Survivin——一个新的肿瘤特异性的抑制凋亡因子

Survivin(SVV)是IAP(inhibitorofapoptosis)家族的一个新成员。具有抑制细胞凋亡的作用,并在细胞的有丝分裂和胞质分裂中起重要的作用。研究表明SVV是一个肿瘤特异性的抑制凋亡因子它在成熟的终末分化组织中基本无表达,而在胚胎发育过程中和人的肿瘤组织中表达,SVV的过度表达是提示肿瘤预后不良的一个因素,并可能是导致肿瘤细胞耐药性的因素。SVV是肿瘤靶向治疗的一个很好的靶基因蛋白。

X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1通过自噬途径调控Caspase 1介导的胃肠道间质瘤细胞焦亡

目的:探究X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)对人胃肠道间质瘤(GIST)细胞中半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase 1)介导的细胞焦亡的影响及机制。方法:实时荧光定量PCR和Western blot检测人正常胃黏膜上皮细胞系(RGM-1)和GIST细胞系(GIST-T1、GIST-430、GIST-882)中XAF1的表达水平;采用脂质体介导转染法将pcDNA3.1-XAF1重组质粒染进GIST-882细胞,以构建高表达XAF1的GIST-882细胞。GIST-882细胞分为对照组、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1空载体质粒)、pcDNA3.1-XAF1组(转染pcDNA3.1-XAF1重组质粒)、pcDNA3.1-XAF1+Rap组(转染pcDNA3.1-XAF1重组质粒并给予自噬激活剂雷帕霉素处理),免疫荧光染色检测各组细胞内微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达情况,Western blot检测各组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与Beclin1蛋白表达水平,ELISA法检测各组细胞上清中白细胞介素,IL-1β、IL-18含量,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测各组细胞LDH释放率,Western blot检测各组细胞中Caspase-1及其活化形式cleaved-Caspase-1、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)蛋白表达水平。结果:与RGM-1细胞比较,GIST-T1、GIST-430、GIST-882细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量显著减少(P<0.05);细胞转染后,pcDNA3.1-XAF1组GIST-882细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于pcDNA3.1组、对照组(P<0.05)。与对照组比较,pcDNA3.1-XAF1组GIST-882细胞内LC3荧光强度明显减弱,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白相对表达量显著减少(P<0.05),细胞上清液IL-1β、IL-18含量及LDH释放率显著升高(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量也显著增加(P<0.05);与pcDNA3.1-XAF1组比较,pcDNA3.1-XAF1+Rap组GIST-882细胞内LC3荧光强度明显增强,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白相对表达量显著增加(P<0.05),同时,细胞上清液IL-1β、IL-18含量及LDH释放率显著下降(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量也显著减少(P<0.05)。结论:XAF1在GIST细胞中表达下降,提高XAF1表达能通过抑制自噬从而促进Caspase 1介导的GIST细胞焦亡,发挥抗肿瘤作用。

凋亡抑制因子存活素的研究进展

凋亡抑制因子存活素(survivin)在细胞中呈周期依赖性表达,与有丝分裂期纺锤体微管相互作用,调节G2/M期,并可直接抑制caspase-3和caspase-7的活性。在肿瘤发生发展中,存活素与肿瘤细胞的凋亡负相关,与细胞增殖活性和血管生成正相关。在人类肿瘤中,存活素表达上调可预示生存期缩短和预后不良。体内、外研究中应用存活素反义核酸和突变体可诱导肿瘤细胞凋亡,使肿瘤细胞的生长减弱,并可增加肿瘤细胞对化疗和X射线辐射的敏感性。提示存活素可能是肿瘤诊断和治疗的新靶点。

凋亡抑制因子survivin在喉鳞癌中表达及其临床意义

目的 探讨凋亡抑制因子survivin在喉鳞癌中的表达及临床意义。方法 应用免疫组化SABC方法检测 5 4例喉鳞癌手术切除标本石蜡切片组织中survivin的表达 ,并以 10例声带息肉组织为对照。结果 survivin在声带息肉中不表达 ;在 5 4例喉鳞癌中 ,38例 ( 70 .4 % )表达阳性 ;survivin阳性表达率与喉癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、临床分型无相关性 (P >0 .0 5 ) ,与喉癌临床分期、组织学分级、淋巴结转移呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论 凋亡抑制因子survivin的异常表达所引起的凋亡抑制与喉鳞癌的发生发展相关 ,可作为肿瘤诊断、预后和治疗的一个新指标。

