中药复方抑瘤饮影响荷S180瘤小鼠免疫功能的动态研究

研究荷S180瘤小鼠灌服中药复方抑瘤饮(简称抑瘤饮)不同时间点脾细胞免疫功能的动态变化,揭示其体内抗瘤的免疫机制。于BALB/c小鼠右腋皮下接种S180细胞,24 h后,抑瘤饮组开始每日灌服抑瘤饮,对照组灌服等量凉开水。分别于灌服第0、10、20、30、40天处死动物,称取体重和瘤重;无菌获取脾细胞,MTT法检测NK细胞杀伤活性、ConA诱导转化及IL-2诱生活性,流式细胞仪检测CD4+细胞和CD8+细胞百分率。结果显示,抑瘤饮对小鼠体内S180移植肿瘤的生长,有明显的渐增性抑制作用;抑瘤饮能够明显逆转S180移植肿瘤对小鼠脾细胞的NK细胞杀伤率、转化指数、IL-2诱生活性、CD4+细胞和CD8+细胞百分率的抑制作用,且逆转作用呈时间依赖性增强。表明抑瘤饮体内能够渐增地上调被S180移植肿瘤抑制的免疫功能,从而发挥抗瘤作用。

抑瘤饮增加小鼠S180移植瘤巨噬细胞浸润及TNF-α和iNOS表达

目的动态研究中药复方抑瘤饮对小鼠S180移植瘤内巨噬细胞(Mφ)浸润及TNF-α和iNOS表达的影响,揭示其体内抗瘤免疫机制。方法Balb/c小鼠右腋皮下接种S180肿瘤细胞,24h后,抑瘤饮组小鼠每日灌服抑瘤饮,对照组小鼠每日灌服等量凉开水。分别于第10、20、30天和第40天杀鼠取瘤制成切片,免疫组化染色法检测肿瘤组织内Mφ浸润及TNF-α和iNOS表达,以图像分析系统对染色结果进行测定。结果所有4个时间点抑瘤饮组Mφ浸润均显著高于对照组;第10天时抑瘤饮组TNF-α和iNOS表达与对照组无差异,第20、30天和第40天时高于对照组。结论抑瘤饮体内抗瘤作用可能与增加肿瘤组织中Mφ浸润及TNF-α和iNOS表达有关。

抑瘤饮影响小鼠S180移植瘤组织中Bcl-2和Bax表达的动态研究

目的动态研究中药复方制剂抑瘤饮体内对小鼠S180移植肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达的影响。方法BALB/c小鼠右腋皮下接种S180肿瘤细胞24 h后开始,抑瘤饮组小鼠每日灌服抑瘤饮,对照组小鼠每日灌服等量凉开水。分别于第10、20、30、40 d杀鼠取瘤制成切片,免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达,以图像分析系统对染色结果进行测定。结果各时间点抑瘤饮组肿瘤组织中Bcl-2表达均低于对照组,Bax表达均高于对照组。结论抑瘤饮体内抑瘤作用可能与下调肿瘤组织中Bcl-2表达,上调肿瘤组织中Bax表达,促进肿瘤细胞凋亡有关。

扶正抑瘤饮抑瘤作用的实验研究

目的 :观察扶正抑瘤饮对人胃癌细胞株体外增殖的影响 ,及其对小鼠移植性肉瘤的抑制作用 .方法 :应用MTT比色法 ,检测不同浓度扶正抑瘤饮 (简称中药ZY)对不同分化程度的 3株人胃癌细胞增殖的影响 .并以小鼠移植性肉瘤180为模型 ,随机分空白对照组 ,ELF化疗方案组 (ELF) ,扶正抑瘤饮组 (ZY) .观察其对小鼠移植性肉瘤的抑制作用 .结果 :中药对 3株胃癌细胞均呈现一定程度的抑制作用 ,但其对不同细胞株敏感性有差异 .中药浓度在 1× 10 -2 ～ 1× 10 3mg·L-1之间 ,对SGC 790 1,880 1细胞株增殖的抑制作用与剂量无明显相关 ,而对MGC 80 3细胞株增殖的抑制作用随浓度升高而增强 ,当浓度为 1× 10 3 mg·L-1时 ,抑制率最大 (4 1.1±5 .4 ) % .中药对小鼠移植性肉瘤 (91.0 % )与ELF组肿瘤生长抑制率 (93.1% ) ,ZY组平均瘤重 (0 .131± 0 .0 18)g与ELF组(0 .0 10± 0 .0 0 8)g相比 ,均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) .ZY组小鼠体质量变化量 (6 .80± 0 .5 4 )g与空白对照组 (5 .5 0± 2 .2 7)g相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,但ELF组小鼠体质量变化量(0 .4 3± 0 .15 )g明显小于空白对照组和ZY组 (P <0 .0 5 ) .结论 :扶正抑瘤饮对人胃癌细胞株SGC 790 1,880 1的抑瘤作用与浓度无明显关系 ,但对MGC 80 3细胞株的抑?

