髓源抑制性细胞与肝癌

髓源抑制性细胞(MDSCs)作为肿瘤免疫微环境中的一种异质性细胞群,可在肿瘤患者和荷瘤动物体内大量扩增及聚集,并发挥免疫抑制活性。近年来的一些研究表明,MDSCs在肝癌的发生、发展和转移过程中也发挥重要作用。本文将综述MDSCs与肝癌的相关研究进展,探讨其在肝癌中的作用及潜在治疗策略。

髓系抑制性细胞调节炎症性疾病中Th17应答的研究进展

髓系抑制性细胞(MDSC)是一群具有免疫抑制功能的调节性细胞。MDSC与炎症性疾病的发生密切相关。Th17细胞属于CD4+T细胞亚群,主要通过分泌白细胞介素(IL)-17、IL-22等细胞因子在炎症性疾病中发挥重要作用。MDSC可通过表达精氨酸酶-1、IL-1β及分泌转化生长因子-β等调控Th17活化,进而影响炎症性疾病的过程。本文综述MDSC调控Th17细胞的作用方式及其在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎及哮喘等炎症性疾病中的作用。

基于肿瘤干细胞诱导多核型髓源抑制性细胞形成介导免疫逃逸探讨中医扶正解毒法防治肿瘤转移的可能机制

多核型髓源抑制性细胞(PMN-MDSCs)在肿瘤的免疫逃逸中扮演重要角色,尤其体现在逃逸T淋巴细胞免疫监视方面。肿瘤干细胞具有病理性活化中性粒细胞(PMNs)诱导PMN-MDSCs形成的能力,进而在PMN-MDSCs的帮助下实现免疫逃逸发生转移。中医扶正解毒法对PMN-MDSCs的活化形成及肿瘤干细胞的生物学行为均具有一定的调控作用,这可能为中医药防治肿瘤转移提供了新的依据。基于肿瘤干细胞诱导PMN-MDSCs形成而逃避免疫监视,探讨中医扶正解毒法干预肿瘤转移的可能机制,以期为中医药防治肿瘤转移提供新思路。

髓系抑制性细胞在细菌感染性疾病中的作用研究

髓系抑制性细胞(MDSCs)是一种先天免疫细胞,其特征是具有控制T细胞反应和抑制炎症的能力。MDSCs在癌症中的作用已被深入研究,但在细菌感染期间MDSCs的作用及其与细菌性疾病免疫调节的关联仍不明确。为此,本文综述了MDSCs参与细菌感染的当前主要观点,分析了细菌病原体诱导的MDSCs与肿瘤衍生的MDSCs的相似性和差异,为针对细菌性疾病设计免疫治疗方法提供重要思路。

初诊弥漫大B细胞淋巴瘤患者骨髓来源抑制性细胞的亚群分布及功能异常分析

目的 探讨初诊的弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者外周血和骨髓中骨髓来源抑制性细胞(MDSC)亚群的分布和功能。方法 收集50例初诊DLBCL患者和30例健康供者的外周血标本,10例初诊DLBCL患者和10例健康供者的骨髓标本。采用多色流式细胞术检测上述标本中MDSC两大亚群即单核细胞性MDSC(M-MDSC)和粒细胞性MDSC(G-MDSC)的分布情况。从收集的初诊DLBCL患者和健康供者外周血标本中分别随机选取20例,通过DCFH-DA探针法检测其外周血标本M-MDSC和G-MDSC的活性氧(ROS)水平。结果 初诊DLBCL患者外周血M-MDSC比例明显高于健康供者,差别有统计学意义(P=0.001);2组间G-MDSC比较,差别无统计学意义(P=0.770)。初诊DLBCL患者骨髓标本中M-MDSC比例亦高于健康供者,差别有统计学意义(P=0.001);2组间G-MDSC比例比较,差别无统计学意义(P=0.213)。G-MDSC的ROS表达水平明显高于健康供者,差别有统计学意义(P=0.005);2组间M-MDSC的ROS表达水平比较,差别无统计学意义(P=0.099)。结论 初诊DLBCL患者的外周血、骨髓中M-MDSC亚群比例的上调和外周血G-MDSC的ROS表达水平增高可能参与构成异常免疫微环境,介导疾病进展过程。