凋亡抑制因子Livin在喉鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制因子L ivin在喉鳞癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测40例喉癌患者喉鳞癌组织及外周血细胞中L ivin的表达,并以声带息肉患者和正常人外周血作对照。结果在40例喉鳞癌标本中,L ivinα在26例(65%)癌组织中表达阳性,在17例(42.5%)外周血细胞中表达阳性;L ivinβ在喉癌组织及外周血细胞和声带患者中均不表达。L ivinα的阳性表达率与喉癌患者的年龄、性别、肿瘤部位、分化程度无相关性(P>0.05),与临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论凋亡抑制因子L ivinα在喉鳞癌组织和血液中高表达且与喉癌淋巴结转移、临床分期密切相关。

凋亡抑制因子Livin在口腔鳞癌及癌前病变中的表达及意义

目的探讨凋亡抑制蛋白家族(IAP家族)新的凋亡抑制因子Livin在人口腔鳞癌及癌前病变中的表达及意义。方法运用组织芯片技术和免疫组织化学SABC法检测Livin在正常黏膜组织(5例)、癌前病变(49例)、鳞癌(36例)的表达情况。结果Livin在正常口腔黏膜组织中呈弱阳性表达,癌前病变中呈阳性表达(89.8%),而在口腔鳞癌呈强阳性表达(92.2%);其表达程度随癌病变程度加重而增加。结论凋亡抑制因子Livin在口腔鳞癌表达与肿瘤分化程度密切相关。

凋亡抑制因子Survivin的研究进展

Survivin是凋亡抑制因子家族的新成员，是迄今发现的最强大的凋亡抑制因子。Survivin兼有调节细胞周期和抑制细胞凋亡的双重作用，对细胞存活至关重要；Survivin在正常组织和肿瘤组织中的差异性表达，能准确反映肿瘤分级、淋巴转移、放化疗的疗效、复发倾向及预后。

凋亡抑制因子反义寡核苷酸对肝癌细胞生物学作用

目的 :探讨survivin反义寡核苷酸对人肝癌细胞凋亡、增殖、化疗药物敏感性的影响 .方法 :设计合成特异性survivin的反义寡核苷酸 (ASODN) .以高表达survivin基因的人肝癌细胞系 (SMMC 772 1 )为靶细胞、ASODN为阻断剂 ,Westernblot法检测细胞survivin表达情况 ,通过MTT试验观察ASODN对该细胞系的生长抑制作用 ,倒置显微镜观察细胞形态变化 ,流式细胞仪分析细胞增殖周期 ,MTT法检测survivin表达抑制前后细胞对紫杉醇敏感性影响 .结果 :ASODN明显抑制了SMMC 772 1肝癌细胞的生长 ,细胞分裂阻滞在分裂期的中期 ,并诱导细胞发生凋亡 ,而各对照组细胞生长良好 ;各A SODN药物组细胞凋亡指数明显高于各对照组 (P <0 .0 5 )且细胞增殖指数明显低于各对照组 (P <0 .0 5 ) ;紫杉醇药物组细胞IC5 0低于对照组 (1 6 .2± 2 .2 ) μg/Lvs (35 .5± 4 .3) μg/L ,P<0 .0 1 .结论 :survivinASODN能下调其蛋白表达 ,诱导人肝癌细胞凋亡 ,抑制细胞增殖 ,增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性 .

凋亡抑制因子Livin和细胞周期蛋白D1在外鼻基底细胞癌的表达及意义

目的检测凋亡抑制因子Livin和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在外鼻基底细胞癌中的表达,探讨两者在外鼻基底细胞癌发生、发展过程中的作用及其相关性。方法采用免疫组织化学技术检测凋亡抑制因子Livin和Cyclin D1在30例外鼻基底细胞癌和18例外鼻正常组织中的表达,并观察两者在外鼻基底细胞癌表达的相关性。结果 Livin和Cyclin Dl在外鼻基底细胞癌组织中阳性表达率53.33%(16/30)和63.33%(19/30),明显高于外鼻正常组织11.11%(2/18)和16.67%(3/18),差异均有显著性(P<0.01)。两者在外鼻基底细胞癌中的表达呈正相关。结论凋亡抑制因子Livin和Cyclin D1均参与外鼻基底细胞癌的发生、发展过程,并且两者之间存在反馈调节机制,在外鼻基底细胞癌的形成中起协同作用。

