花生芽中白藜芦醇的亚临界水萃取及抑制酶活性研究

为了提高花生芽中白藜芦醇的提取率,此试验通过考察液料比、亚临界萃取温度、萃取时间、提取次数对花生芽中白藜芦醇提取率的影响,在单因素试验基础上进行响应面优化亚临界水萃取花生芽中白藜芦醇的工艺。并通过测定白藜芦醇纯化物抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的能力研究其抑制酶活性。结果表明,亚临界水萃取花生芽中白藜芦醇的最优工艺为:萃取温度135℃,萃取时间30 min,液料比130∶1(m L/g),在此条件下整个试验过程重复三次,白藜芦醇提取率为(7.65±0.04)mg/g。花生芽白藜芦醇具有良好的抑制酶活性能力,其对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为67.36%、73.38%。

间接抑制酶联免疫吸附法测定大豆凝集素方法的建立

本研究用标准抗原、纯化抗体和辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG ,建立间接抑制酶联免疫吸附法 ,测定了几种不同品种生大豆和豆粕产品的凝集素含量。结果表明 ,间接抑制ELISA检测大豆制品中的凝集素含量变异系数小于 15 % ,样品回收率误差在 15 %以内 ;抑制率在 2 0 %～ 70 %范围内 ,曲线呈现良好的线性关系 ,提取液中的大豆凝集素检测下限为 10mg mL。

Delvocid抑制酶对酸奶保质期的影响

酸奶是一种利用特定乳酸菌的发酵制品,但在加工及包装过程中易受到霉菌与酵母菌的污染。本研究使用一种称为“Delvocid”的抑制酶,分析了在酸奶加工中添加不同浓度的剂量对酸奶保质期的影响。实验结果表明,在酸奶中添加20mg/kg的剂量,可使产品保质期延长至4周以上。

鼻分泌物中蛋白抑制酶与螨变应原蛋白酶间的相互作用

目的研究螨变应原的致敏机理，观察室尘螨变应原蛋白酶与人鼻分泌物中蛋白抑制酶在体外的相互作用。方法鼻分泌物经稀释、混匀、离心后，所得上清液低温保存备用。螨变应原和其它各种蛋白酶分别与各种浓度的水解蛋白抑制酶或不同稀释度的鼻分泌物进行前培养，继而与酶基质进行反应。利用荧光光度计测定被蛋白酶裂解的基质的荧光强度。结果鼻分泌物中显示出轻度的胰蛋白酶样和其它蛋白酶活性，其能抑制胰蛋白酶活性，并对螨变应原的胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶活性和木瓜酶样半胱氨酸蛋白酶活性显示抑制作用，并呈现浓度依赖的抑制效果。结论鼻分泌物中的水解蛋白抑制酶可能在防御螨变应原蛋白酶穿透鼻粘膜上皮屏障中发挥作用。

竞争性抑制酶联反应在量热式农残生物传感器中的试验研究

以量热式农残生物传感器为研究对象,借鉴免疫分析方法,进行竞争性抑制酶联反应在量热式农残生物传感器中的试验研究。结果表明,在甲胺磷浓度为0~0.004 mg.kg-1范围内,甲胺磷含量和放热量之间的线性较好,竞争性抑制酶联反应分析法测农药残留的最低检测限为0.0011 mg.kg-1,每次测定时间为20 min。

抑制酶~-发酵乳制品的生物保鲜剂

介绍了抑制酶作为新兴生物型防腐剂所具备的优点，这些优点在发酵乳制品的防腐保鲜作用上发挥得淋漓尽致。抑制酶。的防腐保鲜效果给生产优质纯正酸奶、奶酪者带来信心。

α-淀粉抑制酶纳米脂质体运动食品的制备及稳定性评价

本研究以α-淀粉抑制酶为主要原料,辅以适当的卵磷脂、胆固醇,生产出一款含α-淀粉抑制酶的纳米脂质体。以α-淀粉抑制酶添加量、卵磷脂添加量、胆固醇添加量、搅拌温度为因素,以包封率为指标,进行单因素实验及正交试验,并研究了温度和pH等贮藏条件对α-淀粉抑制酶纳米脂质体稳定性的影响。结果表明,最佳工艺条件为α-淀粉抑制酶添加量2.0 mg/mL,胆固醇添加量8.0 mg/mL,卵磷脂添加量0.25 mg/mL,搅拌温度70℃。制得的纳米脂质体的包封率达到91.6%,平均粒径为70.2 nm,并在温度为25℃、pH3.5~7.5的条件下贮藏40 d,其粒径变化小,分散体系稳定性好。在本实验的工艺条件下制备的纳米脂质体有效提高α-淀粉抑制酶的稳定性和利用率,为进一步的开发应用提供可行性。

