槲皮素及异鼠李素对去甲肾上腺素促人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对培养人血管平滑肌细胞增殖的影响.方法利用培养的人主动脉平滑肌细胞,采用细胞计数和3H-胸腺嘧啶掺入法,观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的影响,以及槲皮素、异鼠李素和酚妥拉明对去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的影响.结果槲皮素有明显抑制血管平滑肌细胞增殖和DNA合成的作用,而异鼠李素作用较弱.在所观察1～200 μmol/L的浓度范围内,槲皮素和异鼠李素均在200 μmol/L浓度发挥了最大的抑制作用,其抑制作用有剂量依赖关系.去甲肾上腺素有促进血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的作用, 而这些促进作用能被酚妥拉明所阻滞.槲皮素和异鼠李素均呈剂量依赖性抑制去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞增殖和DNA合成的作用, 且槲皮素和异鼠李素有明显的协同作用.槲皮素和异鼠李素对去甲肾上腺素刺激作用的抑制明显强于酚妥拉明. 槲皮素和异鼠李素对血管平滑肌细胞无细胞毒性作用.结论槲皮素和异鼠李素是细胞毒性低的天然黄酮类物质,对血管平滑肌细胞增殖、DNA合成尤其是对去甲肾上腺素刺激的血管平滑肌细胞增殖、DNA合成有较强的抑制作用.

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及机制

目的探讨川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响。方法建立血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖模型,用酶促反应定磷法观察不同浓度的川芎嗪在不同时段内对血管平滑肌细胞中钙调蛋白和钙调神经磷酸酶活性的影响。结果与正常对照组比较,血管紧张素Ⅱ组能够明显刺激血管平滑肌细胞增殖,血管紧张素Ⅱ处理的血管平滑肌细胞的钙调蛋白和钙调神经磷酸酶活性及细胞增殖活度均较正常对照组显著增高(P<0.01)。同时加川芎嗪处理后,各组钙调蛋白和钙调神经磷酸酶活性均显著下降(P<0.01)。结论川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖有显著抑制作用,其抑制机制可能与其干预钙调神经磷酸酶依赖的信号转导途径有关。

甘草皂苷抑制血管平滑肌细胞增殖与β-catenin信号通路的关系

目的:探讨甘草皂苷对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用及内在分子机制,同时在体研究甘草皂苷对大鼠颈总动脉球囊损伤后内膜新生的影响。方法:采用10μmol/L和50μmol/L甘草皂苷干预体外培养的胸主动脉VSMCs,用活细胞计数法评价VSMCs增殖能力,Western Blotting方法检测VSMCs胞核和胞浆中的信号蛋白β-catenin表达,实时定量RT-PCR检测β-catenin下游靶基因cyclinD1的mRNA水平。构建大鼠颈总动脉球囊损伤模型后,应用甘草皂苷干预28天,观察大鼠颈总动脉内膜增生情况。结果:与FBS刺激组相比,甘草皂苷显著抑制胞核内β-catenin水平(1.80±0.61vs 0.82±0.15,P<0.05)和下游cyclinD1的mRNA表达(2.20±0.05vs 0.63±0.07,P<0.05),进而抑制VSMCs增殖(1.93±0.17vs 1.47±0.21,P<0.05);且在大鼠颈总动脉球囊损伤28天后,较对照组内膜新生显著减少(2.28±0.26vs 1.56±0.23,P<0.05)。结论:甘草皂苷通过调控β-catenin/cyclinD1信号通路,抑制动脉内膜损伤后VSMCs增殖,可能具有防治冠脉内支架术或球囊成型术后再狭窄作用。

胰岛素样生长因子1受体抗体对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察胰岛素样生长因子1受体抗体对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。方法球囊导管损伤大鼠一侧颈总动脉,7天后体外培养受损血管的中膜平滑肌细胞,以损伤侧血管细胞为实验组,以对侧正常血管中膜平滑肌细胞为对照组;采用-αactin免疫细胞化学法进行细胞鉴定;在细胞的培养悬液中加入不同浓度的胰岛素样生长因子1受体抗体作用24 h,然后采用5-溴-2脱氧尿苷细胞增殖检测法检测细胞的增殖程度。结果大鼠颈总动脉球囊损伤后,体外培养的中膜平滑肌细胞表现出显著的增殖性(与对照组比较,P<0.01);胰岛素样生长因子1受体抗体可以显著抑制大鼠平滑肌细胞的增殖,呈现出浓度依赖性特征(组间比较,P<0.01)。结论胰岛素样生长因子1受体抗体具有抑制平滑肌细胞增殖的作用,有望用于治疗平滑肌细胞增殖性疾病。

白藜三醇对黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶致平滑肌细胞核因子-κB活化及蛋白激酶Cα表达的干预

