芪灵扶正清解方对Huh-7细胞能量代谢及糖酵解相关蛋白的影响

目的 探讨芪灵扶正清解方(QFQ)对Huh-7细胞能量代谢及糖酵解相关蛋白的影响。方法CCK8法检测0、62.5、125、250、500μg/mL QFQ醇提物干预Huh-7细胞24、48和72 h后的细胞活力。将Huh-7细胞分为0、62.5、125、250、500μg/mL组,分别予相应浓度的QFQ醇提物干预24 h,应用细胞能量代谢分析仪检测线粒体和糖酵解ATP产生速率、实时耗氧率、胞外酸化率、糖酵解速率和质子流出速率;Western blot检测Huh-7细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、己糖激酶(HK)、葡萄糖转运蛋白(Glut)1以及Glut3的蛋白表达量。结果(1)与0μg/mL组比较,125、250、500μg/mL QFQ醇提物干预Huh-7细胞24、48和72 h后细胞活力明显降低(P<0.01)。(2)与0μg/mL组比较,62.5、125、250μg/mL组Huh-7细胞线粒体和糖酵解ATP产生速率比值明显提高(P<0.05),125、250μg/mL组Huh-7细胞糖酵解速率明显降低(P<0.05或P<0.01);与0μg/mL组比较,随着检测时间延长,62.5μg/mL组Huh-7细胞实时耗氧率呈升高趋势(P<0.05),250μg/mL组Huh-7细胞胞外酸化率和质子流出速率呈降低趋势(P<0.05)。(3)与0μg/mL组比较,62.5、125、250、500μg/mL组Huh-7细胞的HIF-1α、HK、Glut1、Glut3蛋白表达量均明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论 QFQ通过调控细胞能量代谢和糖酵解相关蛋白HIF-1α、HK、Glut1和Glut3的表达,提高线粒体能力,抑制糖酵解能力,促进有氧呼吸,从而有效抑制Huh-7细胞的增殖。

寡聚脱氧核苷酸协同扶正清解方抗肝癌细胞侵袭转移作用

目的探讨寡居脱氧核苷酸(ODN)协同扶正清解方对肝癌细胞侵袭转移的抑制作用。方法将对数生长期的肝癌细胞HEPG2分为3组培养,Medium组、ODN组及ODN+扶正清解方组,分别在细胞培养液、含ODN的细胞培养液、含ODN和扶正清解方的细胞培养液中培养12、24、36、48、60、72、84 h。然后通过MTT法测定各组肝癌细胞的增殖情况、划痕实验检测肝癌细胞迁移能力、Transwell小室检测肝癌细胞侵袭转移能力。结果 MTT实验表明ODN+扶正清解方组的Hep G2细胞的生长在第24h开始受到抑制,其细胞增值能力明显低于Medium组及单独ODN组(P <0.05);迁移实验显示ODN+扶正清解方组的肝癌细胞与对照细胞相比,更少的细胞发生了迁移(P <0.05);Transwel实验显示,ODN+扶正清解方组Hep G2细胞加入Transwel上室以后24 h,穿过Matrigel胶的细胞数目显著低于对照组细胞(P <0.05)。结论 ODN协同扶正清解方通过抑制肝癌细胞的增殖、迁移,降低了肝癌细胞的侵袭转移能力。