抑制酶免疫分析测定APP血清-5型抗体

胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起猪呼吸道感染,死亡率很高。本病通过猪的感染传播世界许多国家,引起养猪业严重经济损失。丹麦兽医实验室Stenhxk等用APP-5特异单抗建立了测定APP猪血清-5型(App-5)抗体的抑制酶免疫分析法,并发现单抗(McAb210-F11)能识别0-链APP-5脂多糖表位。在抑制酶免疫分析中,用高纯度APP与脂多糖包被微量反应板。

青钱柳叶化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

目的 研究青钱柳Cyclocarya paliurus(Batal.) Iljinskaja叶的化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法 青钱柳叶95%乙醇提取物采用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、聚酰胺、C18反相硅胶及半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用PNPG法评价其α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果 从中分离得到15个化合物,分别鉴定为cyclopaloside C(1)、cyclopaloside A(2)、juglanosides E(3)、vaccinin A(4)、ent-mururin A(5)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(6)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(7)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(8)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸乙酯(9)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(10)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(11)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(12)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(13)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(14)、香橙素(15)。总提取物抑制α-葡萄糖苷酶的IC_(50)值为(1.83±0.04)μg/mL,化合物1、4~5分别为(29.48±1.86)、(0.50±0.07)、(0.71±0.07)μmol/L。结论 化合物1为新四氢萘醇苷类,化合物4~5、8~10、14为首次从青钱柳叶中分离得到。化合物4~5为较少见的黄酮木脂素类化合物,对α-葡萄糖苷酶具有潜在的抑制活性。

血管紧张素转化酶抑制剂或血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂联合糖皮质激素治疗IgA肾病疗效观察

目的探讨血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)或血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂(ARB)联合糖皮质激素治疗IgA肾病患者的临床疗效。方法选择2019年10月至2022年10月安阳地区医院收治的125例IgA肾病患者为研究对象。将患者随机分为对照组(n=62)和观察组(n=63),对照组患者给予ACEI或ARB类药物治疗,观察组患者在对照组的基础上加用丙酸氟替卡松吸入气雾剂治疗,2组患者均连续治疗3个月。比较2组患者治疗后的效果。分别于治疗前后检测2组患者24 h尿蛋白定量、肾功能指标血肌酐(Scr)、肾小球滤过率(GFR)和血常规指标白细胞计数(WBC)、血红蛋白(HGB)水平、血小板计数(PLT)。记录2组患者治疗期间不良反应发生情况。结果对照组和观察组患者治疗总有效率分别为54.84%(34/62)、84.13%(53/63),观察组患者治疗总有效率显著高于对照组(χ^(2)=12.669,P<0.05)。治疗前2组患者24 h尿蛋白定量、Scr、GFR比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组患者治疗前后24 h尿蛋白定量比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组患者治疗后24 h尿蛋白定量显著低于治疗前(P<0.05);2组患者治疗后Scr显著低于治疗前,GFR显著高于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组患者24 h尿蛋白定量显著低于对照组(P<0.05);2组患者Scr、GFR比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗前后WBC、HGB、PLT水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗过程中均未出现糖耐量异常、类固醇性糖尿病、血压升高等不良反应。结论丙酸氟替卡松吸入气雾剂联合ACEI或ARB类药物治疗IgA肾病患者,可降低24 h尿蛋白定量,有助于肾功能的改善,疗效显著,且不会对患者造成血液系统损伤,安全性较高。

荧光方法在酶抑制农药残留快速检测中的研究进展

农药残留污染是农产品质量安全的首要关注因子,基于大型仪器的实验室检测模式难以匹配检测时效性需求。基于乙酰胆碱酯酶活性抑制的农药残留快速检测方法(酶抑制法)具有操作便携、检测速度快等优势,已成为农产品质量安全的常用筛查手段。囿于常规可见光比色法性能,传统的酶抑制法在检测灵敏度方面受到制约,这限制了其进一步的发展。荧光方法利用特征的激发/发射光谱,可以有效降低非特异性干扰,因此将荧光信号作为数据采集技术是改善酶抑制法灵敏度缺陷的有效手段。本文重点介绍了荧光方法在酶抑制农药残留快速检测中的信号响应模式,包括单酶-荧光材料响应、多酶级联响应和酶活性靶向小分子荧光探针响应,还分别总结了不同方法的目标物响应机制、检测效果及应用现状,最后对酶抑制农药残留快速检测的发展方向进行了展望。

