α_1-肾上腺素受体抗体介导对糖尿病大鼠肾小管转化生长因子-β_1表达的影响

目的:观察α1-肾上腺素受体抗体(简称α1-受体抗体)介导的糖尿病大鼠对肾小管转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其在肾小管间质病变发生发展中的作用。方法:Wistar大鼠64只,分为对照组和糖尿病组。对照组和糖尿病组又分为无介导组与抗α1-受体抗体介导组。用链脲佐菌素复制糖尿病模型。葡萄糖氧化酶法测定血糖,放射免疫法测定尿白蛋白,免疫组化法检测肾小管基质TGF-β1的表达。结果:成功构建糖尿病大鼠模型,α1-受体抗体介导的对照组和糖尿病组肾皮质远端小管均可见TGF-β1表达,且糖尿病组明显高于对照组(P<0.01)。结论:TGF-β1在α1-受体抗体介导大鼠表达增加,即TGF-β1的表达与自身免疫有关。

硒对抗α1-受体抗体介导的糖尿病鼠心肌纤维化的保护作用研究

目的研究分析纳米硒对于抗α1-受体抗体介导的糖尿病鼠心肌纤维化的保护作用。方法 70只健康实验室小鼠,选取10只作为对照组,60只小鼠进食24h后,注射50mg/kg链脲佐菌素,连续5d。7d后,采集尾血测定血糖。将40只血糖值>16.65mmol/L的小鼠分为观察组、低剂量组(25μg/kg)、中剂量组(50μg/kg)、高剂量组(100μg/kg),各10只。每天用0.2ml的溶液对各组小鼠进行灌胃,对相应剂量的纳米硒及生理盐水进行补充。2个月后对比小鼠心肌指标。结果观察组、低、中、高剂量组的体重、血糖、MDA、细胞凋亡度以及Bax蛋白表达水平、心肌GSH-PX活性、Bcl-2以及SOD与对照组对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论纳米硒元素能够有效调节血糖,增强体内Bcl-2蛋白表达,其对抗α1-受体抗体介导的糖尿病鼠心肌纤维化的保护作用明显。

糖尿病心肌病患者与抗G-蛋白偶联型受体血管紧张素Ⅱ1型受体和肾上腺素能α_1受体自身抗体的初步研究

目的 :探讨抗G 蛋白偶联型受体血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1受体 )和肾上腺素能α1受体 (α1受体 )自身抗体是否与糖尿病心肌病发病有关。方法 :以合成的AT1与α1受体多肽片段为抗原 ,应用酶联免疫吸附测定技术 ,检测 196例住院及门诊体检者血清中抗G 蛋白偶联型受体AT1和α1受体自身抗体 ,其中糖尿病心肌病患者 46例 (糖尿病心肌病组 ) ,2型糖尿病 5 2例 (糖尿病组 ) ,高血压无靶器官受损患者 5 8例 (高血压组 )及正常对照组 40例。结果 :糖尿病心肌病组抗AT1受体自体抗体阳性率和抗α1受体自身抗体阳性率 ,明显高于糖尿病组、高血压组以及正常对照组 ,有显著性差异 (P均 <0 .0 5～ 0 0 1)。结论 :免疫学机制可能参与糖尿病心肌病病理生理过程。

