土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取工艺优化及其酶动力学研究

目的优化土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取工艺,并考察其酶动力学。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、提取时间、提取温度为影响因素,黄嘌呤氧化酶活性抑制率为评价指标,响应面法优化提取工艺。分别通过Lineweaver-Burk图、Dixon图确定其抑制类型、抑制动力学常数K i。结果最佳条件为乙醇体积分数69%,提取时间89 min,提取温度82℃,黄嘌呤氧化酶活性抑制率为62.25%。抑制类型为竞争性可逆抑制,K i为1.92 mg/mL。结论该方法稳定可靠,可用于提取土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。

藜蒿茎抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取条件优化及其成分分析

以黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)抑制活性为监测指标,采用乙醇回流提取法提取藜蒿茎活性成分。首先进行单因素实验,然后以此为基础,通过响应曲面法优化藜蒿茎中抑制XOD活性成分提取条件,最后通过超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱仪(UPLC/Q-TOF-MS/MS)对藜蒿茎乙醇提取液定性分析。结果表明,最佳提取条件为乙醇浓度53%,提取温度79℃,液料比34∶1(mL/g),在此条件下得到提取液的XOD活性抑制率为56.4%。鉴定出藜蒿茎乙醇提取液的主要成分包括新绿原酸(5-CQA)、绿原酸(3-CQA)、异绿原酸b(3,4-diCQA)、异绿原酸a(3,5-diCQA)、1,5-二咖啡酰基奎宁酸(1,5-diCQA)和异绿原酸c(4,5-diCQA)。

玉米须抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的提取工艺研究

以玉米须为原料,采用索氏提取法提取玉米须黄酮类化合物,并研究其体外抑制黄嘌呤氧化酶活性。分别以乙醇浓度、提取温度和液料比为单因素,以黄酮得率和黄嘌呤氧化酶的抑制率为考察指标,以提取总效果值为评价指标,通过正交实验设计优化玉米须抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的索氏提取工艺。结果表明,最佳提取条件为乙醇浓度为60%,提取温度为80℃,料液比为30∶1(mL/g),在此条件下进行试验,得到玉米须抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的提取总效果值为49.23%

平卧菊三七黄嘌呤氧化酶活性抑制提取物的成分分析和降尿酸作用

抑制黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)活性降低尿酸生成是预防和治疗高尿酸血症的有效手段。为获得安全性高的天然来源XOD活性抑制剂,该文以XOD活性抑制率为指标,优化超声波提取条件获得食药兼用资源平卧菊三七XOD活性抑制提取物(Gynura procumbens(Lour.)Merr.extract,GE),利用液质联用技术鉴定其物质组成,并检测其降高尿酸血症小鼠血尿酸作用。经超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱分析发现,GE主要含有4个单咖啡酰基奎尼酸、6个二咖啡酰基奎尼酸等绿原酸类物质和槲皮素及3个糖苷、山奈酚及1个糖苷等黄酮类物质。GE经乙酸乙酯萃取(GEA)和正丁醇萃取(GEB)后,XOD活性抑制率均提高。动物实验表明,GE、GEA和GEB均有效降低血清尿酸水平和肝XOD活性(P<0.01),显著降低肝丙二醛水平(P<0.01)、升高超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性,降低促炎因子IL-6和TNF-α含量(P<0.05)、恢复抑炎因子IL-10水平(P<0.01),从而减轻肾脏尿酸盐沉积和炎症,且GEA和GEB效果好于GE。研究结果可为开发食药资源降尿酸护肝肾产品提供理论基础。

超声辅助酶解制备大米蛋白黄嘌呤氧化酶活性抑制肽的工艺条件优化

以大米蛋白为原料,研究碱性蛋白酶酶解法制备黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase,XOD)活性抑制肽,并对其体外功能活性进行评价。研究了蛋白酶种类、底物质量分数、酶解温度、加酶量、酶解pH、酶解时间对大米蛋白水解度(degree of hydrolysis,DH)及酶解产物对黄嘌呤氧化酶活性抑制率的影响,探讨了不同超声处理方式对酶解过程的影响,通过响应面法对实验条件进行了优化结果为:采用碱性蛋白酶,底物质量分数5%,酶解温度为56℃,加酶量为8000 U/g,酶解pH为10,超声功率70 W,超声酶解60 min,对所制备的大米蛋白黄嘌呤氧化酶活性抑制肽的功能活性进行了评价。在最优条件下其黄嘌呤氧化酶抑制活性的IC_(50)为1.55 mg/mL,ABTS自由基清除作用、羟基自由基清除作用、DPPH自由基清除作用的IC_(50)值分别为0.49、12.48、3.88 mg/mL。

