抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体与先兆流产的关系

目的探讨抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体与先兆流产的关系。方法通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测121例先兆流产孕妇(其中妊娠未成功者75例,妊娠成功者46例)、40名健康正常妇女(其中未妊娠者20名,妊娠者20名)的血清中抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体(IgM型)的水平。结果先兆流产组血清抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体总阳性率为58.7%,与对照组(17.5%)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。妊娠未成功组阳性率为78.7%,与妊娠成功组(26.1%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);妊娠未成功组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而妊娠成功组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);首次先兆流产组、多次先兆流产组抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体阳性率均高于健康正常妊娠组(P<0.05),而不同次数先兆流产组间阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论先兆流产与体内抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体的存在有关,检测抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体可为先兆流产的诊断、治疗及预后判断提供实验室依据。

抗核抗体、抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体、D-二聚体对复发性流产疾病转归的影响

目的探讨复发性流产(RSA)患者抗核抗体(ANA)、抗β_(2)-糖蛋白Ⅰ抗体(A-β_(2)-GPⅠ)、D-二聚体(D-D)对疾病转归的影响。方法选取舞钢市人民医院2019年3月至2021年3月收治的224例RSA患者作为观察组,另选取于产科门诊就诊的60例正常经产妇作为对照组。比较两组ANA、A-β_(2)-GPⅠ阳性率及D-D水平,分析ANA、A-β_(2)-GPⅠ、D-D与流产次数、RSA患者疾病转归的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析ANA、A-β_(2)-GPⅠ、D-D表达对RSA患者疾病转归的预测价值。结果观察组ANA、A-β_(2)-GPⅠ阳性率及D-D水平均高于对照组(P<0.05),流产≤3次的患者D-D水平低于流产>3次的患者(P<0.05)。相关性分析可知,RSA患者ANA、A-β_(2)-GPⅠ表达与流产次数无关,D-D水平与流产次数呈正相关(P<0.05)。既往流产次数、吸烟、饮酒、受教育程度、生殖道感染、ANA、A-β_(2)-GPⅠ阳性均为RSA患者疾病转归的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,ANA、A-β_(2)-GPⅠ、D-D表达三者联合预测RSA患者疾病转归的AUC最大,且>0.9,预测效能较高。结论ANA、A-β_(2)-GPⅠ、D-D与RSA患者预后密切相关,可有效预测疾病转归。

抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体与反复自然流产的关系

目的:探讨抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β2-GPⅠantibody)与反复自然流产(RSA)的关系。方法:采用酶联免疫吸附法检测81例RSA患者和39例正常妇女血清中anti-β2-GPⅠ的水平。结果:RSA组anti-β2-GPⅠ及其IgG型抗体阳性率分别为42.0%和40.8%,显著高于对照组(7.7%)(P<0.01,P<0.05);IgM型抗体阳性率与对照组比较差异无显著性(P>0.05);早期与中晚期RSA两组间及RSA 2次与RSA≥3次两组间阳性率比较差异均无显著性(P>0.05)。结论:anti-β2-GPⅠ与RSA有关,可作为RSA免疫因素的辅助诊断指标。

系统性红斑狼疮患者血浆内皮微粒和抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体的检测

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）是一种自身免疫性疾病,可引起全身多脏器损害,临床上常出现静脉血栓、血小板减少、溶血性贫血及神经系统改变等表现,研究表明SLE的许多临床表现与血栓形成密切相关,而内皮功能障碍在血栓形成中亦扮演着重要角色,内皮微粒（endothelial mi-croparticles，EMP）是内皮细胞凋亡或激活时释放的亚微米级颗粒，检测血浆中EMPs的水平是新近提出的评估内皮功能障碍的方法。

抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体在RSA患者血清中的表达及意义

采用ELISA法对40例反复自然流产患者(RSA组)和20例正常妇女(对照组)的血清抗β2-糖蛋白I抗体(anti-β2-GPI)进行检测。结果RSA组anti-β2-GPI总阳性率明显高于对照组(P<0.01),其中IgG型阳性率明显高于对照组(P<0.05),而IgM型阳性率无显著差异;早期与中晚期流产、流产2次与≥3次者阳性率均无显著差异。提示RSA与anti-β2-GPI密切相关。

