng/mL比(12.54±1.74)ng/mL,P<0.05或P<0.01]。HE染色病理显示,模型组大鼠肝组织,癌症细胞巢形成,细胞坏死、变性;治疗组大鼠肝组织癌细胞巢形成和细胞坏死减少。RT-PCR显示,模型组NF-κB水平较正常对照组升高[(2.19±1.06)比(1.00±0.00),P<0.01],治疗组NF-κB水平较模型组下降[(1.69±0.48)比(2.19±1.06),P<0.05]。结论扶正化结汤可能通过下调升高的NF-κB水平抑制大鼠肝脏炎症、癌细胞增殖,促进模型大鼠肝癌细胞凋亡,从而改善其肝功能。

扶正化结汤对二乙基亚硝胺诱导的肝细胞癌大鼠炎症反应的影响

目的 探讨扶正化结汤对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的肝细胞癌大鼠炎症反应的影响。方法 雄性SPF级WISTAR大鼠30只,随机分为3组(n=10)正常对照组、造模组及中药治疗组。各组均以普通饲料喂养。对照组予以0.9%氯化钠注射液0.4ml/100g腹腔注射,1次/周,0.9%氯化钠注射液1ml/100 g灌胃,1次/d;造模组予DEN皮下注射50mg·kg^(-1)·次^(-1),1次/周,0.9%氯化钠注射液1 ml/100g灌胃,1次/d;中药治疗组予DEN皮下注射50 mg·kg^(-1)·次^(-1),1次/周,予扶正化结汤1 ml/100 g灌胃,1次/d连续17周。试验结束后检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白介素6(IL-6)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)及核转录因子κB(NF-κB)水平,比较各组体质量、肝质量、肝脏系数,分析病理学表现并检测大鼠肝组织中环氧合酶2(COX-2)及核因子κB(NF-κB)表达。结果 造模组ALT、AST、IL-6、AFP、CEA、CA199及NF-κB水平均高于对照组(均P <0.05),中药治疗组上述指标均低于造模组(均P <0.05)。与正常对照组相比,造模组大鼠体质量下降(P<0.01),肝重及肝指数明显上升(均P<0.01);与造模组相比,中药治疗组大鼠体质量与造模组差异无统计学意义(P> 0.05)但肝重及肝指数均明显下降(均P <0.01)。病理显示,造模组大鼠肝组织中,纤维组织增多假小叶形成,肝细胞坏死、变性偶见癌巢;中药治疗组大鼠的肝组织中,肝细胞坏死及纤维化减少。造模组COX-2及NF-κB表达量均高于正常对照组(均P <0.01),中药治疗组表达均较模型组低(均P<0.01)。结论 扶正化结汤可能通过下调升高的COX-2及NF-κB水平来抑制大鼠肝脏炎症、癌细胞增殖,促进模型大鼠肝癌细胞凋亡,改善其肝功能。