酪氨酸蛋白激酶抑制剂RG50864对血小板衍生生长因子诱导的肺动脉平滑肌细胞增生的影响

目的研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂RG50864对血小板衍生生长因子(PDGF)诱导的肺动脉平滑肌细胞增生的影响。方法用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞,采用细胞计数法,噻唑蓝(MTT)比色法及Giemsa染色法对PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增生等情况进行分析。结果与对照组相比,RG50864处理组能在24、48、72h显著地抑制PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增生,且呈剂量依赖性。结论RG50864可显著地抑制PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增生。

中药血管抑制剂人参皂苷Rg3联合紫杉醇治疗胃癌术后肝转移的研究

目的:探讨中药血管抑制剂人参皂苷Rg3联合紫杉醇治疗胃癌术后肝转移的临床疗效。方法:39例胃癌术后肝转移患者随机分为治疗组18例,采用中药血管抑制剂人参皂苷Rg3联合紫杉醇为主化疗,对照组21例,采用单纯紫杉醇为主化疗。结果:治疗组总有效率(CR+PR)达66.6%,对照组42.8%,两组比较有显著性差异(P<0.05);两组治疗后血清血管内皮生长因子(VEGF)均有下降,治疗组下降更明显(P<0.01);治疗组在保护免疫功能方面优于化疗组,两组比较有显著性差异(P<0.01);治疗组中位生存期及中位疾病进展时间较对照组延长,两组中位生存期及中位疾病进展时间比较有显著性差异(P<0.05);结论:中药血管抑制剂人参皂苷Rg3联合紫杉醇治疗胃癌术后肝转移能提高总有效率,保护免疫功能,延长中位生存期及中位疾病进展时间。

血管抑制剂人参皂苷Rg3联合紫杉醇治疗胃癌术后肝转移临床疗效观察

目的观察和分析胃癌术后肝转移患者应用血管抑制剂人参皂苷Rg3联合紫杉醇治疗的临床效果。方法选取我院2013年3月-2014年3月收治的50例胃癌术后肝转移患者,应用抛硬币随机分组法分为对照组（n=25）和观察组（n=25）,对照组患者采用紫杉醇化疗,观察组患者采用血管抑制剂人参皂苷Rg3联合紫杉醇化疗,对两组患者临床治疗效果进行比较和分析。结果观察组患者治疗总有效率为68.00%,与对照组44.00%比较差异显著（P〈0.05）;治疗后观察组患者VEGF水平低于对照组（P〈0.05）。结论针对胃癌术后肝转移患者,血管抑制剂人参皂苷Rg3联合紫杉醇治疗,可明显提高治疗效果,增强患者免疫功能,延长患者生存时间,最大程度提升患者生活质量,值得临床推广应用。

人参皂苷Rg3增强PD-1抑制剂对弥漫大B细胞淋巴瘤免疫治疗作用的体外研究

目的:探讨人参皂苷Rg3联合PD-1抑制剂对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的作用,通过体外实验观察人参皂苷Rg3在增强T细胞对抗淋巴瘤治疗中的作用及其机制。方法:收集DLBCL患者的外周血,提取单个核细胞,体外激活并扩增T细胞,建立T细胞与肿瘤细胞共培养体系,检测联合人参皂苷Rg3能否增强PD-1抑制剂对T细胞增殖、凋亡和细胞因子分泌的影响。结果:DLBCL细胞可抑制T细胞增殖,促进凋亡;联合人参皂苷Rg3能够增强PD-1抑制剂对恢复T细胞增殖,减少凋亡,并增加细胞因子IL-2和IFN-γ分泌的作用。结论:人参皂苷Rg3增强PD-1抑制剂对DLBCL的抗肿瘤作用,其机制为增强T细胞增殖,抑制凋亡,增加细胞因子分泌。

