扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质TGF-β1、E-cadherin和α-SMA表达的影响

[目的]探讨扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质转化生长因子-β1(TGF-β1)、E-钙黏素(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。[方法]采用SD大鼠切除5/6肾脏+1.5%百特腹透液的方法复制大鼠腹膜纤维化模型。扶肾方干预6周后,检测血清学指标肌酐和尿素氮的含量;苏木精-伊红(HE)染色观察腹膜病理改变;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组腹膜间皮标志物E-cadherin和α-SMA的表达;酶联免疫吸附(ELISA)法检测TGF-β1含量的变化。[结果]扶肾方干预后,各组血清肌酐及尿素氮均呈现下降趋势,尤其以高剂量组最为明显(P<0.05);扶肾方组腹膜间皮细胞变性、脱落,炎症细胞浸润以及血管新生现象明显减少;RT-PCR检测结果显示,模型组E-cadherin较正常组表达下降,差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、α-SMA较正常组表达上调,差异有统计学意义(P<0.01),与模型组相比,扶肾方干预后的各组E-cadherin表达均有所上调,且以高剂量组上调最为明显(P<0.01);TGF-β1、α-SMA中、高剂量组有统计学差异(P<0.05或P<0.01),其他组较正常组有下调趋势,低剂量组结果无统计学意义,中、高剂量组结果有统计学差异(P<0.05)。[结论]扶肾方很可能通过抑制TGF-β1,调节E-cadherin和α-SMA表达,从而抑制腹膜间皮细胞间质转化的发生。

扶肾方对尿毒症腹膜透析大鼠腹膜功能及VEGF、TNF-α、IL-12、IFN-γ的影响

目的观察扶肾方对尿毒症腹膜透析大鼠的腹膜功能及腹膜组织VEGF、TNF-α、IL-12、IFN-γ的影响。方法50只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为5组:正常对照组,模型组(尿毒症腹膜透析),模型+扶肾方低剂量干预组,模型+扶肾方高剂量干预组,模型+塞来昔布干预组。采用5/6肾切除法建立尿毒症模型,腹腔注射腹膜透析液建立腹膜透析模型。连续给药4周后留取各组大鼠腹膜组织。HE染色观察腹膜组织形态学变化,腹膜平衡试验检测腹膜转运功能,液相芯片法检测腹膜组织VEGF、TNF-α、IL-12和IFN-γ的含量。结果与正常对照组比较,模型组大鼠腹膜组织VEGF、TNF-α表达上调,IL-12、IFN-γ的表达下调,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,扶肾方低剂量组VEGF、TNF-α表达下调,IL-12、IFN-γ表达上调,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);扶肾方高剂量组和塞来昔布组VEGF表达下调,IL-12、IFN-γ表达上调,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论扶肾方可减轻尿毒症腹膜透析大鼠腹膜损伤、改善腹膜超滤功能,该作用可能与下调腹膜组织血管生成促进因子VEGF、TNF-α的表达,上调血管生成抑制因子IL-12、IFN-γ的表达有关。

扶肾方对大鼠腹膜间皮细胞转分化的影响及机制探讨

目的：观察扶肾方对腹膜透析大鼠腹膜间皮细胞转分化的影响及可能机制。方法：采用SD大鼠切除5/6肾脏＋1.5%百特腹透液的方法复制大鼠腹膜纤维化模型。扶肾方干预6周后,检测血清学指标肌酐和尿素氮的含量;HE观察腹膜形态的变化;RT-PCR法检测各组腹膜间充质标志物Vimentin和α-SMA的表达;ELASA法检测TGF-βRI和TGF-βRII含量的变化。结果：扶肾方干预后,各组血清肌酐及尿素氮均呈现下降趋势,尤其以高剂量组最为明显（P〈0.05）;扶肾方组腹膜间皮细胞变性、脱落,炎症细胞浸润以及血管新生现象明显减少;RT-PCR检测结果显示,与模型组相比,Vimentin各组表达均有所下降,但以中剂量组下调最为明显（P〈0.05）;腹膜纤维化相关因子TGF-βRI和TGF-βRII检测结果中,TGF-βRI的表达呈上升趋势,同模型组相比有显著性差异（P〈0.01,P〈0.05）,TGF-βRII的表达则呈下降趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：扶肾方能够有效抑制腹膜间皮细胞转分化,改善腹膜纤维化,可能与调节TGF-βRI和TGF-βRII的表达有关。

