临床分离碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌菌株的分子流行病学及碳青霉烯酶抑制剂增强试验的应用

目的:碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)的流行已成为临床抗感染治疗的巨大挑战。本研究探讨本地区CRE耐药情况及分子流行病学特征,并评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验在临床实验室的应用价值,旨在为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:收集中南大学湘雅医院临床标本中分离的非重复性CRE,最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)联合纸片扩散法(Kirby-Bauer,KB)检测菌株的药物敏感性,PCR方法检测13种碳青霉烯酶基因。使用碳青霉烯酶抑制剂增强试验对126株经PCR确定为产碳青霉烯酶的菌株进行表型检测,了解该方法与金标准PCR结果的符合程度。结果:704株CRE呈现出高度耐药的情况,经检测,501株为产碳青霉烯酶的肠杆菌目细菌(carbapenemase producing Enterobacterales,CPE);CPE菌株以肺炎克雷伯菌为主,其次为阴沟肠杆菌和大肠埃希菌;碳青霉烯酶有9种,包括肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(Klebsiella pneumoniae carbapenemase,KPC)、新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)、维罗纳整合子金属酶β-内酰胺酶(Verona integronencoded metallo-β-lactamases,VIM)、亚胺培南酶(imipenemase,IMP)、苯唑西林酶48型(oxacillinase-48,OXA-48)以及罕见的亚胺培南水解β-内酰胺酶(imipenem-hydrolyzingβ-lactamase,IMI)、阿德莱德亚胺培南酶(adelaide imipenemase,AIM)、圭亚那超广谱β-内酰胺酶(guiana extended-spectrumβ-lactamase,GES)和Bicêtre碳青霉烯酶(bicêtre carbapenemase,BIC),KPC型丝氨酸酶检出率最高,为61.7%(309/501);碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测单产A类丝氨酸碳青霉烯酶、单产B类金属酶以及同时产A类和B类酶菌株的符合率均为100%。结论:湖南省长沙市CRE菌株分布非常广泛,产碳青霉烯酶(特别是KPC型丝氨酸酶)是这类细菌对碳青霉烯类药物耐药的主要机制。在湖南省长沙市首次检出了肠杆菌目细菌携带GES、IMI型基因。碳青霉烯酶抑制剂增强试验结果显示该方法能准确检测产A类丝氨酸酶和B类金属酶的CRE,且操作简单、结果容易判读,能满足临床微生物实验室丝氨酸碳青霉烯酶和/或金属酶检测的需求,为临床精准用药提供依据。

mCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测CRE和CRPA产酶表型的方法学评价

目的综合评估改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)和碳青霉烯酶抑制剂增强试验对碳青霉烯酶检测和分型能力。方法采用mCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测中山大学肿瘤防治中心2019~2022年临床分离并保存的47株耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)和42株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa,CRPA)的产酶表型,胶体金法对检测结果进行验证比对,通过卡方检验进行统计分析,并从多角度综合评价。结果mCIM检测CRE和CRPA的阳性率分别为70.2%和35.7%,碳青霉烯酶不确定占比为25.5%和11.9%。增强试验检测47株CRE:44.7%产B类金属β内酰胺酶,17.0%产A类碳青霉烯酶,不产A或B类碳青霉烯酶的菌株占38.3%;增强试验检测42株CRPA:2.4%产B类金属β内酰胺酶,90.4%产A类碳青霉烯酶,同时产A类碳青霉烯酶和B类金属β-内酰胺酶的菌株占4.8%,不产A或B类碳青霉烯酶的菌株占2.4%。两种方法检测CRE差异有统计学意义(χ^(2)=17.803,P=0.01),检测CRPA差异无统计学意义(χ^(2)=4.632,P=0.592)。胶体金法验证:产碳青霉烯酶的阳性符合率为84.6%,产丝氨酸酶的阳性符合率为80%,产金属酶的阳性符合率为100%。结论检测CRE两种方法均适用且差异不大,CRPA更推荐碳青霉烯酶抑制剂增强试验,胶体金值得推广,临床实验室应根据实际条件选择检测方法。