细粒棘球蚴慢性感染小鼠髓源抑制性细胞对调节性B细胞分化的调控作用

目的研究细粒棘球蚴慢性感染小鼠不同亚群髓源抑制性细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSCs)对调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs)分化的调控作用。方法将20只C57 BL/6J小鼠随机分为对照组和感染组。感染组小鼠腹腔注射活原头节2000个/只,对照组小鼠注射等体积生理盐水。于感染第180天后,解剖并观察小鼠腹腔和各脏器的病变。无菌条件下取其脾细胞,流式细胞术检测MDSCs及其亚群比例。利用免疫磁珠分选技术,分选感染组和对照组小鼠MDSCs亚群以及正常对照组小鼠CD19^(+)B细胞,将二者以1∶1比例共培养,3 d后流式检测Bregs比例。结果细粒棘球慢性感染小鼠腹腔和内脏器官中发现单房性包囊。MDSCs、多核MDSCs(PMN-MDSCs)及单核MDSCs(M-MDSCs)的比例较对照组均明显升高(P<0.05)。M-MDSCs与B细胞共培养结果显示,与单纯B细胞组相比,正常对照及感染小鼠M-MDSCs均能显著增加CD19^(+)IL-10^(+)B以及CD19^(+)CD5^(+)CD1d^(high)IL-10^(+)B(即Bregs)细胞的比例(P<0.05),但正常对照组和感染组M-MDSCs调控二者的能力无显著差异(P>0.05)。PMN-MDSCs与B细胞共培养结果显示,与单纯B细胞组相比,正常对照小鼠PMN-MDSCs能显著增加CD19^(+)IL-10^(+)B以及Bregs比例(P<0.05),增加培养上清中IL-10及TGF-β含量(P<0.01);与对照小鼠PMN-MDSCs相比,感染小鼠PMN-MDSCs则可显著减少CD19^(+)IL-10^(+)B以及Bregs比例(P<0.01),降低培养上清中IL-10及TGF-β含量(P<0.01)。结论细粒棘球蚴慢性感染小鼠MDSCs及其亚群比例均升高;且在体外,感染小鼠PMN-MDSCs可抑制Bregs分化。

髓源抑制性细胞在日本血吸虫感染小鼠脾脏及外周血富集的研究

目的分析日本血吸虫尾蚴感染小鼠体内髓源抑制性细胞（myeloid．derivedsuppressorcells，MDSC）的富集情况．初步探索其在抗血吸虫感染免疫中的作用。方法日本血吸虫尾蚴用腹部贴片法感染C57BL／6小鼠（20条／鼠）24只。感染后1、2、6和8周采集小鼠（各6只）外周血，感染6、8周组小鼠脱颈处死后取脾组织，制备单细胞悬液。各时段同时设健康对照组（各6只）。通过流式细胞术检测小鼠脾组织和外周血中的Gr-1＋细胞、CD11b＋细胞及MDSC比例。通过CD4＋T细胞增殖抑制试验验证感染小鼠Gr-1＋粒细胞的功能。结果感染后6周和8周组小鼠外周血MDSC、Gr-1＋细胞、CD11b＋细胞分别约占总单核细胞（MNC）的38．2％～57．8％和47．1％～77．6％，28．9％～44．6％和40-4％～72．9％，36．0％-48．1％和40-3％-68．3％，显著高于健康对照组（15．1％～20．4％，8．4％～17-3％，9．8％～22．6％）、感染后1周（16．2％～19.8％，13．0％～16.8％，17．6％～19．4％）及2周组（19．8％-29．5％，17．2％～22．2％和20．9％-33.3％）（P〈0．01）。而感染后1周、2周组与健康对照组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。脾组织与外周血中的MDSC、Gr—1＋细胞、CD11b＋细胞变化趋势一致。此外，从感染小鼠脾组织分离到的Gr-1＋细胞显著抑制刀豆球蛋白诱导的健康小鼠的CD4＋T细胞增殖能力。结论日本血吸虫感染可诱导小鼠体内MDSC富集，且感染Gr.1＋细胞可抑制正常CD4＋T细胞增殖。

