红树林海洋细菌PLM4抑制肿瘤细胞生长活性多糖的纯化及结构分析

红树林海洋短小芽孢杆菌Bacillus pumilus(PLM4)的发酵液对人喉癌细胞Hep-2、肝癌细胞BEL-7404和舌癌细胞TCA8123的生长抑制活性分别为63.6%、59.2%和61.5%。PLM4发酵液经乙醇沉淀和凝胶柱层析纯化可得到多糖纯品。采用高效凝胶渗透色谱法测定其分子量和纯度,硫酸-咔唑法、2,4-二硝基苯肼比色法、氯化钡明胶比色法、茚三酮反应和气相色谱法等测定其组分。采用红外光谱分析、高碘酸氧化和Smith降解等方法研究其结构。结果表明,该多糖分子量为116kd,由己糖醛酸、甘露糖、葡萄糖和丙酮酸组成,其摩尔比为31∶19∶6∶1,不含硫酸、乙酸和蛋白质。平均每100个己糖基中含有约42个1→3糖苷键、42个1→6糖苷键和/或非还原末端基、13.5个1→2糖苷键和2.5个1→4糖苷键。

复合中药多糖对小鼠淋巴细胞活性和肿瘤生长抑制的影响

本文提取猴头、灵芝、黄芪的多糖成分 ,各按高、中、低三种剂量水平配伍 ,根据正交设计原理 ,用MTT法测定其对小鼠淋巴细胞活性的影响 ,猴头多糖的高水平剂量与黄芪多糖的中水平剂量组成的复合多糖可增强小鼠淋巴细胞的活性 ,抑制S180 实体瘤的生长。

重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子的抗肿瘤活性

目的 :检测重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子 (VEGI)的抗肿瘤活性。 方法 :检测重组人可溶性 VEGI对建株人脐静脉内皮细胞 (ECV 30 4)、新生牛主动脉内皮细胞 (BAEC)增殖抑制的活性以及对荷 S180肉瘤小鼠的疗效。 结果 :重组人可溶性 VEGI可以直接抑制 ECV30 4、BAEC的增殖 ,强烈抑制 S180肉瘤生长并延长 S180腹水瘤小鼠的寿命。结论 :重组人可溶性 VEGI可通过抑制新生血管形成用于肿瘤治疗。

Envision法免疫组织化学染色研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子的抗肿瘤活性

目的：研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子(vascular endothelial growth inhibitor，VEGI)的抗肿瘤活性及其机制。方法：用重组人可溶性VEGI治疗荷S180肉瘤小鼠；第VIII因子相关抗原(FVIII RAg)标记肿瘤血管内皮细胞，用免疫组化Envision法检测瘤内微血管密度。结果：重组人可溶性VEGI显著抑制S180肉瘤生长，肿瘤微血管密度大大减低。结论：VEGI具有较强的抗肿瘤活性，其机制可能是通过抗新生血管形成介导的。

舍蝇抗菌肽的提取及其对肿瘤细胞生长的抑制作用

目的 :研究含蝇抗菌肽的提取对肿瘤细胞生长的抑制作用 ;方法 :对舍蝇幼虫采用针刺损伤及金黄色葡萄球菌感染诱导方法 ,并通过研磨、加热、阳离子交换柱层析及SephadexG - 5 0葡聚糖凝胶柱层析等步骤提取抗菌肽 ;结果 :经SDS -PAGE电泳分离到 2条带 ,分子量分别为 4kD ,9.6kD ;结论 :提取的舍蝇抗菌肽能有效地抑制人胃癌细胞MGC80 - 3和BGC - 82 3 ,人乳腺癌细胞MCF - 7及人肺癌细胞SPC -A - 1的体外增殖 。