人参皂苷Rg3对小鼠Lewis肺癌生长和转移的抑制作用及其与肿瘤相关巨噬细胞的关系

目的研究人参皂苷Rg3(ginsenoside Rg3,Rg3)对肺腺癌小鼠异体移植瘤生长和转移的抑制作用及其相关机制。方法构建高转移肺腺癌小鼠移植瘤模型,将24只接种高转移性Lewis肺癌的C57BL/6J小鼠随机分成3组:对照组、顺铂(Cisplatin,DDP)组和Rg3组。给予相应药物干预,于接种后24日处死各组小鼠,剥离皮下肿瘤,取出双肺,计算肺转移发生情况,免疫组织化学检测皮下移植瘤中肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)和微血管密度(microvessel density,MVD)的表达并定量分析。结果 DDP组、Rg3组抑瘤率分别为39.20%、54.86%,与对照组比较,瘤重差异有统计学意义(P<0.01),肺表面结节转移抑制率分别为30.25%,58.57%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),对照组、DDP组和Rg3组TAMs分别为(47.21±12.06)、(45.67±11.90)、(16.11±6.32),MVD分别为(24.57±4.59)、(23.52±4.74)、(14.17±2.43)。结论 Rg3对肺腺癌移植瘤的生长和转移具有抑制作用,其机制可能与其抑制肿瘤内TAMs在肿瘤基质中浸润及抑制微血管生成有关。

人参皂苷Rg3对胃癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的 :探讨人参皂苷Rg3对胃癌诱导血管内皮细胞 (VEC)增殖的抑制作用。方法 :用MTT法检测不同浓度Rg3对VEC、胃癌MKN 4 5细胞增殖及MKN 4 5细胞诱导VEC增殖的影响。结果 :Rg3浓度为 0 0 313～ 0 5mmol/L时 ,对VEC及MKN 4 5细胞增殖没有影响 (P >0 0 5) ;经 0 0 313～ 0 5mmol/LRg3作用后的MKN 4 5细胞条件培养液对VEC增殖没有影响 (P >0 0 5) ;Rg3浓度为 0 12 5～0 5mmol/L时 ,对MKN 4 5细胞条件培养液诱导的VEC增殖有抑制作用 (P <0 0 1) ,抑制率为13 10 %～ 77 38%。结论 :人参皂苷Rg3对胃癌细胞条件培养液诱导的VEC增殖具有抑制作用。

苏拉明联合人参皂苷Rg3抑制肺腺癌小鼠移植瘤转移的作用及机制

目的血管生成抑制剂靶向治疗肿瘤已成为目前研究热点之一。本研究旨在观察苏拉明联合人参皂苷Rg3(PG-Rg3)对肺腺癌小鼠异体移植瘤转移的协同抑制作用,并初步探讨苏拉明和PG-Rg3抑制肿瘤转移的相关机制。方法复制高转移肺腺癌小鼠移植瘤模型,将40只接种高转移性Lewis肺癌的C57BL/6J小鼠按随机数字表法随机分成5组:对照组、顺铂组、苏拉明组、PG-Rg3组及苏拉明+PG-Rg3组(联合组)。给予相应药物干预,于接种后24 d处死各组小鼠,剥离皮下肿瘤和取出双肺,计算肺转移发生情况,免疫组化和图像分析系统检测皮下移植瘤中组织蛋白酶B(CB)和血管内皮生长因子(VEGF)表达并定量分析,RT-PCR半定量检测组织蛋白酶B mRNA、VEGF mRNA表达。结果对照组、顺铂组、苏拉明组、PG-Rg3组、联合组的肺表面转移结节数分别为(14.00±2.90)、(9.77±1.65)、(6.00±1.70)、(5.80±2.02)、(1.93±1.12),CB灰度值分别为(147.24±5.51)、(129.57±5.41)、(87.39±5.03)、(81.38±5.31)、(67.36±4.37),CB mRNA相对量分别为(85.07±9.24)、(80.45±9.01)、(45.21±7.53)、(39.67±6.84)、(24.33±6.10),VEGF灰度值分别为(156.26±6.45)、(134.7±5.81)、(96.13±5.66)、(90.80±4.92)、(68.73±4.31),VEGF mRNA相对量分别为(91.07±9.43)、(84.45±9.50)、(49.67±8.07)、(45.48±6.46)、(27.39±5.19),苏拉明组和PG-Rg3组中肺表面转移结节数、皮下肿瘤内CB、CB mRNA、VEGF、VEGF mRNA表达与对照组相比明显下降,相反顺铂组对此则无明显影响。联合用药组则显著抑制肿瘤肺表面转移结节数且具有协同作用。结论苏拉明和PG-Rg3对肺腺癌移植瘤的转移具有协同抑制作用,其机制与其抑制肿瘤内CB、CB mRNA、VEGF、VEGF mRNA表达相关。

