球形棕囊藻抑藻活性化合物筛选及抑藻微球制备

首先评价了胆固醇、棕榈酸单甘油酯、玉米黄素、对羟基苯乙醇、豆甾醇、尿嘧啶核苷、亚油酸、十七烷酸、异植醇、半胱氨酸、海藻糖和二十二碳酸甲酯12种化合物对赤潮微藻球形棕囊藻生长的抑制作用,筛选到最具有抑藻剂开发前景的化合物——亚油酸。在此基础上,将亚油酸制备成微球,采用单因素实验和正交实验相结合的方式得到优化的微球制备条件:亚油酸质量浓度50μg/mL、海藻酸钠质量分数0.500%、CaCl_(2)质量分数1.00%、体系pH 4.0、水浴温度60℃、壳聚糖质量分数0.5%。优化条件下制备得到的亚油酸微球载药率和包封率分别为49.06%、81.76%,对球形棕囊藻的第4天生长抑制率可达52.21%。

海带中抑藻活性化合物的分离及抑藻活性分析

以2 000 g海带为原料、米氏凯伦藻为测试微藻,采用甲醇浸提、液液萃取、硅胶柱层析、Sephadax LH-20凝胶柱层析和硅胶薄层层析等分离方法,纯化可能具有抑藻活性的化合物,制备到5个薄层纯样品,B21(1.39 g)、B131(0.51 g)、B132(0.48 g)、C211(0.016 g)和C212(0.020 g)。经鉴定,B21、B_(131)、B_(132)、C_(211)和C_(212)依次为7-羟基庚酸、十四酸、十六酸、十八酸和油酸,均是第一次从海带中分离获得。此5种脂肪酸对塔玛亚历山大藻、强壮前沟藻、赤潮异弯藻、米氏凯伦藻、球形棕囊藻和中肋骨条藻的生长表现出选择性抑制作用,其中7-羟基庚酸具有较为广泛的抑藻活性。除塔玛亚力山大藻之外,在浓度为50μg/mL时,7-羟基庚酸对其他5种赤潮微藻生长的抑制作用与硫酸铜和重铬酸钾对它们生长的抑制作用接近,生长抑制率超过71%(第4天);十四酸在浓度为50μg/mL时对强壮前沟藻、米氏凯伦藻和中肋骨条藻生长也有明显的抑制作用,第4天时对它们的生长抑制率在57%以上。在此基础上,第一次确定了7-羟基庚酸、十四酸、十六酸和十八酸对强壮前沟藻、赤潮异弯藻、米氏凯伦藻、球形棕囊藻和中肋骨条藻生长的半抑制效应浓度(EC;),7-羟基庚酸对塔玛亚历山大藻生长的EC;也是第一次被确定。与硫酸铜和重铬酸钾对每种赤潮微藻生长的EC;比较,7-羟基庚酸和十四酸在抑制强壮前沟藻上具有明显的抑藻优势。