丹参酮ⅡA抑制多种肿瘤细胞生长的体外实验研究

目的 研究丹参酮ⅡA对多种不同类型肿瘤细胞生长的体外抑制作用。方法 用 0 .5 μg·ml- 1 丹参酮ⅡA处理体外培养的肿瘤细胞 4d ,分别应用光镜、细胞计数、集落形成试验、流式细胞仪分析丹参酮ⅡA对不同肿瘤细胞生长的影响。结果 经丹参酮ⅡA处理后 ,肿瘤细胞生长和增殖明显被抑制 ,对NB4细胞的生长抑制作用更明显 ;部分肿瘤细胞发生凋亡的细胞形态改变 ,凋亡百分率为 10 .0 %～ 2 4 .3% (对照组为 2 .1%～ 6 .9% ) ,细胞明显被阻止于G0 G1 期 ,而S期细胞明显减少。结论 0 .5 μg·ml- 1 丹参酮ⅡA可明显抑制多种肿瘤细胞生长 。

端粒酶抑制剂对肿瘤细胞及其端粒酶活性的影响

目的 探讨端粒酶抑制剂作为肿瘤治疗药物的可行性。方法 选择人结肠癌细胞株 HC86 93、人肺癌细胞株A5 49以及人肝癌细胞株 L740 2作为靶细胞 ,观察 3′-叠氮 -3′-脱氧胸腺核苷 (AZT)和人端粒酶模板区的硫代反义寡核苷酸 (S- Oligos)对上述几种肿瘤细胞株的作用 ,用 MTT试验测定细胞毒作用 ;3H - Td R掺入试验测定细胞增殖速度 ;用端粒重复序列扩增法 (TRAP)半定量方法测定细胞染毒前后端粒酶活性的变化。结果 反义核苷酸片段和 AZT在一定剂量范围内有抑制肿瘤细胞株繁殖的作用 ,在抑制细胞生长的同时 ,端粒酶活性降低 ,去除抑制剂 2 4h后 ,端粒酶活性仍然维持在较低水平。三种细胞中 ,HC86 93和 L740 2对两种抑制剂较 A5 49细胞株更加敏感 ,两种抑制剂联合应用比单独应用的效果好。结论 AZT和 S- Oligos单独或联合应用在体外有抗肿瘤细胞的作用 ,进一步深入的研究有助于新的抗癌药物的开发。

藤黄总酸对实验性肿瘤及肿瘤细胞体外生长的抑制作用(英文)

目的 :研究藤黄总酸的体内外抗肿瘤活性。方法 :以抑瘤率和生命延长率观察药物的体内抗肿瘤活性 ,以药物对肿瘤细胞株的抑制率为指标 ,探讨其体外抗瘤作用。结果 :藤黄总酸 (8,4 ,2mg/kg)iv对Heps、EC及S1 80 的肿瘤生长具有明显的抑制作用 (P <0 0 1 ) ;ip(1 5 ,0 75 ,0 375mg/kg )能显著延长Heps、EAC、S1 80 腹水型小鼠移植瘤的存活天数 ;藤黄总酸对人肝癌细胞BEL 74 0 2及人肺腺癌细胞SPC A1有较强的抑制作用。结论 :藤黄总酸对肿瘤细胞的体内外生长有明显抑制作用。

肿瘤侵袭抑制因子-2对基因重组肝细胞生长因子诱导的人肺癌细胞运动和侵袭的抑制作用

应用基因重组肝细胞生长因子（HGF）可诱导人肺癌细胞运动和侵袭，通过细胞离散、集落扩散和基底膜侵袭实验证明，侵袭抑制因子-2（ⅡF-2）可明显地抑制由HGF诱导的作用。该抑制作用可被抗ⅡF-2抗体所阻断，表明ⅡF-2在肿瘤转移的预防和治疗方面可能具有重要意义。