乳腺癌患者肿瘤组织中髓源抑制性细胞的临床意义

目的:研究乳腺癌患者肿瘤组织中髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:收集天津肿瘤医院2009年2月至2009年12月间35例乳腺癌根治术的手术切除组织标本,制成单细胞悬液;流式细胞术检测其中MDSCs(Lin-CD33+CD13+CD14-CD15-)比例,免疫组化法检测同一肿瘤组织中ER、PR、Her-2表达;分析MDSCs比例与患者临床病理特征的关系。结果:乳腺癌患者肿瘤组织中MDSCs比例与临床分期、淋巴结转移有关,Ⅲ期患者MDSCs比例[(11.70±7.85)%]高于Ⅰ/Ⅱ期患者[(5.32±4.59)%],发生3个以上淋巴结转移患者的MDSCs比例[(10.97±7.87)%]高于3个以下(含3个)淋巴结转移的患者[(5.86±5.26)%](P<0.05)。未观察到MDSCs比例高低与患者年龄、病理类型、肿瘤直径、组织学分级,以及ER、PR、Her-2表达有关(P>0.05)。结论:乳腺癌患者肿瘤组织中MDSCs比例与患者临床分期、淋巴结转移有关,MDSCs增多可能是乳腺癌患者发生免疫抑制的重要原因之一。

肿瘤来源的抑制性细胞因子影响树突状细胞的微观流变特性并导致免疫应答恶化

现已证明,在肿瘤发生过程中,司职抗原呈递的树突状细胞的功能存在缺陷和紊乱,从而导致了免疫系统的显著受抑和肿瘤的免疫逃逸.为了探索肿瘤的免疫逃逸机制,利用生物物理学和微观流变学的方法研究了肿瘤来源因素对树突状细胞(dendriticcells,DCs)分化过程的影响.发现来源于肿瘤微环境的细胞因子等成分,导致DCs的渗透脆性增加、细胞膜脂流动性显著下降,而且细胞的转录水平和能量状态也明显改变,导致DCs的抗原摄取能力和活化幼稚T细胞的能力显著下降.所以,DCs的微观流变特性的改变也许是肿瘤免疫逃逸机制的一个方面.

爆发性肝炎小鼠中髓系衍生抑制性细胞对NK细胞活性影响的研究

目的:利用爆发性肝炎小鼠模型,研究髓系衍生抑制性细胞(myeloid-derived suppressorcells,MDSCs)在爆发性肝炎进展过程中对自然杀伤细胞(nature killer cell,NK cell)的作用及其相关机制,探讨急性爆发性肝炎的发病机制及可能的干预措施。方法:通过腹腔注射细菌脂多糖和D-半乳糖胺诱发建立爆发性肝炎模型,流式细胞仪分析爆发性肝炎模型不同时间不同组织中MDSCs和NK细胞的比例变化以及NK细胞活性。结果:在模型小鼠中随着肝炎的发展不同组织中的MDSCs的比例增加,肝脏中NK细胞的比例增加,同时,不同组织中NK细胞表达NK细胞活化受体NKG2D的细胞比例增加,NKG2D的平均荧光强度增强。结论:小鼠爆发性肝炎模型中MDSCs能促进NK细胞的活化与增殖,初步揭示了在爆发性肝炎机体中MDSCs及NK细胞参与肝脏损伤的作用机制。

