血清抑制性G蛋白α亚基-2在2型糖尿病合并不同分级高血压患者中的变化及意义

目的探讨血清抑制性G蛋白α亚基-2(Giα-2)水平在2型糖尿病合并不同分级高血压患者中的改变及临床意义。方法选取197例2型糖尿病患者作为研究对象,分为单纯2型糖尿病(DS)组45例,2型糖尿病合并高血压1级(DH1)组47例,2型糖尿病合并高血压2级(DH2)组51例,2型糖尿病合并高血压3级(DH3)组54例,另选取40例健康人作为健康对照(NS)组。应用酶联免疫吸附法测定血清Giα-2水平。多元线性回归法分析Giα-2水平与各影响因素的相关性。结果 DS组Giα-2水平较NS组降低,DH1、DH2、DH3组Giα-2水平均高于DS组,随着血压增加,Giα-2水平逐渐增加,其中DH3组最高(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示Giα-2水平与收缩压呈正相关(r=0.54,P<0.05),进一步多元回归分析提示收缩压是Giα-2水平的独立影响因素。结论 Giα-2可能对2型糖尿病合并高血压的发生有一定的影响。

G蛋白β2亚基对结直肠癌细胞转移能力的影响

目的探讨G蛋白β2亚基(GNB2)对结直肠癌细胞体外迁移和体内转移能力的影响及机制。方法将对数生长期人胚肾细胞293FT随机分为对照组和shGNB2组,对照组293FT细胞转染PSPAX2、PMD2G、Control质粒,shGNB2组293FT细胞转染PSPAX2、PMD2G、shGNB2质粒,分别收集病毒上清液。将对数生长期人结直肠癌细胞HCT116、RKO按随机数字表法分为对照组和shGNB2组,应用293FT细胞对照组病毒上清液转染对照组HCT116和RKO细胞,应用293FT细胞shGNB2组病毒上清液转染shGNB2组HCT116和RKO细胞,应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测对照组和shGNB2组HCT116、RKO细胞中GNB2 mRNA的表达,Western blot法检测对照组和shGNB2组HCT116、RKO细胞中GNB2、波形蛋白(Vimentin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,划痕愈合实验检测对照组和shGNB2组HCT116、RKO细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测对照组和shGNB2组HCT116、RKO细胞迁移细胞数。分别取对照组和shGNB2组HCT116细胞2×106个注射于裸鼠皮下,3周后取出皮下肿瘤,剪成1 mm 3大小的组织块。按随机数字表法将8只4~5周龄雌性裸鼠分为对照组和shGNB2组,每组4只;将对照组HCT116细胞皮下瘤组织块接种于对照组裸鼠回盲部肠浆膜处,shGNB2组HCT116细胞皮下瘤组织块接种于shGNB2组裸鼠回盲部肠浆膜处;记录裸鼠死亡时间,取出肝脏,观察肝脏肿瘤转移数。结果shGNB2组HCT116、RKO细胞中GNB2 mRNA和蛋白相对表达量显著低于对照组(P<0.01)。培养48 h时,shGNB2组HCT116、RKO细胞划痕愈合率显著低于对照组(P<0.01),shGNB2组HCT116、RKO细胞迁移数显著少于对照组(P<0.01)。shGNB2组裸鼠肝内转移瘤数显著少于对照组(P<0.05)。shGNB2组HCT116、RKO细胞中Vimentin、N-cadherin蛋白相对表达量显著低于对照组,E-cadherin蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.01)。结论干扰GNB2表达可有效抑制结直肠癌细胞的转移能力,其机制可能是GNB2通过调控上皮间质转化过程来参与结直肠癌细胞的转移。

