抑癌基因P16INK4在sf9细胞中的表达和鉴定

目的 :利用杆状病毒表达系统在体外表达抑癌蛋白P16 ,为研究P16蛋白的结构与功能及其在肿瘤生物治疗中的应用奠定基础。方法 :①利用定向克隆的方法将P16全基因序列插入转移载体 pSX IVVI+ X3 的EcoRI、SalI位点上 ,经氨苄青霉素平板初筛、菌落原位杂交、PCR扩增酶切电泳鉴定后 ,分离含P16的重组转移载体—pSXIVVI+ X3 16 ;②用昆虫杆状病毒TnNPV SVI G感染sf9细胞扩增病毒 ,用PEG法沉淀病毒、酚 /氯仿抽提纯化病毒DNA ;③CaCl2 沉淀法使重组转移载体—pSXIVVI+ X3 16和病毒TnNPV SVI GDNA共转染sf9细胞。通过多角体观察和PCR法鉴定重组病毒 ;④经空斑纯化法纯化重组病毒 ,重组病毒感染草地夜蛾细胞 (sf9)使P16大量表达 ,经SDS PAGE及WesternBlot鉴定所表达的P16蛋白。结果 :①筛选出两株含P16全基因的重组转移载体—pSXIVVI+ X3 16 ;②构建了含P16全基因序列的重组杆状病毒TnNPV p16 ;③SDS PAGE电泳显示重组病毒TnNPV P16感染sf9细胞的培养上清及胞体裂解物和阳性对照Hela细胞裂解物在 16kD左右均有蛋白条带 ,而阴性对照TnNPV SVI G感染的sf9细胞培养上清中无此蛋白条带 ,经免疫印迹染色证实此蛋白为抑癌蛋白P16。结论 :利用我国自己构建的昆杆状病毒表达系统成功了表达P16蛋白 ,分子量大小及特异?

抑癌基因p16INK4变异与肿瘤基因治疗

肿瘤抑制基因ｐ１６ＩＮＫ４在肿瘤中的变异及治疗越来越受到重视。本文主要对抑癌基因ｐ１６ＩＮＫ４在肿瘤细胞系与原发性肿瘤中的变异及其在肿瘤基因治疗方面的最新研究进展作一综述。

食管鳞癌中hMLH1、E-cadherin、p16^INK4a基因启动子甲基化及其意义

背景与目的:目前认为抑癌基因启动子甲基化导致转录抑制是恶性肿瘤发生的重要机制之一,hMLH1、E-cadherin及p16INK4a基因在多种恶性肿瘤中都已被证实存在较高频率的甲基化。本研究通过检测食管鳞癌组织及癌旁组织中hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因启动子甲基化的发生情况,探讨hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因启动子甲基化在食管鳞癌发生发展中的作用。方法:采用酚-氯仿法提取105例食管鳞癌组织及癌旁组织的基因组DNA,应用甲基化特异性PCR对所提DNA进行hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因甲基化检测。采用EnVison免疫组织化学二步法对癌组织中上述3种基因蛋白表达进行检测。结果:癌组织中E-cadherin、hMLH1、p16INK4a基因启动子甲基化的阳性率分别为57.1%(60/105)、20.9%(22/105)和50.5%(53/105),而癌旁食管组织中相应的3个基因的甲基化率分别为10.5%(11/105)、1.9%(2/105)和7.6%(8/105),均显著低于癌组织。E-cadherin(P=0.021)及p16INK4a(P=0.026)基因甲基化与蛋白表达缺失密切相关,而hMLH1基因甲基化与蛋白表达无显著相关性。E-cadherin基因启动子甲基化与淋巴结转移有关(P=0.016),p16INK4a基因启动子甲基化与低分化癌有关性(P=0.024)。hMLH1基因甲基化与各项临床病理特征均无关。结论:食管鳞癌中p16INK4a基因启动子甲基化与相应蛋白表达缺失密切相关,且在低分化癌中更多见;E-cadherin基因启动子甲基化与相应蛋白质表达缺失有相关性,并且有淋巴结转移多见的显著特征,这2个基因的甲基化位点与食管鳞癌密切相关。hMLH1基因甲基化可能并不直接参与食管鳞癌的发生、发展。