髓系抑制性细胞在小鼠肝癌免疫逃逸中的作用

目的:研究荷瘤小鼠脾脏中髓系抑制性细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)比例的变化及在组织中的分布,探讨其在肝癌免疫逃逸中的作用。方法:采用肝癌细胞原位移植法建立小鼠原位肝癌模型,流式细胞仪检测正常小鼠和荷瘤小鼠7、14、21天脾脏中MDSCs的比例,免疫组织化学染色对其进行定位分析。结果:荷瘤小鼠脾脏中MDSCs的比例比正常小鼠显著增高(P<0.05),而且随着荷瘤时间的延长,MDSCs的比例逐渐增加。正常小鼠脾脏中少量的MDSCs散在分布于红髓区,荷瘤后大量MDSCs主要聚积在边缘区及白髓区的动脉周围淋巴鞘。结论:小鼠脾脏中MDSCs的比例与肿瘤进展相关,且主要分布在脾脏胸腺依赖区。

髓系抑制性细胞和调节性T细胞在小鼠实验性结肠炎中的作用

目的探讨髓系抑制性细胞(MDSC)和调节性T细胞(Treg细胞)在小鼠溃疡性结肠炎发生、发展过程中的作用。方法使用5%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液复制小鼠溃疡性结肠炎模型,每日观察小鼠体重和大便状况。DSS处理3和7 d后处死小鼠,苏木精-伊红染色法观察病理组织学变化,流式细胞仪检测脾脏和肠系膜淋巴结中MDSC和Treg细胞的表达。结果模型组小鼠于造模第4天体重开始下降,有腹泻和血便,HE染色结果显示小鼠结肠出现黏膜损伤及炎症表现。与对照组和造模3 d组比较,造模7 d组肠系膜淋巴结中Treg细胞比例增加,而MDSC比例降低;进一步观察MDSC亚群变化发现,粒细胞型MDSC在造模7 d组中比例下降,而单核细胞型MDSC则无改变。无论Treg细胞还是MDSC,脾脏中的水平3组比较差异无统计学意义。结论急性溃疡性结肠炎可导致MDSC降低和Treg细胞增高,可能与疾病的发生发展有关。

不同流式抗体分选小鼠原位肝癌模型中髓系来源抑制性细胞的比较

目的比较不同的流式抗体分选小鼠原位肝癌模型骨髓中的髓系来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)。方法建立BALB/c小鼠原位肝癌移植模型,10d后分离荷瘤小鼠骨髓细胞,分别进行CD11b、Gr-1单色标记及CD11b和Gr-1双色标记后,进行流式分选。比较这三种方式分选的MDSCs纯度、活力,并检测分选的细胞精氨酸代谢酶1(arginase-1,Arg-1)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达,并通过活性氧检测试剂盒检测MDSCs活性氧(reactive oxygen species,ROS)表达。结果三种方法分选到的细胞活力和纯度都大于90%。CD11b标记进行分选操作最为方便,易于统一,但纯度略差;Gr-1标记进行分选时,细胞群不好确定,但纯度高;双色标记进行分选纯度最高。分选的细胞高表达Arg-1、iNOS和ROS。结论三种抗体标记方法均能从小鼠原位肝癌模型骨髓中的分选到纯度高、活力好的MDSCs,而用CD11b单色标记操作方便,易于统一,可作为首选方法。MDSCs的成功分选,对于后续开展MDSCs的生物学和免疫学功能研究奠定了基础。

