基于生物热动力学分析的板蓝根抑菌效价检测方法的建立

目的建立板蓝根抑菌效价检测方法。方法以金黄色葡萄球菌为生物模型,应用生物热动力学技术建立板蓝根抑菌效价检测方法,以系统的方法学考察所建立方法的科学性,并以常规管碟法加以验证。结果在0.522～1.28 g.mL-1范围内,板蓝根药材剂量的对数与生物热动力学参数Tmax呈良好的线性关系(r=0.983 2,P<0.01),检测限与精密度均符合生物效价检测的要求,生物热动力学特征信息与常规抑菌活性具有较好的相关性。结论建立基于生物热动力学的板蓝根抑菌效价检测方法可以用于板蓝根药材的质量评价。

5株芽孢杆菌的分离鉴定、拮抗性试验与抑菌效价测定

通过对采集样品中细菌的分离与纯化,获得5株芽孢杆菌,经纯化培养后观察其个体和群体形态特征,并进行了16项生理生化特征鉴定。结果表明,L1为地衣芽孢杆菌、L2为蜡样芽孢杆菌、L3为短小芽孢杆菌、L4为蜡样芽孢杆菌、L5为蜡样芽孢杆菌;通过对5株指示菌的拮抗试验,确定了它们的抑菌图谱;从中挑选出拮抗性最强的两株菌,采用平板琼脂扩散法,测定了其发酵液的抑菌效价。在30℃,pH7.0,150r/min的条件下,恒温振荡培养24h,测其发酵液的抑菌效价:L1、L2菌株的发酵液对金黄色葡萄球菌的抑菌效价分别2000IU/ml、1000IU/ml;对枯草芽孢杆菌的抑菌效价分别1500IU/ml、1000IU/ml;对大肠杆菌的抑菌效价分别1500IU/ml、500IU/ml。

变形链球菌抑制菌的筛选及其发酵滤液抑菌活性考察

目的:获得一株对口腔变形链球菌具有较强抑制作用的菌株,并对其发酵滤液的抑菌活性进行考察。方法:采用体外筛选法,从土壤中筛选出3株对变形链球菌具有抑制作用的菌株,对它们的性质进行考察。结果:初步鉴定它们均为地衣芽孢杆菌,其中1#菌对变形链球菌的抑制作用最强,在30℃,pH7.0,150r/min的条件下,恒温振荡培养24h,测其发酵滤液对变形链球菌的抑菌效价为1500IU/ml。该发酵滤液具有较强的热稳定性,37℃放置1h,活性下降了35%;60℃放置30min,活性下降了47%,放置1h,活性下降了50%;100℃放置1h,活性仍能保持39%;121℃下放置1h,基本无活性。该发酵滤液抑菌作用的最适pH值为7.0,在pH3.0时能保持70%的活性,在pH11.0时,仍能维持65%的活性。结论:1#菌株发酵滤液对口腔变形菌的抑制作用最强,稳定性最大,是一株很有应用前景的菌株。

酵母菌中表达的新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)的特性研究

研究酵母菌中表达的新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin XJ)的抗菌特性。根据琼脂孔穴扩散法 ,检测抗菌肽的热稳定性、抑菌效价、对氨苄青霉素抗性菌的抑菌作用 ,并检测了抗菌肽对酸碱盐、人造胃液的耐受性及其抗菌谱。结果显示新疆家蚕抗菌肽具有很强的热稳定性、能够杀灭氨苄青霉素抗性菌、对酸碱盐、人造胃酸有一定的耐受性 ,其杀菌活力为 :1mg抗菌肽与 1 2 0 0U的氨苄青霉素杀菌活力相当。新疆家蚕抗菌肽能够不同程度地杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 ,这一发现将为抗菌肽在农业、医疗卫生、畜牧业等方面的应用奠定基础 。

新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)特性的研究

探讨了新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin -XJ)的抗菌特性。根据琼脂糖孔穴扩散法 ,检测抗菌肽的热稳定性、抑菌效价、对氨苄青霉素抗性菌的抑菌作用 ,检测抗菌肽对酸碱盐、人造胃液的耐受性及其抗菌谱。结果表明新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin -XJ)具有很强的热稳定性、能够杀灭氨苄青霉素抗性菌、对酸碱盐、人造胃酸有一定的耐受性 ,其杀菌活力为 :1μg/ μl抗菌肽与 2 4 0 0 0单位的氨苄青霉素杀菌活力相当。新疆家蚕抗菌肽能够杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 ,而对革兰氏阳性菌的抗菌活力高于革兰氏阴性菌 ,这一发现将为抗菌肽在农业、医疗卫生、畜牧业等方面的应用奠定基础 。