人参皂苷Rg1对小鼠慢性间歇性缺氧诱导脑损伤的减轻作用及其机制

目的:探讨人参皂苷Rg1对小鼠慢性间歇性缺氧(CIH)诱导脑损伤的减轻作用,并阐明其可能的作用机制。方法:40只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组、抑制剂组(给予钙蛋白酶1抑制剂)、低剂量人参皂苷Rg1组(给予10 mg·kg^(-1)人参皂苷Rg1)和高剂量人参皂苷Rg1组(给予20 mg·kg^(-1)人参皂苷Rg1)。除对照组外,其余各组小鼠均置于自动调节氧浓度的低氧舱中以诱导小鼠缺氧性脑损伤。检测各组小鼠尾外周血氧饱和度(SpO_(2)),采用Morris水迷宫实验检测各组小鼠逃逸潜伏期、路径长度和游泳路线穿过目标象限频次,采用试剂盒检测血清中血尿素氮(BUN)、乳酸(LA)、丙二醛(MDA)、白细胞介素6 (IL-6)和肿瘤坏死因子α (TNF-α)水平以及血清中超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,采用HE染色观察各组小鼠脑组织损伤程度,采用二氢乙啶(DHE)探针检测各组小鼠海马组织CA1区中活性氧(ROS)表达水平,采用Western blotting法检测各组小鼠脑组织中钙蛋白酶1、IL-6、和TNF-α蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠SpO_(2)明显降低(P<0.01),表明模型建立成功。与模型组比较,抑制剂组和低及高剂量人参皂苷Rg1组小鼠SpO_(2)明显升高(P<0.01)。Morris水迷宫实验,与对照组比较,模型组小鼠逃逸潜伏期和路径长度明显延长(P<0.01),游泳路线穿过目标象限频次明显减少;与模型组比较,抑制剂组、低和高剂量人参皂苷Rg1组小鼠逃逸潜伏期和路径长度明显缩短,游泳路线穿过目标象限频次明显增多。与对照组比较,模型组小鼠血清中BUN、LA、MDA、IL-6和TNF-α水平明显升高(P<0.01),LDH活性明显升高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01);与模型组比较,抑制剂组、低和高剂量人参皂苷Rg1组小鼠血清中BUN、LA、MDA、IL-6和TNF-α水平明显降低(P<0.01),LDH活性明显降低(P<0.01),SOD活性明显升高(P<0.01)。HE染色,与对照组比较,模型组小鼠海马组织CA1区中锥体神经元排列疏松,部分神经元呈三角形,核固缩,胞质浓染,少数神经元脱失,呈明显缺氧性神经元损伤形态;与模型组比较,抑制剂组、低和高剂量人参皂苷Rg1组小鼠海马组织CA1区中缺氧性神经元损伤表现有效改善。DHE探针检测,与对照组比较,模型组小鼠海马组织CA1区中ROS水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,抑制剂组、低和高剂量人参皂苷Rg1组小鼠海马组织CA1区中ROS水平明显降低(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,模型组小鼠海马组织中钙蛋白酶1、TNF-α和IL-6蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,抑制剂组、低和高剂量人参皂苷Rg1组小鼠海马组织中钙蛋白酶1、TNF-α和IL-6蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:人参皂苷Rg1可减轻小鼠CIH诱导的脑组织损伤,其机制可能与抑制脑组织炎症反应和氧化应激并下调钙蛋白酶1表达有关。