衣被蛋白复合物亚基β-2在膀胱癌中的分子机制研究

目的研究衣被蛋白复合物亚基β-2(coatomer protein complex subunitβ2,COPB2)的表达对膀胱癌发病的影响,探讨COPB2在膀胱癌中的分子作用机制。方法从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库下载膀胱癌中COPB2的相关数据,探究COPB2的表达水平与预后关系。根据膀胱癌不同分期将样本进行分组。使用Kaplan-Meier法对不同组别间的生存情况进行分析。使用COPB2-shRNA慢病毒和阴性对照慢病毒感染5637细胞(人膀胱癌细胞),RT-qPCR和蛋白印迹检测细胞中COPB2表达变化。使用平板克隆实验评估细胞的增殖能力。对细胞中p27 kip1、半胱天冬酶-3和多腺苷二磷酸多聚酶的表达水平进行蛋白印迹检测。检测细胞中与上皮-间充质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关的N-钙黏蛋白和Snail的表达水平。结果肿瘤免疫浸润评分数据库(tumor immune estimation resource,TIMER)显示,相比于正常膀胱,COPB2在膀胱癌中过表达。COPB2表达水平越高,患者预后越差(P<0.05)。COPB2敲低后膀胱癌细胞增殖能力减弱,凋亡相关蛋白表达增加,EMT相关蛋白表达减弱。结论COPB2在膀胱癌中的高表达显著促进膀胱癌发生发展,是一种有前途的膀胱癌治疗靶点。

西藏羊和白-藏杂交羊外周血IFN-α、IgG和IL-2的研究

为了解西藏羊和白萨福克羊与西藏羊的杂交后代羊生长发育中免疫因子的分泌特点和免疫学特征,以西藏羊和白-藏杂交羊为研究对象,应用ELISA方法检测0.5、1和1.5岁外周血中干扰素(IFN-α)、免疫球蛋白G(IgG)和白细胞介素-2(IL-2)的质量浓度,分析其变化规律。结果表明:随年龄的增长,藏公羊IL-2呈逐渐降低的趋势,而藏母羊呈逐渐升高的趋势(P<0.05);藏杂交公羊和藏母羊IgG含量都呈逐渐降低趋势,藏公羊下降较明显(P<0.05);藏公羊IFN-α的含量逐渐降低,0.5岁与1岁之间下降趋势明显(P<0.05),而藏母羊变化不大。随年龄的增长,白-藏杂交羊公羊和母羊IL-2含量先降低再升高;白-藏杂交羊公羊IgG含量变化不大,母羊则是先升高后下降趋势,且1岁和1.5岁之间下降明显(P<0.05);白-藏杂交羊公羊IFN-α的含量逐渐降低,而母羊是先升高后下降。

G蛋白抑制性多肽-27药动学测定方法的建立

目的建立测定小鼠血浆中G蛋白抑制性多肽-27(GCIP-27)浓度的放射性核素(125I)示踪测定法。方法125I-GCIP采用Iodogen法标记,血浆中GCIP的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法或低相对分子质量SDS-PAGE电泳法测定,并比较其测定结果。结果TCA沉淀法和电泳法同时对照测定60份GCIP血浆样品,结果呈良好的相关性,r=0.9554。2种方法最低检测浓度均为2.0μg.L-1,日内、日间RSD均小于10%,血浆在3.75～480μg.L-1内均呈良好的相关性,相关系数分别为r=0.9977和0.9964,血浆中GCIP的平均回收率分别为(92.72±4.55)%和(91.77±5.21)%。结论同位素示踪法与沉淀法或电泳法结合,方法稳定、可靠、灵敏度较高,两法相辅相成,适于GCIP-27血药浓度测定。

肺癌患者GASP-1、LCN2和TPX2的表达水平及其与TNM分期和预后的相关性分析

目的探究肺癌患者血清G蛋白偶联受体相关分选蛋白1(GASP-1)、脂质运载蛋白-2(LCN2)、Xklp2靶蛋白(TPX2)表达水平及其与TNM分期和预后的相关性。方法选取2019年4月至2022年5月在南部战区总医院接受诊疗的92例肺癌患者作为观察组,同期选取92例健康体检者作为对照组。采集所有研究对象的外周静脉血样,检测血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平。将观察组按预后情况分为预后良好组和预后不佳组,比较2组患者血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平。分析肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平与TNM分期和预后的相关性。结果观察组血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平高于对照组(P<0.05);观察组TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期的肺癌患者血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平高于TNM分期为Ⅰ、Ⅱ期的肺癌患者(P<0.05),TNM分期为Ⅳ期的患者血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平均高于TNM分期为Ⅲ期的患者(P<0.05)。预后良好组血清GASP-1、LCN2、TPX2水平均低于预后不佳组(P<0.05);观察组治疗前血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平均与TNM分期呈正相关(P<0.05),治疗后血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平均与预后呈负相关(P<0.05)。结论血清GASP-1、LCN2、TPX2表达水平与肺癌患者的TNM分期相关,在对症治疗后检测上述血清指标,可在一定程度上反映患者预后情况,为临床提供参考。