几种黑豆成分、体外抗氧化及酶抑制作用对比

目的:挑选黑豆药用与食用的适宜品种。方法:测定了9种黑豆的总酚酸、总黄酮、缩合单宁、总花色苷、总多糖和总蛋白质含量,并对黑豆提取物的体外抗氧化活性以及对α-淀粉酶、胰脂肪酶、乙酰胆碱酯酶、酪氨酸酶的抑制作用进行比较。结果:总酚酸、总黄酮、缩合单宁、总花色苷含量为马料豆>小黑豆>黑豆;总多糖含量为小黑豆>黑豆>马料豆;总蛋白含量为马料豆>黑豆>小黑豆;抗氧化活性为马料豆>小黑豆>黑豆。体外试验发现,小黑豆与黑豆对多种酶均有抑制作用,强度各不相同。结论:不同品种黑豆的生物活性物质含量和功能存在差异。黑豆更适合食用,马料豆和小黑豆药用价值更高。

红毛藻血管紧张素转化酶抑制肽的筛选及其稳定性评价

本实验以红毛藻为原料,利用酶解法及超滤分级制备获得不同分子质量的肽组分,经高效液相色谱法测定体外血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制活性发现F2组分(800~2000 Da)的ACE抑制率最高;采用液相色谱-串联质谱技术和PEAKS Studio软件的de novo从头测序对F2组分进行氨基酸序列鉴定,并结合分子对接筛选出与ACE稳定结合的6个ACE抑制肽。利用固相合成法制备预测肽并经体外ACE抑制活性验证,发现L1(LVLLFLFGE)的ACE抑制活性最高,半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为14.22μg/mL。分子对接结果表明,L1对ACE的抑制主要归因于其能够与ACE的活性口袋形成氢键相互作用。最后,探讨温度、pH值、金属离子、光照类型和模拟胃肠道酶系消化对L1稳定性的影响,结果表明L1具有较好的热稳定性和离子强度稳定性,pH>2时抑制活性逐步减弱,紫外光处理会影响其抑制活性,体外模拟胃肠液处理后L1的ACE抑制率虽然显著降低,但仍具有较高ACE抑制活性。

窄孢灵芝化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

目的研究窄孢灵芝Ganoderma angustisporum J.H.Xing,B.K.Cui&Y.C.Dai的化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法窄孢灵芝乙酸乙酯提取物采用硅胶、ODS、TLC、HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用pNPG法评价其α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果从中分离得到7个化合物,分别鉴定为N-acetyl-L-phenylalanine ethyl ester(1)、N-acetyl-L-phenylalanine methyl ester(2)、4-hydroxy-17R-methylincisterol(3)、6,8-di-O-methylaverufin(4)、aversin(5)、methyl 2-(4-hydroxyphenyl)acetate(6)、5-甲苯-1,3-二醇(7)。化合物1~2、4~7的α-葡萄糖苷酶抑制活性IC_(50)值分别为(33.80±0.47)、(45.45±7.95)、(48.80±5.86)、(39.48±2.82)、(41.47±6.68)、(55.38±10.12)μmol/L,其中化合物1的抑制活性较强。结论化合物1为新天然产物,化合物2~7为首次从灵芝属中分离得到。化合物1~2、4~7具有α-葡萄糖苷酶抑制活性。

药食同源物协同血管紧张素转化酶抑制肽微胶囊的制备及其降压作用

研究药食同源复合物(枸杞∶山楂∶决明子=4∶1∶1,质量比,下同)协同血管紧张素转化酶(angiotensin convertingenzyme,ACE)抑制肽微胶囊对自发性高血压大鼠(spontaneouslyhypertensiverats,SHR)的降压作用。当ACE抑制肽与复合物的质量之比为1∶2时,ACE抑制率为78.19%,显著高于单一药食同源复合物(69.46%)及ACE抑制肽(71.48%)(P<0.05)。通过优化包埋工艺(固含物为10%、进风温度为160℃、芯壁比为1∶15、壁材为变性淀粉∶麦芽糊精=1∶4)制备药食同源物协同ACE抑制肽微胶囊包埋率为82.76%,在肠道中消化240 min后的释放率为81.4%,苦味显著降低(P<0.05)。动物实验结果发现药食同源物协同ACE抑制肽能够明显降低SHR的血压值,显著增加大鼠血浆中ACE2及血管紧张素1-7含量,降低血浆中ACE及血浆、心脏、肾脏及胸主动脉中血管紧张素II的含量(P<0.05),作用效果优于单一复合物及ACE抑制肽,证明药食同源物与ACE抑制肽存在协同效果,可通过调节肾素-血管紧张素系统降压,还可显著降低SHR心脏及胸主动脉纤维程度,从而改善由高血压引起的脏器损伤。