安徽引江济淮蜀山船闸混凝土碳化防治技术研究与应用

安徽引江济淮蜀山船闸工程混凝土的早期碳化深度较大,对采用回弹法进行混凝土的强度评定造成了较大的影响,也在一定程度上影响了混凝土的耐久性使用寿命。从碳化抑制剂种类、开始涂刷时间和涂刷遍数等方面,研究了碳化抑制剂对混凝土碳化深度的影响。结果表明:氟硅酸镁类碳化抑制剂的抗碳化效果要优于硅酸钠类的;碳化抑制剂的开始涂刷时间越早,混凝土的抗碳化性能越好;碳化抑制剂的涂刷遍数越多,抗碳化效果越好,以涂刷2~3遍为宜;采用氟硅酸镁类碳化抑制剂可大大降低混凝土的碳化深度,值得在工程中推广应用,尤其是对耐久性要求较高的低标号大体积混凝土工程。

离子束辅助沉积碳膜抑制栅电子发射研究

本文利用离子束辅助沉积方法在钼栅极的表面镀上一层碳膜 ,采用模拟二极管的方法测量阴极活性物质Ba、BaO蒸发沉积在镀碳钼栅与纯钼栅表面后的电子发射性能 .测量结果表明 ,镀碳钼栅的电子发射量显著减少 .依据XPS、电子探针对钼栅极表面阴极发射物的分析结果 。

新型碳糖苷类熊果苷类似物的合成及其对酪氨酸酶的抑制活性

合成了一系列稳定高效的新型碳糖苷类熊果苷类似物,其中10个化合物未见文献报道。化合物结构通过核磁及质谱确证。初步生物活性测试结果表明,目标化合物具有良好的酪氨酸酶抑制活性,其中化合物13、14、15、16、19的活性接近或优于天然熊果苷。

细菌碳代谢抑制作用的研究进展

当生长介质中存在多种碳源时,细菌通常选择利用某一种优先碳源,同时在碳代谢抑制蛋白参与下抑制其他碳源的代谢和利用。这种碳代谢抑制现象广泛存在于细菌中,是当前微生物代谢研究的热点和前沿之一。通过对碳源的选择性优先利用,细菌可以在生存环境中保持高度的竞争力和环境适应能力。碳代谢抑制蛋白通过复杂的调控网络发挥作用,主要通过转录水平上的激活/抑制或者与RNA结合蛋白的翻译控制等方式进行。在不同微生物中,碳代谢抑制蛋白的种类及其作用机制存在一定的差异。综述了目前研究较为深入的几种细菌中的碳代谢抑制蛋白及其作用机制,将有助于深化微生物的环境适应性,代谢多样性和碳代谢分子调控的认识。

大肠杆菌碳分解代谢抑制及混合C源共利用的研究进展

总结了大肠杆菌中C源分解代谢(carbon catabolite repression,CCR)现象的原理及特点,综述并分析了如何通过对宿主菌进行基因工程改造以解除碳代谢抑制,以实现大肠杆菌利用多种C源。

碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶表型的临床应用

目的:评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶表型的临床应用价值。方法:收集六安市人民医院2020-2021年分离自临床标本的耐碳青霉烯、非重复肠杆菌目细菌共227株。采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测菌株携带的碳青霉烯酶,并以PCR试验扩增常见5种碳青霉烯酶基因为金标准,评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验对CRE菌株A类和B类碳青霉烯酶的检测价值。结果:碳青霉烯酶抑制剂增强试验结果显示,产A类酶菌株有167株,产B类酶菌株有53株,5株肺炎克雷伯菌和1株产气肠杆菌未检出A类或B类酶。与PCR方法比较,碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测单独产A类酶的灵敏度为100.0%(164/164),特异度为95.2%(60/63),对于单独产B类酶的检测,灵敏度和特异度均为100.0%,两种检测方法之间一致性高。结论:碳青霉烯酶抑制剂增强试验操作简便、结果易判读,适合临床微生物实验室普遍应用。