胃癌中p16^(INK4a)和RB基因甲基化状况及其表达

目的 :研究胃癌组织中 p16 INK4a和视网膜母细胞瘤易感基因 (RB)启动子区域的甲基化状况 ,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达及其临床病理指标的关系。方法 :采用甲基化特异性PCR方法对 81例胃癌和 10例正常胃黏膜中 p16 INK4a和RB启动子区域甲基化状况进行检测 ,并采用免疫组织化学方法对 p16 INK4a和视网膜母细胞瘤蛋白 (pRb)表达情况进行相应检测。 结果 :胃癌中 p16 INK4a和RB基因的甲基化率分别为 37% (30 / 81)和 4 2 % (34/81) ;胃癌p16 INK4a蛋白和pRb表达阳性率分别为 5 4 % (4 4 / 81)和 90 % (73/ 81)。 10例正常胃黏膜中均未检测到p16 INK4a和RB异常甲基化 ,而且其相应蛋白表达均为阳性。 p16 INK4a甲基化状况与其蛋白表达有相关性 ,但p16 INK4a甲基化状态与肿瘤分化程度、淋巴结转移、性别及年龄均不相关。RB甲基化状态与pRb表达、肿瘤分化程度、性别及年龄无相关性 ,但与淋巴结转移相关。结论 :p16 INK4a和RB异常甲基化是胃癌细胞常见的分子事件 ,可能参与了胃癌的发生发展过程。RB异常甲基化与胃癌淋巴结转移相关 ,提示RB甲基化检测对于分析胃癌淋巴结转移情况可能有一定参考价值。p16 INK4a基因启动子区域高甲基化是其蛋白表达抑制的重要机制。

结直肠癌患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化状态观察

目的观察结直肠癌(CRC)患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化状态。方法 CRC患者50例(肿瘤组)、结直肠良性病变者50例(良性组)、健康体检者50例(正常组),采用甲基化特异度PCR的方法检测各组粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化检出率,并分析其与CRC临床病理参数的关系。根据肠镜病理诊断结果进行验证,比较粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A单独及联合检测诊断CRC的敏感度和特异度。结果肿瘤组、良性组、正常组粪便p16INK4a基因甲基化检出率分别为74%、28%、14%,MGMT基因甲基化检出率分别为56%、24%、12%,RASSF1A基因甲基化检出率分别为72%、20%、10%,肿瘤组分别与正常组、良性组比较,P均<0.05。p16INK4a基因甲基化状态与CRC分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关,MGMT基因甲基化状态与CRC淋巴结转移相关,RASSF1A基因甲基化状态与CRC分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关,P均<0.05。三者联合检测诊断CRC的敏感度为95.8%,特异度为83.4%,ROC曲线下面积为0.816(95%CI 0.739%~0.894%)。结论 CRC患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化检出率明显高于结直肠良性病变者及健康体检者,联合检测上述指标有助于CRC患者的早期诊断及其生物学行为的判断。

抑癌蛋白p16INK4a:一种新的衰老调控因子

p16INK4a是一种非常重要的抑癌蛋白,可通过抑制癌细胞的分裂和诱导癌细胞的死亡而减少癌症的发生,因此它的缺失或异常将增加患癌症的概率。最新的研究却发现,p16INK4a还有另外一个重要作用,通过诱发老龄哺乳动物干细胞功能下降而促使衰老的产生,至少在骨髓、前脑、胰岛细胞和角化细胞等类型细胞中被证实。这个发现使人们对p16INK4a功能和衰老分子机制有了新的理解,因此为更好的临床应用提供了重要的材料。

肺癌p14ARF和p16INK4a基因协同表达缺失及其意义

目的 :研究抑癌基因位点INK4a ARF在肺肿瘤细胞中的表达状况 ,揭示p14ARF和p16INK4a协同表达缺失与肺癌发生发展的相关性。方法 :用RT PCR和Westernblot对 6株肺癌细胞 (SPC A 1,Calu 1,H44 6 ,SH77,A5 49,H46 0 )的INK4a ARF基因位点在mRNA、蛋白质水平上进行检测 ,对PCR产物进行纯化和测序分析。结果 :6株肺癌细胞中 ,有 3株细胞 (H46 0 ,Calu 1,A5 49)的p16INK4a基因表达缺失 ,其中 ,Calu 1表达正常p14ARF的mRNA ,而在H46 0和H5 49这两株非小细胞肺癌中 ,p14ARF和p16INK4a发生协同表达缺失。结论 :p14ARF基因与p16INK4a一样 ,是肺肿瘤细胞中的失活靶点之一。揭示了p14ARF缺失导致p5