为探讨红葡萄酒的最有效成分之一白藜三醇拮抗黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶对血管平滑肌细胞内核因子活性和蛋白激酶Ca表达的影响,以培养幼兔主动脉平滑肌细胞为研究对象,分别给予不同剂量的黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶和/或白藜三醇,采用噻唑蓝法、电泳迁移率改变分析法、免疫组织化学和原位杂交技术检测不同处理组平滑肌细胞增殖及核因子的活性和蛋白激酶Ca蛋白及其mRNA的表达变化。结果发现,不同浓度黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶的系统所产生的氧自由基可明显增加体外培养血管平滑肌细胞增殖及核因子的活性和蛋白激酶蛋白Ca及其mRNA的表达水平,白藜三醇呈剂量依赖性的抑制氧自由基对体外培养血管平滑肌细胞的增殖作用和核因子的活性,并下调蛋白激酶Ca的表达水平;其中以终浓度100μmol/L的白藜三醇对氧自由基介导的核因子活性的抑制作用最强,终浓度200μmol/L的白藜三醇对血管平滑肌细胞的增殖作用及蛋白激酶Ca表达的抑制作用最强。实验结果提示,红葡萄酒的有效成分白藜三醇可能是通过抑制核因子的诱导合成而阻断黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶系统所产生氧自由基的促蛋白激酶Ca的表达效应,进而抑制平滑肌细胞增殖,发挥其抗动脉粥样硬化的作用。

粉防己碱对内膜损伤后血管平滑肌细胞表型转化和p38表达的影响

目的研究粉防己碱防治血管内膜损伤后再狭窄与血管平滑肌细胞表型转化及其信号转导途径之间的关系。方法采用HE染色检测假损伤组、损伤组和粉防己碱组损伤后28天的血管形态学改变;分别使用免疫组织化学和免疫印迹技术检测损伤组和粉防己碱组损伤后71、4和28天增殖细胞核抗原、平滑肌α-肌动蛋白和p38表达的变化。结果假损伤组血管壁各层结构完整;损伤组新生内膜面积显著增加,管腔面积显著缩小;粉防己碱组内膜增殖较损伤组明显减轻,管腔面积增加。损伤后7天,粉防己碱组与损伤组之间血管壁平滑肌α-肌动蛋白、增殖细胞核抗原和p38表达变化无显著性差异,新生内膜增殖程度亦基本相同。粉防己碱治疗14和28天,血管壁增殖细胞核抗原和p38表达均低于损伤组;而损伤后14天平滑肌α-肌动蛋白表达略高于损伤组,损伤后28天两组间无显著性差异。结论粉防己碱可不同程度地拮抗内膜损伤后血管平滑肌细胞表型转化及p38信号转导,继而减缓新生内膜增殖。

海带多糖对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:研究海带多糖诱导血管平滑肌细胞凋亡及其调控机制。方法:在碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导血管平滑肌细胞增殖模型基础上,运用MTT法考察海带多糖对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用;利用荧光倒置显微镜观察VSMC细胞形态学的变化;通过流式细胞术分析VSMC细胞周期的分布;采用Western blotting免疫印迹法探讨VSMC细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:海带多糖抑制VSMC细胞增殖抑制。细胞形态学观察结果及流式、Western blotting免疫印迹分析结果表明海带多糖可诱导VSMC细胞凋亡。其凋亡机制与其诱导细胞周期阻滞于S期以及提高Bax/Bcl-2比率有关。结论:海带多糖可诱导VSMC细胞凋亡。

葛根素抑制家兔髂动脉球囊损伤后再狭窄

观察家兔髂动脉球囊损伤后葛根素抑制损伤部位平滑肌细胞增殖的药效。复制球囊损伤家兔髂动脉造成血管狭窄模型 ,实验分为 5 0mg (kg·d)葛根素治疗组、10 0mg (kg·d)葛根素治疗组和手术对照组 ,通过体外超声定期检测血管腔直径 ,病理切片观察血管内膜和中膜面积。结果发现 ,球囊损伤术后第 5周 5 0mg (kg·d)葛根素治疗组的血管直径 (1.6 6± 0 .4 1mm)和 10 0mg (kg·d)葛根素治疗组的血管直径 (1.5 9± 0 .17mm)显著高于对照组(1.13± 0 .4 3mm)。病理切片结果发现 10 0mg (kg·d)葛根素治疗组内膜 /中膜面积比 (36 %± 18% )显著低于对照组(12 4 %± 6 4 % )。结果提示 ,葛根素对球囊损伤术后血管平滑肌细胞增殖有一定抑制作用。