老年晚期非小细胞肺癌循环肿瘤细胞表皮生长因子受体表达与酪氨酸激酶抑制剂疗效的相关性

目的探讨老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)外周血中循环肿瘤细胞(CTC)的表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平与EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)靶向治疗疗效及预后的相关性。方法通过流式细胞技术(FCM)检测CTC的EGFR表达水平,根据中位数分为高表达组和低表达组,患者都给予TKI治疗至少1个月后与TKI疗效及预后关系进行分析。结果 EGFR表达水平在不同病理类型间有统计学差异(P<0.05);在不同性别,分期及功能状态(PS)评分间无统计学差异(P>0.05)。EGFR高表达组治疗有效率(50%)及疾病控制率(70%)均明显高于低表达组(35.7%,53.5%,均P<0.05)。在TKI治疗有效的老年患者中,治疗前后EGFR表达水平有统计学差异(P<0.05);在TKI治疗无效的老年患者中,治疗前后EGFR表达水平无统计学差异(P>0.05)。EGFR高表达组中位生存期(21个月)及无疾病进展期(11个月)均明显长于低表达组(10个月,4个月,均P<0.05);1年生存率(77.8%),2年生存率(38.1%)及3年生存率(22.2%)均明显高于低表达组(63.3%,31.2%,3.3%,均P<0.05)。结论老年晚期NSCLC外周血CTC的EGFR高表达患者对EGFR-TKI靶向治疗反应有效率较高,生存期较长。

枸杞子多糖及合并应用厌氧短棒杆菌菌苗对小鼠腹腔巨噬细胞抑制肿瘤增殖活性的影响(英文)

本研究观察了中药枸杞子(Lyciumbarbarum L.)提取物枸杞多糖(LBP)对小鼠腹腔巨噬细胞抑制肿瘤增殖活性的影响。结果表明,给正常小鼠ip LBP 40 mg/kg×7d能增强经Con A处理的巨噬细胞抑制肿瘤靶细胞增殖的活性;LBP 5.10.20,40mg/kg×7 d并与小剂量(250μg/只)厌氧短棒杆菌菌苗(Corynebacterium parvum,CP)合并应用,具有明显的协同效应。在LBP浓度为20 mg/kg时,效应最为显著,对靶细胞P815及P388增殖的抑制率分别为85.5％和63.6％;CP对照组则为28.1％及24.0％。表明合并应用LBP及CP可减少二者的用量,增强效应,减低CP的毒副作用。据本室先前的研究发现,LBP为主要作用于T细胞的免疫增强剂,能增强CTL,NK细胞的功能;CP则为巨噬细胞刺激剂。本研究结果提示,合并应用作用于免疫应答不同环节的免疫增强剂可获得协同效应,这将为临床肿瘤的免疫疗法中免疫增强剂的联合应用提供参考。此外,本实验还发现,来自经肿瘤细胞免疫小鼠的腹腔巨噬细胞,表现出较强的特异性抑制肿瘤增殖活性,LBP则能进一步加强其作用。以上结果提示,LBP无论对巨噬细胞在非特异性抗肿瘤或特异性抗肿瘤过程中,均具有激活作用。

内皮细胞生长抑制素——抗肿瘤血管生成的细胞因子

综述了内皮细胞生长抑制素的结构和功能 ;探讨了其与胶原蛋白 的关系以及抗血管生成、抗肿瘤生长和转移的可能机理 ;展望了其在肿瘤诊断、治疗等方面的应用前景 .内皮细胞生长抑制素是胶原蛋白 C-末端的酶解产物 ,在血管生成过程中起负调控作用 ,通过阻断血管生成的信号并诱导内皮细胞的凋亡而特异性地抑制内皮细胞的迁移和新血管的生成 ,从而抑制肿瘤的生长和转移 .其抗血管生成的机制目前尚未完全清楚 ,研究显示它是一个结合紧密的球状折叠分子 ,一面富含精氨酸残基 ,是肝素的结合位点 ,推测与抗血管生成的机制有关 .内皮细胞生长抑制素作为抗肿瘤的内源性药物 ,具有高效性 ,低毒性 。