扶肾方调节各种细胞因子干预腹膜间皮细胞EMT的实验研究

目的探讨扶肾方对大鼠腹膜间皮细胞转化生长因子-β受体Ⅰ(TGF-βRⅠ)、TGF-βRⅡ、Smad泛素化相关因子2(Smurf2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)的影响及抑制上皮-间充质转分化(EMT)的作用机制。方法原代培养大鼠腹膜间皮细胞,传至第2代并鉴定后,分为空白对照(C)组,含药血清(B)组,模型(T)组(40μg/L TGF-β1),模型+含药血清(T+B)组,模型+MG132(T+M)组。培养24 h后收集细胞和培养液上清液,采用蛋白印迹法检测Smurf2蛋白水平,qPCR检测各组TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、E-cadherin、ZO-1的m RNA转录水平。结果与C组比较,T组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅡmRNA、Smurf2蛋白表达明显上调(P<0.05);与T组比较,B组E-cadherin、ZO-1 mRNA表达均上调,T+B组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅡmRNA表达均上调,Smurf2蛋白表达下调,T+M组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅠmRNA、Smurf2蛋白表达均下调,TGF-β1RⅡm RNA表达上调(P<0.05);与B组比较,T+B组和T+M组E-cadherin mRNA表达下调,T+M组ZO-1、TGF-β1RⅠm RNA表达下调(P<0.05);与T+B组比较,T+M组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1R,TGF-β1RⅡmRNA表达均下调(P<0.05)。结论扶肾方抑制大鼠腹膜间皮细胞EMT可能与上调TGF-βRⅡmRNA转录,下调Smurf2蛋白含量,促进E-cadherin、ZO-1 mRNA的转录相关。

扶肾方对UUO大鼠肾脏病理及CTGF、FN、Vimentin表达的影响

[目的]研究扶肾方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)、纤连蛋白(FN)、波形蛋白(Vimentin)表达的影响。[方法]健康雄性SD大鼠50只,适应性饲养1周后,按照随机原则将大鼠分为假手术组(12只)与造模组(38只),造模组在手术后7 d随机选取大鼠2只以验证造模是否成功,余造模组大鼠随机分为模型组(12只)、中药低、高剂量组(各12只)。除假手术组外,其余各组均以单侧输尿管结扎的方法制作肾间质纤维化模型,假手术组仅游离输尿管。各组大鼠在术后7 d开始灌胃给药,所有大鼠均按照每只每天2 mL进行灌胃,假手术组与模型组灌服生理盐水,中药低剂量组和高剂量组分别按照扶肾方溶度2.52和5.04 g/mL进行灌胃。用苏木精-伊红(HE)染色及电镜观察肾脏病理形态变化;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测肾组织CTGF、FN、Vimentin的表达。[结果]光镜下观察,HE染色示假手术组肾小球形态完整,肾小管结构正常,肾间质正常;模型组术后28 d,肾小球数量减少,肾皮质显著变薄,肾小管萎缩、坏死、消失明显,肾间质纤维化程度严重;中药低、高剂量组肾组织病变较模型组轻。电镜示对比假手术组,模型组肾组织病变明显,中药低、高剂量组肾组织病变较模型组轻。Western Blot检测显示,在术后14、28 d时,与假手术组比较,模型组、中药各剂量组CTGF、FN、Vimentin表达明显增多(P<0.05);中药低、高剂量组与模型组比较,在术后14 d CTGF、FN、Vimentin表达明显下降(P<0.05);与低剂量组比较,在术后28 d高剂量组CTGF、FN、Vimentin表达明显下降(P<0.05)。[结论]扶肾方可以降低UUO大鼠CTGF、FN、Vimentin的表达,随着梗阻时间的延长,高剂量效果更好。