基于自噬探讨芪灵扶正清解方抗抑郁作用研究

目的观察芪灵扶正清解方对抑郁模型大鼠行为学及海马神经元微结构的影响,探讨其对自噬相关蛋白、基因的调节及其抗抑郁机制。方法30只SD大鼠随机分3组:正常组、模型组、芪灵组。正常组不干预,其余2组以慢性不可预知温和应激联合孤养建立抑郁大鼠模型。各组大鼠进行糖水消耗实验、敞箱实验行为学观察;HE染色观察海马细胞形态;透射电镜观察海马细胞超微结构及自噬变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Ulk1、Beclin1、P62、LC3蛋白和mRNA的表达;免疫组织化学染色法(IHC)检测海马组织Beclin1表达。结果行为学实验提示:与正常组比较,模型组大鼠糖水消耗量明显降低(P<0.05);直立次数、水平穿越的格数和理毛时间减少,粪便粒数和中央格停留时间增加(P<0.05);与模型组比较,芪灵组大鼠糖水消耗量明显增加(P<0.05);直立次数、水平穿越的格数和理毛时间增加,粪便粒数和中央格停留时间减少(P<0.05)。HE染色提示:与正常组比较,模型组海马CA3区细胞数量减少,排列紊乱,部分细胞核模糊;CA1区细胞形态不规则,数量稀疏,体积明显变大,排列紊乱,细胞核模糊;与模型组比较,芪灵组海马CA1区、CA3区细胞形态相对规则,细胞数量相对较多,排列相对齐整,细胞体积相对正常,细胞核较清晰。透射电镜显示:与正常组比较,模型组大鼠海马区神经细胞形态不规则,线粒体结构损伤严重,细胞自噬的表征数量较为丰富;与模型组比较,芪灵组神经细胞形态相对规则,线粒体损伤相对轻微,细胞自噬的表征数量较少。Western blot与qPCR实验提示:与正常组比较,模型组大鼠的Ulk1、Beclin1、LC3-II蛋白和mRNA的表达增加(P<0.05),P62蛋白和mRNA的表达减少(P<0.05);与模型组比较,芪灵组大鼠的Ulk1、Beclin1、LC3-II蛋白和mRNA的表达减少(P<0.05),P62蛋白和mRNA的表达增加(P<0.05)。IHC实验提示:与正常组比较,模型组大鼠海马CA3区Beclin1表达增加(P<0.05);与模型组比较,芪灵组大鼠CA3区Beclin1表达减少(P<0.05)。结论CUMS联合孤养诱导的抑郁模型大鼠海马神经元CA1区、CA3区首先出现损伤性改变,CA3区可能首先出现自噬异常激活;芪灵扶正清解方能改善抑郁模型大鼠的行为学指标,对其海马神经细胞具有一定的神经保护作用,其抗抑郁机制可能与调节海马细胞异常自噬有关。

杜建教授应用芪灵扶正清解方治疗肺癌术后临床经验

杜建教授认为肺癌术后的病因病机应当重视手术、放疗和化疗带来的影响,杜建教授运用温病学理论,灵活结合扶正法与清解法,从肺脾肾同治的角度出发,攻补兼施,创立了芪灵扶正清解方,根据肺癌患者气滞、痰湿、血瘀等兼证,以芪灵扶正清解方为基础辨证加减,疗效显著。

魏开建教授运用扶正清解方治疗肿瘤经验

肿瘤已然成为严重威胁中国居民健康和社会发展的重要公共卫生问题之一。魏开建教授长期从事临床、科研、教学工作,治疗肿瘤疾病经验丰富,认为肿瘤疾病的病因病机不外乎正虚和感邪留著两方面,正气的盛衰是肿瘤发生发展的关键。魏教授在临床实践中,发现肿瘤患者多气阴两虚,治疗上以扶正清解方为基础,益气解毒顾阴,同时注重扶正固本,顾护脾胃,攻补兼施,兼顾它证,处方用药灵活,疗效显著。

扶正清解方辅助肺癌化疗对晚期肺癌患者的临床疗效及生活质量的影响

目的探讨扶正清解方辅助肺癌化疗对晚期肺癌患者的临床疗效及生活质量的影响。方法选取80例晚期肺癌患者依照其意愿分为观察组与参考组,各40例,观察组患者在肺癌化疗的基础上采用扶正清解方辅助治疗,参考组患者单纯接受肺癌化疗治疗,观察两组患者治疗后近期效果、临床症状改善情况、1年内生存率以及生活质量。结果观察组与参考组患者治疗后近期治疗总有效率分别为92.5%、75.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者中医症候症状缓解情况显著优于参考组(P<0.05);观察组患者1年内生存率明显大于参考组,患者生存期生活质量显著优于参考组(P<0.05)。结论肺癌晚期患者在接受化疗治疗的同时采用扶正清解方治疗能够提高患者生存期生活质量,有助于延长患者生命期限。

魏开建教授运用扶正清解方治疗大肠癌经验

大肠癌是消化道恶性肿瘤的一部分,包括直肠癌、结肠癌等,是危害全国人民生命安全的恶性肿瘤。魏开建教授经过多年的临床实践,认为大肠癌患者多属气阴两虚、热毒内蕴证,可运用扶正清解方作为基本方对大肠癌进行治疗。以乙状结肠癌术后辅助化疗为例,服用扶正清解方加减后明显改善临床症状,减轻化疗后毒副作用,恢复机体功能。扶正清解方加减对手术、放化疗前后大肠癌患者机体功能的恢复大有裨益。