高脂饲料动员CD11b^+Gr-1^+髓系抑制性细胞参与动脉粥样硬化形成的研究

目的:研究高脂饲料饲养ApoE-/-小鼠建立动脉粥样硬化动物模型的过程中CD11b+Gr-1+髓系抑制性细胞的变化趋势,以期揭示高脂血症导致动脉粥样硬化的另一种可能的细胞机制。方法:将12只雄性ApoE-/-小鼠随机分为对照组(n=6)和模型组(n=6),分别给予普通饲料与高脂饲料处理。8周后酶法和免疫比浊法检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A-I(apoA-I)和载脂蛋白B(apoB)水平;HE染色观察主动脉病理形态学改变;油红O染色观察内皮下间隙脂质沉积情况;流式细胞术分析骨髓、脾脏、外周血中CD11b+Gr-1+髓系抑制性细胞的百分比,比较其与对照组之间的差异度。结果:8周的高脂饲喂使得ApoE-/-小鼠血脂水平显著改变,动脉粥样硬化斑块明显形成,CD11b+Gr-1+髓系抑制性细胞占骨髓单个核细胞比例显著升高,并进一步被动员释放到外周组织,导致循环中CD11b+Gr-1+髓系抑制性细胞显著增加。结论:高脂饲料饲养ApoE-/-小鼠能使CD11b+Gr-1+髓系抑制性细胞的生成显著增加,并向循环和外周组织释放。高脂血症可能是通过激活CD11b+Gr-1+髓系抑制性细胞的途径来参与动脉粥样硬化的发生、发展。

白细胞介素17体外抑制小鼠髓源抑制性细胞的凋亡

目的:体外观察白细胞介素17(interleukin17,IL-17)对小鼠髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)凋亡的影响。方法:通过皮下注射Lewis细胞构建荷瘤小鼠模型,采用免疫磁珠分选技术(MACS)分离脾脏MDSCs,常规培养。经IL-17处理24 h后,采用流式细胞术检测MDSCs凋亡率;经IL-17处理6 h后通过蛋白质印迹法检测细胞Bcl-2的表达。结果:IL-17处理组活细胞数量为(9.547±0.962 6)×10~4,明显高于对照组活细胞数[(4.123±0.259 8)×10~4,P<0.01];IL-17处理组活细胞比例为(59.55±2.831)%,明显高于对照组[(45.33±1.556)%,P<0.05];对照组晚期凋亡细胞比例为(22.87±1.349)%,明显高于IL-17处理组[(13.70±1.003)%,P<0.01]。蛋白质印迹检测结果显示,IL-17处理后的MDSCs抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平明显上调(P<0.05)。结论:IL-17体外可明显抑制MDSCs的凋亡。

不同液体复苏对多发伤伴失血性休克患者凝血功能及髓系抑制性细胞数的影响

目的:探讨不同液体复苏对多发伤伴失血性休克患者凝血功能及髓系抑制性细胞(MDSCs)数的影响。方法:选取2014年4月至2016年4月深圳市宝安区松岗人民医院收治的多发伤伴失血性休克患者50例,将患者按随机数字表法分为两组,每组25例,分别实施积极液体复苏(积极组)和限制性液体复苏(限制组)。记录两组病死率和并发症发生情况,并观察两组治疗前、后凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、剩余碱(BE)及治疗后不同时间MDSCs数量变化。结果:积极组病死率为20.00%,限制组为16.00%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,两组患者PT、APTT、BE比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,限制组PT、APTT较积极组缩短,BE较积极组降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗后12 h,限制组的MDSCs数为(9.14±2.98)个,明显高于积极组的(6.36±1.38)个(P<0.05)。限制组急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、急性肾功能衰竭(ARF)、多器官功能障碍综合征(MODS)的发生率均低于积极组(均P<0.05)。结论:采用限制性液体复苏救治多发伤伴失血性休克患者在改善凝血功能、减少酸中毒和并发症发生方面优于积极液体复苏,而早期积极液体复苏能够更有效抑制骨髓MDSCs的数量,对失血性休克后的免疫调节作用较强。