结缔组织病中抗心磷脂抗体和抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体的表达特点

目的探讨IgA/IgG/IgM类抗心磷脂抗体(a CL)和抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β_2-GPⅠ)在结缔组织病(CTD)中的表达特点。方法酶联免疫吸附法检测9类共546例CTD患者血清IgA/IgG/IgM类a CL和anti-β_2-GPⅠ水平,分析比较这6个指标在9类CTD中的分布差异。结果在9类CTD之间a CL-IgA、a CL-IgG、anti-β_2-GPⅠ-IgA和anti-β_2-GPⅠ-IgG的浓度和阳性率差异均有统计学意义(浓度:P=0.002,0.000,0.004,0.013;阳性率:P=0.031,0.000,0.016,0.002),但a CL-IgM和anti-β_2-GPⅠ-IgM的浓度和阳性率在9类CTD间差异无统计学意义(浓度:P=0.282,0.095;阳性率:P=0.342,0.324)。546例CTD患者a CL-IgA、a CL-IgG、a CL-IgM、anti-β_2-GPⅠ-IgA、anti-β_2-GPⅠ-IgG和anti-β_2-GPⅠ-IgM等6种抗体的阳性率分别为5.3%、8.4%、9.3%、7.1%、6.2%和18.1%。其中a CL-IgA与anti-β_2-GPⅠ-IgA阳性率以及a CL-IgG与anti-β_2-GPⅠ-IgG阳性率差异无统计学意义(P=0.21,0.163),但a CL-IgM和anti-β_2-GPⅠ-IgM阳性率差异有统计学意义(P=0.000)。进一步分析表明a CL的IgA与IgG之间以及IgA与IgM之间阳性率差异有统计学意义(P=0.042,0.011),而anti-β_2-GPⅠ中阳性率的显著差异存在于IgG与IgM之间和IgA与IgM之间(P=0.000,0.000)。结论 9类CTD之间IgA/IgG类、以及9类CTD总体IgM类a CL和anti-β_2-GPⅠ阳性率存在差异;a CL中IgG与IgM表达占优势,而anti-β_2-GPⅠ的优势表达抗体为IgM。

系统性红斑狼疮患者抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体检测及其临床意义

目的探求抗β2-糖蛋白Ⅰ（β2 glycoprotein Ⅰ，β2-GPⅠ）抗体培G、IgA、IgM在系统性红斑狼疮（SLE）临床的测定。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测100例SLE患者、39例疾病对照组（包括类风湿关节炎、硬化症、干燥综合征、自身免疫性肝病和混合性结缔组织病）和30例正常人群血清抗β2-GPⅠ抗体、抗心磷脂抗体（ACL）IgG、IgA、IgM等指标，分析其与临床特点（如血栓、流产）的关系。结果SLE组抗β2-GPⅠ抗体（IgG、IgA、IgM）浓度高于正常对照组，差异具有统计学意义（P〈0．01），敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为17．2％、95．7％、85．0％、44．6％。β2-GPⅠ抗体（IgG、IgA、IgM）与ACL抗体（IgG、IgA、IgM）两者呈正相关（r值分别为0．418、0．624、0．518、0．583，P〈0．01）。以SLE DAI为因变量对β2-GPⅠ抗体、ACL抗体、dsDNA、u1—RNP、Sm、SSA、SSB、Scl-70、Jo-1、P-蛋白、PT、APTT进行Logistic回归统计分析，入选的自变量有β2-GPⅠ—IgG和dsDNA。结论抗β2-GPⅠ抗体在SLE中具有一定敏感性和较高的特异性，与SLE的血栓形成相关，且抗β2-GPⅠ抗体IgG是SLE疾病活动性危险因素之一。检测抗β2-GPⅠ抗体在SLE中存在一定临床应用价值。