扶肾方对尿毒症腹膜透析大鼠腹膜超滤功能及VEGF-Notch信号通路的影响

目的探讨扶肾方对尿毒症腹膜透析大鼠的腹膜超滤功能及腹膜组织Notch1、delta-样配体4(Dll4)、Notch胞内域(NICD)、Hes1、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)的影响。方法采用随机数字表法将50只雄性SD大鼠分为正常组、模型组、扶肾方低剂量组(模型+扶肾方324 g/L灌胃)、扶肾方高剂量组(模型+扶肾方648 g/L灌胃)和塞来昔布组(模型+塞来昔布1.8 g/L灌胃),每组10只。规律腹腔注射腹膜透析液4周,行腹膜平衡实验计算超滤量后处死大鼠,取腹膜组织,HE染色观察腹膜形态学变化,采用实时荧光定量PCR(q PCR)和蛋白印迹法检测Notch1、Dll4、NICD、Hes1、VEGF、VEGFR-2的mRNA和蛋白表达,蛋白印迹法检测p-VEGFR-2的蛋白水平。结果模型组、扶肾方低剂量组、扶肾方高剂量组及塞来昔布组大鼠腹膜超滤量明显低于正常组,扶肾方高剂量组与塞来昔布组超滤量高于模型组和扶肾方低剂量组,塞来昔布组超滤量低于扶肾方高剂量组(P<0.05)。腹膜HE染色显示,扶肾方低剂量组与高剂量组大鼠腹膜新生血管较模型组明显减少。与正常组比较,模型组大鼠腹膜组织Notch1、Dll4、NICD、Hes1 mRNA及蛋白表达均下调,VEGFR-2、VEGF mRNA及VEGFR-2、p-VEGFR-2、VEGF蛋白表达上调(P<0.05)。与模型组比较,扶肾方低剂量组NICD、Hes1 mRNA及Notch1、Dll4、NICD、Hes1蛋白表达上调,VEGFR-2、VEGF mRNA及VEGFR-2、p-VEGFR-2、VEGF蛋白表达下调(P<0.05);扶肾方高剂量组Notch1、Dll4、NICD、Hes1 mRNA及Dll4、Hes1蛋白表达上调,VEGFR-2、VEGF mRNA及VEGFR-2、p-VEGFR-2、VEGF蛋白表达下调(P<0.05);塞来昔布组Notch1 mRNA及Notch1、Dll4蛋白表达上调,VEGFR-2、VEGF mRNA及p-VEGFR-2、VEGFR-2、VEGF蛋白表达下调(P<0.05)。结论扶肾方可改善腹膜超滤功能,该作用可能与上调腹膜组织Notch1、Dll4、NICD、Hes1 mRNA及蛋白表达,下调VEGFR-2、VEGF mRNA及VEGFR-2、p-VEGFR-2、VEGF蛋白表达有关。

扶肾方加减治疗腹膜透析并发胃肠功能紊乱的临床应用

胃肠功能紊乱是腹膜透析(PD)的并发症之一,患者多表现为反复发作的腹痛、腹胀、呕吐、便秘或腹泻等症,严重影响腹透患者的生存和透析质量。现代医学认为肾功能衰竭和PD导致的内环境变化均为发病的原因,从中医机理分析多责之于透析液长期存腹导致的三焦湿气弥漫,脾胃气机受阻。针对这一病机,我中心以健脾和中、通腑泄浊之扶肾方为基础方,临证加减或配合针灸、灌肠等疗法治疗该病取得一定的疗效。现就PD并发胃肠功能紊乱的相关病因和扶肾方的临床加减应用进行分析和探讨,以飨同道。

基于JAK-STATs通路探讨扶肾方对肾衰模型肠黏膜机械屏障的修复机制

目的 探讨扶肾方对肾衰模型肠黏膜机械屏障的修复机制研究。方法 将正常人肠上皮细胞系分对照组、低剂量尿素模型组、高剂量尿素模型组、低剂量尿素脲酶组、高剂量尿素脲酶组、JAK抑制剂组、扶肾方低剂量含药血清组、扶肾方高剂量含药血清组。第6周末检测JAM、ZO-1、Claudin、Occludin;实时荧光定量PCR法分别检测JAM、ZO-1、Claudin、Occludin。结果 与对照组比较,模型组中尿素脲酶组可以显著升高JAK及STAT3蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),并下调了Claudin-1、Occludin、JAM、ZO-1的相对表达量(P<0.01),扶肾方含药血清组则可以明显抑制JAK及STAT3蛋白的表达,并上调Occludin、Claudin、ZO-1及JAM蛋白的表达及四种蛋白基因的相对表达量(P<0.05,P<0.01);扶肾方含药血清组与尿素脲酶组相比,可极显著上调Occludin、Claudin-1、ZO-1、JAM的相对表达量,并下调JAK2、STAT3的表达量(P<0.01),与JAK抑制剂作用相近,且效果更优。结论 证实JAK-STATs信号通路在尿毒素诱导的肠道微炎症模型中的作用机制,扶肾方可有效调控JAK-STATs信号通路的转导,并可以直接影响肠黏膜上皮屏障的完整性。