抗U1-RNP抗体和抗RNPA/RNP68抗体联合检测在自身免疫性疾病诊断中的价值

目的探讨抗U1-核糖核蛋白(RNP)抗体和抗RNPA/RNP68抗体在自身免疫性疾病(AID)诊断中的价值。方法选取2021年10月—2024年3月同济大学附属上海市第四人民医院、上海交通大学医学院附属仁济医院AID患者136例[AID组,包括混合性结缔组织病(MCTD)23例、系统性红斑狼疮(SLE)49例、干燥综合征(SS)14例、狼疮性肾炎14例、自身免疫性肝炎(AIH)17例、类风湿性关节炎(RA)19例]和非AID患者136例(非AID组),以及健康体检者100名(正常对照组)。采用流式点阵免疫发光法检测所有研究对象抗RNPA/RNP68抗体,采用免疫印迹法检测抗U1-RNP抗体。采用Kappa检验评估不同方法之间的一致性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标诊断AID的效能。结果AID组抗U1-RNP抗体和抗RNPA/RNP68抗体阳性率均高于非AID组和正常对照组(P<0.0167),非AID组2种抗体的阳性率亦高于正常对照组(P<0.0167)。各组抗U1-RNP抗体阳性率与抗RNPA/RNP68抗体阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。正常对照组2种抗体的一致性较好(Kappa=0.92),AID组的一致性差(Kappa=0.10)。抗U1-RNP抗体、抗RNPA/RNP68抗体联合检测(2种抗体均阳性)诊断AID的曲线下面积(AUC)为0.80,高于单项检测(0.70、0.73)(P<0.01)。对于MCTD、SLE,抗U1-RNP抗体、抗RNPA/RNP68抗体联合检测的AUC分别为0.81、0.75,均高于抗U1-RNP抗体单项检测(AUC分别为0.73、0.70)(P<0.01);且2种抗体联合检测诊断SLE的AUC高于抗RNPA/RNP68抗体单项检测(0.67)(P<0.01)。对于狼疮性肾炎,抗U1-RNP抗体和抗RNPA/RNP68抗体联合检测的AUC为0.52,低于2种抗体单项检测的AUC(0.62、0.69)(P<0.05)。对于SS,抗RNPA/RNP68抗体单项检测的AUC为0.72,高于抗U1-RNP抗体单项检测(0.51)(P<0.05)。抗U1-RNP抗体、抗RNPA/RNP68抗体单项检测和联合检测诊断其他AID的AUC差异均无统计学意义(P>0.05)。结论抗U1-RNP抗体对诊断狼疮性肾炎、RNPA/RNP68抗体对诊断SS具有较高的效能;2种抗体联合检测可提高对SLE和MCTD的诊断效能。

程序性死亡受体(PD)-1单克隆抗体治疗肝癌肝移植术后复发诱发急性免疫性肝炎:附1例报告

目的探讨程序性死亡受体(PD)-1单克隆抗体治疗肝细胞癌(肝癌)肝移植术后复发的安全性。方法回顾性分析1例因使用PD-1单克隆抗体(pembrolizumab)治疗肝癌肝移植后复发而诱发急性免疫性肝炎患者的临床资料。结果患者因原发性肝癌行肝移植术,术后4个月发现肝癌肺转移,术后12个月予pembrolizumab治疗(150 mg静脉滴注1次),治疗后第5日发现肝功能异常,行肝穿刺活组织检查病理提示轻至中度急性排斥反应。结合患者临床表现、实验室检查以及pembrolizumab的药物说明书,诊断为急性免疫性肝炎。给予肾上腺皮质激素及加强免疫抑制治疗,随访8个月患者带瘤生存,但肝功能仍持续异常。结论肝移植术后免疫抑制状态下不宜应用PD-1单克隆抗体等免疫检查点抑制剂,有诱发免疫性肝炎的风险。

磷酸肌酸钠对充血性心力衰竭患者心功能及β1-肾上腺素能受体自身抗体的影响

充血性心力衰竭一种复杂的临床症候群,是各种心脏疾病发展的终末阶段。由于人群的老龄化、高血压的高发病率和低控制率,溶栓和介入治疗使急性心肌梗死的死亡率下降等原因,导致心力衰竭的发生率、住院率明显上升,是心血管病患者住院和死亡的主要原因。而磷酸肌酸在肌肉收缩的能量代谢中发挥重要作用，它是心肌和骨骼肌的化学能量储备，并用于三磷腺苷（ATP）再合成，磷酸肌酸水平不足在心收缩力和功能恢复能力的损伤中具有重要的临床意义，本课题尝试评价充血性心力衰竭患者应用磷酸肌酸钠的获益与安全性。

肾血管性高血压大鼠发病过程中心血管AT_1-受体自身抗体的变化

实验观察了肾血管性高血压（RVH）大鼠血浆中抗AT1-受体自身抗体在发病过程中的作用及其变化规律。采用两肾一夹Goldblatt RVH模型,以合成的大鼠AT1-受体细胞外第二环165-191位氨基酸序列作为特异性抗原,用SA-ELISA法检测大鼠血清中抗AT1-受体自身抗体。结果表明,RVH模型组术后2周时大鼠血清中抗AT1-受体自身抗体的阳性率和平均滴度与术前相比明显增高,较高的阳性率和平均滴度持续几周后逐渐下降,12周时下降到正常水平。结果提示,自身免疫机制参与了高血压的形成,抗AT1-受体自身抗体可能与心肌肥厚有关。