含抗菌肽基因的天然质粒在枯草杆菌中的表达

侧孢短芽孢杆菌抗菌肽具有高效、广谱、稳定的抗菌活性,该抗菌活性与其内源质粒密切相关。为研究侧孢短芽孢杆菌含抗菌肽基因质粒异源表达的可行性,本研究中将侧孢短芽孢杆菌S62^-9的天然质粒电转枯草芽孢杆菌Wb800受体细胞,筛选阳性转化子并对其表达产物性质进行研究。得到了产生抗菌活性产物菌株Z4,发酵6 h后开始产生抗菌物质,12~20 h产量达到最大,达620.96 AU/m L。Tricine^-十二烷基硫酸钠^-聚丙烯酰胺凝胶电泳看到S62^-9质粒在枯草芽孢杆菌中得到了成功的表达,反相高效液相色谱分析Z4表达产物含有与侧孢短芽孢杆菌抗菌肽相同物质。该物质抑菌谱广,稳定性好:对于G^+、G^-和真菌均有抑菌活性,而且对于G^+菌株的抑菌效果优于G^-菌株和真菌,121℃处理20 min后的效价保留率约为90%,100℃处理60 min后仍有81%的活性保留;p H 2~12的范围内效价保留率基本不发生变化;对蛋白酶较为敏感,胰蛋白酶和蛋白酶K处理后抗菌肽的效价保留率为60%左右,其他3种蛋白酶处理后也有一定程度的降低。本研究获得了抗菌肽的异源表达菌株Z4,为进一步工业生产抗菌肽提供支持,而且为该抗菌肽遗传基因定位于质粒上提供了证明。

从虎皮鹦鹉粪便中分离产细菌素菌株及其细菌素特性分析

从虎皮鹦鹉(Melopsittacus undulatus)的粪便中分离得到一株产广谱细菌素的菌株,其细菌素产物对革兰氏阳性和阴性细菌均有较强抑制作用。经形态学、生理生化反应和16S rDNA分子方法鉴定,该菌株初步鉴定为干酪乳杆菌。用硫酸铵分级沉淀得到的细菌素粗提物,作温度、pH值、蛋白酶的敏感性测定,结果显示该细菌素经100℃处理10 min抑菌活性不变,当pH4.0时,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别达到99.06%和86.14%,并且对多种蛋白酶表现出敏感性。与Nisin标准品的抑菌效价对比,得到粗提物的效价为204.87 IU/mL。

盐穗木正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌的影响

为了研究盐穗木(Halostachys caspica)抑菌单体对金黄色葡萄球菌抑菌作用,对盐穗木乙醇溶液进行减压蒸馏,正丁醇萃取,柱层析分离,GC-MS鉴定单体结构,药敏试验分析其抑菌作用。结果表明,盐穗木正丁醇萃取物单体结构鉴定为N-氰基-乙基苯磺酰胺,最低抑菌浓度(MIC)为15.60 mg/mL,最低杀菌浓度(MBC)为31.25 mg/mL,该研究为盐穗木用于抗菌药的开发利用提供了理论指导。

屎肠球菌B13产乳酸菌素的发酵条件优化

为提高屎肠球菌B13乳酸菌素的产量,以接种量、培养基初始pH值和发酵温度为考察因素,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组和试验设计原理进行三因素三水平的响应面优化分析,优化后的最佳培养条件为:接种量4.4%、培养基初始pH 5.3、发酵温度33℃。在此条件下,乳酸菌素的抑菌效价达5.32×10^8 IU/mL,比优化前提高1.44倍,为屎肠球菌B13乳酸菌素的开发利用提供参考依据。

嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacilin XH1发酵条件优化

以细菌素相对抑菌效价为考察指标,通过单因素和正交试验对嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH1发酵条件进行优化,研究了培养基初始pH、培养温度、培养时间及接种量4个因素对细菌素产生的影响。结果表明,优化后最佳发酵条件为培养基初始pH 6.5、培养温度35℃、接种量为2.5%和培养时间28 h,在此条件下细菌素Lactobacillin XH1相对抑菌效价值达到247.49±1.05 AU/mL,比优化前提高了2倍。

乳酸菌发酵上清液成分分析

目的 乳酸菌发酵上清液为益生菌生产企业的废弃物,为了开发其在食品和饲料中的应用,对其进行初步的成分分析。方法 采用本公司乳酸菌生产离心上清液为材料,用化学分析法测定其中的总固形物、总糖、总蛋白质和总酸等成分含量;采用抑菌圈法检测以大肠埃希菌为革兰阴性菌指示菌、金黄色葡萄球菌为革兰阳性菌指示菌的抑菌活性,并测定以大肠埃希菌为革兰阴性菌指示菌的抑菌效价;采用点样培养法测定菌种分泌淀粉酶、蛋白酶等消化酶的活力。结果 乳酸菌发酵上清液分别含总固形物4.96%~7.04%、总糖0.11%~0.60%、总蛋白质1.67%~2.45%、总酸(以乳酸计)2.41~7.12 g/L;其对革兰阴性菌、革兰阳性菌都具有一定的抑制作用,抑菌效价范围为374.87~878.05μ/g;测得菌种分泌淀粉酶活力(H/C)范围为4.33~8.67。结论 初步揭示了乳酸菌发酵上清液中含有一定量的营养成分及抑菌活性、抑菌效价和淀粉酶活力,为开发其在食品和饲料中的应用提供了依据。