粪便中MGMT,p16^(INK4A)及ECAD基因启动子甲基化检测在结直肠癌诊断中的价值

目的探讨粪便中p16INK4A、ECAD及MGMT基因启动子甲基化在结直肠癌诊断中的应用价值。方法选择我院老年病科2014年2月至2015年11月收治的65岁以上老年健康者50例(对照组)、结直肠镜检查证实良性结直肠疾病者41例(良性肠病组)和结直肠癌患者46例(肠癌组)为研究对象。采用表观遗传学方法应用甲基化特异PCR对上述患者粪便中p16INK4A、MGMT和ECAD基因启动子DNA甲基化进行检测,判断上述标本中各基因启动子的甲基化水平。根据p16INK4A、MGMT和ECAD基因启动子DNA甲基化水平,评价其作为诊断结直肠癌的敏感性和特异性。结果对照组、良性肠病组和肠癌组p16INK4A基因启动子DNA甲基化率分别为14.0%、24.4%和71.7%;MGM基因甲基化率分别为16.0%、14.6%和54.3%;ECAD基因甲基化率分别为12.0%、19.5%和65.2%。上述基因启动子甲基化率在肠癌组明显高于对照组和良性肠病组,差异均有统计学意义(P<0.05);p16INK4A、MGMT和ECAD诊断肠癌的敏感性分别为0.72、0.54和0.65,特异性分别为0.76、0.75和0.80。结论 p16INK4A、MGMT和ECAD基因启动子甲基化发生率在肠癌患者粪便中显著增高,可作为肠癌诊断的分子标志物。

河南食管癌高发区居民食管癌组织p15INK4b和p16INK4a基因变化的研究

基因丢失导致ｐ１６ＩＮＫ４ａ和（或）ｐ１５ＩＮＫ４ｂ对ＣＤＫ激酶的抑制作用丧失，从而导致细胞增生调节失控［１－３］，目前在多种肿瘤中已发现存在ｐ１５ＩＮＫ４ｂ和ｐ１６ＩＮＫ４ａ的失活现象［４－６］．作者近年对河南食管癌高发区林州市居民的研究证实，肿瘤...

Bcl2转录抑制因子1、E-钙黏蛋白在宫颈鳞状细胞癌不同区域的表达及两者与P16INK4a表达的关系

目的检测宫颈鳞状细胞癌肿瘤出芽区及肿瘤中央区失巢凋亡因子Bcl2转录抑制因子1(Bit1)、上皮-间质转化(EMT)标志物E-钙黏蛋白及P16INK4a的表达情况,探讨Bit1、E-钙黏蛋白在宫颈癌获得高侵袭力过程中的意义及二者与P16INK4a表达的关系。方法收集甘肃省肿瘤医院病理科2014-2018年宫颈鳞状细胞癌石蜡包埋标本77例。采用免疫组织化学法检测宫颈鳞状细胞癌肿瘤出芽区及中央区Bit1、E-钙黏蛋白、P16INK4a的表达情况。以肿瘤中央区及出芽区各蛋白质表达评分的中位数作为分界点,将标本分为高表达组和低表达组,分析在不同P16INK4a表达情况下Bit1及E-钙黏蛋白的表达差异及二者与患者临床病理特征的关系,并进一步分析在肿瘤中央区及出芽区Bit1与E-钙黏蛋白的相关关系。统计学分析采用χ2检验或连续校正χ2检验和Spearman等级相关分析。结果77例宫颈鳞状细胞癌标本中,肿瘤中央区P16INK4a、E-钙黏蛋白、Bit1高表达率分别为32.5%(25/77)、67.5%(52/77)、63.6%(49/77),而在肿瘤出芽区分别为67.5%(52/77)、33.8%(26/77)、37.7%(29/77),差异有统计学意义(χ2=18.935、17.561、10.391,P均<0.01)。无论在肿瘤出芽区还是中央区,P16INK4a高表达组与P16INK4a低表达组Bit1及E-钙黏蛋白的表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。肿瘤中央区Bit1低表达与脉管内癌栓及淋巴结转移有关(χ2=5.053、4.400,P均<0.05),肿瘤出芽区E-钙黏蛋白和Bit1低表达均与淋巴结转移有关(χ2=5.580、7.573,P均<0.05)。Spearman等级相关分析显示,在肿瘤中央区及肿瘤出芽区E-钙黏蛋白与Bit1表达均呈正相关(r=0.287,P=0.011;r=0.236,P=0.039)。结论宫颈癌侵袭力的增高与Bit1及E-钙黏蛋白表达降低及P16INK4a表达增高有关,宫颈癌细胞可能通过抑制Bit1获得失巢凋亡抗性并影响EMT的发生从而获得更高的侵袭能力,但P16INK4a并未参与此过程。

