一种吡唑并吡啶酮类衍生物对新型冠状病毒SARS-CoV-2的抑制作用研究

目的探究3-(4-氯苯基)-1,4-二苯基-1,4,5,7-四氢-6H-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-酮(以下简称为J1)体外抑制新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的作用及潜在作用机制。方法采用MTT法评价化合物J1对Vero-E6、ACE2/293T和HRT18细胞的毒性。利用感染性SARS-CoV-2和人冠状病毒OC43(HCoV-OC43)检测化合物J1的抗冠状病毒活性。采用SARS-CoV-2假病毒体外细胞感染模型和时间点加药实验检测J1抑制SARS-CoV-2病毒感染靶细胞的作用阶段。通过S蛋白介导的细胞融合抑制实验检测J1是否通过阻止病毒膜融合而抑制SARS-CoV-2的进入。采用SPR实验和分子对接技术阐明J1与SARS-CoV-2 S蛋白的作用。结果J1对Vero-E6、ACE2/293T和HRT18细胞的毒性较小,半数细胞毒性浓度CC50均大于100μmol·L^(-1)。J1能显著抑制SARS-CoV-2原始株和Delta变异株的活性,半数有效浓度EC50分别为607μmol·L^(-1)和221μmol·L^(-1)。此外,J1可抑制HCoV-OC43病毒的感染,显著减少NP蛋白和mRNA的表达。分子对接结果显示,J1通过氢键作用和疏水作用力与SARS-CoV-2 S蛋白活性位点稳定结合。机制研究结果表明,J1可抑制SARS-CoV-2病毒进入靶细胞,半数抑制浓度IC50为157μmol·L^(-1)。J1浓度依赖性抑制SARS-CoV-2 S蛋白介导的细胞-细胞膜融合,SPR实验证实J1与S蛋白具有较强结合能力。结论吡唑并吡啶酮类衍生物J1通过靶向S蛋白抑制SARS-CoV-2进入靶细胞。

小分子药物抑制SARS病毒的体外实验研究

目的 为探索SARS的治疗药物 ,实验观察合成的 13种小分子药物抑制SARS冠状病毒的效果。 方法 采用微孔塑料板病变法及MTT法 ,通过观察细胞病变 (CPE)及OD值测定结果 ,判定药效。 结果 13种小分子药物中 3、4、7和 8号药物在接种SARS病毒后 2 0h内对SARS冠状病毒有抑制作用 ;9号药物在接种病毒后 3 0h内药效显著 ;接种SARS病毒 3 6h后 ,SARS病毒繁殖迅速 ,48h后全部发生细胞病变 ,微孔板病变法与MTT法结果一致。 结论 13种药物中有 5种药物在2 4h内对SARS冠状病毒有一定的抑制作用 ,3 0h后所有药物细胞孔开始出现病变 ,48h后细胞全部病变、死亡 ,表明合成的 13种小的药物均不能有效地抑制SARS病毒的繁殖。

三种中药处方对SARS相关冠状病毒体外抑制作用的初步研究

探讨三种中药处方对Vero-E6细胞内SARS相关冠状病毒的抑制作用。取一定量的SARS相关冠状病毒BJ01株加入培养好的Vero-E6细胞中,置37℃、5%CO2孵箱吸附2h,吸出病毒液,再分别加入不同浓度的药物稀释液,在同样条件下培养48～72h,观察细胞病变情况。迪康注射液、连花清瘟胶囊和复方连蒲颗粒抑制Vero-E6细胞内SARS-CoV的半数有效浓度EC50分别为0.056、0.11和0.49mg/ml,治疗指数TI分别为53.6、40.3和4.0。说明上述三种中药处方在体外对SARS-CoV有一定抑制作用,

SARS冠状病毒3CL蛋白酶及其抑制剂的理论研究

应用AutoDock程序将SARS冠状病毒3CL蛋白酶及其抑制剂配体和受体进行了对接,并用InsightⅡ中的Discover3模块进行了分子动力学模拟,分析了蛋白酶活性口袋的形状,讨论了其亚基的氢键、静电、疏水等相互作用,为进一步设计药物提供了重要的参考信息.