利用噬菌体抗体库制备人源性抗β_2糖蛋白-Ⅰ抗体

目的:制备人源性抗β2糖蛋白-Ⅰ(β2GPI)抗体Fab片段。方法:以人β2GPI为抗原,从人源性天然抗体库中筛选特异性Fab抗体,并用ELISA方法对所获抗体进行抗原结合活性和特异性鉴定。结果:通过4轮"亲和吸附-洗脱-扩增"筛选,获得2株抗β2GPI抗体。酶切去掉载体上的噬菌体基因III,得到了可溶性表达的Fab段。经过鉴定,所获抗体具有良好的抗原结合活性和特异性。结论:利用人源性天然抗体库成功制备了2株抗β2GPIFab抗体,为深入研究该抗体在抗磷脂抗体综合征发病机理中的作用和探讨新的治疗措施奠定了基础。

抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体在系统性红斑狼疮诊断中的应用

目的了解抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体(抗β2-GPⅠ抗体)与系统性红斑狼疮(SLE)的关系及在诊断中的价值。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测60例SLE患者、30例类风湿性关节炎(RA)患者和30例正常人血清中的抗β2-GPⅠ抗体、抗心磷脂抗体(抗CL抗体)水平,并分析与临床的关系。结果60例SLE患者抗β2-GPⅠ抗体阳性率为23.3%(14/60),其中伴有继发性抗磷脂综合征(SAPS-SLE)者40.6%(13/32),无继发性抗磷脂综合征(WSAPS-SLE)者3.6%(1/28),2组比较有显著性差异。60例SLE患者抗CL抗体阳性率为46.7%(28/60),其中伴有SAPS-SLE者56.2%(18/32)、WSAPS-SLE者35.7%(10/28)。结论抗β2-GPI抗体在SLE中具有敏感性,在判断SLE伴继发性抗磷脂综合征有一定的特异性,联合检测抗β2-GPⅠ抗体和抗-CL抗体能辅助诊断SLE伴血栓形成。

慢性丙型肝炎患者抗心磷脂抗体及抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体检测意义

目的探讨抗心磷脂抗体(ACA)及抗β2-糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)抗体与慢性丙型肝炎(HCV)患者是否合并血栓栓塞症状的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)半定量测定61例HCV患者及30名健康对照者血清中抗心磷脂抗体(ACA)和抗β2-糖蛋白I抗体。结果HCV患者血清抗ACA和抗β2-GPI阳性率分别为24.6%、16.4%,分别显著高于正常对照组(P<0.05或<0.01);HCV伴血栓组抗ACA和抗β2-GPI阳性率分别为93.3%、66.7%,分别显著高于HCV无血栓组(P<0.01)。结论抗β2-GPI抗体不仅与HCV合并血栓栓塞症状关系密切而且特异性比ACA高,可能成为HCV合并血栓栓塞症状的重要指标。

系统性红斑狼疮患者抗心磷脂抗体和抗2β-糖蛋白Ⅰ抗体与心脏瓣膜病变的研究

目的:探讨抗心磷脂抗体(ACA)及抗2β-糖蛋白Ⅰ(2β-GPⅠ)抗体与系统性红斑狼疮(SLE)患者心脏瓣膜病变的关系。方法:用超声心动图(UCG)分析60例SLE患者心脏受累情况,同时应用酶联吸附试验(ELISA)对32例经超声心动图(UCG)确诊合并心脏瓣膜病变的SLE患者血清中的ACA及抗2β-糖蛋白Ⅰ抗体进行检测,并以28例无心脏瓣膜病变的SLE患者及20例正常人血清为对照。结果:合并心脏瓣膜病变的SLE患者血清ACA及抗2β-GPⅠ抗体的阳性率分别为(68.75%和59.37%),较无心脏瓣膜病变的SLE患者组(32.14%和7.14%)显著增高(P<0.05和P<0.01)。结论:抗2β-GPⅠ抗体不仅与SLE心脏瓣膜病变关系密切而且特异性比ACA高,可能成为SLE心脏瓣膜病变的重要指标。