温清饮中黄连碱选择性抑制血管平滑肌细胞增殖

以大鼠血管平滑肌细胞探讨温清饮及其组成生药对细胞增殖的影响。 结果，温清饮可抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖。方中黄连提取物对细胞周期G0／G1期的抑制作用最强（GI50为4．4μg／m）。并且，与其他培养细胞（3Y1、dRLh-84、B16和HeLa细胞）比较，黄连抑制血管内皮细胞增殖的浓度最低。进一步研究发现，黄连中的生物碱成分黄连碱作用最强（G150为1．2μg／ml），小檗碱的GI50（35．4μg／ml）约为黄连碱的30倍。上述结果表明，温清饮尤其是黄连碱对血管内皮细胞增殖引起的疾病有预防作用。

局部应用没食子儿茶素-3-没食子酸抑制移植静脉内膜增生

目的探讨局部应用没食子儿茶素-3-没食子酸对移植静脉内膜增生的抑制作用及其发生机制。方法应用异硫氰酸荧光素荧光标记技术和高效液相色谱法体外定性和定量测定血管对没食子儿茶素-3-没食子酸的吸收情况。日本大耳白兔20只,随机分为没食子儿茶素-3-没食子酸处理组和对照组(n=10)。建立兔颈外静脉与颈内动脉间置移植模型,移植前没食子儿茶素-3-没食子酸处理组血管在0.1 g/L没食子儿茶素-3-没食子酸中常温保存1 h,而对照组血管保存在生理盐水中。组织学方法测定移植三周后移植静脉血管新生内膜厚度、内膜中膜厚度比,原位DNA断裂位点的3′-羟基末端标记、Ki67免疫组织化学染色测定新生内膜阳性细胞百分比。结果0.1g/L没食子儿茶素-3-没食子酸中保存1 h2、h4、h,静脉血管的吸收量分别为2.9±0.9 mg/g、5.8±2.1 mg/g和8.0±2.3 mg/g,分布在血管壁全层。两组移植血管术后3周的通畅率均为90%(9/10)。移植术后3周没食子儿茶素-3-没食子酸处理组较对照组内膜厚度(41.1±13.6μm比89.9±48.3μm,P<0.01)及内膜/中膜厚度比(0.40±0.18比0.77±0.31,P<0.05)均显著降低,新生内膜Ki67阳性染色平滑肌细胞百分比也显著下降(22.4%±8.6%比8.8%±2.4%,P<0.05),而凋亡细胞百分比(0.40%±0.55%比0.60%±0.89%,P>0.05)无明显变化。结论局部应用没食子儿茶素-3-没食子酸能够抑制移植静脉内膜增生,可能与其抑制内膜平滑肌细胞增殖有关。

治疗肺动脉高压的中药及其药理学研究进展

肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是以肺小动脉的收缩、肺血管重塑、血栓形成为主要病理特征的渐进性疾病。血管舒缩因子、血管生长因子、炎性因子、低氧诱导因子等多种细胞因子共同参与PH的发病过程,现有药物治疗效果不理想。因此,寻找有效防治PH的药物迫在眉睫。我国中药资源丰富,运用中药治疗PH的历史悠久,因此,从天然产物中筛选和开发疗效确切、安全无毒的防治PH的药物具有得天独厚的优势。近年来,一些学者的研究表明中药防治PH有较好的疗效。该文将对部分中药单体、单味中药及中药复方制剂在PH治疗中的作用及其机制进行综述。

中医药防治冠心病PCI术后再狭窄的研究进展

经皮冠状动脉介入治疗（PCI）后再狭窄（RS）是指狭窄冠状动脉在PCI术后于扩张原位所形成的新的狭窄,严重影响PCI术的效果。1中医药防治PCI术后再狭窄的现代机制研究1.1抑制血管平滑肌细胞增殖PCI术使用的球囊、金属支架及其涂层药物对冠脉内膜的损伤和过度刺激导致血管中膜平滑肌细胞增殖,

绿藻基根硬毛藻的化学成分及其活性

目的:对绿藻基根硬毛藻Chaetomorphabasiretorsa进行化学成分研究,并对单体化合物进行细胞毒活性筛选以及抗动脉硬化活性筛选。方法:利用正相和反相色谱、SephadexLH20色谱以及反相HPLC等手段进行分离纯化,应用MS,IR和1D,2DNMR等方法鉴定结构;通过MTT法对单体化合物进行细胞毒活性筛选;通过MTT法对单体化合物在犬血管平滑肌细胞模型上进行增殖抑制活性测试。结果:从基根硬毛藻中分离并鉴定了5个化合物,分别为euphol(Ⅰ),loloilide(Ⅱ),4cumylphenol(Ⅲ),zeaxanthin(Ⅳ),lactucaxanthin(Ⅴ)。结论:所有化合物均为首次从本属海藻中分离得到,其中4cumylphenol(Ⅲ)为新天然产物。细胞毒活性试验结果显示所有化合物均无明显活性(IC50>10μg·mL-1);犬血管平滑肌细胞增殖抑制测试结果表明化合物Ⅰ具有一定的增殖抑制活性,其细胞成活率为(0.32±0.056)%。

