母代鸡日粮不同蛋白水平对后代肌纤维发育及肌肉生成抑制因子基因(MSTN)mRNA表达的影响

旨在研究2个品系母鸡饲喂不同蛋白水平日粮对后代肌纤维发育及肌肉生成抑制因子基因(MSTN)mR-NA表达的影响。试验通过对高、低脂系肉种鸡饲喂3个蛋白水平(分别是NRC肉种鸡饲养标准蛋白水平的80%、100%、120%)的日粮,子代饲喂正常蛋白水平日粮,研究母体效应对后代肌纤维发育的影响。结果表明:①母代高蛋白日粮可显著提高子代1日龄肉仔鸡初生体质量(P<0.05),但屠宰日龄肉仔鸡体质量各组间差异不显著(P>0.05)。②随着母代日粮蛋白水平的降低,子代胸肌肌纤维直径逐渐减小,且低蛋白组显著低于正常蛋白和高蛋白组(P<0.05),2个品系间差异不显著(P>0.05)。③随着母代日粮蛋白水平的降低,胸肌肌纤维密度逐渐增加,且低蛋白组显著高于正常蛋白组和高蛋白组(P<0.05),2个品系间差异不显著(P>0.05)。④母代高蛋白日粮有降低MSTNmRNA表达量的趋势,但未达显著水平(P>0.05),低脂系肉仔鸡高蛋白组21日龄胸肌MSTNmRNA表达量显著低于正常蛋白组和低蛋白组(P<0.05)。结果表明,母代高蛋白日粮可提高后代初生体质量,且高蛋白日粮有降低胸肌中MSTNmRNA表达量的趋势;母代低蛋白日粮可显著降低后代肌纤维直径提高肌纤维密度,从而改善肌肉品质。品系对肌纤维无显著影响。

过氧化氢对血管平滑肌细胞增殖和明胶酶A及其抑制因子基因表达的影响

目的 :探讨过氧化氢 (H2 O2 )对体外培养大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和明胶酶A(MMP - 2 )、及其抑制因子 (TIMP - 2 )基因表达的影响。方法 :先用四甲基偶氮唑 (MTT)法筛选出H2 O2 对VSMC的毒性作用浓度和增殖作用浓度 ,在此基础上用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)法测定H2 O2 对MMP - 2、TIMP - 2mRNA表达的影响。结果 :H2 O2 浓度大于 30 0 μmol/L后显示出对VSMC的致死毒性作用 ;H2 O2 浓度在 0 0 1 - 50 μmol/L内可以刺激VSMC的增殖 ,且呈时间依赖性 ;1 μmol/LH2 O2 、1 0 μmol/LH2 O2 对MMP - 2基因转录有明显的促进作用 ;不同浓度的H2 O2对TIMP - 2基因转录无明显促进作用。结论 :适当浓度的H2 O2 可以促进VSMC的增殖和MMP - 2mRNA表达 ,但对TIMP - 2mRNA表达无明显作用 ,提示H2 O2 参与了血管重塑的不同病理环节。

宫颈癌患者核糖核酸酶抑制因子基因突变的分析

目的通过对宫颈癌患者血液核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因RNH的突变分析,探讨RNH基因与肿瘤生长的关系。方法针对RNH全基因序列设计21对引物,PCR扩增后采用SSCP对突变进行检测。结果正常人和宫颈癌患者均扩增出相应的21个条带,未发现异常;经过SSCP分析未发现所收集的18例宫颈癌患者血液中的RNH基因有突变发生。结论尚不能肯定RNH基因的突变是否与肿瘤无关,也不能肯定其他肿瘤没有发生突变。需缩小检测片段进一步实验。