重组人干扰素βSer^(17)的制备及其对SARS病毒的抑制作用

目的制备重组人干扰素-βSer17(rhIFN-βSer17),并检测其对SARS病毒的抑制作用。方法通过发酵收集菌体,经高压匀浆破碎收集包涵体、有机溶剂抽提、酸沉淀、柱层析纯化重组蛋白,通过细胞病变抑制法检测其对SARS病毒的抑制作用。结果研制的rhIFN-βSer17的纯度超过95%,比活性超过2.0×107IU/mg蛋白,在体外对SARS病毒具有明显的抑制作用。结论已成功制备rhIFN-βSer17,并在体外对SARS病毒具有抑制作用。

可用于SARS治疗的抗病毒药物

严重急性呼吸综合征(SARS)的爆发是对人类健康的严重威胁,在抗SARS冠状病毒(SARS-CoV)的小分子化合物和疫苗尚未面市之前,在已经注册上市的抗病毒药物中寻找对SARS-CoV有效的药物不失为一条捷径,一旦发现有效的抗SARS-CoV药物,即可直接应用于临床治疗。本文对有关药物的研究状况进行了简要总结综述。

非肽类SARS冠状病毒3CL蛋白酶抑制剂的设计与活性表征

SARS冠状病毒3CL蛋白酶是SARS病毒复制过程中的主要蛋白酶,针对其开展药物设计有望得到有效的抗SARS病毒药物.本文基于SARS冠状病毒3CL蛋白酶的三维结构,对现有化学试剂及临床用药数据库进行虚拟筛选,选出可能对SARS冠状病毒3CL蛋白酶有抑制的非肽化合物进行初步活性测试,并研究了已知的人鼻病毒3C蛋白酶抑制剂对SARS冠状病毒3CL蛋白酶的活性,合成了两种母环的衍生物,得到靛红和哌嗪两类SARS冠状病毒3CL蛋白酶的抑制剂,其中一个靛红类化合物的IC50为0.76μmol·L-1;而抗组胺药哌嗪类化合物对SARS冠状病毒3CL蛋白酶及细胞培育的SARS病毒的抑制作用,提示了老药可以开发出新的用途.

SARS病毒蛋白水解酶的三维结构模建及可能的小肽抑制剂研究

SARS is a positive-stranded virus featuring the largest viral RNA genomes today. The viral main proteinase(Hydrolase), controlling the activities of SARS virus replication , is an attractive target for therapy. We determined crystal structure for transmissible gastroenteritis virus(TGEV) hydrolase, and constructed a homology model for SARS coronavirus proteinase on Silicon Graphics station by Insight Ⅱ molecule simulation software. The structure may reveal remarkable degree of conservation of the substrate binding sites. We design an imaginable peptide precursor for inhibitor, and the base shape of pocket and property of the residues may be used as a basis for designing anti-SARS drugs.

SARS抗病毒治疗的药物选择探讨

目的 分析不同SARS抗病毒治疗方法的效果 ,为制定SARS抗病毒治疗方案提供参考。方法 采用临床流行病学回顾研究 ,使用SPSS11.0软件分析我院SARS患者的住院病历 ,分析选择不同抗病毒治疗药物治疗SARS的T细胞亚群、血象、肝肾功能变化及临床效果。结果 本文研究发现 ,利巴韦林治疗病死率为 18.0 3% ;干扰素组T细胞亚群下降值最低 ,但治愈率为 10 0 % ,与利巴韦林组比较 (P <0 .0 0 1)统计学有极显著性差异 ,并有延长T细胞亚群下降至最低值时间的趋势 (P >0 .0 5 ) ;干扰素与利巴韦林联合治疗可延长T细胞亚群下降至最低值的时间 ,CD3 与利巴韦林组比较 (P <0 .0 5 )统计学有显著性差异 ,病死率为 6 .0 6 % ,与利巴韦林组比较 (P <0 .0 5 )统计学有显著性差异 ,并低于文献报道水平 (6 .5 % )。干扰素组对SARS患者血象及肝肾功能的影响最小 ,各组与利巴韦林组比较 (P >0 .0 5 )统计学无显著性差异。结论 干扰素或干扰素联合利巴韦林抗病毒治疗效果优于单独使用利巴韦林的效果。干扰素抗病毒治疗效果最好。

二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003抗戊型肝炎病毒的研究

研究二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003对戊型肝炎病毒(HEV)复制的影响,为抗HEV治疗提供新型候选药物。用带有高斯荧光素酶的HEV复制子模型研究ASLAN003是否具有抗HEV作用,实时荧光定量PCR和间接免疫荧光检测ASLAN003对HEV RNA复制以及衣壳蛋白表达的抑制作用,细胞毒性试验和间接免疫荧光计算ASLAN003的半数毒性浓度(CC_(50))和半数抑制浓度(IC_(50))。结果表明,ASLAN003在0.2~50μmol/L浓度范围内能显著抑制HEV复制子在HEK 293T和Huh7细胞内的复制;ASLAN003在1μmol/L浓度能有效抑制HEV RNA复制,使其下降50%;在0.4μmol/L的浓度能够显著抑制衣壳蛋白ORF2的表达。通过对ASLAN003的细胞毒性和抑制HEV效果进行研究发现,其CC_(50)为294μmol/L,而IC_(50)为0.231μmol/L。说明ASLAN003能够有效抑制HEV复制,提示其可作为潜在抗病毒药物。