β2-糖蛋白Ⅰ的多重作用及其抗体在血液系统疾病中的研究进展

β2-糖蛋白Ⅰ(β2-GPⅠ)是一种具有双重调节补体系统和凝血系统的功能蛋白。β2-GPⅠ不仅具有抗凝、抗血小板和促凝作用,还具有调节补体、调节血管生成及调节免疫的作用。近些年新方法的应用不仅提升了β2-GPⅠ分离纯化的能力,更进一步提升了抗β2-GPⅠ抗体的检测灵敏度及特异性。在临床上,β2-GPⅠ及其抗体可能参与了免疫性血小板减少症、白血病、淋巴瘤等多种血液系统疾病的发生发展。该文综述了β2-GPⅠ的作用、相关指标检测方法、β2-GPⅠ及其抗体在血液系统疾病中的研究进展。

兔抗人β_2糖蛋白Ⅰ多克隆抗体的制备与鉴定

目的制备兔抗人β2糖蛋白Ⅰ多克隆抗体,并鉴定抗体的特异性及功能活性。方法以纯化的人血浆β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)免疫新西兰大白兔,获得抗血清;利用Protein A及β2-GPI亲和层析柱纯化血清中总IgG和抗β2-GPI多克隆抗体;用免疫双向扩散试验(IDD)、ELISA和western-blot等方法鉴定抗体。结果IDD及ELISA鉴定抗体效价分别达到16和1×105;western-blot显示纯化的总IgG和抗β2-GPI抗体与β2-GPI蛋白均有特异反应条带;且抗体与β2-GPI复合物能够刺激单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)活性。结论成功获得并纯化兔抗人β2-GPI多克隆抗体,为进一步研究β2-GPI/抗β2-GPI复合物在抗磷脂抗体综合征血栓形成机制中的作用建立了基础。

氧化修饰的β_2-糖蛋白-1诱导抗心磷脂抗体的产生

目的：探讨蛋白质的氧化修饰与体内抗磷脂抗体产生的关系。方法：首先，在体外以次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶氧化系统氧化大鼠β_2-GP1，然后以氧化的β_2-GP1（oxβ_2－GP1）免疫同种大鼠，最后以ELISA方法检测被免疫大鼠β_2-GP1血清中的抗心磷脂抗体（ACA）。结果：氧化的β_2-GP1免疫的大鼠血清中产生高滴度的ACA。结论：β_2－GP1的氧化修饰在ACA的产生上可能起十分重要的作用。

人β_2糖蛋白1的重组表达及对抗磷脂抗体综合征患者血清诱导内皮细胞产生ICAM-1的影响

目的:探讨重组人β2糖蛋白1(hrβ2-GP1)对抗磷脂抗体综合征(APS)患者血清诱导内皮细胞系产生细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响。方法:应用pQE30表达载体表达hrβ2-GP1,Western blotting对重组蛋白进行鉴定;应用hrβ2-GP1处理前后的APS患者血清分别与内皮细胞株EA.hy926共孵育,细胞ELISA和RT-PCR方法分析处理前后EA.hy926表达ICAM-1的变化。结果:成功构建pQE30-hβ2-GP1,并对表达产物进行了纯化和鉴定,所获得的蛋白与预期的大小一致,并具有人β2-GP1的抗原性;rhβ2-GP1处理后的APS患者血清与处理前比较,与其孵育的内皮细胞系EA.hy926表达ICAM-1在蛋白和mRNA水平均明显降低,这种抑制作用随着rhβ2-GP1的浓度增加而逐渐增强。结论:抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2GP1)促进内皮细胞系EA.hy926表达ICAM-1,hrβ2-GP1可中和此作用。