老年冠心病患者血浆中细胞凋亡抑制因子和炎性因子的变化及意义

目的:探讨老年冠心病患者血浆中细胞凋亡抑制因子和炎性因子的改变及意义。方法:120例老年冠心病患者分为稳定性心绞痛、不稳定性心绞痛和急性心肌梗死三组,40例非冠心病患者为对照组,采用酶联免疫吸附法测定血浆中细胞凋亡抑制因子、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6及超敏C反应蛋白水平。结果:急性心肌梗死组及不稳定性心绞痛组血浆中细胞凋亡抑制因子、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6及超敏C反应蛋白水平高于稳定性心绞痛组(P<0.05),急性心肌梗死组与不稳定性心绞痛组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高水平的血浆中细胞凋亡抑制因子可能与急性冠状动脉综合征有关,可作为判断动脉粥样硬化斑块稳定性的指标,炎症对破坏动脉粥样硬化斑块稳定性起着促进作用。

新的凋亡抑制因子Livin

Livin是新近发现的一个凋亡抑制因子 ,属于抑制细胞凋亡蛋白 (inhibitorofapoptosisprotein ,IAP)家族的新成员 ,主要通过抑制胱天蛋白酶 3/ 7/ 9(caspase 3/ 7/ 9)的活性来阻断细胞凋亡过程。Livin特异地表达于胚胎发育组织和大多数实体瘤 ,正常成人的绝大多数组织中也有表达。Livin抑制细胞凋亡 ,与肿瘤的发生、发展及预后相关 ,有望成为肿瘤治疗的新靶点。

凋亡抑制因子Survivin在喉癌中的表达及其意义

目的:检测凋亡抑制因子Survivin在喉癌组织中的表达及其与喉癌的临床、病理特性之间的关系。方法:取石蜡包埋喉鳞状细胞癌标本33例,声带息肉21例,应用免疫组化SABC法检测Survivin在喉癌和声带息肉组织中的表达。结果:Survivin在喉癌组织中的表达率为63.6%,在声带息肉组织中的表达率为28.6%,二者有统计学差异(P<0.05)。而Survivin的表达与喉癌的临床分期、组织学分级、淋巴结转移和患者年龄、性别等无关。结论:凋亡抑制因子Survivin在喉癌组织中高表达,在声带息肉中低表达,与喉癌的发生、发展密切相关。

p53凋亡刺激蛋白抑制因子表达水平与鼻咽癌临床病理学特征的关系

目的探讨p53凋亡刺激蛋白抑制因子(iASPP)表达水平与鼻咽癌临床病理学特征的关系。方法采用免疫组化法检测iASPP在62例鼻咽癌患者鼻咽癌组织中的表达情况,比较不同临床病理特征者的iASPP表达情况。结果 62例患者中iASPP阳性表达者44例(71.0%),阴性表达者18例(29.0%)。不同性别、年龄、病理分型、T分期和临床分期患者的i ASPP阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P均>0.05),而不同N分期患者的iASPP阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。N分期与iASPP阳性表达率呈正相关(r=0.368,P=0.003)。结论鼻咽癌患者的N分期与i ASPP阳性表达有关,iASPP的表达水平有可能成为鼻咽癌预后的预测指标。

凋亡抑制因子反义核酸对肝癌细胞生物学作用研究

目的探讨survivin反义寡核苷酸对人肝癌细胞凋亡、增殖的影响。方法设计合成特异性sur-vivin的反义寡核苷酸(ASODN)。以高表达survivin基因的人肝癌细胞系(SMMC-7721)为靶细胞、反义sur vivin(AS-ODN)为阻断剂,倒置显微镜观察细胞形态变化,WesternBlot法检测细胞survivin表达情况,MTT试验观察AS-ODN对该细胞系的生长抑制作用,流式细胞仪分析细胞增殖周期。结果AS-ODN明显抑制了SMMC-7721肝癌细胞的生长,细胞分裂阻滞在分裂期的中期,并诱导细胞发生凋亡,而各对照组细胞生长良好,细胞增殖指数明显低于各对照组(P<0.05)。结论survivingASODN能下调其蛋白表达,诱导人肝癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。