槐米提取物对黄嘌呤氧化酶活性抑制评价及作用机制研究

为了探究槐米醇提物药效物质对体外黄嘌呤氧化酶(XOD)活性抑制的作用机制,本研究采用体外XOD促动力学模型对槐米醇提物及其潜在活性成分芸香叶苷、槲皮素及白桦脂醇进行XOD活性抑制评价,以分析其天然成分芸香叶苷热-酸性水解作用对XOD活性抑制的影响。试验结果表明,槐米提取物A在药剂浓度100~700μg/mL,对体外XOD活性抑制具有良好作用,其最大抑制率可达36.68%,与对照药剂别嘌呤醇(90μg/mL,抑制率61%)相比,抑制率较弱。槐米中主要化学成分芸香叶苷、槲皮素及白桦脂醇在一定药剂浓度范围内,芸香叶苷抑制率不明显,槲皮素表现出优异的XOD抑制作用(抑制率61.64%,IC_(50)值为203.6μmol/L),白桦脂醇次之。在酸性水解作用的条件下,芸香叶苷酸性水解混合物抑制XOD活性作用较热水解作用混合物较高。研究认为槐米醇提物对体外XOD活性抑制的药效物质可能为槲皮素。

UPLC-Q Exactive Plus-MS分析高粱壳化学成分及黄嘌呤氧化酶体外抑制活性筛选

采用高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱对高粱壳中的化学成分进行分析鉴定,并通过高效液相色谱法筛选抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。该实验使用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(2.1 nm×30 nm,3μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱,流速1.0 m L/min,进样量10μL。质谱分析采用ESI离子源,在正离子模式下采集数据,利用Xcalibur 4.1软件结合数据库对所得数据进行分析,共鉴定出27种化学成分。对刺槐素、葛根素、芹菜素、根皮苷、异鼠李素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮6种化学成分进行活性筛选,发现芹菜素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮对黄嘌呤氧化酶(XO)表现出较强的抑制活性,IC_(50)分别为18.11和34.59μmol/L。

载鲣鱼鱼籽肽微球模拟消化过程中黄嘌呤氧化酶抑制活性变化

在体外模拟鲣鱼鱼籽肽不同消化阶段对黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)的抑制活性,分析不同消化阶段鱼籽肽的分子量分布、氨基酸组成;并利用海藻酸钙对鱼籽肽进行包埋,分析鱼籽肽微球在模拟胃/肠液中的累计释放率及XOD抑制活性变化。结果表明,经胃消化后鱼籽肽XOD抑制活性最高,为(76.09±0.12)%;肠消化后,鱼籽肽XOD抑制活性下降到(53.02±0.48)%;分子量小于3 000 Da的多肽以及疏水性氨基酸在鱼籽肽XOD抑制活性中起重要作用;载鱼籽肽海藻酸钙微球在肠液中的累计释放率为(88.79±0.65)%,肠液中XOD抑制活性为(81.82±0.28)%,利用海藻酸钙包埋鱼籽肽明显提高了其对XOD的抑制活性。

不同紫薯馒头黄嘌呤氧化酶抑制活性及感官品质比较

该研究采用8种紫薯粉,对比了其制备紫薯面团的pH值、可滴定酸度(Titratable Acidity,TTA)值与发酵能力,分析了8种紫薯馒头活性成分含量、黄嘌呤氧化酶抑制活性、抗氧化活性以及感官品质的差异,阐明了紫薯馒头活性成分与黄嘌呤氧化酶抑制活性和抗氧化活性之间的内在联系,并筛选出一种能制备具有潜在降尿酸功能紫薯馒头的紫薯粉。结果表明,济黑一号紫薯馒头总黄酮和总花色苷含量、黄嘌呤氧化酶抑制活性、超氧阴离子自由基清除活性与还原力分别为195.70 mg RE/100 g、2.16 mg C3G/100 g、11.93μmol AE/100 g、29.07 mmol TE/100 g和2.69 mmol VE/100 g,均显著高于其它7种紫薯馒头(P<0.05)。相关性分析表明,总黄酮和总花色苷是造成不同紫薯馒头黄嘌呤氧化酶抑制活性与抗氧化活性存在差异的主要原因。济黑一号和济黑二号紫薯馒头感官评分相对较高,分别为86.56和88.22。因此,济黑一号紫薯馒头综合品质最优,济黑一号紫薯粉适用于降尿酸紫薯馒头的开发。该研究为紫薯馒头降尿酸活性的深入研究以及功能性紫薯馒头的开发与工业化生产提供理论依据。

