地塞米松对脑缺氧缺血新生大鼠细胞凋亡抑制蛋白1 mRNA及Caspase-3活性的影响

目的探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后细胞凋亡抑制蛋白1(cIAP1)基因表达、Caspase-3活性的变化及地塞米松(DEX)对其影响,阐明DEX预处理对HIBD神经保护的可能机制。方法7日龄SD大鼠24只,随机分成DEX组、9g/L盐水组(NS组)、HIBD组、健康对照组。DEX、NS、HIBD组大鼠采用Rice方法制备HIBD模型。DEX和NS组在缺氧缺血前12h腹腔内分别注射DEX、等量9g/L盐水。取HIBD动物模型实验侧大脑半球,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测cIAP1基因表达,比色法测定Caspase-3活性。结果与健康对照组比较,HIBD组大鼠cIAP1基因表达明显下降(P<0.01),Caspase-3活性明显上升(P<0.01)。与HIBD组比较,DEX组cIAP1基因表达明显上升,而Caspase-3活性明显下降。结论脑缺氧缺血可导致cIAP1基因表达下调,Caspase-3活性升高。DEX能通过上调cIAP1基因表达,抑制Caspase-3活性,抑制细胞凋亡,起到神经保护作用。

肝癌及其癌旁组织中细胞凋亡抑制蛋白survivin的表达

目的:分析细胞凋亡抑制蛋白survivin在原发性肝癌(HCC)及其癌旁组织中的表达,探讨其在肿瘤血管形成和抵抗肿瘤血管内皮细胞凋亡中的作用。方法:采集HCC癌组织、癌旁组织和正常肝组织标本,通过免疫组织化学方法分析survivin蛋白表达阳性率与HCC病理参数的关系,采用流式细胞术分析survivin蛋白在不同组织中的表达水平,用荧光定量PCR方法分析不同组织中survivin基因的表达水平。结果:survivin蛋白在肝癌组织中表达水平与门静脉癌栓的形成有关联(P<0.05),与肿瘤大小、包膜、甲胎蛋白(AFP)水平及HCC病理分期均无关联(P>0.05);流式细胞术结果,肝癌组织中survivin蛋白表达水平高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05),癌旁组织中survivin蛋白表达水平高于正常肝组织,但差异无统计学意义(P>0.05);荧光定量PCR检测,survivin基因只在肝癌组织中表达,在癌旁组织和正常肝组织中无表达,其表达水平组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:细胞凋亡抑制蛋白survivin在肝癌组织中表达水平较高,但在癌旁组织中检测不到其基因的表达,survivin蛋白可能是通过旁分泌作用从肝癌病变处进入癌旁组织细胞中发挥抑制细胞凋亡的功能。

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时细胞凋亡抑制蛋白1的变化

目的 探讨在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)细胞凋亡抑制蛋白 1(cIAP1)的变化。方法 建立新生大鼠HIBD动物模型 ,采用RT PCR技术检测缺氧缺血 (HI)后不同时间点缺血侧脑组织中cIAP1基因表达的变化。结果 正常组中有cIAP1基因表达 ,HI组cIAP1基因表达明显下调 ,且随HI后时间的延长 ,cIAP1基因表达在HI后 6h开始下调 ,2 4h下调最明显 ,4 8～ 72h有所回升。

TFPI基因转染对血管平滑肌细胞中细胞凋亡抑制蛋白的调控

目的研究组织因子途径抑制物(TFPI)基因转染对大鼠血管平滑肌细胞中细胞凋亡抑制蛋白(IAP)表达的影响,探讨TFPI诱导细胞凋亡的可能机制。方法将含有人TFPI基因的重组腺病毒或含β-半乳糖苷酶(LacZ)基因的重组腺病毒或DMEM在体外分别转染大鼠血管平滑肌细胞,用ELISA方法测定转染后细胞中TFPI蛋白的表达水平,用RT-PCR方法测定基因转染后不同时间点细胞中c-IAP1mRNA的表达,用Western-blot方法检测基因转染后不同时间点细胞中survivin的表达。结果基因转染后1天在血管平滑肌细胞中即可检测到TFPI蛋白表达,峰值出现在转染后第3天;基因转染后3天和7天,TFPI组c-IAP1 mRNA的表达与对照组相比明显减少(P<0.05);基因转染后3、5、7天,TFPI组survivin的表达与对照组相比明显减少(P<0.05),且具有明显的时间依赖性。结论 TFPI可能通过抑制IAP的表达来发挥诱导平滑肌细胞凋亡的作用,从而抑制冠状动脉介入治疗后再狭窄发生。