利用碳抑制剂降低含碳氰渣中金品位的试验研究

鑫汇金矿矿石为多金属硫化矿,有用元素为Au、Ag、Cu和Zn等,但同时含有一定量的有害元素C,并且随着井下开采深度的增加,矿石和精矿中的含碳量也逐渐增加。由于碳的劫金特性,金精矿中含碳量增多,导致浸出和洗涤效果差,氰渣品位偏高,氰化回收率较低。为了减少碳对氰化指标的影响,提高金的回收率,从2011年初开始,在实验室进行了"在浸出过程中添加碳抑制剂"的小型试验,在对大量的试验结果综合分析后认为,在浸出过程中添加碳酸钠能够抑制碳的劫金性能,有利于提高金的回收率。从2011年6月开始进行工业试验,在氰化生产中添加碳酸钠,通过对比2011年6—12月的生产指标与2010年同期指标可以看出,氰渣品位同比降低了0.26 g/t,每年为公司增加经济效益155万元。

3-氨基苯硼酸联合乙二胺四乙酸碳青霉烯酶抑制增强试验检测肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的研究

目的了解3-氨基苯硼酸(PBA)联合乙二胺四乙酸(EDTA)碳青霉烯酶抑制剂增强试验(PBA-EDTA法)用于检测肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的检测结果。方法使用PBA-EDTA法测定275株经金标准PCR及DNA测序已明确为产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶结果的符合率,并与CLSI推荐的mCIM联合eCIM改良碳青霉烯灭活试验(mCIMeCIM法)检测结果的符合率比较。结果PBA-EDTA法对产KPC酶菌株的符合率为99.2%(118/119),对产金属酶菌株的符合率为100%(109/109),对产KPC+MβL复合酶的符合率为100%(13/13);但不能检出34株D组OXA酶;其检测结果与分子生物学检测结果总体符合率为87.3%(240/275)。mCIM-eCIM法检测结果显示产KPC酶菌株符合率100%(119/119);检测金属酶的符合率94.5%(103/109);未能检出13株产KPC+MβL复合酶,虽能检出34株产D组OXA酶菌株产酶特性但不能分类酶型;与分子生物学检测结果相比较,mCIM-eCIM法检测结果总体符合率为93.1%(256/275)。两种方法对于KPC酶和金属酶的检出虽有差异,但显示此差异无显著统计学意义。PBA-EDTA法对复合酶(KPC+金属酶)的检出优于mCIM-eCIM法。结论PBA-EDTA法可以检测细菌产生的A组丝氨酸碳青霉烯酶、B组金属酶以及同时产A组和B组碳青霉烯酶的菌株;操作较mCIM-eCIM法简单易行;便于临床微生物实验室使用和开展肠杆菌目细菌产生的丝氨酸碳青霉烯酶和金属酶的检测,为临床合理使用抗菌药物、精准治疗患者提供实验室依据。

Rijke型燃烧器中声波对碳烟抑制影响的试验研究

针对Rijke型燃烧器的碳烟排放过高的问题,利用扬声器诱发火焰与声波的共振使火焰进入脉动燃烧状态以达到碳烟抑制的目的。首先分析了声波的频率、振幅和波形及乙炔的流量对碳烟抑制效果的影响,然后分析了火焰周期性变化图像,并测量了火焰的温度。结果表明:在共振频率为170 Hz和346 Hz的情况下,当输入振幅超过0.04 V时,碳烟抑制率最高可接近100%;碳烟的抑制效率与外加声波的波形(方波、正弦波和三角波)相关,在频率较高(346 Hz)时差异更为明显;与其他波形相比,施加方波时,在同样的位置,火焰的温度最高,碳烟抑制效果最佳,其原因是方波对空气气团的压缩最强,提高了燃料与氧气的混合效果,促进了碳烟颗粒的再氧化,从而提高了燃烧效率。利用扬声器诱发的脉动燃烧能有效地抑制碳烟的生成,这可为Rijke型燃烧器的设计提供理论依据。

改良碳青霉烯灭活试验和碳青霉烯酶抑制剂增强试验鉴定肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶型别的临床价值