5种南海海藻醇提取物活性初步研究

海藻是海洋生物代谢产物的主要来源之一,能产生丰富多样的生物活性物质。为了更好地利用中国南海的海藻资源,分别对采自中国湛江硇洲岛的1种绿藻基根硬毛藻Chaetomorpha basiretorsa Setchell和4种红藻刺状鱼栖苔Acantophora spicififera(Vahl)Boerg、三列凹顶藻Laurencia tristicha Tseng,Chang etXia、紫杉状海门冬Asparagopsis taxiformis(Delile)Trevisan、鸡毛菜Pterocla diatenuis Okam进行了生物活性研究,分别对细胞毒活性(KB、Bel-7402、PC-3 M、Ketr3和MCF-7)、Na+,K+-ATPase抑制活性以及犬血管平滑肌细胞增殖抑制活性进行了筛选,部分海藻提取物表现出一定的生理活性。

多沙唑嗪对兔动脉粥样硬化斑块及炎症因子表达的影响

多沙唑嗪（doxazosin ，DOX）在国外已广泛用于治疗良性前列腺增生和高血压病，近年来越来越多的实验表明DOX具有改善脂代谢作用，并可通过改善血管内皮功能、抑制血管平滑肌细胞增殖、减少血小板凝聚率等环节延缓动脉粥样硬化（AS）进程［1‐3］，但对DOX作用机制除了α1肾上腺素能拮抗外，其他机制尚不明确。因此本实验拟采用高脂饮食建立兔AS模型，观察DOX对兔主动脉粥样硬化斑块病变的影响，在此过程中对血清中白细胞介素‐6（IL‐6）、肿瘤坏死因子α（TNF‐α）和主动脉血管细胞黏附因子1（VCAM‐1）表达的影响，探讨其抗AS的可能机制，为DOX的临床应用提供依据。

Inhibitory Effects of Sodium Ferulate on Proliferation of Rabbit Aortic Smooth Muscle Cells Induced by Oxidized LDL

The effects of sodium ferulate(SF), a water-soluble element of Chinese medicine Angelica sinensis diels, on cell-mediated oxidative modification of human low density lipoprotein(LDL) and proliferation of rabbit aortic smooth muscle cells(SMCs) were investigated. Using experimental models of proliferation of cultured rabbit aortic SMCs induced by oxidized LDL(ox-LDL), the extent of oxidation was determined by thiobarbituric acid reactive substances(TBARS) method, MTT colorimetry and 3H-thymidine(3H-TdR) incorporation were used to observe proliferation of SMCs. It showed that SF effectively inhibited cell-mediated oxidation induced by Cu2+ in a concentration-dependent manner. At the final concentration of 40, 80, 120 gmL-1, SF could significantly inhibit 3H-TdR incorporation and cell Proliferation in a dose-dependent manner. The results indicated that SF could, in vitro protect LDL against oxidative modification and inhibit the proliferation of SMC, which might be due to its free radical scavenging capacity.

硫化氢与门脉循环

内源性硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）具有舒张血管及消化道平滑肌张力、抑制血管平滑肌细胞增殖等作用,并且参与神经元兴奋、学习和记忆的调节,被认为是继一氧化碳（CO）,一氧化氮（NO）之后的第三个内源性气体信号分子。本文就H2S与肝脏及肝纤维化相关的研究作一综述。

他汀类药物治疗冠心病抗炎机制的研究进展

冠状动脉内易损粥样斑块破裂、继发血栓形成是急性冠脉综合征的发生机制．而炎症反应是导致冠脉内结构性易损斑块向功能性易损斑块进展的重要环节．临床实验和基础研究表明：他汀类药物不但具有降低血浆胆固醇的主要作用，而且还涉及不依赖于其降血脂特性的非调脂抗动脉粥样硬化作用如抗炎性反应、促进斑块稳定及抑制血小板聚集、抑制血管平滑肌细胞增殖与迁移、促进血管平滑肌细胞凋亡、改善内皮功能等．基于以上作用机制，目前他汀类药物已成为冠心病治疗的基石．下面我们主要就他汀类药物治疗冠心病抗炎机制的最新研究进展作一综述。

5／6肾切除大鼠自体动静脉内瘘模型的建立

自体动静脉内瘘是维持性血液透析（MHD）最理想的血管通路，但由于内膜增生导致内瘘成熟失败和迟发丧失功能，严重影响了其远期疗效，因此，有关研究主要集中在抑制血管平滑肌细胞增殖。采用吻合法能在慢性肾衰竭动物建立自体动静脉内瘘模型，但吻合技术的熟练程度会影响结果。我们成功地在5／6肾切除大鼠采用套管法建立自体动静脉内瘘模型，报告如下。