基于RNA-seq探讨扶肾降浊方及蚓激酶对肾间质纤维化的作用机制

目的:探讨扶肾降浊方、蚓激酶及联合用药对肾间质纤维化的作用机制。方法:雄性Sprauge-Dawley(SD)大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、扶肾降浊方组、蚓激酶组和联合用药组,每组12只,术后第2天开始,每天给药1次,扶肾降浊方灌胃给药:29 g/(kg·d),蚓激酶腹腔注射给药:36万U/(kg·d),假手术组、模型组给予等体积生理盐水,于第7、14天剖杀。HE和Masson染色评价纤维化改变;RNA测序(RNA-seq)检测第7天模型组和治疗组的基因表达;Western印迹检测第7、14天肾脏中纤维化标志蛋白[纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、Collagen-1、纤连蛋白(Fibronectin)]、上皮-间充质转化(EMT)标志蛋白(E-cad、-SMA、Vimentin)、Flna、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和细胞外信号调节激酶(ERK)的蛋白水平。结果:病理显示造模7天后肾脏出现明显纤维化改变(P<0.01),随造模时延长而加重(P<0.01);扶肾降浊方、蚓激酶及联合用药对纤维化有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01),第7天,扶肾降浊方较蚓激酶作用更为明显(P<0.01);第14天,蚓激酶较扶肾降浊方作用更为明显(P<0.05),两个时期均以联合用药效果最佳。同时,造模后肾脏中的纤维化和EMT标志蛋白显著升高(均P<0.01),扶肾降浊方、蚓激酶及联合用药对纤维化和EMT标志蛋白均有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01),第7天,扶肾降浊方较蚓激酶作用更为明显(P<0.05或P<0.01);第14天,蚓激酶较扶肾降浊方作用更为明显(P<0.05或P<0.01),两个时期均以联合用药作用最明显(P<0.05或P<0.01)。机制上,第7、14天,造模后各组Flna和p-ERK蛋白表达均明显升高(均P<0.01),扶肾降浊方、蚓激酶及联合用药均可抑制Flna和p-ERK的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:扶肾降浊方、蚓激酶及联合用药均能抑制肾间质纤维化,病变早期应用扶肾降浊方效果优于蚓激酶且联合用药优于单独用药,其共同机制可能通过抑制Flna基因及ERK的磷酸化,抑制表型转化,减少细胞外基质的产生而起作用。

扶肾降浊方含药血清对肾小管间质损害大鼠成纤维细胞TGF-β_1/Smads信号转导通路的影响

目的:探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾小管间质损害的疗效机制。方法:采用扶肾降浊方水溶液灌胃干预Wistar大鼠常规制备含药血清;在Ms PGN动物模型基础上,延长造模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型,体外培养12、16和20周模型大鼠间质成纤维细胞;采用real-time PCR和Western blotting法检测扶肾降浊方含药血清对病理状态间质成纤维细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3和Smad7 mRNA及蛋白表达的影响。结果:Ms PGN大鼠间质成纤维细胞TGF-β1和Smad3 mRNA和蛋白表达上调,Smad7 mRNA和蛋白表达下调。扶肾降浊方含药血清随着给药周期的延长可部分逆转Ms PGN间质损害造成的上述mRNA和蛋白表达异常。结论:扶肾降浊方含药血清对Ms PGN大鼠间质成纤维细胞保护作用可能与调节TGF-β1/Smads信号转导通路有关。