miR-144-3p通过调控ABCG2信号通路对膀胱癌细胞的影响

目的探究miR-144-3p通过调控ATP结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)信号通路对膀胱癌细胞影响。方法选取2023年5月黑龙江省医院泌尿科实验室1株人膀胱癌T24细胞株为研究对象,细胞培养后接种6孔板中,将其随机分为A组、B组、C组,每组细胞均设置3个平行样本,每个样本细胞检测均设置3个复孔(每组共计12个样本量)。A组转染miR-144-3p模拟物,B组转染miR-144-3p抑制剂,C组转染无意义序列,另选正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞株为D组,以实时定量联合酶链式反应(quantification real-time polymerase chian reaction,qRT-PCR)法检测4组细胞中miR-144-3p表达情况,以CCK-8法检测4组细胞增殖活力,以Transwell检测细胞迁移数量,检测ABCG2通路蛋白表达情况;以双荧光素酶报告基因实验预测miR-144-3p与ABCG2靶向结合关系。结果转染前,T24细胞中miR-144-3p表达水平较SV-HUC-1细胞低,ABCG2水平较SV-HUC-1细胞高,差异有统计学意义(t=8.145、13.928,P<0.05);转染48 h时,miR-144-3p水平由低至高依次为B组、C组、A组,差异有统计学意义(P<0.05),ABCG2表达水平由低至高依次为A组、C组、B组,差异有统计学意义(P<0.05);转染48 h后,细胞增殖能力(A值)由低至高依次为A组、C组、B组,细胞凋亡率由低至高依次为B组、C组、A组,细胞迁移能力(个数)由低至高依次为A组、C组、B组,ABCG2表达水平由低至高依次为A组、C组、B组,差异有统计学意义(P<0.05);经在线数据库TargetScan预测,测得ABCG23’UTR与miR-144-3p存在结合靶点;共转染48 h时检测,3’-UTR-WT miR-144-3p组荧光素酶活性较3’-UTR-Wut miR-144-3p组低,差异有统计学意义(P<0.05);3’-UTA-WT NC组、3’-UTR-Mut NC组荧光素酶活性相近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论ABCG23’UTR与miR-144-3p存在结合靶点,miR-144-3p表达上调可抑制ABCG2表达,并抑制细胞迁移、增殖,促进细胞凋亡。

纳米金抑制Ang-2和RGS-5表达导致裸鼠肝癌血管正常化

目的:观察纳米金在一定时间窗内,对裸鼠H22肝癌组织中血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)、G蛋白信号调节蛋白-5(RGS-5)表达及肝癌血管正常化的影响。方法:6周龄BALB/c裸鼠48只,从右腋皮下注入H22肝癌细胞,肿瘤形成约3～4 mm大小,随机分为对照组(12只,注入生理盐水)和实验组(36只)。实验组从肿瘤周围及瘤内注入纳米金溶液0.2 mL(浓度为500 nmol/L),每天1次;连续给药3 d、7 d、11d后,分批处死12只,取肿瘤标本,用免疫化学染色法检测Ang-1、Ang-2及RGS-5的表达,并用电镜观察肿瘤血管壁周细胞形态。结果:(1)Ang-1在纳米金治疗后第3 d、第7 d及第11 d阳性率分别为16.7%、50.0%和16.7%,均高于对照组(8.3%),差异显著(P<0.05);其中实验组第7 d时Ang-1阳性率最高,与其在第3 d、第11d时比较,差异显著(P<0.05)。Ang-2在纳米金治疗后第3 d、第7 d及第11 d阳性率分别为33.3%、16.7%和41.7%,均低于对照组(58.3%),差异显著(P<0.05);其中Ang-2在第7 d时阳性率最低,与其在第3 d、第11 d时比较,显著差异(P<0.05)。(2)RGS-5在纳米金治疗后第3 d、第7 d和第11 d阳性率分别为33.3%、16.7%和50.0%,其中第7 d阳性率最低;低于对照组(50.0%)及第3 d、第11 d实验组,差异显著(P<0.05)。(3)不成熟周细胞覆盖率在纳米金治疗后第7 d时最低,为19.6%±4.3%,低于对照组(64.8%±11.7%)及第3 d(32.5%±7.9%)、第11 d(41.2%±9.1%)实验组,差异显著(P<0.05)。电镜观察见实验组裸鼠在纳米金治疗后第7 d血管外壁周细胞形态多数趋于正常,完整覆盖内皮细胞;而对照组周细胞形态大小不一、结构不完整,对内皮细胞覆盖少。结论:纳米金在其用药7 d时间窗内,能最大限度地通过抑制Ang-2和RGS-5在裸鼠肝癌组织中的过度表达,减少不成熟周细胞对新生血管的覆盖,使裸鼠肝癌血管正常化。