地西泮结合抑制因子基因在慢性吗啡依赖大鼠部分脑区的表达

目的研究地西泮结合抑制因子(DBI)基因在慢性吗啡依赖大鼠部分脑区不同时点表达水平的变化。方法30只雄性SD大鼠随机分为研究组20只和生理盐水对照组10只。研究组:腹腔注射盐酸吗啡,2次/d,起始剂量为5mg·kg1·次1,逐日递增5mg·kg1·次1,至第10天为50mg·kg1·次1,对照组同期注射相同体积的生理盐水。研究组于末次注射后3h(依赖组)及72h(戒断3d组)、第6天(戒断6d组)、第10天(戒断10d组)分别处死5只,对照组于末次注射后3h及72h分别各处死5只,灌注、取脑、冰冻切片并选取含有海马CA1区(HIPCA1)、中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(Nac)、前额叶皮质(PFC)、杏仁核(AMG)、中脑导水管(PAG)等结构的脑片,利用组织原位杂交技术检测DBImRNA在各脑区的表达,进行组间比较。结果吗啡成瘾组在HIPCA1、VTA、NAc、PFC、AMG、PAG和LC的DBImRNA表达依次为:102.7±6.7、139.6±12.8、137.1±9.3、144.3±10.8、153.6±10.6、122.1±8.5和100.0±8.8,显著高于对照组,并均在戒断的第3天达到峰值,依次为139.7±12.4、181.1±10.2、159.3±13.3、186.6±7.6、195.1±7.0、176.9±14.7,随后出现下调,在戒断第6天各脑区仍高于对照组,在戒断第10天,除了PFC仍为145.3±9.3,明显高于对照组(P<0.05)外,其他脑区与对照组无显著差异。

基质金属蛋白酶组织抑制因子3基因转染血管平滑肌细胞移植对急性心肌梗死后早期心肌重塑的影响

目的研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor-3of matrix metalloproteinases,TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对急性心肌梗死(acute myocardialinfarction,AMI)后早期心脏结构变化的影响,并探讨其可能的机制。方法取Wistar大鼠胸主动脉采用组织块贴壁法培养VSMCs。另取61只Wistar雌性大鼠建立左冠状动脉远端结扎的AMI动物模型,将存活的54只大鼠模型随机分为三组,每组18只。于冠状动脉结扎后立即向缺血部心室壁内注射含有1×106个TIMP-3基因转染VSMCs(A组)、1×106个VSMCs(B组)或不含细胞的PBS液(C组)各0.5ml。术后1周,进行心脏形态学检测观察大鼠心脏结构变化,免疫组织化学染色验证TIMP-3基因转染VSMCs在缺血心肌中的存活情况,Western blot法测定大鼠缺血心肌TIMP-3蛋白和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9,MMP-9)蛋白的含量。结果成功分离、培养VSMCs,纯度达98%,TIMP-3基因成功转入VSMCs中。术后1周,A组大鼠梗死心肌面积占左室游离壁面积的百分比为28.73%±1.56%,小于B组39.63%±1.84%和C组46.32%±2.16%(P<0.01);B组小于C组(P<0.01)。A组大鼠左室容积指数为5.27±0.21mm3/g,小于B组6.69±0.34mm3/g和C组9.67±0.88mm3/g(P<0.01);B组小于C组(P<0.01)。免疫组织化学染色见TIMP-3基因转染VSMCs被成功植入缺血心肌并在其中存活。Western blot法示A组大鼠缺血心肌TIMP-3蛋白含量为300704.8±3692.8,高于B、C组的195548.8±3014.2及177991.1±2502.1(P<0.01);B组高于C组(P<0.01)。A组MMP-9蛋白含量为594827.4±5708.5,低于B、C组的921461.4±8887.4及1044445.0±8788.6(P<0.01);B组低于C组(P<0.01)。结论将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制AMI后早期心肌重塑。

前列腺癌细胞DU145同步化诱导的DNA损伤反应通路和PI3K/Akt通路对凋亡抑制因子基因API2(BIRC3)mRNA表达的影响

目的探讨在前列腺癌细胞DU145同步化培养后引起的DNA损伤反应通路和PI3K/AKT通路对凋亡抑制因子(IAP)基因API2(BIRC3)mRNA表达的影响,同时分析API2基因所在染色体是否存在特异性的异常。方法采用无血清的饥饿培养法使细胞同步在G0期;分别用含羞草碱(mimosine)、胸腺嘧啶(thymidine)和噻氨酯哒唑(nocodazole)使细胞同步在G1期、S期和G2/M期并引起DNA损伤反应,同时加入PI3K的特异性抑制剂ly294002以阻止PI3K/AKT通路。通过RT-PCR半定量法检测API2 mRNA在各个细胞周期相的表达情况。通过细胞遗传学的常规G式显带法,分析凋亡抑制因子基因所在的染色体是否存在特异性的异常。结果 mimosine同步化的G0/G1期细胞达到了78.04%,thymidine同步化的S期细胞达到62.19%,nocodazole同步化的G2/M 60.5%。API2基因位于染色体11q22-q23,存在易位,如t(11;12)(q;q)。API2mRNA的表达,非同步化的ly294002组分别与同步化的mimosine+ly294002组、nocodazole+ly294002组和thymidine+ly294002组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论前列腺癌细胞株DU145存在某些染色体的结构和数目异常,这些异常可能影响某些基因的表达。药物的同步化激活了DNA损伤反应通路和生存信号通路,再通过PI3K/Akt通路,而不是通过P53通路,在细胞周期的某个时相调控API2(BIRC3)mRNA的表达。