枳椇子不同溶剂提取物对黄嘌呤氧化酶的作用及动力学研究

目的:探讨不同溶剂提取枳椇子对黄嘌呤氧化酶(XOD)的影响及其动力学模型,为研究高尿酸血症提供实验依据。方法:用水、50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇提取枳椇子,测定各提取液中黄酮类成分的含量,采用紫外分光光度法分析不同溶剂提取液对XOD的作用及动力学模型。结果:枳椇子不同溶剂提取液对XOD均有抑制作用,其中50%乙醇提取液和70%乙醇提取液的抑制作用较强,其提取液中黄酮类成分含量也较高,抑制效果呈剂量依赖性;95%乙醇提取物黄酮总量较低,但也显示出较好的抑制作用。动力学分析显示,不同溶剂提取液对XOD的亲和力值α均大于1,70%乙醇提取液对XOD的亲和力值为134.40,更易与XOD结合,各提取液均表现为混合型抑制。结论:枳椇子提取液具有抑制XOD的作用,效果以50%乙醇提取液和70%乙醇提取液为著,95%乙醇提取物对XOD的抑制效果与提取液中的其他成分相关。枳椇子提取液的抑制作用类型属于混合型抑制,即竞争性-非竞争性抑制,且竞争性抑制占主导地位。

山木瓜枝中抑制黄嘌呤氧化酶活性的化学成分研究

目的:研究山木瓜枝中抑制黄嘌呤氧化酶活性的化学成分。方法:通过活性导向分离,筛选山木瓜枝中具有抑制黄嘌呤氧化酶活性的粗提物及组分,采用多种色谱分离技术对活性部位进行系统分离,通过理化常数和光谱分析,结合相关文献确定所得化合物的结构;并对所得化合物进行黄嘌呤氧化酶抑制活性的研究。结果:从山木瓜枝的乙酸乙酯部位分离得到6个化合物,经鉴定分别为桑橙素(1)、4,6,3',4'-tetrahydroxy-2-methoxybenzophenone(2)、2,4,6,3'-tetrahydroxybenzo-phenone(3)、3,6,7-trihydroxy-1-methoxyxanthone(4)、2S,3S-3,5,7,3',5'-pentahydroxyavane(5)、丁香酸(6);实验研究证实化合物1对黄嘌呤氧化酶具有一定的抑制活性(IC50=28.9μM)。结论:从活性部位鉴定的6个化合物均为首次从该植物中分离得到,其中化合物1是主要的活性成分。

梅花总黄酮对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及其抗氧化活性评价

评价了梅花总黄酮对黄嘌呤氧化酶(XOD)的抑制作用及其抗氧化活性。通过体外评价实验测定梅花总黄酮对XOD的抑制作用,并分别采用DPPH自由基法、铁离子还原法(FRAP)和血液总抗氧化能力测定法评价其抗氧化活性。结果显示,梅花总黄酮对XOD的抑制呈现浓度依赖关系,半抑制浓度(IC50值)为85.45μg/mL;梅花总黄酮清除DPPH自由基的能力强于竹叶黄酮,但弱于维生素C和芦丁;梅花总黄酮还原铁离子的FRAP值为3.38mmol/mg,是芦丁的1.44倍和竹叶黄酮的1.29倍;血液总抗氧化能力的测定结果从强到弱依次为:维生素C>梅花总黄酮>竹叶黄酮>芦丁。研究表明,源自青梅花的生物总黄酮具有优良的生物抗氧化能力和显著的XOD抑制活性,可作为潜在的抗氧化应激和预防高尿酸血症的膳食功能因子进行深入研究和开发。

紫外分光光度法测定中药中黄嘌呤氧化酶抑制活性研究

黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制剂是一类重要的抗痛风药物。寻求具有强XOD抑制活性的天然药物及其活性成分具有重要意义。采用紫外分光光度法对一系列中药中XOD抑制活性进行了直接测定。考察了抑制活性最强药物各部分的活性,并对其主要活性部位分离出了一个活性成分,最后采用IR、MS1、H NMR和13C NMR分析手段对其进行了鉴定。结果表明,丹皮具有最强XOD抑制活性,乙酸乙酯部分为其主要活性部位,没食子酸为其活性成分之一。

异叶蛇葡萄和蛇葡萄提取物抑制黄嘌呤氧化酶和脂质氧化酶的活性研究

蛇葡萄和异叶葡萄是湖北地区应用的具有抗病毒作用的药用植物 ,它们的抗氧化活性用酶的和非酶的体外抗氧化测定方法进行研究。实验结果显示 ,两种植物的提取物具有抑制黄嘌呤氧化酶和脂质氧化酶的活性 ;用Trolox等价抗氧化能力 (TEAC)方法测定 ,显示两种提取物是ABTS· +自由基离子的清除剂 ,与葡萄种子提取物相比较 。