从Cyclin E1-CDK2-CKIs通路探讨芪灵扶正清解方抑制肝癌细胞株Hep1-6增殖的作用机制

目的从周期蛋白Cyclin E1-细胞周期依赖性蛋白激酶2(CDK2)-CDKs抑制因子CKIs(Cyclin E1-CDK2-CKIs)信号通路角度探讨芪灵扶正清解方(QL)调控小鼠肝癌Hep1-6细胞株增殖的机制.方法体外培养Hep1-6细胞,分别给予不同剂量的QL醇提物(0、31.25、62.5、125、250、500、1000μg/mL)干预Hep1-6细胞株24h、48h和72h.MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期各个时相的比例;Western blot检测CDK2、周期蛋白Cyclin E1、视网膜母细胞瘤Rb、磷酸化Rb(p-Rb)以及CDKs抑制因子(CKIs)p57^(KIP2)和p27^(KIP1)的蛋白水平.结果QL醇提物能显著抑制Hep1-6细胞的生长活力,呈剂量依赖性;Hep1-6细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期的DNA合成被抑制;QL醇提物下调了CDK2、Cyclin E1、p-Rb的蛋白水平,上调了p57^(KIP2)和p27^(KIP1)的蛋白水平.结论QL方通过抑制CDK2与Cyclin E1的结合,同时正向调控CKIs抑制Cyclin E1-CDK2复合物的激酶活性,从两方面抑制下游Rb的磷酸化水平,进而有效抑制肝癌Hep1-6细胞的增殖.

魏开建教授运用扶正清解方治疗大肠癌临证经验

文章总结了魏开建教授治疗大肠癌的临床经验,魏开建教授认为大肠癌的基本病机为“热、毒、痰、瘀、虚”,以邪盛正虚,气阴两虚之证多见,运用扶正清解方加减治疗本病,临床疗效显著。

晚期胃癌应用中药辅助胃癌根治术加化疗的疗效观察及对生活质量的影响

目的探讨晚期胃癌患者应用中药辅助胃癌根治加化疗治疗的临床疗效以及对患者生活质量的影响。方法选取2014年1月至2015年6月收入医院治疗的60例晚期胃癌患者为研究对象,根据治疗方法的不同分为对照组与观察组,每组30例。两组均采取D2根治性切除术联合XELOX辅助化疗,观察组在此基础上增加扶正清解方治疗,采用Karnofsky功能状态评分评价治疗后症状改善情况,比较两组毒副反应发生情况、免疫功能与生活质量。结果观察组治疗效果明显优于对照组;观察组QOL评分高于对照组;观察组出现骨髓抑制、肝功能损害与肾功能损害的例数明显少于对照组;两组治疗后CD3^+与CD4^+值均较治疗前提高,且观察组治疗后CD3^+与CD4^+值高于对照组,上述差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论在胃癌根治术联合化疗的基础上,增加扶正清解方辅助治疗不但能够缓解患者的临床症状,提高患者机体免疫力,而且还可降低毒副反应发生率,可提高患者生活质量,安全性较高,值得临床推广并应用。

药物辅助胃癌根治术用于晚期胃癌治疗中对患者生活质量的影响

目的:探讨药物辅助胃癌根治术用于晚期胃癌治疗中对患者生活质量的影响。方法:晚期胃癌患者98例根据随机数字表法分为治疗组与对照组各49例,两组都给予D2根治性切除术结合XELOX辅助化疗,在此基础上治疗组加用扶正清解方进行治疗。结果:治疗组的Karnofsky评分改善情况明显优于对照组(P<0.05)。治疗组的骨髓抑制、肝功能损伤与肾功能损伤等毒副反应程度与比例明显少于对照组(P<0.05)。治疗后两组的CD3+和CD4+值都明显提高(P<0.05),同时治疗组的CD3+和CD4+值明显高于对照组(P<0.05)。随访到2015年4月,治疗组与对照组的平均生存期为(22.44±2.14)月与(16.98±2.41)月,差异具有流计学意义(P<0.05)。结论:扶正清解方辅助胃癌根治术用于晚期胃癌能有效改善患者的免疫功能,减少化疗毒副作用,从而提高总体治疗效果,延长患者的生存期。

中药介导线粒体防治肝癌的研究进展

肝癌是临床肝病科较为常见的疾病之一,具有高发病率、高复发率及高致死率。近年来线粒体介导的凋亡途径成为防治肝癌的研究热点,如何更好地利用中医药低毒性、多靶点、多环节的优势通过介导线粒体凋亡途径抑制肝癌的发生发展,仍是临床中急需解决的关键问题。从单味中药、中药复方及中药注射液的分子机制方面综述中药介导线粒体防治肝癌的研究进展,并围绕研究中存在的问题进行讨论和展望。