水稻种子贮藏谷蛋白α-2亚基减少突变体

通过筛选水稻 (OryzasativaL .)受精卵的甲基亚硝基脲 (MNU)处理后代 ,获得 9个谷蛋白α_2亚基减少 (α_2L)突变体。这些突变体依据其SDS_PAGE图谱又可分成 3种类型 :α_1显著增加型 (α_1H/α_2L)、β_2减少型 (β_2L/α_2L)和α_3显著增加型 (α_3H/α_2L)。双向电泳分析揭示了产生突变体α_2L的原因在于缺少了一条pI6 .71/α_2的多肽 ;α_1H和α_3H的原因在于分别形成了一条新的多肽pI6 .5 0 /α_1和pI6 .90 /α_3;而产生 β_2L的原因在于缺少一条pI8.74/ β_2的多肽。pI6 .71/α_2和pI8.74/ β_2多肽同时缺失于同一突变体暗示二者可能来源于同一前体 ,为同一基因的产物。这些突变体为水稻谷蛋白遗传规律、生物合成遗传调控机制、基因功能以及蛋白组学研究不可多得的素材。

穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型PLA2R和IgG4表达的影响及其机制

目的 分析穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型磷脂酶A2受体(Phospholipase A2 receptor, PLA2R)和免疫球蛋白G亚型4(Immunoglobulin G4,IgG4)表达影响及可能机制。方法 将40只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、贝那普利组(10 mg/kg)、低和高剂量穿山龙总皂苷组(80 mg/kg、160 mg/kg),每组各8只。除对照组,其余4组采用Border法制备膜性肾病模型,造模成功后,贝那普利组灌胃给予贝那普利10 mg/(kg·d),低和高剂量穿山龙总皂苷组分别灌胃给予穿山龙总皂苷80 mg/(kg·d)、160 mg/(kg·d),对照组、模型组灌胃给予10 ml/(kg·d)生理盐水。连续给药4周后,检测24 h尿蛋白、白蛋白、血肌酐、血尿素氮、尿酸水平,HE染色观察肾脏病理改变,蛋白免疫印迹法检测肾脏中M型PLA2R、IgG4、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphorylated phosphoinositide 3-kinase, p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶(Heme oxygenase-1,HO-1)表达水平。结果 与模型组比较,贝那普利组、高剂量穿山龙总皂苷组白蛋白水平明显升高,血肌酐、血尿素氮、尿酸水平明显降低,差异均有统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,贝那普利组、低剂量和高剂量穿山龙总皂苷组肾脏病理改变明显改善,24 h尿蛋白水平及肾脏中M型PLA2R、IgG4、p-PI3K、p-AKT表达水平明显降低,肾脏中Nrf2、HO-1表达水平明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与降低PLA2R、IgG4表达,抑制PI3K/AKT通路,激活Nrf2/HO-1通路相关。