扶正抑瘤饮及其配伍不同化疗药物对人胃癌细胞增生的抑制作用

目的:研究扶正抑瘤饮及其配伍不同化疗药物后对体外人胃癌细胞的影响.并探讨中药抑制人胃癌细胞增生的可能的作用机制. 方法:取两株人胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803细胞, 分别加入中药及其分别配伍不同的化疗药物及方案(包括化疗药物Vp-16,ADM,5-FU,DDP以及化疗方案EAP, EFP),分别采用MTT法观察各组药物作用胃癌细胞24h, 48 h,72 h后对两种胃癌细胞增生的抑制作用.并通过流式细胞仪测定各组药物作用胃癌细胞72 h后的胃癌细胞凋亡率和坏死率.同时通过透射电镜观察中药作用72 h后的胃癌细胞的细胞超微结构的变化. 结果:透射电镜下可以观察到中药引起胃癌细胞发生典型的凋亡细胞形态学的改变.经t检验,结果显示中药与4种化疗药物2种化疗方案联用24,48,72 h后,对两株胃癌细胞均有协同抑制作用,且随着药物作用时间的延长, 其协同抑制作用也增强.中药与ADM联用对人胃癌细胞株SGC-7901,MGC-803的协同抑制作用均为最弱,分别为(55.4±4.8 vs 20.1±5.5,t=2.41,P=0.02<0.05; 50.7±6.4 vs 14.8±2.7 t=2.42,P=0.02<0.05).其中中药与EFP化疗方案联用对SGC-7901细胞株协同抑制作用较强,分别为(79.4±2.8,83.3±4.8,87.5±4.3,t=2.85, P=0.005<0.05).而中药与DDP(70.2±3.5,80.1±3.6, 84.3±7.5,t=2.42,P=0.02<0.05)和与EFP(82.6±7.8, 87.5±3.1,89.9±4.8,t=2.96,P=0.005<0.05)化疗方案联用对MGC-803细胞株的协同抑制作用较强.且中药与DDP和EFP化疗方案联用72 h对MGC-803细胞株的抑瘤率相近且高于其他治疗(P<0.05).中药与不同的化疗药物及方案联用,对不同分化程度的人胃癌细胞株所产生的协同增效作用不同. 结论:扶正抑瘤饮通过诱导细胞凋亡抑制肿瘤细胞的增生,并与化疗药物有协同效果,但与不同药物联用的协同效率和产生协同效果的机制不同.且中药与单药联用的抑瘤率不一定低于与化疗方案联用的抑瘤率.中药与化疗或与化疗方案联用对不同分化程度的胃癌的抑制作用也存在敏感性差异.

