抑制素α基因表达下调对鹅卵泡颗粒细胞凋亡和增殖的影响(英文)

抑制素α基因是控制家禽排卵率的一个重要候选基因。为研究抑制素α基因对体外培养的鹅卵泡颗粒细胞增殖凋亡的遗传作用,构建psiRNA-INHα1和psiRNA-INHα2两个抑制素α基因干扰载体,以降低抑制素α基因表达。体外培养鹅F1和闭锁卵泡的颗粒细胞,经抑制素α基因干扰48h后,荧光显微镜检测转染效率,同时用流式细胞术检测抑制素α基因表达水平,以及细胞生长周期、细胞凋亡指数和增殖指数的变化,用放免法测定细胞培养上清中雌激素和孕酮水平。结果表明,抑制素α基因干扰后卵泡颗粒细胞抑制素表达水平比对照组降低30%～40%(P<0.05);细胞凋亡指数和增值指数显著高于对照组(P<0.05);细胞分泌雌激素水平显著下降(P<0.05)。由此推断,抑制素α基因对颗粒细胞具有显著的抗凋亡效应。

抑制素α基因769G→A点突变与卵巢功能的关系研究

目的 :探讨抑制素α基因 769G→A点突变与中国人卵巢功能的关系。方法 :应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析 ,对 3 4例卵巢早衰患者和 62例卵巢反应不良患者和 12 5名正常妇女进行了INHα基因769G→A点突变检测并对所有卵巢反应不良患者进行了随访。结果 :卵巢早衰组 769G→A突变频率为 5 88% ,明显高于正常对照组 (P <0 0 5 )。卵巢反应不良组及正常对照组突变频率均为 0 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。随访发现有 3名卵巢反应不良发展为卵巢早衰。结论 :抑制素α基因 769G→A突变对卵巢功能有严重影响 ,与卵巢早衰的发病有相关性。

抑制素α基因诱导表达及其多克隆抗体的制备

目的为获得诱导表达的绵羊卵泡抑制素基因蛋白及其多克隆抗体。方法试验首先对绵羊卵泡抑制素α基因原核表达产物进行诱导表达及可溶性分析,其次运用以镍柱亲层析和尿素透析的方法收集其表达蛋白并用弗氏佐剂对其进行乳化,最后将乳化后的蛋白免疫制剂对新疆双峰骆驼进行多次加强免疫,以获得卵泡抑制素α基因多克隆抗体。结果绵羊卵泡抑制素α基因原核表达产物在IPTG诱导作用下呈包涵体形式存在,蛋白纯度较高,免疫后血清抗体效价为5.12×10^6,SDS-PAGE电泳分析结果显示,在39 ku有常规抗体的条带存在,在26 ku处存在纳米抗体的条带。结论绵羊卵泡抑制素α蛋白经纯化后对双峰骆驼免疫可以获得高效价、高纯度的抑制素α多克隆抗体。