组织途径抑制因子-2基因重组腺病毒载体的构建及其抑制喉鳞癌侵袭的研究

目的构建载有TFPI-2基因的重组腺病毒载体,探讨其对喉癌侵袭能力的抑制作用。方法将TFPI-2cDNA克隆于腺病毒载体PSG-CMV,得到重组质粒PSG-TFPI-2。将质粒PSG-TFPI-2与5型腺病毒共转染至293细胞,生成带有TFPI-2基因的重组腺病毒载体。重组腺病毒质粒经过293细胞的扩增和CsCl的纯化,感染Hep-2细胞。运用侵袭实验观察感染后的喉癌细胞侵袭能力的变化。结果经酶切和测序等方法的鉴定,证实了载体构建的正确性,病毒滴度为2.8×1010PFU/mL。侵袭实验显示转染Ad-TFPI-2的喉癌细胞侵袭能力下降。结论成功构建带有TFPI-2的重组腺病毒载体,运用Ad-TFPI-2重组腺病毒能够有效地抑制喉癌细胞的侵袭能力。

α1-抗胰蛋白酶和组织因子途径抑制物基因多态性的交互作用及其与大肠癌侵袭和转移的关系

目的:探讨α1-抗胰蛋白酶(α1-antitypsin,α1-AT)基因第5外显子和组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)基因T287C多态性的交互作用及其与大肠癌侵袭和转移的关系。方法:选择河南省新乡医学院第一附属医院2011年7月至2015年7月期间收治的经病理学确诊的大肠癌TNMⅠ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者各180例,以180例TNM 0期患者作为对照组,用PCR-RFLP技术检测各组患者外周血白细胞两基因的多态性,以Hardy-Weinberg平衡检验分析样本的群体代表性,以Khoury和Wagener模型分析两基因多态性的交互作用。ELISA法检测患者血清α1-AT和TFPI蛋白表达,细胞划痕试验和Transwell侵袭试验分别检测α1-AT和TFPI对人结肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响,Western blotting检测SW480细胞胰蛋白酶、组织因子(tissue factor,TF)和蛋白酶激活受体-2(protease-actieated receptor 2,PAR-2)表达水平。结果:α1-AT(MZ)、α1-AT(ZZ)、TFPI(TC)和TFPI(CC)基因型者大肠癌侵袭与转移的风险均显著增加,且在α1-AT(MZ)和TFPI(TC)之间、α1-AT(MZ)和TFPI(CC)之间、α1-AT(ZZ)和TFPI(TC)及α1-AT(ZZ)和TFPI(CC)之间均存在正向交互作用(均γ>1)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者血清α1-AT(或TFPI)表达明显低于0期组,且Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者之间血清α1-AT(或TFPI)表达也有明显差异(P<0.01)。同一组携带突变基因型个体的血清α1-AT(或TFPI)表达明显低于携带野生型个体(P<0.01)。体外细胞培养实验显示,α1-AT可明显抑制SW480细胞胰蛋白酶的表达,而TFPI则明显抑制TF表达,而两者均可明显降低细胞PAR-2的表达及细胞迁移和侵袭能力。结论:α1-AT(MZ)、α1-AT(ZZ)、TFPI(TC)和TFPI(CC)基因型均是大肠癌侵袭与转移的高危因素,基因多态性的交互作用增加了大肠癌侵袭与转移的风险。

缺血性脑血管病患者半胱氨酸蛋白酶抑制因子C基因多态性临床研究

目的探讨半胱氨酸蛋白酶抑制因子C(Cys C)基因CST3 G73A多态性与缺血性脑血管病(ICVD)的关系。方法选取确诊为缺血性脑血管病患者120例(病例组)及100例非ICVD对照人群(对照组)作为研究对象,采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术检测其Cys C基因G73A位点的多态性分布。结果 CST3扩增产物片段长度为557bp,在酶切后,可产生野生GG型、突变杂合子GA型及突变纯合子AA型3种基因型。病例组GG、GA和AA等3种基因型频率分别为59.17%、28.33%及12.50%,对照组分别为60.00%、24.00%及16.00%;病例组G及A等位基因频率分别为75.42%及24.58%,对照组分别为78.50%及21.50%,2组基因型频率及等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Cys C基因G73A位点多态性可能与脑缺血性脑血管病发病无关,需大样本研究进一步证实。