阿片受体信号调节相关蛋白RGS4及β-arrestin2在泻剂结肠大鼠结肠中的表达变化

目的探讨泻剂结肠大鼠结肠中阿片受体信号调节相关蛋白RGS-4和β-arrestin2的表达变化及意义。方法 7~8周龄Wistar大鼠16只,体质量（200±20）g,雌雄各半,按随机数字表法分为对照组（n=8）及泻剂结肠组（n=8）,饲养环境温度18~28℃,相对湿度40%~80%。对照组饲以普通软饲料,泻剂结肠组饲以混有酚酞的饲料,建立泻剂结肠大鼠模型。通过RT-PCR及Western blot方法对RGS-4和β-arrestin2在结肠中的表达进行相对定量分析。结果两种阿片受体信号调节蛋白在泻剂结肠组及对照组大鼠结肠内均有不同程度的表达。RT-PCR结果显示泻剂结肠组RGS-4和β-arrestin2 mRNA相对表达水平均明显高于对照组[（3.418 3±0.247 4）vs（0.987 6±0.034 1）,（2.974 4±0.214 2）vs（0.921 1±0.040 1）,P〈0.01]。Western blot检测结果显示RGS-4和β-arrestin2的表达在泻剂结肠组较对照组明显升高[（0.403 4±0.049 9）vs（0.115 3±0.010 2）,（0.913 9±0.061 1）vs（0.467 6±0.043 7）,P〈0.01]。结论RGS-4和β-arrestin2在泻剂结肠大鼠结肠中表达均明显增强,提示其可能增强泻剂结肠大鼠结肠MOR信号传导调节功能。

角蛋白19片段K19-2G2和TSGF对肺癌诊断价值的比较

目的探讨角蛋白19片段K19-2G2检测对肺癌的诊断价值,并与肿瘤相关物质(TSGF)进行比较。方法应用化学发光免疫分析方法检测300例肺癌患者,80例肺部良性疾病患者和200例健康体检者的血清K19-2G2浓度。同时采用TSGF试剂盒检测TSGF的含量。比较三组患者K19-2G2和TSGF的变化。结果三组患者K19-2G2和TSGF比较差异有统计学意义(P<0.05)。300例肺癌患者中K19-2G2阳性检出率为95%,TSGF阳性检出率为73.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌患者K19-2G2血清水平与TSGF血清水平呈正相关。结论角蛋白19片段K19-2G2对肺癌的诊断价值及临床应用效果优于TSGF。

β2肾上腺素受体基因、α上皮细胞钠通道基因和G蛋白β3亚基基因联合变异与维吾尔族人群高血压的关系

目的:探索β2肾上腺素受体(ADRB2)基因G1023A,α上皮细胞钠通道(ENaC)基因G2139A和G蛋白β3亚基(GNB3)基因C825T多态性与新疆维吾尔族人群原发性高血压的关系。方法:采用人群为基础的病例对照研究,高血压组269例,正常血压组229例。用聚合酶链反应一限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)的方法检测ADRB2基因G1023A基因型、ENaC基因G2139A基因型和GNB3基因C825T基因型,分析其与与维尔族人群高血压的关系。结果:高血压组和正常血压组的ADRB2基因型分布分别为GG:0.202、0.147;AG:0.266、0.339;AA:0.532、0.513,差异无统计学意义(P=0.119)。高血压组和血压正常组的ENaC基因型分布分别为GG:0.249、0.266;AG:0.472、0.476;AA:0.281、0.260,差异无统计学意义(P=0.840);高血压组和血压正常组的GNB3基因型分布分别为CC:0.346、0.293;CT:0.394、0.437;TT:0.260、0.271,差异无统计学意义(P=0.418)。用Logistic回归模型校正年龄、性别、吸烟、体重指数、腰围、臀围、血糖、甘油三酯、总胆固醇及胆红素之后,亦未发现三个位点与原发性高血压有关。进一步分析未发现三个位点对维吾尔族高血压的发病有交互作用(P=0.080)。结论:在新疆维吾尔人群中,未发现ADRB2基因G1023A、ENaC基因和GNB3基因多态性单独或联合作用在高血压发病中起作用。