扶肾降浊方含药血清对肾小管间质损害大鼠成纤维细胞抗纤维化因子HGF和BMP-7的影响

目的:探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾小管间质损害的疗效及机制。方法:采用扶肾降浊方水溶液灌胃Wistar大鼠常规制备含药血清,在Ms PGN动物模型的基础上,延长造模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型,体外培养造模12、16和20周末大鼠间质成纤维细胞,采用real-time PCR和Western blotting法检测扶肾降浊方含药血清对病理状态间质成纤维细胞中抗纤维化因子肝细胞生长因子(HGF)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)mRNA及蛋白表达的影响。结果:病理状态间质成纤维细胞中抗纤维化因子HGF、BMP-7 mRNA和蛋白表达下调,扶肾降浊方含药血清随着给药周期的延长可部分逆转间质损害造成的上述mRNA和蛋白表达异常。结论:扶肾降浊方含药血清对Ms PGN大鼠间质成纤维细胞的保护作用可能与调节抗纤维化因子HGF、BMP-7 mRNA和蛋白表达有关。

扶肾降浊方对系膜增生性肾炎肾小管间质损害大鼠COLⅠ及COLⅢ蛋白和基因表达的影响

目的观察扶肾降浊方对系膜增生性肾炎大鼠肾小管间质细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原(COLⅠ及COLⅢ)蛋白和基因的调节作用。方法采用系膜增生性肾炎模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、扶肾降浊方中药组、贝那普利西药组。采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法分别检测实验12周、16周和20周末各组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和基因的表达。结果 12周、16周和20周末的模型组肾脏COLⅠ及COLⅢ蛋白表达呈强阳性(P<0.01),COLⅠ及COLⅢ基因表达上调(P<0.01),扶肾降浊方中药组和贝那普利组大鼠肾脏COLⅠ及COLⅢ蛋白表达均较模型组降低(P<0.01),COLⅠ及COLⅢ基因表达亦均较模型组下调(P<0.05);随着造模时间的延长,模型组肾小管COLⅠ及COLⅢ蛋白和基因表达均呈升高趋势,治疗组仍作用明显(P<0.05)。结论扶肾降浊方可通过基因和蛋白水平调节COLⅠ和COLⅢ在肾脏的表达,减少COLⅠ和COLⅢ在肾小管间质的积聚以减轻肾间质纤维化,从而对肾小管间质损害起到防治作用。

扶肾降浊方对肾小管间质损害大鼠抗纤维化因子HGF、BMP-7的影响

[目的]探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾小管间质损害的疗效机制。[方法]在Ms PGN动物模型基础上,延长造模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型。实验设中药组、西药组、模型组及空白组。中药组给予扶肾降浊方,西药组给予贝那普利,模型组和空白组给予生理盐水,连续20周,分别于实验第12、16和20周末取材,采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测大鼠肾组织抗纤维化因子肝细胞生长因子(HGF)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)m RNA及蛋白表达水平。[结果]模型大鼠肾组织HGF、BMP-7m RNA和蛋白表达下调,扶肾降浊方随着给药周期的延长可部分逆转间质损害造成的上述m RNA和蛋白表达异常。[结论]扶肾降浊方对Ms PGN大鼠肾小管间质损害保护作用机制可能与调节抗纤维化因子HGF、BMP-7 m RNA和蛋白表达有关。

西药联合温肾扶脾方治疗原发性甲状腺功能减退65例临床观察

目的:观察原发性甲状腺功能减退患者采用西药联合温肾扶脾方治疗的临床疗效。方法:选取129例原发性甲状腺功能减退患者作为研究对象,随机数字表法分为对照组64例和观察组65例,对照组接受左甲状腺素钠片治疗;观察组在对照组基础上加用温肾扶脾方治疗,比较两组治疗效果、甲状腺功能及中医证候积分。结果:治疗后,观察组FT3、FT4均高于对照组,TSH、TG-Ab及TPO-Ab均低于对照组(P<0.05);观察组MPO、MCP-1、中医证候积分均低于对照组,总有效率高于对照组(P<0.05)。结论:西药联合温肾扶脾方治疗原发性甲状腺功能减退患者效果较好,其能显著调节患者免疫功能,减轻甲状腺炎对甲状腺损伤,改善甲状腺分泌功能,提高甲状腺激素水平,缓解甲减症状。