G蛋白信号蛋白的调节剂:新的多功能药物靶点

G蛋白信号调节 (RGS)蛋白是新近发现的能调节G蛋白功能的蛋白家族。RGS能通过加速鸟苷三磷酸 (GTP)水解抑制G蛋白信号 ,即其GTP酶活化蛋白 (GAP)功能。此外 ,RGS还能通过其RGS区域和非RGS区域产生非GAP功能。此类蛋白的组织分布特异 ,受到信号传递物质的调节并能在活细胞产生特定功能 ,也因此而成为新的药理和治疗靶点。以RGS蛋白为靶点的药物分为 5类 :增强内源性激动剂功能的药物 ;阻断外源性G蛋白偶联受体 (GPCR)激动剂脱敏的药物 ;增强外源性激动剂功能的药物 ;RGS蛋白效应器信号抑制剂 ;RGS激动剂。

血管生成抑制剂Rg3对胃癌生长和转移抑制作用的实验研究

目的 研究血管生成抑制剂Rg3对胃癌生长和转移的抑制作用。 方法 完整组织块SCID鼠胃壁原位种植 ,建立类似于临床的胃癌转移模型。移植后第 7天开始灌胃给药 ,Rg3剂量为 0、2 5、5 0、10 0mg/kg ,每日 1次 ,共 6周。移植后第 8周末处死动物 ,测定原位肿瘤重量 ,观察转移情况 ,并采用抗CD31抗体的标记链霉亲和素 生物素免疫组化方法检测肿瘤内微血管密度。 结果Rg3对原位肿瘤的生长和转移均有抑制作用 ,2 5、5 0、10 0mg/kg剂量组的抑瘤率分别为 5 2 3%、6 3 3%和 71 6 % ,肝转移抑制率分别为 37 8%、6 8 9%和 84 4% ,腹膜转移抑制率分别为 36 4%、74 6 %和 74 6 %。Rg3治疗后 ,肿瘤内微血管密度明显降低。

人参皂苷Rg1对纤维化肝脏肝细胞超微结构及其表达基质金属蛋白酶组织抑制剂-1的影响

基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-1随肝纤维化病情的发展表达增强，与基质金属蛋白酶（MMP）-1特异性结合，使间质胶原酶活性下降，造成细胞外基质（ECM）沉积增加，促进肝纤维化进一步发展。三七可以增强胶原酶活力，降解肝内的Ⅰ、Ⅲ型胶原，其发挥作用的主要成分为三七总甙；而三七总甙是一种混合物，含人参皂苷共7种，人参皂苷Rg1为其中主要成分之一。前期研究表明，

术后采用人参皂甙Rg3联合丝裂霉素加呋喃尿嘧啶方案对进展期胃癌的疗效

目的探讨人参皂甙Rg3（Rg3）联合丝裂霉素加呋喃尿嘧啶（MF）化疗方案（Rg3＋MF）对进展期胃癌术后的治疗效果。方法将71例进展期胃癌术后患者随机分为对照组（33例）和观察组（38例），前者用MF方案，后者用Rg3加MF方案治疗。检测血清血管内皮生长因子（VEGF）水平，并对预后进行对比分析。结果进展期胃癌患者血清VEGF含量[（297．8±129．6）pg／m1]明显高于正常组[（212．3±67．5）pg／m1]（P〈0.01），且与胃癌患者肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、肿瘤大于4cm及TMN分期有关（均P〈0．05）。术后14周时检测血清VEGF水平，观察组已明显低于术前（P〈0．05）、而接近正常组水平，对照组仅降至术前水平。观察组、对照组中位生存时间分别为40和25个月。观察组的术后累计生存率高于对照组（P=0．047）。结论进展期胃癌患者术后采用MF方案联合Rg3治疗可明显降低血清VEGF含量，提高生存率。