抑瘤饮对胆管癌细胞增殖和凋亡的影响及机制

目的观察中药复方抑瘤饮对胆管癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法取胆管癌QBC939细胞,随机分为抑瘤饮低、中、高浓度组和对照组,抑瘤饮低、中、高浓度组分别加入6、8、12 mg/m L抑瘤饮,对照组加入PBS,培养24 h。采用Hoechst 33258荧光染色法观察细胞形态学改变; CCK-8法测算各组培养24、48 h的细胞增殖抑制率;流式细胞仪测算细胞凋亡率; Western blotting法检测凋亡相关蛋白PARP、Caspase-9、Caspase-12、Bax、Bcl-2表达。结果与对照组比较,抑瘤饮高浓度组细胞呈明显的形态学改变,细胞核染色质固缩,核内荧光分布不均匀,出现畸形核。抑瘤饮各浓度组细胞增殖抑制率均高于对照组,其中抑瘤饮高浓度组细胞增殖抑制率高于低、中浓度组,各组48 h时的细胞增殖抑制率高于24 h(P均<0. 05)。抑瘤饮各浓度组细胞凋亡率均高于对照组(P均<0. 05)。抑瘤饮各浓度组PARP、Caspase-9、Caspase-12、Bax蛋白表达均高于对照组,Bcl-2蛋白表达均低于对照组(P均<0. 05)。结论抑瘤饮能够抑制胆管癌细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与Caspase的内源信号凋亡途径有关。

扶正抑瘤饮和全量、半量氟尿嘧啶联用对胃癌细胞的抑制作用

目的:研究扶正抑瘤饮(简称中药)联用全量、半量血浆峰浓度氟尿嘧啶(5-Fu)对体外胃癌细胞增殖的影响。方法:中药分别联用全量、半量血浆峰浓度5-Fu,并以全量血浆峰浓度5-Fu(125 μg/ml)为对照。采用 MTT、法观察各组对胃癌细胞的抑制作用。结果:与5-Fu 组比较,中药加半量5-Fu 组对8801、MGC-803细胞株抑瘤率差异无显著性;对 SGC-7901细胞株,抑瘤率高于单用5-Fu 组(P<0.05)。对8801细胞株,中药加全量5-Fu 组与5-Fu 组比较抑制率差异无显著性;对 SGC-7901、MGC-803细胞株,中药高浓度联用组抑瘤率显著高于5-Fu 组(P<0.05)。结论:中药对不同分化程度的胃癌细胞的增殖均有不同程度的抑制作用。且中药可增强半量血浆峰浓度5-Fu 的抑瘤率,高浓度的中药可增强血浆峰度5-Fu 对部分肿瘤细胞株的抑瘤作用。

基于动物实验和网络药理学探讨子芪抑瘤饮治疗卵巢癌的潜在机制

目的基于动物实验和网络药理学探讨子芪抑瘤饮治疗卵巢癌的潜在机制。方法动物实验观察子芪抑瘤饮对皮下成瘤的影响,利用HE染色观察瘤体的形态学改变;通过生物信息学技术进行基因富集分析;利用免疫组织化学染色检测Ki67、TP53、ESR1、EGFR、VEGFA的蛋白表达水平。结果子芪抑瘤饮能显著减小卵巢癌瘤体的体积和质量(P<0.05),上皮细胞异型性和病理性核分裂象减少。通过数据库共检索到子芪抑瘤饮的154个活性成分,283个潜在靶点,药物与疾病交集靶点38个。PPI网络分析以及GO和KEGG通路富集分析得到TP53、ESR1、AKT1、EGFR等10个核心靶点,分子功能主要为分子结合、催化活性等,生物学进程主要为分子代谢、刺激反应等。免疫组织化学染色显示子芪抑瘤饮显著降低了Ki67、TP53、ESR1的表达(P<0.05)。结论子芪抑瘤饮可能通过槲皮素、木犀草素、山柰酚等关键成分作用于TP53、ESR1等靶点抑制卵巢癌细胞增殖和耐药,促进凋亡等。