微小RNA-103a-3p通过肿瘤蛋白53调控凋亡抑制剂1/P53对骨质疏松症的影响

目的探讨微小RNA(miR)-103a-3p调控细胞肿瘤蛋白53调控凋亡抑制剂1(TRIAP1)对成骨细胞分化以及去卵巢小鼠骨量的影响。方法MC3T3-E1细胞分为正常对照(NC)组、miR-103a-3p-NC组、miR-103a-3p模拟(mimc)组、miR-103a-3p mimic+TRIAP1-NC组、miR-103a-3p mimic+TRIAP1 mimic组。Real-time PCR检测细胞miR-103a-3p、TRIAP1、P53的mRNA表达,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡,免疫荧光染色和茜红素染色检测细胞骨架F-actin表达和矿化情况,ELISA检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性。24只雌性小鼠设为sham组、骨质疏松症(OP)组、miR-103a-3p antagonist-NC组和miR-103a-3p antagonist组,每组6只摘取双侧卵巢制备OP模型,sham组仅分离卵巢组织周围脂肪。测定骨组织miR-103a-3p、TRIAP1、P53、ALP、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)的mRNA表达,microCT测定骨密度(BMD)、骨矿物质含量(BMC),HE染色观察骨组织病理改变。结果细胞转染miR-103a-3p mimic后,miR-103a-3p及P53表达升高、TRIAP1表达降低,细胞增殖降低、凋亡增加,F-actin表达减弱,钙结节数量减少,ALP活性降低(P<0.01);而在增加转染TRIAP1 mimic后,以上miR-103a-3p mimics导致的结果均得到显著逆转(P<0.01)。OP组小鼠骨组织miR-103a-3p、P53表达升高,TRIAP1、ALP、OCN、OPN基因表达降低,BMD、BMC降低,骨组织结构破坏(P<0.05);miR-103a-3p antagonist组小鼠骨组织miR-103a-3p及P53表达降低,TRIAP1、ALP、OCN、OPN基因表达升高,BMD、BMC升高,骨组织结构改善(P<0.05)。结论MiR-103a-3p可介导TRIAP1/P53抑制成骨细胞增殖及矿化,而miR-103a-3p拮抗治疗可减少OP小鼠骨量丢失。

细胞凋亡抑制蛋白:IAP家族

IAP家族 (InhibitorofApoptosisfamilyofproteins,IAPs)为一类内源性细胞凋亡抑制蛋白 ,在许多物种中起着阻止细胞凋亡的作用。IAPs主要通过抑制caspase ,参与TNFR介导的信号转导 ,与NF κB相互作用发挥抗细胞凋亡作用。IAPs可能与肿瘤发展、神经变性病以及缺血再灌注损伤有一定关系。

乙肝相关性肝癌组织中细胞凋亡蛋白抑制因子2蛋白的表达变化及其意义

目的探讨乙肝相关性肝癌组织中细胞凋亡蛋白抑制因子2(inhibitor of apoptosis protein 2,IAP2)蛋白的表达变化及其意义。方法选取2015年1月至2017年6月河南省传染病医院乙肝相关性肝癌术后组织标本80例(A组)、非乙肝相关性肝癌术后组织标本40例(B组)、乙肝相关性肝癌癌旁组织(C组)40例,采用免疫组织化学、蛋白质印迹法(Western blotting)检测三组标本中IAP2蛋白表达,分析乙肝相关性肝癌组织中IAP2蛋白表达与其病理特征的关系。结果A组的IAP2蛋白阳性表达率为76.25%,高于B组的35.00%和C组的30.00%,差异有统计学意义(P<0.05);A组的IAP2蛋白积分光密度累积值高于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05);IAP2蛋白阳性表达与乙肝相关性肝癌病人的临床分期、包膜侵犯、门脉侵袭、发生淋巴结转移显著相关(P<0.05)。结论IAP2蛋白在乙肝相关性肝癌组织中表达显著提高,并且与病人的临床分期、包膜侵犯、门脉侵袭、发生淋巴结转移有相关关系。