抗病毒药物奥司他韦专利技术现状

相关技术概述奥司他韦是一种抗流感病毒药物,其抗病毒作用原理是活性代谢产物作为选择性的流感病毒神经氨酸酶抑制剂抑制病毒从被感染的细胞中释放,进而减少流感病毒的传播。磷酸奥司他韦是当前应用十分广泛的流感治疗药物。奥司他韦的适应证包括:成人和儿童的甲型和乙型流感治疗,以及用于成人和13岁以上青少年预防甲型和乙型流感。

常用抗病毒蛋白酶抑制剂药物相互作用研究进展

病毒对人类健康造成严重危害,且病毒性疾病常伴随感染性和非感染性并发症,抗病毒药物常需要与其他药物联合使用。蛋白酶抑制剂作为一类重要的抗病毒药物被广泛使用,但药动学相对复杂。常用抗病毒蛋白酶抑制剂与多种临床药物联用存在潜在药物相互作用。本文综述了常用抗病毒蛋白酶抑制剂的潜在药物相互作用及机制,以期为临床安全、合理用药提供参考。

土贝母苷可有效抑制新冠病毒和埃博拉病毒复制

近日,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所重要人兽共患病与烈性外来病创新团队在新冠病毒和埃博拉病毒入侵细胞机制及其抗病毒药物发现取得重要进展,发现土贝母苷这一植物提取物,可有效抑制新冠病毒和泛丝状病毒复制,发挥抗病毒作用。相关研究成果发表在《自然·通讯(Nature Communications)》上。

丹酚酸B及其镁盐通过阻止病毒融合抑制SARS-CoV-2感染靶细胞

目的探究中药单体丹酚酸B(Sal-B)及其镁盐体外抑制SARS-CoV-2感染靶细胞的效果及作用机制。方法利用感染性SARS-CoV-2及SARS-CoV-2假病毒体外细胞感染模型,检测Sal-B及其镁盐制剂注射用丹参多酚酸盐(ZDDY)的抗SARSCoV-2活性;利用分子对接技术与分子动力学模拟技术,寻找Sal-B的抗病毒作用靶点;利用圆二色谱技术,检测六螺旋束(6-HB)的α-螺旋构象;利用SARS-CoV-2 S蛋白介导的细胞-细胞融合体系,检测Sal-B是否作用于新冠病毒入侵宿主的膜融合过程;利用流式细胞术,检测Sal-B是否作用于新冠病毒受体结合区RBD蛋白。结果Sal-B与ZDDY在非洲绿猴肾细胞(Vero-E6)感染模型上抑制SARS-CoV-2的半数有效浓度EC50分为55.47μmol/L,36.07μg/mL;Sal-B与ZDDY抑制SARS-CoV-2的进入阶段,抑制SARS-CoV-2假病毒活性的IC_(50)分别为1.69μmol/L,24.81μg/mL;Sal-B可与SARS-CoV-2 S2亚基的8个氨基酸位点结合,亲和力为-8.2 kcal/moL,Sal-B在分子对接预测位点与SARS-CoV-2 S2亚基稳定结合;Sal-B干扰SARS-CoV-2 HR1与HR2形成6-HB,显著降低6-HB的α-螺旋百分比(P<0.05);Sal-B浓度依赖性抑制SARS-CoV-2 S蛋白介导的细胞-细胞膜融合,IC_(50)为3.33μmol/L;Sal-B不影响SARS-CoV-2 RBD蛋白与受体ACE2结合。结论Sal-B及其镁盐制剂ZDDY体外可有效抑制SARS-CoV-2感染靶细胞,Sal-B通过抑制病毒膜融合过程发挥抗SARS-CoV-2活性。

冠状病毒主要蛋白酶（3CLpro）结构：抗—SARS药物研制的基础

德国科学家有关3个冠状病毒Mpro的三维结构作为抑制剂设计的基础。

SARS冠状病毒的基因组结构与药物治疗

介绍了SARS冠状病毒的基因组结构及其作用机制的最新研究进展,探讨了抗SARS病毒药物的研制。