β2-糖蛋白Ⅰ与抗心磷脂抗体阳性先兆流产的关系以及安子合剂干预作用的实验研究

目的阐述β2-糖蛋白Ⅰ（β2-GPⅠ）在抗心磷脂抗体阳性先兆流产中诱导抗体产生的机制,为安子合剂治疗ACA阳性先兆流产的进一步研究打下良好的实验基础。方法以β2-GPⅠ为免疫原,构建流产小鼠模型;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗心磷脂抗体阳性先兆流产模型小鼠血清中ACA、抗β2-GPⅠ抗体。结果①成功复制模型：胚胎丢失率模型组明显高于空白组（P〈0.05）,模型组抗β2-GPⅠ抗体浓度、ACA滴度均显著高于空白组（P〈0.05）;②安子合剂低剂量组能明显降低抗β2-GPⅠ抗体浓度和ACA滴度（P〈0.01）,且效果优于安子合剂中剂量组、高剂量组以及阿司匹林组（P〈0.05～0.01）。结论①抗β2-GPⅠ抗体、ACA均是导致免疫性复发流产的免疫因素;②安子合剂通过降低ACA滴度和抗β2-GPⅠ抗体浓度改善ACA阳性先兆流产妊娠结局;③安子合剂低剂量组具有临床等效性,随着剂量的增加,反而引起代谢障碍而使得效果逐渐减弱。

抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体诱导血液单核细胞表达组织因子活性的机制探讨

目的:探讨抗β2糖蛋白Ⅰ(抗β2GPⅠ)抗体诱导血液单核细胞表达组织因子(TF)活性的机制。方法:利用纯化的抗磷脂综合征(APS)患者血清IgG、单克隆抗β2GPⅠ抗体、抗Annexin A2抗体等刺激血液单核细胞及单核细胞株,通过凝血因子Ⅹa的生成量,判断细胞TF活性的表达;利用W estern杂交技术检测单核细胞膜表面AnnexinA2的表达;采用免疫细胞化学染色判断单核细胞膜表面Annexin A2、β2GPⅠ、抗β2GPⅠ抗体的结合情况。结果:APS患者血清IgG和抗β2GPⅠ抗体显著增强单核细胞TF的表达;单核细胞膜表达的Annexin A2与β2GPⅠ/抗β2GPⅠ结合成复合物,引发细胞TF表达增强;抗Annexin A2抗体可抑制复合物的这种作用。结论:细胞表面Annexin A2介导β2GPⅠ/抗β2GPⅠ诱导单核细胞表达TF活性,是APS血栓形成的机理之一。

清热活血方对β_2-糖蛋白诱导的抗心磷脂抗体产生的影响及机理研究

目的:观察清热活血方对β_2-糖蛋白(β_2-GPI)诱导的抗心磷脂抗体(aCL)产生的影响,探讨清热活血方对抗磷脂抗体综合征(APS)的治疗作用及可能的作用机制。方法:4周龄的30只雌性昆明种小鼠被随机分为3组:A组(用药组)、B组(模型组)、C组(正常对照组);A组用清热活血方5g/(kg·d)灌胃;14d后,A、B两组多部位皮下注射β_2-GPI;检查血清aCL、外周血T细胞亚群和IL-2生物活性。结果:A组各周血清aCL OD值均较B组有不同程度降低(P<0.01)。与B组相比,A组可明显降低T_H/T_s比值(P<0.01),可使不同稀释度的IL-2活性明显降低(P<0.01)。经双变量直线分析,T_H/T_S比值和IL-2生物活性呈正相关(P<0.01)。结论:清热活血方可抑制β_2-GPI诱导的aCL的产生,其作用机理可能是抑制T_H/T_S比值和IL-2生物活性的升高。

β_2糖蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)单克隆抗体(MAbs),并鉴定抗体的特性。方法:以纯化的人血浆β2GPⅠ免疫BALB/c小鼠,采用PEG融合技术,间接ELISA法和有限稀释法,制备和筛选杂交瘤细胞。杂交瘤细胞继续扩大培养后注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水,经硫酸铵沉淀及Protein G纯化MAbs。秋水仙素阻抑法鉴定杂交瘤细胞株染色体数目,ELISA测定滴度,Ig亚类试剂盒鉴定Ig亚类,Western blot鉴定特异性。结果:获得1株稳定分泌MAbs的杂交瘤细胞株β2,该杂交瘤细胞株的染色体数为99～108。进一步研究发现,其培养液和腹水滴度为1∶29和1∶215,其MAbs分类为IgG1/κ,Western blot显示纯化的MAbs及标准anti-β2GPⅠ与β2GPⅠ均有反应条带,具有较好的特异性。结论:成功获得并纯化β2GPⅠ单克隆抗体,为进一步研究β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ复合物在抗磷脂综合征中的作用奠定了基础。