抑癌基因p16^(INK4)真核表达转移载体的构建

目的 构建可应用于昆虫杆状病毒表达系统的含抑癌基因p16 INK4cDNA的重组转移载体。方法 采用定向克隆方法将抑癌基因p16 INK4cDNA全长插入转移载体质粒pSXIVVI+ X3,并经斑点杂交 ,PCR及酶切鉴定重组质粒。结果 经三种鉴定方法证实p16 INK4cDNA片段成功地插入转移载体pSXIVVI+ X3。结论 重组质粒pSXIVVI+ X3 p16构建成功 ,为真核表达抑癌基因p16 INK4奠定了基础。

喉鳞状细胞癌中p16^(INK4a)基因甲基化状况及表达

目的研究喉鳞状细胞癌p16INK4a基因启动子区域5′CpG岛的甲基化状况,探讨基因异常甲基化与蛋白表达及其临床病理指标的关系。方法采用甲基化特异性PCR检测30例喉鳞状细胞癌及15例远离肿瘤的正常喉黏膜中p16INK4a基因启动子区域5′CpG岛的甲基化状况,并应用免疫组化EnVision法检测p16INK4a蛋白的表达情况。结果30例喉鳞状细胞癌中p16INK4a基因启动子区5′CpG岛甲基化率76.7%(23/30);p16INK4a蛋白缺失率为93.3%(28/30)。15例正常喉黏膜中未检测到p16INK4a基因异常甲基化,而且其相应蛋白表达均为阳性。p16INK4a基因甲基化状况与其蛋白表达和临床分期密切相关。结论p16INK4a基因5′CpG岛异常甲基化在喉鳞状细胞癌中频率很高,可能在喉癌发生、发展中扮演重要角色;而且这可能是一个早期事件,其临床早期诊断和基因治疗意义均值得进一步深入探讨。

粪便中MGMT、p16INK4A及ECAD基因启动子甲基化在结直肠癌筛查的临床应用价值

目的探讨结直肠癌筛查中MGMT、p16INK4A和ECAD基因DNA启动子甲基化等指标的意义。方法针对本院老年病科室收治的50例年龄在65岁以上的实施结肠镜检查无器质性病变的老年健康患者作为对照组,选择46例结直肠癌患者作为肠癌组,选择41例经结直肠镜病理检查确诊为良性结直肠疾病的患者作为良性肠病组,观察时间为2016年2月至2017年11月。采用表观遗传学方法应用甲基化特异PCR对上述患者粪便中p16INK4A、MGMT和ECAD基因启动子DNA甲基化进行检测,判断上述标本中各基因启动子的甲基化水平。结果对照组、良性肠病组和肠癌组p16INK4A基因启动子DNA甲基化率分别为14.0%、24.4%和71.7%; MGM基因甲基化率分别为16.0%、14.6%和54.3%; ECAD基因甲基化率分别为12.0%、19.5%和65.2%。上述基因启动子甲基化率老年健康群体、良性肠道疾病患者与肠癌患者之间对比差异显著(P <0. 05),统计学有意义。结论在诊断结直肠癌过程中实施MGMT、p16INK4A、ECAD基因DNA启动子甲基化等指标的检测能提高诊断的准确率,为患者预后提供参考。