细胞凋亡抑制蛋白家族与神经损伤

细胞凋亡抑制蛋白(IAP蛋白)是细胞凋亡过程中重要的调节因子,它通过阻断调亡蛋白酶的激活表达来抑制细胞凋亡的发生。大量的研究显示,细胞凋亡是许多神经损伤后神经细胞死亡的主要方式,而细胞凋亡抑制蛋白可以通过抑制细胞凋亡的发生来发挥神经保护作用,并且这种内源性的神经保护作用具有重要的临床指导意义。本文就IAP家族蛋白的基本结构,抑制细胞凋亡的机制及其在神经损伤中的作用加以综述。

鼻腔鼻窦鳞状细胞癌中细胞质凋亡抑制蛋白2和半胱氨酸蛋白水解酶4的表达

目的 通过检测细胞质凋亡抑制蛋白 2 (cytoplasmicInhibitorofapoptosisprotein 2 ,c IAP2 )和半胱氨酸蛋白水解酶 4 (caspase 4 )在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌 (简称鳞癌 )组织中蛋白质水平的表达情况 ,研究其表达的相关性 ,探讨此 2种凋亡相关基因控制蛋白在鼻腔鼻窦鳞癌发生、发展中的作用和机制。方法 选取已确诊的 4 1例鼻腔鼻窦鳞癌患者的标本为实验组 ,10例正常鼻黏膜标本为对照组 ,以免疫组化法检测caspase 4和c IAP2在鼻腔鼻窦鳞癌中的表达 ,光镜下计数。 结果①c IAP2在 4 1例鼻腔鼻窦鳞癌患者中 36例阳性表达 ,阳性率为 87 8% ,其中 14例表达 (+++) ,15例 (++) ,7例 (+) ,5例表达缺失 (- ) ,与对照组相比差异有显著性 (实验组平均秩 =2 9 11,秩和T1=1194 0 0 ,对照组平均秩 =13 2 0 ,秩和T2 =132 0 0 ,统计量Z =- 3 14 1,双侧渐近概率为0 0 0 17) ,且c IAP2的表达与临床分期无关 (P >0 0 5 ) ,与病理分期 (P <0 0 1)及临床预后 (P <0 0 1)有相关性 ;②caspase 4在 4 1例鼻腔鼻窦鳞癌患者中 17例表达缺失 (- ) ,13例低表达 (+) ,与对照组差异有显著性 (实验组平均秩 =2 3 76 ,秩和T1=974 0 0 ,对照组平均秩 =35 2 0 ,秩和T2 =35 2 0 0 ,统计量Z =- 2 2 6 7,双侧渐近概率为 0 0 2 77) ,?

细胞凋亡抑制蛋白在卵巢上皮癌中的作用

目的 :研究卵巢上皮性癌细胞中细胞凋亡抑制蛋白的表达及作用。方法 :采用反义XIAP(X -linked细胞凋亡抑制蛋白 )腺病毒感染卵巢上皮性癌细胞系 ,用Hoechst染色计细胞凋亡率 ,用Western印迹法及扫描法检测XIAP的蛋白表达量。结果 :反义XIAP腺病毒抑制耐药性卵巢上皮性癌细胞的XIAP的表达 ,随感染时间的延长 ,细胞凋亡率升高。感染72h ,细胞凋亡率达 32 2 1% (P <0 0 0 1)。结论 :反义XIAP腺病毒抑制耐药性卵巢上皮性癌细胞XIAP的表达 ,诱导癌细胞凋亡 。