中药复方抑瘤饮对小鼠S180移植瘤血管生成的动态研究

目的:研究荷S180瘤小鼠灌服中药复方抑瘤饮不同时间点肿瘤内血管生成的动态变化,揭示抑瘤饮体内抗瘤的作用机制。方法:56只BALB/c小鼠随机分为抑瘤饮组和对照组(n=28),每组分为4个亚组(每亚组7只)。右腋皮下接种S180肿瘤细胞24 h后,抑瘤饮组小鼠灌服抑瘤饮,对照组小鼠灌服等量凉开水,每日2次,每次0.5 mL;2组分别于灌服第10,20,30,40天点各处死一亚组小鼠。分离肿瘤制成石蜡包埋切片,免疫组化法检测肿瘤组织内血管生成(CD34染色)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)和内皮抑素(ES)的动态变化,结果以阳性酶点(positive enzyme dot,PED)表示。结果:抑瘤饮能显著降低肿瘤组织内微血管生成:抑瘤饮组CD34在第10,20,30,40天点PED均低于对照组(分别P<0.05,P<0.01,P<0.01和P<0.01)。抑制VEGF和VEGFR-2的表达:抑瘤饮组VEGF在第10,20,30,40天点PED均低于对照组(分别P<0.05,P<0.01,P<0.01和P<0.01):抑瘤饮组VEGFR-2在相应时间点均低于对照组(分别P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01)。促进ES的表达:抑瘤饮组ES在相应时间点与对照组比第10天点PED无明显差异,在第20,30,40天点PED均高于对照组(分别P<0.05,P<0.05和P<0.01)。结论:抑瘤饮体内可通过下调VEGF和VEGFR-2表达,上调ES表达,抑制肿瘤组织内血管生成发挥抗瘤作用。

扶正抑瘤饮对消化道恶性肿瘤患者细胞免疫功能的影响

目的 :观察扶正抑瘤饮对接受化疗的消化道肿瘤患者细胞免疫功能的影响。方法 :6 0例中晚期消化道肿瘤患者随机分成治疗组 (化疗加中药 )、对照组 (单纯化疗 ) ,在 1个疗程化疗前后分别检测患者外周血 T淋巴细胞亚群、可溶性白细胞介素 - 2受体 (s IL- 2 R)含量 ,并与正常组作比较。结果 :化疗前与正常组相比 ,治疗组、对照组外周血 CD4 + 细胞比例均减少 ,CD+ 8细胞比例升高 ,CD+ 4/ CD+ 8比值降低 (P <0 .0 5 ) ;s IL- 2 R含量明显升高 (P <0 .0 1)。化疗后与化疗前相比 ,对照组外周血 CD+ 4细胞比例下降 ,CD+ 8细胞比例升高 ,CD+ 4/ CD+ 8比值下降 ,外周血s IL - 2 R含量升高 ;而治疗组 CD+ 4细胞比例明显升高 ,CD+ 4/ CD+ 8比值上升 ,s IL - 2 R含量下降 ,差异均有显著性意义(P <0 .0 5 ) ;结论

抑瘤饮影响S180瘤组织中Bcl2和Bax表达的动态研究

凋亡相关基因Bcl2和Box的表达与肿瘤细胞凋亡与否密切相关。抑瘤饮是依中医抗肿瘤理论组成的中药复方水煎剂，其主要成分为：黄芪、党参、云芝、三七、仙鹤草、墨旱莲、鸡血藤、卷柏、大枣、陈皮等；临床和动物实验显示其在体内确有一定抗肿瘤效果，但尚不知其在体内是否对肿瘤细胞凋亡相关基因表达有影响。为此，本研究以56只BALB／c小鼠于右腋皮下接种S180瘤细胞使成为荷瘤小组。随之分为4组，每组14只，再随机分为抑瘤饮组和对照组各7只。自荷瘤翌日起．抑瘤饮组以抑瘤饮．

复方抑瘤饮对原发性肝癌术后患者预后及血清IgG、IgA、NK水平的影响

研究复方抑瘤饮对原发性肝癌术后患者预后及血清IgG、IgA、NK水平的影响。方法:选取我院2017年4月至2019年4月收治的原发性肝癌术患者60例,按随机数字表法分为对照组和试验组,各30例。两组患者均行原发性肝癌切除术,对照组患者于术后服用水飞蓟宾胶囊及维生素C片治疗,试验组患者于术后给予复方抑瘤饮治疗,3个月为1个疗程,两组均连续治疗1个疗程。比较治疗前后两组患者中医症候积分、血清IgG、IgA、NK水平,治疗期间两组患者的不良反应发生率。结果:与治疗前相比,治疗后两组患者的腹痛、神疲乏力、形体消瘦等分值、血清IgG、IgA水平均降低,且试验组的数据比对照组低;而血清NK水平均升高,且试验组的数据比对照组高;试验组的不良反应发生率为3.33 %,低于对照组的23.33%(均P<0.05)。结论:复方抑瘤饮能够增强原发性肝癌术后患者的患者的免疫功能,从而改善患者临床症状,且患者预后良好,不良反应较少。