血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体的制备及其生物效应检测

目的 利用主动免疫方法 在大鼠血清中制备AT1受体的抗体并检测其对心血管系统的生物效应,以探讨血管紧张素Ⅱ-1型（AT1）受体的抗体与心血管疾病的关系.方法 按照人AT1受体细胞外第二环表位肽段合成抗原肽段,以此对大鼠进行主动免疫,获取抗AT1受体抗体,并提纯抗体IgG,检测该抗体对大鼠血管环和离体心脏的生物效应.结果 ELISA检测表明,抗体滴度从免疫后第2周开始升高,第8周滴度达到一个高峰;PAGE凝胶电泳检测显示纯化结果 理想.AT1受体抗体可剂量依赖性地使大鼠主动脉血管环收缩增加,使离体灌流心脏的收缩和舒张功能增强.上述效应与血管紧张素Ⅱ的作用一致,并可被AT1受体阻断剂Losartan所阻断.结论 用主动免疫法可在大鼠血清中获取足量AT1受体抗体,借以研究其生物效应.AT1受体抗体对大鼠主动脉血管环和离体心脏均有激动剂样的刺激效应,提示该抗体可能与心血管疾病的发病有关.

抗β_1-肾上腺素受体自身抗体对在体大鼠心肌细胞的致凋亡作用

目的:观察抗β1-肾上腺素受体(β1-AR)自身抗体对在体大鼠心肌细胞的致凋亡作用,并探讨其可能的信号转导通路,以阐明该抗体参与心衰发生发展的病理机制。方法:用β1-AR细胞外第二环合成肽段免疫抗β1-AR自身抗体阴性大鼠(9周),定期检测大鼠的血清抗β1-AR自身抗体滴度、心功能、心肌组织凋亡现象和caspase-3,8,9活性。结果:(1)免疫组大鼠的血清抗β1-AR自身抗体滴度逐渐升高并维持于高水平[1∶(1 280±0.07)];对照组始终在1∶10左右;(2)TUNEL和琼脂糖凝胶电泳显示免疫组大鼠在免疫3、4、5周心肌组织发生明显凋亡,caspase-3,8活性增高,免疫7、9周心功能明显下降,对照组未见异常。结论:抗β1-AR自身抗体可能通过激活死亡受体途径促进在体大鼠的心肌细胞发生凋亡,最终引起心功能下降。

AT_1-受体自身抗体与原发性高血压的关系

目的 :了解AT1 受体自身抗体与原发性高血压临床特征及降压疗效的相关性 ;方法 :记录 1 2 3例原发性高血压患者多项临床资料及检测AT1 受体自身抗体 ,在抗体阳性组及阴性组中各随机抽取 2 4例患者分别给予科素亚治疗 1 2周 ,比较两组治疗前后血压变化。结果 :阳性组年龄显著高于阴性组 (P =0 .0 2 3)。Logistic回归分析表明仅年龄进入回归方程。抗体阳性组与阴性组科素亚降压疗效比较无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :AT1 受体抗体的阳性率仅与年龄相关 。

β1-肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体长期存在对大鼠免疫功能的影响

目的 观察β1-肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体（β1-AA）长期存在对大鼠免疫功能的影响.方法 用人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段（β1-AR-ECII）作为抗原主动免疫大鼠,获取β1-AA,并经SDS-PAGE检测纯度;将纯化的β1-AA通过鼠尾静脉注入大鼠体内,建立被动免疫模型,并通过SA-ELISA方法定期检测血清中β1-AA的水平;定期采用流式细胞技术测定大鼠外周血CD4＋、CD8＋ T淋巴细胞亚群的变化;定期用直接溶血空斑和间接溶血空斑实验观察B细胞抗体生成能力的变化.结果 被动免疫模型中,β1-AA水平可以维持在与临床患者血清中该抗体相匹配的状态,较好地模拟了临床患者血清中自身抗体维持在一定水平且长期存在的状态.β1-AA的长期存在可以使机体的CD4＋/CD8＋ T淋巴细胞比值持续升高,使直接溶血空斑和间接溶血空斑数目明显增高.结论 β1-AA长期存在可以导致机体细胞免疫和体液免疫功能改变.

抗β1-肾上腺素受体抗体对大鼠T淋巴细胞的作用

目的观察抗β1-肾上腺素受体（AR）抗体对大鼠T淋巴细胞的作用。方法用人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段（β1-AR—ECⅡ）作为抗原主动免疫大鼠，采用流式细胞技术测定大鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化；观察抗β1-AR自身抗体对培养的淋巴结T细胞的影响。结果免疫组血清中T淋巴细胞亚群CD4^＋／CD8^＋在处理24h后开始升高，在第7天时达到高峰并持续2个月；抗β1-AR自身抗体可促进T淋巴细胞增殖，与β1-AR特异性阻断剂Metoprolol或β1-AR—ECⅡ共同作用时，可使抗体的促增殖效能显著减弱。结论抗β1-AR自身抗体可以使免疫系统失衡，促进T淋巴细胞的增殖。