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)/乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(eCIM)、碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶型别的临床价值。方法收集分离自临床样本的肠杆菌目细菌130株,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)100株。首先采用微量肉汤稀释法对分离菌株进行体外药物敏感性试验,然后分别用mCIM/eCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶并分型。以聚合酶链反应(PCR)结果为标准,评价mCIM/eCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶基因型的效能。结果100株CRE对替加环素和黏菌素的敏感率>95%,对头孢他啶-阿维巴坦、阿米卡星和复方磺胺甲噁唑的敏感性分别为13.0%、50.4%、55.7%,对其他临床常用抗菌药物的耐药率均>75%,。与PCR结果比较,碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测丝氨酸碳青霉烯酶的敏感性为98.60%,特异性为100%;检测金属β-内酰胺酶的敏感性为100%,特异性为100%。mCIM/eCIM检测丝氨酸碳青霉烯酶的敏感性为97.22%,特异性为100%;检测金属β-内酰胺酶的敏感性为96.30%,特异性为100%;mCIM/eCIM无法检测同时产2种酶的菌株。结论mCIM/eCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验均都能较好地区分不同类型的碳青霉烯酶,其中碳青霉烯酶抑制剂增强试验操作更加简便,结果更易观察。

南宁地区某院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶表型与基因型检测

目的了解南宁地区某院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性及碳青霉烯酶产生情况,为CRKP感染防控提供依据。方法收集2021年1月至2022年2月临床分离的CRKP共46株,用PhoenixM50全自动微生物鉴定药敏分析仪进行药敏试验,采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验进行碳青霉烯酶表型筛选,用PCR扩增碳青霉烯酶耐药基因。结果46株CRKP对厄他培南100%耐药,对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为76.1%和78.3%,对除氨曲南外的其他β-内酰胺类药物的耐药率均为100%,对替加环素耐药率为0,对多黏菌素B(4.3%)及阿米卡星(32.6%)耐药率较低;碳青霉烯酶表型筛选试验检出单产A类碳青霉烯酶菌株33株(71.7%),单产B类金属β-内酰胺酶9株(19.6%),单产D类OXA-48型碳青霉烯酶2株(4.3%),同时产A类和B类碳青霉烯酶2株(4.3%);46株CRKP均检出碳青霉烯酶耐药基因,其中,33株(71.7%)仅携带KPC-2基因,7株(15.2%)仅携带NDM-1基因,2株(4.3%)仅携带VIM-1基因,2株(4.3%)仅携带OXA-48基因,2株(4.3%)同时携带KPC-2和NDM-1基因,未检出IMP型。结论某院分离的CRKP对常见抗菌药物具有高度耐药性,主要产KPC-2型碳青霉烯酶,应加强抗菌药物合理使用、CRKP酶型检测与感染控制,有效防范院内感染。

耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌耐药性及耐药基因分型

目的 分析临床分离的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)类型、来源、临床分布、耐药性、耐药基因分型,为临床合理使用抗菌药物提供实验室依据。方法 收集深圳市南山区两家三级医院2020年7月至2021年6月临床分离的CRE菌株34株。应用VITEK MS全自动快速微生物质谱检测系统和VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定药敏系统进行细菌鉴定与药敏试验,采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验(PBA-EDTA法)检测碳青霉烯酶耐药表型,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测碳青霉烯酶耐药基因。结果 分离的34株CRE菌株包括肺炎克雷伯菌24株,大肠埃希菌8株,弗劳地枸橼酸杆菌1株,产气肠杆菌1株。标本主要来自呼吸道、泌尿道、血液等。CRE菌株对各类抗菌药物表现出不同程度的耐药率,对头孢曲松、美罗培南、厄他培南、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为100%,对环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为94%以上。PBA-EDTA法与PCR法对碳青霉烯酶的检出率差异无统计学意义。结论 CRE菌株主要为肺炎克雷伯菌,耐药基因主要为blaKPC。采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验(PBA-EDTA法)进行碳青霉烯酶检测,比较适合临床微生物实验室常规开展,对于临床合理使用抗菌药物和院感防控具有重要作用。

碳质物对高含碳金矿浮选影响的试验研究

针对某高含碳金矿不脱碳浮选工艺,考察了不同碳含量对载金矿物浮选的影响;明确了碳质物的晶体结构与石墨化程度,评价了碳质物对捕收剂的吸附能力,研究了不同屏蔽剂对金、碳品位和回收率的影响。结果表明:随着碳质物含量从2.86%提高到7.21%,载金矿物品位从20.07%下降至1.37%,回收率从67.99%下降至10.27%;碳质物主要为半自形石墨或无定形碳,石墨化程度高于活性碳。该碳质物对药剂吸附(对丁基黄药和丁基铵黑药的吸附率分别为49.88%和27.44%)是导致金回收率较低的主要原因。萘磺酸钠(400g/t)抑制剂可使粗精矿中碳品位从15.44%降至13.89%,金品位从22.7g/t增加至29.2g/t,回收率从30.76%提升至45.65%。