9种中药提取物黄嘌呤氧化酶抑制活性研究

本文考察9种中药植物（葛花、卷柏、卷柏根、猫须草、鹅不食草、高良姜、绞股蓝、鸡骨草、金银花）提取物对黄嘌呤氧化酶抑制活性。结果表明9种中药提取物在2mg／mL时均具有较好抑制活性，抑制率从33％-79％不等。葛花、猫须草和金银花半抑制浓度分别是0．65、0．96、0．74mg／mL，且猫须草、葛花抑制类型属于竞争性抑制为主的复合抑制。

2-苯基-四氢噻喃并嘧啶类化合物的合成及黄嘌呤氧化酶抑制活性

以4-羟基苯甲腈为原料,经醚化、水解、酰化、加成等反应,共合成12个新型的2-苯基-四氢噻喃并嘧啶类化合物(6a^6d,8a^8h),并进行抑制黄嘌呤氧化酶活性测试。结果表明:化合物8a^8h(100μmol/L)均表现出不同程度的抑酶活性,其活性明显强于化合物6a^6d,即嘧啶环上引入羧基有利于提高抑酶活性;在化合物8a^8h中,以嘧啶环上异丙酸取代,苯环羟基乙醚化的8f活性最强,IC50为76.0μmol/L。

车前三个不同部位中主要化学成分含量差异及其黄嘌呤氧化酶体外抑制作用比较

目的:比较车前三个不同部位中3个化学成分的含量差异及其水提物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。方法:采用HPLC法对车前草、车前子和车前取车前子后废弃植株中的大车前苷、毛蕊花糖苷和京尼平苷酸含量进行测定;同时以别嘌醇为阳性对照,测定该三个不同部位的水提物与含有黄嘌呤的反应体系反应完全后的尿酸生成量变化。结果:车前三个不同部位的提取物对黄嘌呤氧化酶均具有较好的抑制作用,且车前子药材收集后的车前废弃植株供试品溶液对黄嘌呤氧化酶的体外抑制率高达42.60%。结论:车前废弃植株提取物对黄嘌呤氧化酶的体外抑制率较高,这为车前采收后的废弃植株的资源利用提供一定的参考。

黄酮类衍生物的合成及对黄嘌呤氧化酶活性的影响

目的探讨黄酮类衍生物的合成及对黄嘌呤氧化酶(XO)活性的影响。方法以2,4,6-三羟基苯乙酮、间苯三酚和对羟基苯丙酸分别为原料,合成二氢黄酮、黄酮和二氢异黄酮类化合物;非布索坦作为阳性对照,目标化合物a~c作为实验组,以25μmol/L为起始浓度,采用尿酸(UA)法检测XO的活性,采用分子对接预测化合物与靶蛋白的结合方式。结果设计合成了化合物a~c共3个黄酮类化合物,结构经氢核磁共振(^(1)H NMR)及高分辨质谱(HRMS)确认;目标化合物a~c于25、50、100及200μmol/L浓度下均有XO抑制活性,分子对接表明化合物b与XO受体有多个氨基酸结合位点。结论设计合成的黄酮类化合物b对XO具有较好的抑制活性。

Eupatilin对黄嘌呤氧化酶活性抑制的实验研究

目的:通过体外酶学试验分析Eupatilin对黄嘌呤氧化酶活性的影响及抑制机理。方法:利用紫外分光光度计观测尿酸生成导致的吸光度变化值,测定波长为292 nm,并以黄嘌呤为底物根据测定结果绘制Lineweaver-Burk和Dixon图。结果:Eupatilin对黄嘌呤氧化酶表现很强的抑制作用,其Ki值为0.128 6μg/ml,抑制类型为混合型;而别嘌呤醇作为对照,其Ki值为0.62μg/ml,抑制类型为竞争性抑制。结论:Eupatilin具有明显的黄嘌呤氧化酶抑制活性。

Apigenin对黄嘌呤氧化酶活性抑制的实验研究

目的:通过体外酶学试验研究Apigenin对黄嘌呤氧化酶活性的影响及抑制机制。方法:运用紫外分光光度计测定尿酸生成导致的吸光度变化值,测定波长为292 nm,以黄嘌呤为底物根据测定结果绘制Lineweaver-Burk和Dixon图。结果:Apigenin对黄嘌呤氧化酶具有较强的抑制作用,其Ki值为0.151 3μg/ml,抑制类型为混合型;而别嘌呤醇作为参照,其Ki值为0.62μg/ml,抑制类型为竞争性抑制。结论:Apigenin可明显抑制黄嘌呤氧化酶活性。