急性冠状动脉综合征患者组织因子途径抑制物基因V264M的多态性

目的探讨在中国人群中组织因子途径抑制物基因第9外显子874G→A(V264M)多态性与急性冠状动脉综合征的关系,以及各基因型对血浆游离组织因子途径抑制物水平和冠状动脉病变严重程度的影响。方法选取经冠状动脉造影检查的136例急性冠状动脉综合征患者和106例健康对照者,用聚合酶链反应和限制片长多态性方法分析组织因子途径抑制物(V264M)基因型。利用酶联免疫吸附试验检测部分患者血浆游离组织因子途径抑制物水平。结果急性冠状动脉综合征组血浆游离组织因子途径抑制物水平明显高于正常组(P<0.05),两组的V264M基因型和等位基因的分布趋势相同,差异无显著性(P>0.05)。A等位基因携带者的游离组织因子途径抑制物水平低于GG基因型者(6.9±5.1比14.3±9.5),而冠状动脉病变程度不受V264M基因多态性的影响(χ2=0.413,P>0.05)。结论中国人群中存在V264M多态性,它对血浆游离组织因子途径抑制物水平可能有影响,但未发现V264M多态性与急性冠状动脉综合征发病存在相关性。

冠心病患者细胞因子信号转导抑制剂1基因多态性的临床意义

目的探讨冠心病患者细胞因子信号转导抑制剂1(SOCS1)基因多态性与心功能及细胞因子的相关性。方法选择冠心病患者256例为研究组,健康自愿者256例为对照组。运用聚合酶链反应(PCR)及单核苷酸多态性(SNP)技术分析2组SOCS1基因多态性,并测定细胞因子和心功能的变化。结果 2组SOCS1基因rs173516427和rs15677380等位基因频率差异有统计学意义(χ2=7.46、8.09,P=0.024、0.014),rs173516427 G等位基因和rs15677380 C等位基因为冠心病的高危因素(OR=1.56、1.71);rs15677380、rs173516427不同基因型LVEF和BNP差异有统计学意义(F=10.9、12.3、9.89、11.5,P<0.05)。结论SOCS1基因与动脉粥样硬化的发生有关,并参与冠心病的发展过程。

组织因子途经抑制物基因对血管内皮细胞分泌层黏连蛋白的影响

目的研究组织因子途经抑制物(TFPI)基因转移对大鼠血管内皮细胞层黏连蛋白(LN)表达的影响,探讨TFPI基因抑制再狭窄的机制。方法用丙酮酸钠刺激大鼠血管内皮细胞,比较丙酮酸钠刺激前后大鼠血管内皮细胞表达LN的差异;分别使用携带TFPI基因(Ad-TFPI)和携带LacZ基因(Ad-LacZ)的重组腺病毒在体外转染大鼠血管内皮细胞;用X-gal染色法检测外源基因的转染效率,用酶联免疫吸附测定方法检测TFPI基因转染与LAZ基因转染,大鼠血管内皮细胞分泌LN的浓度变化。结果丙酮酸钠可明显刺激大鼠血管内皮细胞分泌LN。TFPI基因转染培养的大鼠血管内皮细胞后,第2天上清中LN表达减少,为(230.73±32.57)μg/L,Ad-LacZ组为(322.87±34.87)μg/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),但是第4天和第6天LN表达,TFPI组与Ad-LacZ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TFPI基因转移可明显抑制大鼠血管内皮细胞分泌LN,随着时间的推移这种抑制作用减弱;TFPI可能通过直接抑制LN的表达抑制再狭窄的发生和发展。