余承惠·扶正祛瘀清肾方

1939年生，江苏徐州人，中西医结合主任医师，江苏省老中医药专家继承工作指导老师，原江苏省中西医结合学会肾病专业委员会委员、免疫病专业委员会委员。

扶肾利湿方联合连续肾脏替代(CRRT)治疗横纹肌溶解致急性肾衰竭(正虚邪实癃闭)随机平行对照研究

[目的]观察扶肾利湿方联合连续肾脏替代(CRRT)治疗横纹肌溶解致急性肾衰竭(正虚邪实癃闭)疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将36例住院患者简单随机分为两组。对照组18例连续肾脏替代(CRRT)。治疗组18例扶肾利湿方:黄芪30g,熟地黄20g,党参10g,土茯苓20g,车前子15g,丹参20g,苍术10g,生白术、炒薏苡仁、牛膝各15g,川芎12g,水煎200mL,1剂/d,早晚温服;连续肾脏替代治疗同对照组。连续治疗1个月为1疗程。观测临床症状、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、血肌红蛋白(Mb)、BUN、Scr、β2微球蛋白、不良反应。治疗1疗程(1个月),判定疗效。[结果]治疗组显效10例,有效5例,无效3例,总有效率83.33%;对照组显效8例,有效5例,无效5例,总有效率72.22%;治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。BUN、Scr、β2微球蛋白两组均有改善(P<0.01,P<0.05),治疗组改善优于对照组(P<0.01)。CK、LDH、Mb两组均有改善(P<0.01,P<0.05),治疗组改善优于对照组(P<0.01)。[结论]扶肾利湿方联合连续肾脏替代(CRRT)治疗横纹肌溶解致急性肾衰竭(正虚邪实癃闭),疗效满意,无严重不良反应,值得推广。

扶肾降浊方对肾间质纤维化大鼠的治疗作用及TGF-β_1,HGF,ColⅠ蛋白表达的影响

目的:观察扶肾降浊方对肾间质纤维化大鼠的生化指标,肾组织形态及纤维化因子转化生长因子-β1(TGF-β1),肝细胞生长因子(HGF),Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白表达的影响。方法:在系膜增生性肾炎(Ms PGN)的基础上,延长造模至12周,使其自然发展成肾间质纤维化模型,24只大鼠随机分为正常组、模型组、扶肾降浊方中药组、贝那普利西药组,分别检测大鼠血清尿素氮(BUN),血清肌酐(SCr),测定24 h蛋白尿,在光镜下观察肾组织切片病理改变,运用免疫组化法观察肾组织切片中TGF-β1,HGF,ColⅠ蛋白的表达情况。结果:通过对大鼠血清BUN,SCr,24 h蛋白尿定量的检测和肾组织形态的观察,模型组较正常组有明显的肾间质损伤(P<0.01),中药组和贝纳普利组损伤程度均减轻(P<0.01);第12周末,造模各组肾小管间质TGF-β1和ColⅠ蛋白表达均高于正常组(P<0.01),扶肾降浊方组及贝纳普利组均显著低于模型组(P<0.01);而模型组HGF蛋白表达低于正常组(P<0.01),扶肾降浊方组及贝纳普利组均高于模型组(P<0.01)。结论:扶肾降浊方可抑制TGF-β1和ColⅠ蛋白表达,促进HGF蛋白的升高,对肾间质纤维化有明显的保护作用。

扶肾降浊方对肾小管间质损害大鼠TGF-β 1/Smads/ILK信号转导通路的影响

目的研究扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)大鼠肾小管间质损害的疗效机制。方法在MsPGN动物模型基础上,延长建模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型。实验设中药组、西药组、模型组及空白组。中药组给予扶肾降浊方17.01g·kg-1灌服,西药组以贝那普利1.8mg·kg-1灌服,模型组和空白组给予等量生理盐水,连续20周,分别于实验第12,16和20周末剖取大鼠肾组织,采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad7及整合素连接激酶(ILK) mRNA表达水平。结果模型大鼠肾组织TGF-β1/Smads/ILK信号转导通路发生改变,其中TGF-β1、Smad3、ILK mRNA表达上调,Smad7 mRNA表达下调。扶肾降浊方随着给药周期的延长能部分逆转肾小管损害造成的上述mRNA表达异常。结论扶肾降浊方对MsPGN大鼠肾小管间质损害保护作用机制可能与调节TGF-β1/Smads/ILK信号转导通路有关。