β_1-肾上腺素受体自身抗体通过促进肝细胞凋亡参与小鼠肝损伤

目的探讨β_1-肾上腺素受体自身抗体(β_1-AA)对小鼠肝功能的影响。方法用杂交瘤细胞株融合的方法产生具有生物活性的β_1-AA;构建β_1-AA长期被动免疫小鼠模型;血清生化仪检测肝脏血清学指标变化;超声检测小鼠肝脏结构和功能的改变;Tunel染色、annexin V/PI染色和caspase 3活性检测肝细胞凋亡水平。结果具有生物活性的β_1-AA和被动免疫模型小鼠建立成功;在被动免疫过程中,免疫组小鼠肝脏谷丙转氨酶ALT(62.00±0.01 vs37.00±0.02)和谷草转氨酶AST(290.00±0.05 vs 205.00±0.02)水平明显升高,白蛋白ALB显著下降(35.00±0.03vs 43.00±0.05);门静脉、肝静脉流速降低;β_1-AA长期存在诱导肝细胞凋亡水平增加(8.00%±0.02%vs 2.30%±0.03%,P<0.05),β_1-肾上腺素受体特异性抑制剂metoprolol可以部分逆转此效应。结论β_1-AA可以通过β_1-肾上腺素受体致肝细胞凋亡,参与肝损伤的发生发展。

血清抗AT_1-受体自身抗体在难治性高血压患者中的病理作用及临床干预研究

目的 :本文探讨了抗AT1 -受体的自身抗体在难治性高血压中的存在及临床干预措施和效果。方法与结果 :根据美国JNC -Ⅵ的诊断标准 ,收集了 58例难治性高血压病人 ,96例非难治性高血压病人及 40例正常血压对照者 ;性别及年龄因素匹配。人工合成AT1 -受体胞外第二环肽片段作为抗原 ,以ELISA法检测入选病人及对照组血清中的抗AT1 -受体抗体 ,在上述 3组病例中 ,抗体的阳性率分别为 43 % ,1 0 4%及 7 5 % ,在难治性高血压组抗体阳性率具有显著性差异 (P <0 0 5)。对抗体阳性的难治性高血压病人 ,随机分为血管紧张素 -Ⅱ拮抗剂治疗组及ACE抑制剂治疗组 ,进行了为期 6个月的临床随访 ,观察了两组病人在血压降低值、抗体变化及高血压并发症方面的差异 ,共得到有效病例数 48例 ,发现血管紧张素 -Ⅱ拮抗剂组的血压降低值优于ACE抑制剂组 ,且血压控制稳定。结论 :抗AT1 -受体自身抗体可能是导致部分高血压病人血压控制困难的原因之一 ,其机制可能与抗AT1 -受体自身抗体对AT1 -受体的激动活性有关 ,使用血管紧张素 -Ⅱ拮抗剂氯沙坦可有效地阻断AT1 -受体的各种激动途径 ,对抗AT1

1-(1,4-苯并二噁烷-2-羰基)-4-取代芳氧烷基哌嗪类α_1受体拮抗剂的合成及其生物活性

目的寻找新的1,4-苯并二烷类α1受体拮抗剂。方法选用1,4-苯并二烷为母核,以儿茶酚和取代苯酚为原料,分别经关环、水解、成酰胺、取代、成盐等反应合成目标化合物,并测定该类化合物α1受体拮抗活性。结果与结论设计合成了13个新化合物,结构经ESI-MS、1H-NMR、IR及HR-MS确证。初步药理活性实验表明,其中8个目标化合物的pA2值大于6.00,具有良好的α1受体拮抗活性,有进一步研究的价值。

多沙唑嗪干预对α_1肾上腺素能受体抗体阳性糖尿病大鼠心肌的保护作用

目的:探讨多沙唑嗪干预对α1肾上腺素能受体自身抗体(α1R-Ab)阳性糖尿病(DM)大鼠心肌转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原表达的影响及其心肌保护作用。方法:Wistar大鼠分为5组:A组(正常对照组,n=10)、B组(DM模型组,n=10)、C组(DM+多沙唑嗪干预组,n=10)、D组(α1R-AbDM组,n=8)和E组(α1R-AbDM+多沙唑嗪干预组,n=8)。腹腔注射链脲佐霉素(STZ)复制T2DM模型。造模成功后,D组和E组于当周、第4、8、12、16周尾静脉注射α1R-Ab注射液(100μg/100g),建立α1R-AbDM模型。C组和E组均从注射α1R-Ab起每日给予多沙唑嗪0.36mg/Kg灌胃,持续16周。A组不予任何处理。16周后处死各组大鼠,取左室心肌组织常规病理切片和超薄切片,采用免疫组化检测左室心肌TGF-β1和Ⅰ型胶原表达量,电镜观察心肌超微结构。结果:A组大鼠心肌TGF-β1和Ⅰ型胶原表达明显低于B、C、D、E组(均P<0.01),C组心肌TGF-β1和Ⅰ型胶原表达低于B组(P<0.05),E组心肌TGF-β1和Ⅰ型胶原表达亦明显低于D组(P<0.05);电镜下,A组心肌未见明显异常;D组心肌线粒体减少,排列紊乱,呈空泡变性,间质胶原增生,微血管基底膜增厚;而E组心肌病变较D组明显减轻;C组心肌病变亦较B组明显减轻。结论:多沙唑嗪可通过抑制α1R-Ab阳性DM大鼠心肌组织中TGF-和Ⅰ型胶原表达,减轻DM大鼠心肌间质纤维化,保护心肌。