原发性肝癌癌组织肿瘤抑制因子候选基因1表达与病理特征的关系

目的观察原发性肝癌癌组织肿瘤抑制因子候选基因1(TUSC1)表达与病理特征的关系。方法纳入2016年10月至2018年10月于我院收治的78例原发性肝癌患者为研究对象,进行回顾性分析。采用实时荧光定量聚合酶链反应,检测癌组织TUSC1基因mRNA表达,并采用Western blot法检测TUSC1蛋白表达。根据TUSC1 mRNA检测结果,将其分为TUSC1 mRNA表达组(55例)及缺失组(23例);按TUSC1蛋白检测结果,将其分为TUSC1蛋白表达组(45例)及缺失组(33例)。观察原发性肝癌患者癌组织及癌旁组织中TUSC1 mRNA及其蛋白表达水平,分析原发性肝癌病理特征与癌组织中TUSC1 mRNA及其蛋白表达水平的关系,并观察TUSC1 mRNA表达与TUSC1蛋白表达的关系。结果原发性肝癌癌组织中TUSC1 mRNA及其蛋白表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。TUSC1 mRNA及其蛋白表达与原发性肝癌患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、肿瘤类型、HBsAg均无明显关系(P>0.05),但中晚期(TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期)者TUSC1 mRNA及其蛋白阳性表达率显著高于早期(Ⅰ、Ⅱ期)者(P<0.05),高、中分化者TUSC1 mRNA及其蛋白阳性表达率显著低于低、未分化者(P<0.05),肝内转移者TUSC1 mRNA及其蛋白阳性表达率显著高于肝内无转移者(P<0.05),伴门静脉癌栓者TUSC1 mRNA及其蛋白阳性表达率显著高于不伴门静脉癌栓者(P<0.05)。原发性肝癌患者TUSC1 mRNA表达与TUSC1蛋白表达具有良好一致性(kappa为0.56)。结论原发性肝癌患者癌组织中TUSC1 mRNA及其蛋白表达水平下降,与患者TNM分期、分化程度、门静脉癌栓、肝内转移有关。

细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA在急性髓细胞性白血病中的表达及与患者临床特征的关系

目的探讨细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)在急性髓细胞性白血病(AML)中的表达及与患者临床特征的关系。方法选取82例AML患者,作为观察组,依据患者病情分为初治组(n=53)、缓解组(n=19)和复发组(n=10),另选取31例非血液病健康者,作为对照组。采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测各组受试者骨髓ANRIL m RNA的相对表达量,并分析其与AML患者临床特征的关系。结果观察组、初治组、缓解组、复发组患者骨髓ANRIL mRNA的相对表达量均明显高于对照组(P﹤0.01)。复发组患者骨髓ANRIL m RNA相对表达量明显高于缓解组和初治组(P﹤0.01),缓解组患者骨髓ANRIL mRNA的相对表达量明显低于初治组(P﹤0.01)。血小板计数﹤20×10^(9)/L、疾病进展、预后未缓解或缓解后再复发AML患者骨髓ANRIL mRNA相对表达量分别明显高于血小板计数≥20×10^(9)/L、疾病无进展、预后缓解患者(P﹤0.01)。结论ANRIL在AML患者中高表达,其表达水平能反映患者的疾病严重程度,可指导临床诊疗。

急性早幼粒细胞白血病基因生长抑制因子在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达及意义

目的 :探讨急性早幼粒细胞白血病基因 (PML)在人类前列腺癌 (PCa)组织、癌周围组织以及前列腺增生症 (BPH)前列腺组织中的表达及意义。方法 :应用免疫组化方法检测 2 3例PCa标本、38例BPH组织标本中PML的表达情况。结果 :BPH组织中阳性表达共 35例 ,弱阳性表达 2例 ,总阳性表达率 97.37% ,PCa组织中阳性表达 1例 ,弱阳性表达 8例 ,总阳性表达率 39.1 3% ,两者差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。PML在癌组织中表达比癌旁组织中表达明显降低 (P <0 .0 5 )。而PML在癌旁组织和增生组织中表达基本一致。结论 :PML在人类PCa组织中比良性BPH组织中表达明显减弱 ,而且与PCa的病理分级有关。提示PML可能是一种广谱的生长抑制因子和转录抑制因子 ,它的表达减弱或丢失可能与肿瘤的发生。

新疆维吾尔族女性脂质代谢紊乱与细胞因子信号转导抑制因子3基因变异相关

目的 研究新疆维吾尔族女性脂质代谢紊乱与细胞因子信号转导抑制因子3（SOCS-3）基因变异的相关性.方法以1379 名新疆维吾尔族人为研究对象,选择rs12953258、rs4969168和rs9914220 3个代表性位点进行基因型鉴定后分析.结果 3个位点中,仅发现维吾尔族女性的 rs12953258位点在脂质代谢紊乱组及脂质代谢正常组中基因型频率分布差异有统计学意义（P=0.032）,在高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）异常组与正常组中基因型频率分布差异有统计学意义（P=0.029）.Logistic回归分析结果显示,rs12953258位点AA基因型可能是新疆维吾尔族女性脂质代谢紊乱的危险因素 [CC比AA：OR=3.271,95%CI（1.092～9.797）,P=0.034],AA基因型可能与HDL-C降低和三酰甘油升高有关,AA基因型合并体重指数（BMI）异常的维吾尔族女性更易患脂质代谢紊乱性疾病.结论 SOCS-3基因变异可能与新疆维吾尔族女性脂质代谢紊乱相关,携带AA基因型且BMI异常人群脂质代谢紊乱的患病率明显增加.