免疫抑制性细胞Treg和MDSCs与胃癌临床病理特征关系的研究

背景:肿瘤细胞具有逃避机体免疫系统杀伤的免疫逃逸能力。调节性T细胞(Treg细胞)和髓源抑制性细胞(MDSCs)被认为是最为关键的参与肿瘤免疫逃逸机制的细胞亚群。目的:检测胃癌患者外周血Treg细胞、MDSCs比率,初步探讨两者在胃癌发生、发展中的作用。方法:收集77例胃癌患者和20名健康体检者的外周血标本,以流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞、MDSCs比率,分析两者与胃癌临床病理特征的关系以及两者间的相关性。结果:胃癌组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在CD4+T细胞中所占比率、MDSCs在单核细胞中所占比率均显著高于正常对照组(Treg细胞:4.72%±1.01%对1.57%±0.99%,P<0.01;MDSCs:21.72%±10.12%对2.90%±1.80%,P<0.01)。胃癌患者外周血Treg细胞比率与胃癌临床分期、浸润深度和淋巴结转移相关(P<0.05),MDSCs比率与胃癌临床分期相关(P<0.05),且Treg细胞比率与MDSCs比率呈显著正相关(rs=0.681,P<0.01)。结论:胃癌患者存在外周血免疫抑制性细胞Treg、MDSCs高表达现象,两者可能通过参与肿瘤免疫逃逸促进胃癌发生、发展。

髓源抑制性细胞的功能及其逆转策略

髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)是在骨髓中产生的一群具有高度异质性的免疫抑制细胞,在肿瘤等病理状态下大量聚集,是促进肿瘤进展、降低患者对传统治疗反应性的关键因素。近年来,免疫检查点阻断剂和基因工程T细胞过继回输治疗延长了许多晚期恶性肿瘤患者的生存期,但上述免疫疗法在肺癌、结直肠癌等实体瘤中有效率仅为15%~40%,这与实体瘤免疫抑制微环境密切相关。MDSC在肿瘤微环境中聚集,通过抑制T细胞或NK细胞增殖及功能减弱宿主抗肿瘤免疫反应,是患者对免疫治疗耐受的关键机制。因此,明确MDSC聚集及功能特征是探索提高免疫治疗效果的重要研究方向。本文将系统阐述MDSC的产生、聚集及其免疫抑制功能的调控机制,概述目前靶向MDSC治疗的最新研究进展。

髓系衍生抑制性细胞与肿瘤免疫耐受

髓系衍生抑制性细胞(MDSCs)是一群具有免疫抑制功能的髓系细胞群体,包括未成熟DC、巨噬细胞和其他早期分化阶段的髓系细胞等,具有异质性和可塑性的特点。近来研究发现,在肿瘤动物模型及肿瘤患者体内常有MDSCs的聚积,并且与肿瘤免疫逃逸密切相关。本文就MDSCs的性质、募集和活化的因素、免疫调节机制及其与肿瘤免疫的关系进行综述。

荷瘤小鼠外周血髓系抑制性细胞的比例与血清转化生长因子-β_1水平的关系

目的通过建立小鼠原位肝癌模型,检测荷瘤小鼠外周血髓系抑制性细胞(MDSC)的比例和血清转化生长因子(TGF)-β1水平,探讨其在肝癌发病中的作用机制。方法建立小鼠原位肝癌模型,分离荷瘤小鼠外周血的单个核细胞,流式细胞仪检测荷瘤小鼠不同时间外周血MDSC的比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测荷瘤小鼠血清TGF-β1水平。以同期正常小鼠作对照。结果荷瘤小鼠外周血MDSC比例明显升高:对照组、模型组7、14、21d外周血MDSC的比例分别为(3.5±2.2)%、(9.4±2.6)%、(16.4±5.6)%、(25.3±11.3)%,除模型组7d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组与对照组比较均有统计学意义(P<0.05);荷瘤小鼠血清TGF-β1水平明显升高:对照组、模型组7、14、21d血清TGF-β1水平分别为(4.9±1.4)、(14.1±6.0)、(24.0±3.3)、(9.2±1.2)ng/ml。除模型组21d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。外周血MDSC的比例与血清TGF-β1水平呈明显正相关(r=0.564,P<0.05)。结论随着肿瘤的进展,外周血MDSC的比例明显升高,且与血清TGF-β1水平呈明显正相关,提示荷瘤小鼠外周血MDSC的比例与肿瘤的生长进展密切相关,MDSC通过分泌TGF-β1发挥免疫抑制作用,可促进肿瘤的生长与转移。