细胞凋亡抑制蛋白(IAPs)与肿瘤治疗的策略

凋亡是维持机体稳定的重要过程 ,其功能失调与多种疾病的发生有关。IAPs家族蛋白参与凋亡的调节 ,与肿瘤的关系受到人们的关注。

Tn细胞凋亡抑制蛋白(TnIAP)在粉纹夜蛾细胞中的表达和活性研究

在粉纹夜蛾 (Trichoplusiani)细胞Tn 5B1 4中 ,高效表达了来自粉纹夜蛾细胞Tn 5B1 4能够抑制细胞凋亡的TnIAP蛋白 .聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析表明 ,表达的重组TnIAP只有少部分是可溶性蛋白 ,大部分以不溶的形式存在 .这一结果与以往在昆虫细胞中往往表达出可溶性蛋白不同 .活性实验表明 ,可溶的重组TnIAP能够直接抑制caspase 9酶解Ac LEHD AFC的活性 ,也能抑制caspase 9激活HEK2 93细胞抽提物酶解Ac DEVD AFC的活性 .结果进一步证明 。

喉癌患者细胞凋亡抑制蛋白1的表达情况及预后影响因素

目的探讨喉癌患者喉癌组织细胞凋亡抑制蛋白1(c-IAP1)的表达情况及影响患者预后的因素。方法回顾性分析60例喉癌患者的临床资料,采集患者术后喉癌组织与癌旁组织病理切片,采用免疫组织化学法测定c-IAP1的表达情况。比较喉癌患者喉癌组织与癌旁组织中c-IAP1的表达情况,以及不同预后患者喉癌组织中c-IAP1的表达情况。采用多因素COX回归模型分析影响喉癌患者预后的因素。结果喉癌组织中c-IAP1高表达率高于癌旁组织(P<0.05)。本组60例患者中,预后不良42例(70.00%),预后良好18例(30.00%),预后不良患者喉癌组织c-IAP1高表达率高于预后良好患者(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,c-IAP1表达情况、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移情况、临床分期是喉癌患者预后的影响因素(均P<0.05)。结论喉癌患者喉癌组织中c-IAP1阳性表达率升高,c-IAP1表达情况、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移情况、临床分期是喉癌患者预后的影响因素。

细胞凋亡抑制家族蛋白在阿尔茨海默病动物模型中的表达及其初步作用机制研究

随着全球老龄化日益严重,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)作为神经退行性疾病的最常见类型,以进行性认知障碍为主要临床表现,以老年斑、神经纤维缠结和神经元及突触的凋亡缺失为主要病理特征.细胞凋亡抑制家族蛋白(inhibitor of apoptosis family protein,IAP)是一类内源性细胞凋亡抑制蛋白,它们在AD病理进程中的功能尚未十分明确.本研究从AD患者数据库、动物模型和诱导的脑片模型分析IAPs蛋白表达,并通过EMSA和免疫印迹实验初步探索了NFκB信号通路的活化.结果表明:存活蛋白(Survivin)在AD患者、小鼠模型以及Aβ、冈田酸和LPS诱导脑片中共同上调,同时NFκB通路被显著激活,两者变化趋势相似,可能通过NFκB-Survivin轴抵抗神经元凋亡. Survivin蛋白在AD中的进一步深入研究将成为AD治疗和预防的重要靶标.

细胞凋亡抑制蛋白Livin和Survivin检测在胃癌诊断中的价值

目的探讨细胞凋亡抑制蛋白Livin和Survivin检测在胃癌诊断中的作用。方法选择170例天门市第一人民医院手术或内镜病检标本作为研究对象,其中胃癌组织标本45例,萎缩性胃炎37例,浅表性胃炎29例,异型增生胃黏膜33例,26例正常胃部组织。比较各组组织中Livin、Survivin表达阳性率,并分析胃癌组织中Livin与Survivin表达的相关性。结果胃癌组织Livin、Survivin阳性率显著高于其他组织,差异有统计学意义(P<0.05),其中萎缩性胃炎、异型增生胃黏膜Livin阳性率显著高于正常组织,萎缩性胃炎、浅表性胃炎、异型增生胃黏膜Survivin阳性率显著高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Livin阳性表达与组织分化程度和TNM分期有关(P<0.05);Survivin阳性表达与组织浸润程度和TNM分期有关(P<0.05)。Livin阳性率为57.78%,Survivin阳性率为64.44%,二者均为阳性21例,二者表达无明显相关性(χ2=1.076,P>0.05)。结论细胞凋亡抑制蛋白Livin和Survivin在胃癌组织中表达显著上升,两种蛋白因子检测可作为胃癌辅助诊断的指标之一。