双功能分子白介素-2-粒细胞-巨噬细胞集落生长因子促进树突状细胞在肿瘤免疫抑制环境中的活化效应

目的将本室构建与制备的双功能分子白介素-2-粒细胞-巨噬细胞集落生长因子(IL2-GMCSF)蛋白作用于肿瘤条件培养基(TCM)环境中的树突状细胞系(DC),检测其对DC细胞的活化,探讨其用于活化DC、进行抗肿瘤免疫治疗的可能性。方法制备小鼠黑色素瘤B16F10细胞系的TCM,用以培养DC2.4细胞,同时分别添加IL2-GMCSF、GM-CSF、IL-2、或IL-2与GMCSF组合使用。24 h后,检测DC2.4细胞的吞噬与增殖活性、细胞成熟表型、细胞因子分泌与信号通路活化。结果 DC2.4细胞具有未成熟DC的特征,在TCM培养条件下吞噬能力增强、但增殖活性显著受抑,TCM对DC成熟表型表面标志的表达有一定促进作用,并促进单核与DC来源的趋化因子(MDC),但抑制DC的IL-12分泌。与之相反,IL2-GMCSF主要借助其GM-CSF活性,促进DC2.4细胞的吞噬与增殖活性,并促进DC进一步成熟,且高表达IL-12与MDC。与GM-CSF相比,IL2-GMCSF可诱导更高的炎性NF-κB通路活化水平,而抑制调节性STAT3通路的活化。结论与GM-CSF单独作用相比,IL2-GMCSF可更好地促进肿瘤免疫抑制环境中的DC活化,有望成为有效的临床抗肿瘤治疗手段。

c-myc对肿瘤细胞生长抑制基因的转录调控

c-myc基因在许多肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用,它主要通过对靶基因的转录调控发挥作用。对c-myc如何调节肿瘤细胞周期生长抑制基因转录机制进行综述。c-myc对细胞周期的调控主要通过对生长抑制基因转录抑制实现,主要有2个不同机制一个通过myc/Max二聚体中c-myc蛋白的羧基端(C末端)与Mil-1形成复合物与生长抑制基因p15等启动子Inr区域结合,拮抗其他转录激活因子如Mil-1与Inr结构结合。另一机制c-myc及可能存在的抑制物与转录激活因子Sp1及SMad(smaandmadhomologue)等形成复合物干扰Sp1等对生长抑制基因的激活。造成细胞恶性转化及增殖。

机械通气联合肺表面活性剂对新生儿ALI/ARDS血管内皮生长因子、巨噬细胞移动抑制因子表达的影响

目的:研究新生儿急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)血管内皮生长因子(VEGF)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达,以及机械通气(MV)联合肺表面活性剂(MV+PS)与MV对VEGF、MIF的影响比较。方法:选择2014年1月至2016年6月诊断ALI/ARDS的新生儿,MV+PS组58例,MV组52例,同期产房健康足月新生儿10例为对照组;检测机械通气0、24、48、72 h血清VEGF、MIF含量。结果:(1)3组在胎龄、出生体重、性别比较差异均无统计学意义(P>0.05);(2)血清VEGF、MIF含量在ALI/ARDS各时间点均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);在治疗24、48 h逐渐升高,72 h回落,与0h比较差异均有统计学意义(P<0.05);在各时间点比较ALI均低于ARDS,差异均有统计学意义(P<0.05);(3)MV+PS组在ALI/ARDS各时间点比较VEGF、MIF均低于MV组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 :新生儿ALI/ARDS早期血清VEGF、MIF表达增加,参与ALI/ARDS的发生发展;MV联合PS可减轻新生儿ALI/ARDS炎性反应,值得临床推广。

榄香烯复合瘤苗免疫治疗对肿瘤生长和脾细胞细胞毒活性的影响

采用榄香烯复合瘤苗治疗 6 15系小鼠乳腺癌 (Ca76 1)和小鼠肝癌Hca的高淋巴道转移亚系(HCa -F)。Ca76 1和HCa -F的生长均受到抑制 ;平均存活时间分别由 34 5d延长到 4 2 8d(Ca76 1)和由 2 3 7d延长到 31 0d(HCa -F) ,P <0 0 5。治疗组小鼠脾细胞对HCa -F、L92 9和YAC - 1的细胞毒活性也增强。结果提示榄香烯复合瘤苗对MHC表达水平不同的肿瘤都可能有治疗效应。