应用抑制性消减杂交技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白2反式调节基因

目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白2(NS2)反式调节基因cDNA消减文库,研究HCVNS2蛋白的反式调节基因。方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术筛选转染pcDNA3.1(-)NS2和空载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞差异性表达基因,并进行生物信息学分析。结果:获得12个差异表达的已知蛋白基因和3个未知功能基因序列,包括:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican3,GPC3)、酸性核糖体磷蛋白PO、核糖体蛋白L13a、整合素β1、天冬酰胺合成酶、信号肽酶、α2HS糖蛋白、小核糖体蛋白多肽G、蛋白酶样亚单位、黄体酮受体、SDR家族脱氢酶8、Ras家族RAB4A、具有BTB/POZ结构的新蛋白、具有coiled coil helix结构的新蛋白、未知功能基因。结论:成功构建HCVNS2反式调节的相关基因cDNA消减文库,为今后进一步分析、研究病毒蛋白的致病机制提供了线索。

MFG-E8和GNA14在子宫内膜异位症相关性卵巢癌中的表达及其临床意义

目的探讨乳脂球表皮生长因子8(MFG-E8)和G蛋白亚基α-14(GNA14)在子宫内膜异位症相关性卵巢癌(EAOC)中的表达及其临床意义。方法选取2015年5月—2017年5月华北医疗健康集团峰峰总医院EAOC患者51例(EAOC组)、非典型子宫内膜异位症(AEM)患者63例(AEM组)、卵巢型子宫内膜异位症(EMT)患者82例(EMT组)。收集所有患者的临床资料,并检测病变组织中MFG-E8、GNA14表达。对EAOC患者随访5年。采用Kaplan-Meier生存曲线分析EAOC患者的生存情况。采用多因素Cox回归分析评估EAOC患者死亡的危险因素。结果EAOC组MFG-E8阳性率为82.35%、GNA14阳性率为70.59%,均显著高于AEM组(41.27%、44.44%)和EMT组(25.61%、23.17%)(P<0.001)。MFG-E8高表达组和低表达组肿瘤直径、肿瘤级别、国际妇产科联合会(FIGO)分期、淋巴转移情况差异均有统计学意义(P<0.05)。GNA14高表达组和低表达组淋巴转移情况差异有统计学意义(P=0.009)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,MFG-E8高表达组和GNA14高表达组无进展生存期分别短于MFG-E8低表达组和GNA14低表达组(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,FIGO分期Ⅱ期、淋巴转移、MFG-E8高表达、GNA14高表达是EAOC患者死亡的独立危险因素[风险比(HR)值分别为2.337、2.519、3.133、3.080,95%可信区间(CI)分别为1.258~4.342、1.332~4.764、1.381~7.108、1.318~7.197,P<0.01]。结论MFG-E8、GNA14在EAOC患者癌组织中呈高表达,且与患者预后不良密切相关,或可作为EAOC患者的预后评估指标。

PPAR-γ2基因-C34G、NADPH氧化酶p22phox亚基基因-C242T多态性与幽门螺杆菌感染的交互作用和食管鳞状细胞癌的关系

目的探讨过氧化物酶体增殖因子活化受体-γ2（PPAR-γ2）基因-C34G、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶p22phox亚基基因-C242T多态性与幽门螺杆菌（H.Pylori）感染的交互作用和食管鳞状细胞癌（ESCC）的关系。方法选择我院2010年5月~2015年3月收治的ESCCBroderⅠ级、BroderⅡ级和BroderⅢ级患者各200例,以200例健康体检者作为对照组,以上述各组患者的外周血白细胞为样本,利用PCR-RFLP检测PPAR-γ2基因-C34G和NADPH氧化酶p22phox亚基基因-C242T多态性。采用14C-UBT检测受检者H.Pylori与14C结合的每分钟衰变数（DPM）以判断H.Pylori感染情况。采用非条件Logistic回归对-C34G、-C242T多态性与H.Pylori感染的交互作用进行分析。结果 -C34G（CG）和-C34G（GG）基因型者患ESCC的风险均显著增加,-C242T（CT）和-C242T（TT）基因型者患ESCC的风险也显著增加。基因突变的协同分析发现-C34G（GG）和-C242T（TT）基因型在ESCC发生、发展存在正向的交互作用,另外在-C34G（CG）和-C242T（TT）之间、-C34G（CG）和-C242T（CT）之间及-C34G（GG）和-C242T（CT）之间均存在正向交互作用（γ均大于1）。H.Pylori感染者患ESCC的风险性均明显增高。H.Pylori感染与-C34G（CG）、-C34G（GG）、-C242T（CT）和-C242T（TT）基因型与均有正向交互作用（γ均大于1）。结论携带-C34G（CG）、-C34G（GG）、-C242T（CT）和-C242T（TT）基因型的个体属ESCC高危险人群,这些基因型和H.Pylori感染的交互作用促进了ESCC的发生、发展,应当采取根除H.Pylori或调控基因表达的措施以达到有效预防LSCC的目的。