消癃通闭对犬大脑皮层α_1-肾上腺素受体的拮抗作用

消癃通闭浸出液与犬大脑皮层粗制膜及IBE12 5作用测定其对IBE12 5与犬大脑皮层α1 AR结合的抑制作用 ,结果消癃通闭对IBE12 5犬大脑皮层的结合呈竞争性拮抗作用 ,IC50 为 3 4 0± 6 0 g/L ,Hill系数为 0 70± 0 0 6,佐证本方具有α1 AR拮抗作用。

肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对佐剂性关节炎大鼠滑膜中TNF-α、TGF-β1和VEGF表达的影响

目的探讨肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对佐剂性关节炎大鼠滑膜中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将成年雄性Wistar大鼠随机分为5组,Ⅱ～Ⅴ组建立佐剂性关节炎大鼠(AA)模型,于造模后第12天开始Ⅲ组给予甲氨喋呤灌胃治疗,Ⅳ～Ⅴ组给予益赛普皮下注射治疗。第28天取膝关节滑膜,常规HE染色,计算滑膜病理积分,免疫组织化学染色检测TNF-α、TGF-β1和VEGF在膝关节滑膜的表达。结果正常对照组大鼠滑膜组织均有少量TNF-α、TGF-β1和VEGF的表达,Ⅱ～Ⅴ组较Ⅰ组均明显增高(P<0.05)。Ⅳ、Ⅴ组滑膜组织TNF-α表达较Ⅱ组明显减低(P<0.05),而Ⅲ组与Ⅱ组无统计学意义(P>0.05)。Ⅲ～Ⅴ组滑膜组织TGF-β1、VEGF的表达均明显低于Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论可溶性重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白可明显降低AA大鼠滑膜组织TNF-α、TGF-β1和VEGF表达,对AA大鼠的关节炎症有明显的治疗作用,可能抑制局部组织血管新生。

抗代谢型谷氨酸受体1抗体相关性脑炎1例并文献复习

目的探讨抗代谢型谷氨酸受体1(mGluR1)抗体相关性脑炎的临床特征及预后,以提高临床医生对本病的认识。方法报道一例抗mGluR1抗体相关脑炎患者的临床资料,并结合文献报道的34例抗mGluR1抗体相关脑炎患者的临床资料进行回顾性分析。结果患者为38岁男性,主要表现为头晕、共济失调2个月余,脑脊液蛋白、IgG指数轻度增高,头颅MRI平扫+增强检查结果正常,血清及脑脊液mGluR1-IgG滴度均为1∶100,诊断为抗mGluR1抗体相关脑炎,患者经过大剂量糖皮质激素、丙种球蛋白、利妥昔单抗等治疗后明显好转。35例抗mGluR1抗体相关脑炎患者年龄(48.3±20.3)岁,临床主要表现为小脑共济失调(33例)、认知功能下降(11例)。8例(22.9%)患者合并有肿瘤性疾病,所有患者血清或/和脑脊液mGluR1抗体阳性。头颅MRI主要表现为小脑半球或蚓部、小脑幕异常。85.7%(30/35)的患者接受免疫治疗,其中11例患者使用2种免疫治疗,11例使用3种及以上的免疫治疗。随访结果显示,21例(60.0%)患者好转,4例(11.4%)患者好转后复发,7例(20.0%)患者病情稳定,2例(5.7%)患者无明显变化,1例(2.9%)患者死亡。结论抗mGluR1抗体相关脑炎主要表现为小脑共济失调,血清或脑脊液抗mGluR1抗体检测有助于诊断,大多数患者经糖皮质激素联合丙种球蛋白或血浆置换或免疫抑制剂或利妥昔单抗治疗后好转,少部分患者有复发且预后差。