他克莫司对转化生长因子-β诱导的肾小管上皮细胞转分化的抑制作用及对核因子-κB活性的影响

目的 :探讨他克莫司 (FK5 0 6 )对转化生长因子 β(TGF β)诱导的肾小管上皮细胞转分化的作用 ,及其与核因子 κB(NF κB)活性变化的关系。 方法 :以人类肾脏近曲小管上皮细胞株 (Humankidneycell,HKC)为研究对象 ,分为以下 4组 :①阴性对照组 ;②TGF β(8ng/ml)组 :③FK5 0 6 (0 1、1、10、5 0ng/ml)组 :④TGF β(8ng/ml) +FK5 0 6(0 1、1、10、5 0ng/ml)组。应用形态学、间接免疫荧光法 ,免疫组化技术和酶联免疫吸附法观察FK5 0 6对TGF β诱导的HKC细胞转分化的作用、细胞培养上清液纤连蛋白、I型胶原的变化及FK5 0 6对HKC细胞NF κB活性的影响。 结果 :FK5 0 6 (1,10 ,5 0ng/ml) +TGF β组比TGF β组诱导的HKC细胞E 钙粘蛋白和细胞角蛋白表达有所增强 ,波形蛋白和α 平滑肌肌动蛋白 (α smoothmuscleactin ,α SMA)的表达比TGF β组减弱 (P <0 0 5 ) ,同时HKC细胞NF κB的活性比TGF β组减弱 (P <0 0 5 ) ,培养上清液纤连蛋白及I型胶原的浓度比TGF β组降低 (P <0 0 5 ) ;FK5 0 6 (1、10、5 0ng/ml)使基础状态下HKC细胞NF κB的活性明显下降 (P <0 0 5 )和上清液中纤连蛋白及I型胶原的水平明显降低 (P <0 0 5 )。 结论 :①FK5 0 6剂量依赖性地抑制TGF

基因工程IFNα_(2a)和IFNα_(2b)对肿瘤细胞生长的抑制作用

为了研究不同品牌不同亚型基因工程α干扰素的抗肿瘤效应，采用ＭＴＴ法将不同浓度的α干扰素分别对５种肿瘤细胞进行生长抑制实验。结果表明不同品牌的１００００ＩＵ／ｍｌ，１０００ＩＵ／ｍｌ，１００ＩＵ／ｍｌ的ＩＦＮα２ａ或ＩＦＮα２ｂ对人脑胶质瘤细胞（ＳＨＧ４４），人骨肉瘤细胞（ＨＯＳ８６０３），人白血病细胞（ＨＬ６０），红白血病细胞（Ｋ５６２）和淋巴瘤细胞（Ｒａｊｉ）的生长均有不同程度的抑制作用。其抑制率分别为２０％，１０％，５％左右。进口和国产的不同品牌ＩＦＮα２ａ和ＩＦＮα２ｂ对上述５种肿瘤细胞株均有较明显的生长抑制效应，而且抑制的百分率均相近。

端粒酶抑制剂对口腔肿瘤细胞生长的影响

目的 探讨端粒酶抑制剂作为肿瘤治疗药物的可行性。方法 选择人口腔鳞状细胞癌KB细胞株作为靶细胞 ,观察端粒酶抑制剂 3′_叠氮_3′_脱氧胸腺核苷 (AZT)和人端粒酶模板区的硫代反义寡核苷酸片断(AS_ONS)对上述肿瘤细胞株的作用 ,用MTT试验测定细胞毒作用 ;3H_TdR掺入试验测定细胞增殖速度 ;用端粒重复序列扩增法 (TRAP)半定量方法测定细胞染毒前后端粒酶活性的变化 ;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果 AS_ONS和AZT在一定剂量范围内有抑制肿瘤细胞株繁殖的作用 ,在抑制细胞生长的同时 ,端粒酶活性降低。此外 ,AS_ONS和AZT还有诱导细胞凋亡以及使细胞阻滞在G1 期的作用。结论 AZT和AS_ONS在体外有抑制端粒酶活性和抗肿瘤细胞增殖的作用 。