G蛋白偶联内向整流钾通道亚基2mRNA在颞叶癫大鼠海马内的表达

目的 探讨G蛋白偶联内向整流钾通道亚基 2 (GIRK 2 )在颞叶癫疒间 大鼠海马内的表达变化。方法 应用腹腔注射海人酸致疒间 大鼠 ,采用原位杂交法检测大鼠海马GIRK 2mRNA的表达。结果 GIRK 2mR NA在癫疒间 大鼠海马齿状回表达增加 ,与正常对照组相比差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 癫疒间 大鼠海马内GIRK 2增高是机体对神经元网络过度兴奋的代偿反应。

雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠突触后致密物蛋白N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚基2B和突触后致密物质95的影响

目的：探讨雷公藤内酯醇（TP）对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马神经元突触后致密物中N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚基2B（NR2B）和突触后致密物质95（PSD-95）表达的影响。方法：30只SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组、用药组。应用免疫组织化学法和RT-PCR法检测各组大鼠海马NR2B和PSD-95蛋白和mRNA的表达。结果：免疫组织化学显色结果显示，用药组NR2B和PSD-95阳性细胞数较模型组均增多，平均光密度较模型组增加。RT-PCR结果显示，用药组NR2B和PSD-95mRNA水平较模型组升高。结论：TP能促进AD模型大鼠海马神经元NR2B和PSD-95的表达，表明其对突触可塑性有一定的改善作用。

微RNA-126介导磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基2及磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B信号与肿瘤关系的新进展

磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基2(PIK3R2)是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的家庭成员之一,通过PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路参与血管的形成、维护以及改造的调控,是组织器官正常发育、损伤以及肿瘤发生的一个重要的基因调控靶目标。不同类型的肿瘤,微RNA(miRNA)126介导的PIK3R2调控水平及趋势存在差异,可能与肿瘤的发生存在联系,是肿瘤研究中有前景的调控靶目标之一。

血管性痴呆大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸-2B亚基受体水平和钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ活性以及美金刚干预作用的研究

目的研究血管性痴呆(VD)大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸-2B亚基受体(NR2B)水平和钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)活性的变化以及美金刚的干预作用。方法采用结扎双侧颈总动脉方法制备VD大鼠模型,随机分为VD模型组(VD组)和美金刚治疗组(美金刚组)。于术后4周、8周、12周、16周用Morris水迷宫试验检测VD组和美金刚组大鼠的学习记忆水平,用RT-PCR法检测大鼠海马NR2B水平,用32P掺入法检测大鼠海马CaMKⅡ的活性;并与假手术组比较。结果与假手术组比较,VD组大鼠术后各时间点的学习记忆能力均显著下降(均P<0.01);海马NR2B的水平术后4周时明显增高(P<0.05),术后8～16周显著降低(均P<0.01);海马总CaMKⅡ活性术后4周时明显增高(P<0.01),术后8周下降,术后12周、16周明显降低(均P<0.01)。美金刚组术后4周时上述3项检测结果与VD组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),而与假手术组比较,差异均无统计学意义;在其他时间点,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05～0.01);学习记忆水平和NR2B水平术后8周、12周明显高于VD组(P<0.01～0.05);总CaMKⅡ活性与VD组比较,差异无统计学意义。结论VD大鼠海马NR2B水平和总CaMKⅡ活性降低;美金刚能上调海马NR2B表达及改善VD大鼠的认知功能,但对CaMKⅡ活性的影响有限。