针康法对脑缺血大鼠神经功能及缺血半暗区皮层细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察针康法对脑缺血大鼠神经功能及缺血半暗区cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-3和细胞凋亡抑制蛋白1(cIAP1)表达的影响。方法雄性Sprague-Dawley大鼠90只,随机分为假手术组、模型组、针刺组、康复组和针康组,每组再分为3d、7 d和14 d亚组,每个亚组6只。后四组采用改良Koizumi线栓法制备脑缺血模型。假手术组和模型组不予治疗,针刺组行头穴丛刺治疗,康复组行跑台康复训练,针康组同时进行以上两种治疗。预定时间点采用改良神经功能缺损评分(mNSS)、转棒测试进行评定,Western blotting检测脑缺血半暗区cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-3、cIAP1蛋白表达。结果术后各时间点,与模型组比较,各治疗组mNSS评分均降低(P<0.05),转棒上停留时间均延长(P<0.05),cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-3蛋白表达均下降(P<0.05),cIAP1蛋白表达均上调(P<0.05);术后7d、14 d,与针刺组、康复组比较,针康组mNSS评分进一步降低(P<0.05),转棒上停留时间进一步延长(P<0.05),cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-3蛋白表达进一步下调(P<0.05),cIAP1蛋白表达进一步上调(P<0.05)。结论针康法能改善脑缺血大鼠神经功能,促进运动功能恢复,优于单纯针刺、康复训练,可能与抑制caspase-8、aspase-3蛋白活化,促进cIAP1蛋白表达,从而抑制caspases介导的细胞凋亡级联反应有关。

益气血法调节GDF9、c-IAP1/2、JNK1/2、TNFR1/2表达对超排卵大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的观察益气血法经后增殖方含药血清基于p38 MAPK/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路调节生长分化因子9(GDF9)、细胞凋亡抑制蛋白1/2(c-IAP1/2)、c-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)、肿瘤坏死因子受体1/2(TNFR1/2)表达对控制性超排卵大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法取12只雌性大鼠,随机分为控制性超排卵+中药组(6只大鼠给予经后增殖方4.5 g/kg灌胃)和控制性超排卵组(6只大鼠给予等体积生理盐水灌胃),后续经腹腔注射醋酸曲普瑞林、孕马血清促性腺激素、HCG后,取2组大鼠腹主动脉血制备含药血清和空白血清。另取15只雌性大鼠,经腹腔注射醋酸曲普瑞林、孕马血清促性腺激素、HCG后,收集卵巢颗粒细胞,分别与空白血清(空白血清组)、含药血清(含药血清组)、含药血清+GDF9抗体(含药血清+GDF9抗体组)在体外共同培养。TUNEL检测卵巢颗粒细胞凋亡率,qRT-PCR法检测卵巢颗粒细胞中p38 MAPK、NF-κB、GDF9、c-IAP1、c-IAP2、JNK1、JNK2、TNFR1、TNFR2 mRNA表达情况,Western blot法检测卵巢颗粒细胞中GDF9蛋白表达情况。结果含药血清组和含药血清+GDF9抗体组细胞凋亡率均明显低于空白血清组(P均<0.05),且含药血清组明显低于含药血清+GDF9抗体组(P<0.05)。含药血清组p38 MAPK、NF-κB mRNA相对表达量均明显低于空白血清组(P均<0.05)。含药血清组和含药血清+GDF9抗体组c-IAP1、c-IAP2、GDF9 mRNA相对表达量和GDF9蛋白相对表达量均明显高于空白血清组(P均<0.05),且含药血清组均明显高于含药血清+GDF9抗体组(P均<0.05);含药血清组和含药血清+GDF9抗体组JNK1、JNK2、TNFR1、TNFR2 mRNA相对表达量均明显低于空白血清组(P均<0.05),且含药血清组均明显低于含药血清+GDF9抗体组(P均<0.05)。结论益气血法经后增殖方可通过调控p38 MAPK/NF-κB信号通路,上调控制性超排卵大鼠卵巢颗粒细胞中GDF9、c-IAP1、c-IAP2的表达,下调JNK1、JNK2、TNFR1、TNFR2的表达,抑制卵巢颗粒细胞凋亡。