宫颈癌患者miR指标与细胞凋亡促进因子、抑制因子表达的关系探究

目的:探究宫颈癌患者miR指标与细胞凋亡促进因子、抑制因子表达的关系。方法:选取2019年6月-2020年7月本院收治的60例宫颈癌患者作为观察组,同时期60例子宫肌瘤患者作为对照组。检测与比较两组组织miR指标(miR-19a、miR-34a)与细胞凋亡促进因子(Bax、caspase-3及caspase-7)、抑制因子(Bcl-2、Fas及FasL),并比较观察组不同分期、病理分级及淋巴结转移情况患者的检测结果,采用Pearson相关性分析miR指标与上述细胞凋亡促进因子、抑制因子的关系。结果:观察组组织miR-19a、细胞凋亡抑制因子均显著高于对照组,组织miR-34a、细胞凋亡促进因子均显著低于对照组,观察组不同分期、病理分级及淋巴结转移情况患者检测结果比较,差异均有统计学意义(P<0.001),Pearson相关性分析显示,宫颈癌组织miR-19a与细胞凋亡抑制因子呈正相关,与细胞凋亡促进因子呈负相关(P<0.05);宫颈癌组织miR-34a与细胞凋亡抑制因子呈负相关,与细胞凋亡促进因子呈正相关(P<0.05)。结论:宫颈癌患者组织miR指标与细胞凋亡促进因子、抑制因子均呈现异常表达的状态,且其之间有密切的关系,因此在宫颈癌患者中的检测价值较高。

干扰日本血吸虫凋亡抑制因子最佳siRNA分子的筛选

目的筛选干扰日本血吸虫凋亡抑制因子(Inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP)较好的siRNA分子。方法应用生物信息学设计了针对SjIAP的3对siRNA分子。利用脂质体将每对siRNA分子和表达IAP的重组质粒传染到HEK293T细胞中,利用实时定量RT-PCR和免疫印迹检测IAP的表达。将siRNA分子与日本血吸虫童虫(12d)进行体外共培养,利用实时定量RT-PCR和免疫印迹检测虫体内的IAP表达。结果细胞转染实验的实时定量RTPCR和免疫印迹分析表明本研究获得了2个干扰SjIAP较好的siRNA分子,且其中1对siRNA分子可显著抑制日本血吸虫虫体内IAP蛋白的表达,同时虫体Caspase活性有所上升。结论本研究获得了2个干扰日本血吸虫IAP较好的siRNA分子,为进一步利用RNA干扰研究血吸虫IAP的功能奠定了前期基础。

细胞凋亡抑制因子在心肌梗死急性期的动态变化

目的:观察并分析心肌梗死急性期,细胞凋亡抑制因子(Fas/APO-1)的动态变化和临床意义.方法:41例急性心肌梗死患者,分别于发病24小时内、7天和2～4周3个时间段采血.34例年龄和性别相匹配的健康人作为对照.并以60岁为界分两个年龄组,比较不同时间段Fas/APO-1水平的差异.应用ELISA的方法,检测血清中Fas/APO-1的水平.结果:心肌梗死急性期3个时间段的Fas/APO-1水平均明显高于对照组(P<0.05),但以梗死后24小时Fas/APO-1的水平为最高.60岁以上组Fas/APO-1的水平高于60岁以下组,但只有梗死后24小时,两组的结果有统计学意义(P<0.05).结论:在心肌梗死急性期中血清Fas/APO-1的变化趋势与心肌细胞凋亡的变化规律相近.年龄对心肌急性期血清中Fas/APO-1水平有一定影响,这种影响以心肌梗死24小时为著.

X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究

目的研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液(PBS),隔天注射1次,疗程2周。每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异。原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度(MVD)。结果与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小(P<0.05或P<0.01),而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高(P<0.01)。结论腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关。

细胞凋亡抑制因子在老年慢性心力衰竭中的变化及临床意义

目的观察细胞凋亡抑制因子(Fas/APO-1)在老年慢性心力衰竭(CHF)患者中的变化及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)苯那普利(商品名:洛丁新)治疗对Fas/APO-1的影响。方法选择CHF患者54例,随机分为:A组(26例)即常规治疗组,给予常规抗心力衰竭治疗;B组(28例)在常规治疗基础上加用洛丁新(10 mg,qd)治疗2周,分别于治疗前后采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA法)测定血清Fas/APO-1水平,采用超声心动图诊断方法测定左心室收缩末径(LVESD)、左心室舒张末径(LVEDD)和左心室射血分数(LVEF)等。另设健康对照组(C组)20例。结果心力衰竭患者血清Fas/APO-1水平明显高于健康对照组,洛丁新治疗2周后,较常规治疗组血清Fas/APO-1水平明显下降,LVESD和LVEDD明显减低,SV和LVEF明显升高,差异均有显著性;Fas/APO-1水平与LVEF呈负相关。结论洛丁新可明显改善CHF患者心肌重塑与心功能,其作用机制可能与降低血清Fas/APO-1水平有关。