imCIM检测B类碳青霉烯酶的效果评价

目的评价抑制剂增强改良碳青霉烯失活法(im CIM)在B类碳青霉烯酶检测中的应用价值,并与EDTA纸片增效试验(EDPT)进行比较分析。方法收集碳青霉烯类抗生素不敏感菌株181株,其中肺炎克雷伯菌44株、大肠埃希菌44株、鲍曼不动杆菌43株、铜绿假单胞菌50株;碳青霉烯类抗生素敏感菌株83株,其中肺炎克雷伯菌25株、大肠埃希菌16株、鲍曼不动杆菌25株、铜绿假单胞菌17株。采用im CIM和EDPT对上述264株菌株进行B类碳青霉烯酶的筛查,以PCR结果作为金标准。应用一致性检验、Wilcoxon符号秩和检验、独立样本Kruskal-Wallis H检验及ROC曲线进行统计学分析。结果 181株碳青霉烯类抗生素不敏感菌株中144株PCR扩增耐药基因阳性,A、B、D类碳青霉烯酶分别为39株、77株、28株;im CIM检测70株阳性,111株阴性,其中166株与PCR结果一致;EDPT检测72株阳性,109株阴性,其中134株与PCR结果一致。碳青霉烯类抗生素敏感菌株83株,PCR扩增耐药基因、im CIM及EDPT检测结果均为阴性。im CIM敏感性和特异性分别为85.71%(66/77)和97.86%(183/187),与PCR结果一致性Kappa值为0.859;EDPT敏感性和特异性分别为66.23%(51/77)和88.77%(166/187),Kappa值为0.561。im CIM抑菌圈差值(Δdim CIM)与EDPT抑菌圈差值(ΔdEDPT)有差别,差异有统计学意义(Z=-6.941,P<0.05)。采用im CIM检测B类碳青霉烯酶的Δdim CIM水平与A、D类酶Δdim CIM总体分布位置不同,差异有统计学意义(χ2=108.887,P<0.05)。im CIM与EDPT的ROC曲线下面积分别为0.988(95%CI:0.977~0.999)和0.936(95%CI:0.909~0.963)。结论 im CIM是一种准确、高效、便捷的碳青霉烯酶表型筛选方法,敏感性、特异性较高,适合用于流行病学监测。

CIM和Carba NP筛选铜绿假单胞菌产碳青霉烯酶比较

目的评估碳青霉烯类抑制法(carbapenem inactivation method,CIM)和Carba NP对铜绿假单胞菌碳青霉烯酶表型的筛选能力。方法选取河北省医学微生物菌种保藏库(Hebei Provincial Bank for Medical Culture Collections,HBMCC)保存的碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌146株,分别用CIM和Carba NP法检测碳青霉烯酶活性,采用PCR方法检测VIM-1、KPC-2、IMP-4、NDM-1基因。结果 146株铜绿假单胞菌中有11株Carba NP阳性,阳性率为7.5%(11/146);13株CIM阳性,阳性率为8.9%(13/146)。9株碳青霉烯酶编码基因阳性,其中6株VIM-1阳性,1株VIM-1和IMP-4同时阳性,2株KPC-2阳性;碳青霉烯酶编码基因阳性的菌株Carba NP和CIM均阳性;5株基因检测阴性菌株中1株仅Carba NP阳性,3株仅CIM阳性,1株Carba NP和CIM均阳性。结论 CIM能够准确快速筛选铜绿假单胞菌碳青霉烯酶活性,是一种经济高效的表型筛选方法。