子宫内膜癌中P16^(INK4a)和CyclinD1基因的表达及临床意义

目的 研究P16INK4a和CyclinD1 在子宫内膜癌中的表达及临床意义, 并探讨两者表达的相关性。方法 采用免疫组化SP法检测58例子宫内膜癌中P16INK4a和CyclinD1蛋白的表达。结果 P16INK4a、CyclinD1蛋白的阳性表达率分别为32 76%、51 72%, 两者的表达均与临床分期有关(P<0 05), P16INK4a蛋白表达还与组织学分级有关(P<0 05); P16INK4a和CyclinD1 蛋白的表达呈负相关(r=-0 428, P<0 01)。结论 P16INK4a和Cy clinD1与子宫内膜癌的发生和发展有关, 且两者存在协同作用。

p15^(INK4B)和p21^(WAF1)基因对人胰腺癌细胞系BxPC3的协同抑制作用

目的探讨p15INK4B(p15)和p21WAF1(p21)基因联合转染对人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖和凋亡的影响。方法脂质体介导将pcDNA3.1(+)-p15和pcDNA3.1(+)-p21转染BxPC3细胞,稳定筛选后用RT-PCR检测转染细胞p15和p21基因mRNA表达,Western blot检测转染细胞p15和p21蛋白的表达。用MTT法和透射电镜检测p15和p21基因分别及联合转染对BxPC3细胞增殖和凋亡的影响,流式细胞仪检测BxPC3细胞周期分布和凋亡率。结果 p15和p21转染组BxPC3细胞生长速度低于空载体组和未转染组,联合转染与二者单独转染相比,细胞体外生长速度受抑制更明显。p15和p21转染组BxPC3细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组,S期比例显著低于空载体组和未转染组,并出现凋亡峰,透射电镜亦发现p15和p21转染组发生细胞凋亡。p15和p21联合转染组与二者单独转染相比,发生更为明显G1/S阻滞,G1期比例升高,有统计学意义,S期比例降低,但无统计学意义,凋亡率升高,有统计学意义。透射电镜发现联合转染组诱导BxPC3发生更明显的细胞凋亡。结论 p15和p21基因联合转染可以进一步增强对人胰腺癌BxPC3细胞的抑制作用和诱导凋亡作用。

人卵巢浆液性囊腺癌中p16^(INK4a)基因失活机制探讨

目的 :探讨人卵巢浆液性囊腺癌中p16INK4a基因表缺失的机制 ,为p16INK4a相关性基因治疗提供理论依据。方法 :采用PCR、PCR SSCP、甲基化特异性PCR和DNA测序等方法重点检测p16INK4a蛋白表达缺失的卵巢浆液性肿瘤组织中p16INK4a基因缺失、突变和5’ CpG岛甲基化 ,分析它们与肿瘤预后的关系。结果 :4 3份p16INK4a蛋白表达阴性标本中检测到p16INK4a基因纯合缺失 4例 ,第 1、2外显子各 2例 ;第 2外显子点突变 2例 ,经DNA测序确定 1例为第 2外显子 4 94位G→T变异 ,位于非编码区 ;1例为第 2外显子 34 3位G→T变异 ,相应的氨基酸变异为第 115位缬氨酸 (GTG)→亮氨酸 (TTG) ;应用MSP法检测出 14例 (32 .6% ) 5’ CpG岛甲基化并经DNA测序证实。p16INK4a蛋白表达阳性的 14份标本中仅检测到 1例 (7.14% ) 5’ CpG岛甲基化 ,而未发现基因缺失和点突变证据。 34例卵巢浆液性囊腺癌患者中p16INK4a基因异常 16例 ,较无异常 18例预后更差 (P =0 .0 0 0 8)。结论 :5’ CpG岛甲基化可能是卵巢浆液性囊腺癌中p16INK4a基因表达缺失的主要原因 。