脂肪酸合酶及其抑制剂在子宫内膜癌中的研究进展

脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)是脂肪酸合成的关键酶,可催化脂质从头合成。正常组织中的脂肪酸大多来源于食物,而在子宫内膜癌细胞中脂肪酸依赖于脂质的从头合成。既往研究表明,FASN的表达与子宫内膜癌的发生、发展及预后不良相关,FASN的过表达与丝裂原细胞外激酶(mitogen extracellular kinase,MEK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)/丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号转导通路相关。因此,特异性阻断FASN的活性可显著抑制肿瘤细胞的生长和增殖。综述子宫内膜癌中FASN的作用机制、FASN抑制剂(如C75、C93、奥利司他等)在子宫内膜癌或其他肿瘤中的研究进展,旨在为子宫内膜肿瘤的治疗提供新思路。

琯溪蜜柚疏果黄酮酶法辅助提取工艺优化及其抑制酪氨酸酶活性

本论文旨在探讨β-葡萄糖苷酶法辅助提取琯溪蜜柚疏果黄酮的工艺及提取得到的黄酮对酪氨酸酶抑制作用。以总黄酮提取量为指标,采用单因素实验及响应面试验对β-葡萄糖苷酶酶活力、酶解pH、温度及时间进行优化,并研究总黄酮提取物对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明,通过单因素实验和响应面试验优化得到琯溪蜜柚疏果黄酮提取的最优条件是:β-葡萄糖苷酶酶活力0.0128 U/mL、酶解pH4.4、酶解温度35℃、酶解时间4.8 h,在该工艺条件下疏果总黄酮提取量为34.0 mg/g;该黄酮提取物对酪氨酸酶的半抑制浓度(IC50)为0.31 mg/mL。本研究结果说明酶法工艺可显著提高琯溪蜜柚疏果黄酮的提取量,且琯溪蜜柚疏果黄酮具有较强的酪氨酸酶抑制作用,研究结果为琯溪蜜柚疏果黄酮提取及应用提供了参考依据,有利于促进琯溪蜜柚的高值化利用。

GnRHa联合芳香化酶抑制剂在子宫内膜不典型增生及早期子宫内膜癌保育治疗中的研究进展

子宫内膜癌(EC)是女性最常见恶性肿瘤之一,EC患者中5%~10%年龄在40岁以下,且确诊时70%~88%尚未完成生育。子宫内膜不典型增生(AH)为EC的癌前病变,常同时存在EC。接受保留生育功能的AH/EC患者中,部分患者合并肥胖、胰岛素抵抗或糖尿病等,对口服孕激素的反应欠佳,疾病完全缓解率低、复发率高及妊娠结局欠佳。促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合芳香化酶抑制剂作为孕激素治疗的替代方案,对此类患者可取得较满意的疗效及妊娠结局。本文将从AH/EC保育治疗的现状、GnRH-a联合芳香化酶抑制剂在保育治疗中的可行性、影响因素及不良反应等方面进行综述。

CDK4/6抑制剂联合非甾体芳香化酶抑制剂治疗晚期乳腺癌有效性和安全性的Meta分析

目的 系统评价细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase, CDK)4/6抑制剂联合非甾体芳香化酶抑制剂治疗晚期乳腺癌的有效性与安全性。方法 计算机检索Pubmed、Cochrane图书馆、EMbase、中国知网、万方数据库和维普数据库,以收集CDK4/6抑制剂联合非甾体芳香化酶抑制剂治疗晚期乳腺癌的相关文献,检索时限均从建库至2023年02月01日。由2位研究者背对背筛选文献、提取数据并进行偏倚风险评估后,使用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果 纳入Meta分析的文献有8篇,共2 706例患者。Meta分析结果显示,与安慰剂联合非甾体芳香化酶抑制剂治疗相比,CDK4/6抑制剂联合非甾体芳香化酶抑制剂治疗可延长晚期乳腺癌患者无进展生存期(RR=0.58,95%CI:0.51~0.64,P<0.001)、提高客观缓解率(RR=1.34,95%CI:1.20~1.48,P<0.001)和临床获益率(RR=1.11,95%CI:1.06~1.16,P<0.001)。在安全性方面,CDK4/6抑制剂联合非甾体芳香化酶抑制剂治疗患者的3~4级不良反应发生率较高(RR=2.63,95%CI:2.17~3.19,P<0.001)。其中,试验组白细胞减少、嗜中性粒细胞减少、贫血、乏力、呕吐及腹泻等不良反应发生率高于对照组(P<0.05);2组便秘和头疼的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CDK4/6抑制剂联合非甾体芳香化酶抑制剂治疗可延长晚期乳腺癌患者的无进展生存期、提高客观缓解率和临床获益率,但该方案可能导致3~4级不良反应发生率升高。