CIM,mCIM 和MHT筛选肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的方法评价

目的评估碳青霉烯类抑制法(carbapenem inactivation method,CIM)、改良碳青霉烯类失活法(modified carbapenem inactivation method,mCIM)和改良Hodge试验(modified hodge test,MHT)对肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型筛选能力。方法以PCR检测碳青霉烯酶基因作为金标准,对120株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant enterbacteriaceae,CRE)和50株碳青酶烯类敏感的肠杆菌科细菌,分别进行CIM,mCIM和MHT表型筛选试验,评估三种方法的表型筛选能力。结果120株CRE中,93株携带碳青霉烯酶耐药基因,表型筛选试验显示,CIM,mCIM和MHT的敏感度分别是95.6%,96.8%和95.8%,特异度分别为72.7%,92.3%和50%。三种方法筛选碳青霉烯酶,差异有统计学意义(χ^2=12.796,P<0.05)。与PCR结果相比较,CIM,MHT和mCIM的一致率分别为90%,95%和77.4%,Kappa值分别为0.898,0.949和0.771。mCIM和CIM试验与PCR高度一致。50株碳青酶烯类敏感的肠杆菌科细菌PCR检测和三种方法均为阴性。结论三种表型筛选方法均有较高的敏感度,但mCIM较CIM,MHT具有更高的特异度和一致率,是筛选CRE的有效方法。

不同条件下CIM试验检测耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的评价

目的评估不同底物、不同孵育时间下碳青霉烯类抑制法(CIM)对肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型筛选能力的差异。方法分别用亚胺培南、美罗培南、厄他培南作为指示底物对120株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)进行CIM试验,再以美罗培南为指示底物,分别孵育0.5、1、2、4h进行CIM试验,并采用PCR及测序技术检测菌株是否携带碳青霉烯酶相关基因。结果碳青霉烯酶耐药基因PCR检测结果显示,120株CRE中,阳性93株,阴性27株。以亚胺培南作为底物,阳性95株,阴性25株;以美罗培南作为底物,阳性87株,阴性33株;以厄他培南作为底物,阳性68株,阴性52株。与PCR结果相比,三者的灵敏度分别是98.9%(92/93),90.3%(84/93),69.9%(65/93),差异有统计学意义(χ~2=18.43,P<0.01);三者的特异度均为88.9%(24/27)。3种底物的一致率分别为96.7%,90.0%,74.2%,Kappa值分别是0.90,0.73,0.44。在4个不同孵育时间下,灵敏度分别为46.2%(43/93)、58.1%(54/93)、90.3%(84/93)和90.3%(84/93),孵育2h和0.5、1h结果相比差异有统计学意义(χ~2=27.31,P<0.05)。结论亚胺培南、美罗培南CIM试验灵敏度和一致率均高于厄他培南,可作为合适的底物,同时2h为最佳孵育时间。

耐碳青霉烯类抗菌药物革兰阴性杆菌临床分布及耐药基因调查

目的分析甘肃省人民医院2018—2020年碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌(CRO)的临床分布、耐药基因携带情况,为医院CRO的防控提供依据。方法采用飞行质谱仪进行细菌鉴定;K-B纸片扩散法和PhoenixTM-100革兰阴性杆菌药敏板进行药敏试验。从临床标本中共分离出CRO菌株60株,用WHONET 5.6软件统计CRO菌株的耐药情况及临床分布。采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)联合EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)和碳青霉烯酶抑制剂增强试验进行耐药表型检测,荧光定量PCR进行耐药基因型检测。结果60株CRO菌株经鉴定为肺炎克雷伯菌20株、大肠埃希菌11株、阴沟肠杆菌13株、雷极普罗威登菌5株、弗劳地枸橼酸杆菌2株和铜绿假单胞菌9株;主要来源于重症监护病房(ICU)、神经内科、泌尿科和烧伤科等临床科室。经耐药表型检测检出:A类丝氨酸碳青霉烯酶17株(肺炎克雷伯菌16株、弗劳地枸橼酸杆菌1株),B类金属β-内酰胺酶38株(阴沟肠杆菌12株、大肠埃希菌11株、雷极普罗威登菌5株、铜绿假单胞菌6株、肺炎克雷伯菌4株),4株(铜绿假单胞菌3株和阴沟肠杆菌1株)为阴性;另外1株弗劳地枸橼酸杆菌采用mCIM联合eCIM试验检测为B类金属β-内酰胺酶,而用碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测为混合型(A+B类酶)。经PCR检测检出KPC酶17株、NDM型32株,IMP1型酶6株,KPC+NDM混合基因型1株。结论甘肃省人民医院CRO菌株的表型耐药机制是产A类丝氨酸碳青霉烯酶和B类金属β-内酰胺酶,主要携带KPC、NDM和IMP1基因型。