扶正祛瘀通下法对多器官功能障碍综合征大鼠肠屏障功能的干预作用及其机制研究

目的研究扶正祛瘀通下法对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠肠屏障功能的干预作用及其机制。方法30只清洁级Wistar大鼠完全随机分成对照组、MODS组、中药组,各10只,造模前3 d对照组、MODS组予0.9%氯化钠注射液灌胃,中药组予参附桃红承气汤灌胃,MODS组、中药组腹腔注射脂多糖建立MODS模型,对照组灌胃3 d后、MODS组及中药组造模后处死大鼠,取肠系膜淋巴结测定T淋巴细胞阳性表达,经腹主动脉取血测定内毒素、炎性细胞因子水平,分析盲肠内容物菌群变化。结果免疫组织化学染色结果显示,MODS组与中药组CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)T淋巴细胞较对照组的细胞数量明显增加,且中药组CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)T淋巴细胞多于MODS组。中药组和MODS组血浆内毒素、血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素17(IL-17)、IL-23水平均高于对照组,但中药组均低于MODS组[(43.770±16.610)k EU/L比(70.330±7.520)k EU/L、(6.49±0.37)ng/L比(11.65±0.77)ng/L、(2.57±0.06)ng/L比(3.11±0.09)ng/L、(39±5)ng/L比(41±14)ng/L],MODS组血清IL-1β、IL-6水平均高于对照组和中药组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。中药组和MODS组微生物数量及微生物种类均低于对照组,但中药组均高于MODS组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论扶正祛瘀通下法可有效增加MODS大鼠CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)T淋巴细胞数量,下调炎性细胞因子水平,增加肠道微生态多样性,保护肠生物屏障完整性。

基于代谢组学探讨扶正祛瘀通下法治疗脓毒症大鼠心肌损伤作用机制

目的基于代谢组学探讨扶正祛瘀通下法(参附桃红承气汤)治疗脓毒症大鼠心肌损伤的作用机制。方法将30只Wistar大鼠按照随机数字表法分为模型组、实验组和空白对照组,每组10只。采用腹腔注射脂多糖法制备脓毒症大鼠模型。实验组大鼠给予参附桃红承气汤灌胃,模型组给予等量生理盐水灌胃。造模成功后12h观察各组大鼠心功能,随后处死大鼠,取心脏组织并于电镜下观察,同时基于液相色谱-质谱联用技术对大鼠肠道代谢产物进行模式识别与分析,鉴定差异代谢物并分析其富集的代谢通路。结果实验组大鼠左心室射血分数较模型组大鼠显著升高[(72.15±8.09)%比(56.36±5.58)%,P<0.05],但低于空白对照组[(72.15±8.09)%比(82.42±4.12)%,P<0.05];空白对照组大鼠心肌细胞线粒体结构完整无损伤,实验组出现少量线粒体损伤及脊线断裂,而模型组有大量线粒体肿胀、坏死,并且出现脊断裂及空泡化;代谢组学结果方面,在扶正祛瘀通下药物干预前后大鼠肠道代谢谱明显分离,最终筛选出山奈酚、异亮氨酸、柚皮素、芦荟苷、芹菜素、7-脱氢胆固醇、N-甲基酪胺、灵芝酸、5-羟基吲哚乙酸等9种差异代谢物,主要富集于黄酮类合成、氨基酸(异亮氨酸、酪氨酸、色氨酸)代谢、苯丙酸代谢、类固醇激素生物合成等6条代谢通路。结论扶正祛瘀通下法可改善脓毒症大鼠心肌损伤,其机制可能与黄酮类的合成、氨基酸代谢、苯丙酸代谢、类固醇激素生物合成密切相关。

扶正祛瘀通下法对多器官功能障碍综合征大鼠肠机械屏障功能的保护及机制

目的:探讨扶正祛瘀通下法(参附桃红承气汤为方)对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠小肠黏膜损伤的保护作用及其机制。方法:健康清洁级Wistar大鼠50只,随机分为5组:对照组(10只),MODS模型组(10只),中药防治组(分低、中、高剂量3组各10只)。腹腔注射LPS造模24 h后,各组大鼠处死迅速取小肠组织,制作石蜡切片、电镜标本,观察小肠黏膜损伤程度、绒毛变化,留取部分石蜡切片标本用于免疫组织化学染色,观察小肠组织内C-kit和神经递质一氧化氮(NO)、血管活性肠肽(VIP)、P物质(SP)、乙酰胆碱(ACh)的阳性表达。结果:与对照组相比,模型组小肠黏膜充血坏死明显,小肠绒毛大部分脱落、断裂;低、中、高剂量中药防治组小肠组织损伤减轻,尤以高剂量中药防治组为著;模型组与对照组相较,小肠C-kit的细胞数量、抑制性神经递质NO、VIP的表达明显减少,兴奋性神经递质SP、ACh的表达明显增加,低、中剂量中药防治组较模型组无显著差异,高剂量中药防治组的小肠组织间C-kit细胞数量、抑制性神经递质NO、VIP表达较模型组多,但较对照组少,兴奋性神经递质SP、ACh表达较模型组少,但较对照组多。结论:(1)扶正祛瘀通下法可以有效地减轻MODS大鼠小肠黏膜的损伤,防止肠道机械屏障功能进一步被破坏。(2)扶正祛瘀通下法可以有效增加小肠C-kit、NO、VIP的分布,减少SP、ACh的分布,缓解小肠炎性反应,改善小肠蠕动功能,从而达到保护肠屏障功能。(3)扶正祛瘀通下法可通过保护肠屏障功能达到MODS的防治作用。