血清游离p16^(INK4A)基因启动子DNA甲基化用于非小细胞肺癌早期诊断的研究

目的探讨血清游离p16INK4A基因启动子DNA甲基化用于肺癌早期诊断的临床应用价值。方法选择32例健康查体者,32例肺部良性疾病患者和32例Ⅰ期(T1N0M0或T2N0M0)非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清游离DNA做为研究对象,应用甲基化特异PCR(methylation specific PCR,MSP)对上述标本进行p16INK4A基因启动子DNA甲基化检测,判断各组标本启动子的甲基化水平。评价血清游离DNA启动子异常甲基化对于NSCLC早期诊断的价值。结果健康对照组血清游离p16INK4A基因启动子DNA甲基化均呈阴性;肺部良性病变组甲基化阳性率为25.0%(8/32);NSCLC患者组甲基化阳性率为62.5%(20/32)。3组标本血清游离p16INK4A基因启动子DNA甲基化阳性率差别有统计学意义(χ2=16.54,P=0.033)。以血清游离p16INK4A基因启动子DNA甲基化为肺癌诊断标准,其诊断NSCLC的敏感度和特异性分别为59.4%,87.5%。诊断的ROC(receiver operating characteristic)曲线下面积(AUC)为0.86,95%CI(0.74～0.95)。结论与健康体检者和肺部良性病变患者相比,NSCLC患者血清游离p16INK4A基因启动子DNA甲基化水平显著增高,检测血清p16INK4A基因启动子甲基化水平可能为肺癌早期诊断提供一种无创的方法。

皮肤鳞癌组织中E-Cadherin,p14ARF,P16INK4a基因启动子甲基化检测及其意义

目的通过检测皮肤鳞癌组织及正常皮肤组织中E—cadherin，p14ARF，P16INK4a基因启动子甲基化的发生情况，探讨E-cadherin，p14ARF和P16INK4a基因启动子甲基化在皮肤鳞癌发生发展中的作用。方法采用酚-氯仿法提取30例皮肤鳞癌组织及正常皮肤组织的基因组DNA，应用甲基化特异性PCR对所提DNA进行E-cadherin，p14ARF和P16INK4a基因甲基化检测。结果癌组织中E-cadherin，p14ARF和P16INK4a基因启动子甲基化的阳性率分别为36．7％（11／30），60．0％（18／30）和53．3％（16／30），而正常皮肤组织中相应的3个基因的甲基化率分别为10．0％（3／30），6．7％（2／30）和6．7％（2／30），均显著低于癌组织。结论皮肤鳞癌中P16INK4a基因启动子甲基化与正常皮肤组织有明显差异，且在低分化癌中更多见；E-cadherin基因启动子甲基化与正常皮肤比较有显著差异，并且有淋巴结转移多见的显著特征，皮肤鳞癌中p14ARF基因甲基化发生率明显高于正常皮肤，且与分化程度、淋巴结转移和临床分期有关系，同时p14ARF，E-Cad-herin，p16INK4a三种基因甲基化存在正相关关系，这3个基因的甲基化位点与皮肤鳞癌密切相关。

曲古抑菌素A对腺样囊性癌细胞ACC-2增殖及p16^(INK4a)启动子区甲基化、mRNA表达的影响

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人唾液腺腺样囊性癌细胞ACC-2增殖的影响,并分析其对p16^(INK4a)基因启动子区甲基化及mRNA表达的影响。方法:50～800nmol/L范围内不同浓度的TSA作用于体外培养的ACC-2细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,观察细胞形态变化。应用甲基化特异性PCR(methylation- specific PCR,MSP)、反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和实时定量PCR(real-time PCR)分析不同时间(2、4、8、16、24h)100nmol/L TSA处理前、后ACC-2细胞中p16^(INK4a)基因启动子区甲基化及p16^(INK4a)mRNA表达的变化。采用SAS6.12软件包对数据进行t检验。结果:TSA在50nmol/L浓度即能有效抑制ACC-2细胞的增殖(P<0.05),并使细胞形态发生明显改变,抑制作用呈明显的浓度和时间依赖性。100nmol/L TSA处理ACC-2细胞2～16h后,p16^(INK4a)基因启动子区甲基化消失;处理2～24h后,p16^(INK4a)mRNA表达显著增高。结论:TSA可能通过改变组蛋白乙酰化的水平影响p16^(INK4a)基因启动子区甲基化的水平,使p16^(INK4a)基因表达升高,影响细胞周期,从而有效抑制ACC-2细胞的生长。