20(R)-人参皂苷Rg_3对LPS诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察20(R)-人参皂苷Rg3对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及其机制探讨。方法用脂多糖(LPS)诱导HUVEC损伤,采用MTT法观察20(R)-人参皂苷Rg3对HUVEC活性的影响;Fura-2/AM荧光探针负载细胞,用双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离钙离子浓度;用ELISA法测定培养的细胞上清液中组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)含量的变化。结果300mg·L-1的LPS刺激内皮细胞48h后,可明显降低HUVEC的吸光度,细胞内钙离子浓度升高,PAI-1含量明显升高,t-PA含量明显降低;各浓度的20(R)-人参皂苷Rg3可升高LPS引起的HUVEC的吸光度降低,并呈浓度依赖性地显著降低HUVEC内游离钙浓度的升高;20(R)-人参皂苷Rg3明显抑制LPS诱导的PAI-1分泌增多,对t-PA水平无明显影响。结论20(R)-人参皂苷Rg3对LPS诱导的HUVEC损伤具有保护作用,其机制可能与降低细胞内钙离子浓度、抑制PAI-1产生、调节t-PA/PAI-1平衡密切相关。

Ginsenoside Rgl attenuates structural disruption of the blood-brain barrier to protect the central nervous system in ischemia/reperfusion

目的:尽管人参皂甙Rg1有较强的神经保护作用,但前期研究表明Rg1难以透过血脑屏障到达脑实质。血脑屏障能维持中枢神经系统内环境的稳定,对中枢神经系统至关重要。本研究旨在验证Rg1是通过保护血脑屏障而发挥神经保护作用的观点。方法:雄性SD大鼠才用大脑中动脉闭塞(MCAO)2h后再灌22h。Rg1(45mg.kg1)于缺血后1h和再灌注3h通关尾静脉给药。动物模型测定血脑屏障的致密性,体外测定MDA和SOD。同时在体内外试验中测定基质金属蛋白酶的表达量和活性以及基质金属蛋白酶组织抑制剂mRNA的表达量以评估Rg1对血脑屏障结构的保护作用。结果:在缺血/再灌注模型大鼠中,依文思蓝的渗透率、基质金属蛋白酶的表达量和活性明显升高,而给以Rg1的模型鼠中这种升高得到明显抑制。缺血/再灌注模型大鼠中TIMP-2mRNA的表达降低,而给以Rg1的模型鼠中这种降低明显减轻。体外模型的结果与整体动物试验结果一致。结论:人参皂苷Rg1可能是通过保护脑微血管内皮细胞和减少病理条件下基质金属蛋白酶的表达量和活性、降低细胞外基质的水解,达到保护血脑屏障结构完整的作用,从而间接发挥了中枢神经系统保护作用。

药对研究——三七、白及药对配伍前后对三七皂苷成分含量的影响

该文以三七、白及药对为研究对象,采用HPLC测定三七单煎液及不同配伍比例(1∶0.5,1∶1,1∶2)三七与白及合煎液中具有脂肪酶抑制作用的活性成分——(20S)-人参皂苷Rg3和人参皂苷Rh4的含量,并探讨两药配伍后对三七皂苷成分含量的影响。色谱方法为Lichrospher C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-水梯度洗脱;检测波长为203 nm;柱温为30℃;流速为1 m L·min-1。结果发现,与三七单煎液相比,三七、白及合煎液中人参皂苷Rg3、人参皂苷Rh4的含量均呈上升趋势,且上升幅度与配伍白及量呈正比;合煎液中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的色谱峰均较三七单煎液的明显降低。研究结果表明三七与白及配伍后,合煎液中(20S)-人参皂苷Rg3、人参皂苷Rh4的含量较单煎液显著增加,推测白及中的有关成分可促进其它人参皂苷进行转化,该结果为拓展制备(20S)-人参皂Rg3、人参皂苷Rh4的方法提供参考。