高血压患者周期蛋白依赖性激酶抑制因子2B基因启动子甲基化与缺血性脑卒中发病风险相关性研究

目的探讨周期蛋白依赖性激酶抑制因子2A/2B(CDKN2A/2B)基因启动子甲基化状态是否能够预测原发性高血压患者缺血性脑卒中(CIS)的发生风险。方法选取自2019年1月至2020年10月在澄迈县中医院高血压管理信息系统中登记的302例原发性高血压患者(高血压组)与158例原发性高血压合并CIS患者(合并CIS组)为研究对象,采用亚硫酸盐扩增子高通量测序法(BSAS)对血液样本进行定量甲基化分析,检测CDKN2B基因甲基化水平。结果合并CIS组患者饮酒史比例、同型半胱氨酸(Hcy)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、CDKN2B甲基化水平均高于高血压组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,饮酒史、血清Hcy和LDL水平升高以及CDKN2B基因启动子甲基化是高血压患者发生CIS的独立危险因素(P<0.05)。另外,根据性别对患者进行分层,在调整饮酒史、Hcy、TC、LDL等变量后,无论是男性还是女性患者,CDKN2B基因启动子甲基化均是CIS发生的独立危险因素(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,对于原发性高血压患者,CDKN2B基因甲基化水平与患者年龄呈正相关性(rs=0.178,P<0.05)。CDKN2B基因甲基化水平预测高血压患者继发CIS的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.677(95%可信区间0.589~0.779)。另外,对男性和女性患者CIS发生风险的预测曲线下面积分别为0.603(95%可信区间0.527~0.678)和0.754(95%可信区间0.693~0.815),差异有统计学意义(Z=-3.579,P<0.05)。结论高血压合并CIS患者普遍存在CDKN2B基因高甲基化水平,其可作为一个有效预测CIS发病风险的分子标志物。

白血病抑制因子在女性输卵管的表达

白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）是60年代末发现的一种多功能的细胞因子，因能抑制小鼠M1型髓样白血病细胞增殖并诱导其向正常Mφ样细胞分化而得名。研究显示，LIF在女性卵巢及卵泡液、子宫内膜及蜕膜、滋养细胞与输卯管等组织细胞均有表达，在排卵、胚泡的形成、早期发育及胚泡着床中起调节作用，人类输卵管妊娠及部分不孕症的发生可能与组织局部LIF的表达异常有关。

人Id3基因在肺腺癌A549细胞中的表达及其对细胞生长的抑制

目的:研究外源性分化抑制因子3(Inhibitor of differentiation 3,Id3)基因表达对人肺腺癌细胞系A549细胞生长的抑制作用。方法:构建Id3和EGFP的融合基因表达载体pEGFP/Id3,采用脂质体转染技术将pEGFP/Id3导入A549细胞。FCM分析转染细胞EGFP表达效率,荧光显微镜观察EGFP表达情况;半定量RT-PCR、免疫细胞化学分析转染后A549细胞Id3 mRNA和蛋白的表达。MTT法检测转染后A549细胞生长抑制情况,FCM分析A549细胞周期进程,Annexin V/7-AAD和Hoechst33258染色检测转染后细胞的凋亡情况。结果:成功构建人Id3与EGFP融合基因表达载体pEGFP/Id3;荧光显微镜和FCM观察到EGFP的有效表达,转染48～72 h时EGFP表达率最高;Id3 mRNA及蛋白在转染后的A549细胞中能有效表达。转染后48 h和72 h,pEGFP/Id3转染组A549细胞生长受到明显抑制(P<0.01);细胞周期分析表明,pEGFP/Id3转染组G_0/G_1期细胞显著高于对照组(P<0.05);Annexin V/7-AAD双染结果显示,pEGFP/Id3转染组细胞的早期凋亡率[(10.67±2.60)%]显著高于pEGFP组[(3.39±2.21)%]和未转染组[(2.35±0.95)%](P<0.05);Hoechst33258染色结果也证实pEGFP/Id3组A549细胞出现明显凋亡形态特征。结论:外源性Id3基因在肺腺癌A549细胞中的表达能抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡。