重组人β_2糖蛋白1第一结构域对抗磷脂抗体综合征患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生ICAM-1、MCP-1的影响

目的:探讨重组人β2糖蛋白1第一结构域(hrβ2GPⅠDⅠ)对抗磷脂抗体综合征(APS)患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生细胞间黏附分子1(ICAM1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP1)的影响。方法:应用hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理前后的APS患者血清分别与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共孵育,细胞ELISA和RTPCR方法分析处理前后HUVEC表达ICAM1、MCP1的变化。结果:hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理后的APS患者血清较处理前相比,与其孵育的HUVEC表达ICAM1、MCP1在蛋白和mRNA水平均明显降低。结论:hβ2GPⅠDⅠ可中和APS患者血清中的大部分致病性抗β2GPⅠ抗体(anti-β2GPⅠ)。

抗β_2GPⅠ抗体/β_2GPⅠ与PLT活化

近年来，血栓性疾病发病率不断上升，严重威胁人类健康和生命，血小板（PLT）活化是血栓形成的始动因素，在血栓形成中起到关键作用。研究发现抗β2糖蛋白Ⅰ（β2GPI）抗体出现在多种血栓性疾病中，常见于抗磷脂综合征，能使体内PLT活化并和纤维蛋白结合，引起PLT聚集，

重组人β2糖蛋白1第一结构域二聚体作为抗磷脂抗体综合征B细胞耐受原的初步探讨

目的:探讨重组人β2糖蛋白1第一结构域二聚体(rhβ2-GP1-DⅠ2)对重组人β2糖蛋白1(rhβ2-GP1)免疫小鼠β2-GP1特异性B细胞反应的抑制作用。方法:应用固相ELISA方法,检测静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2后免疫小鼠产生的抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-GP1)滴度及anti-β2-GP1产生水平比率;应用ELISPOT方法,检测静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2后免疫小鼠脾脏β2-GP1特异性抗体形成细胞(AFC)数量。结果:静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2后,与对照组比较,rhβ2-GP1免疫小鼠βanti-β2-GP1滴度明显降低(P<0.01),anti-β2-GP1产生水平比率下降,β2-GP1特异性AFC数量明显减少(P<0.01)。结论:静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2能够抑制rhβ2-GP1免疫小鼠β2-GP1特异性B细胞的反应能力。

β2GPⅠ/抗β2GPⅠ抗体复合物抑制oxLDL介导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和FAK活化

目的探讨β2糖蛋白Ⅰ/抗β2糖蛋白Ⅰ抗体复合物(β2/aβ2)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)介导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和黏着斑激酶(FAK)活化的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在该过程中的作用。方法用PMA(100 ng/mL)将THP-1细胞诱导为THP-1巨噬细胞。用RPMI 1640培养液、oxLDL、oxLDL+β2/aβ2和oxLDL+脂多糖(LPS)处理THP-1巨噬细胞,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脂质转运相关分子ACAT1、ABCA1和ABCG1的mRNA水平;利用Trinder法检测THP-1巨噬细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)含量,并计算胆固醇酯(CE)含量和其占TC的比例;利用免疫荧光和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测FAK的蛋白质和mRNA表达并采用western blot检测其磷酸化;最后,利用TLR4阻断剂TAK-242(1μg/mL)预处理的方式,观察TLR4对上述过程的影响。结果β2/aβ2复合物能够抑制oxLDL引起的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和FAK表达与磷酸化,阻断TLR4可以部分逆转这一现象。结论β2/aβ2可以抑制oxLDL引起的巨噬细胞的脂质蓄积和FAK活化,该过程与TLR4有关。

缺血性中风患者抗β_2 GP1抗体的检测及临床意义

目的研究缺血性中风患者抗β_2GP1抗体血清水平,探讨抗磷脂抗体与缺血性中风的相关性,揭示抗β_2GP1抗体的检测在临床上应用的意义。方法检测了51例缺血性中风及40例无血栓疾患的对照组血清中的抗心磷脂抗体、抗β_2GP1抗体。结果抗β_2GP1在抗体在缺血性中风组及对照组之间有显著性差异。结论抗β_2GP1抗体可能为引起患者缺血性中风的病因之一。

β_2糖蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)单克隆抗体(MAbs),并鉴定抗体的特性。方法:以纯化的人血浆β2GPⅠ免疫BALB/c小鼠,采用PEG融合技术,间接ELISA法和有限稀释法,制备和筛选杂交瘤细胞。杂交瘤细胞继续扩大培养后注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水,经硫酸铵沉淀及Protein G纯化MAbs。秋水仙素阻抑法鉴定杂交瘤细胞株染色体数目,ELISA测定滴度,Ig亚类试剂盒鉴定Ig亚类,Western blot鉴定特异性。结果:获得1株稳定分泌MAbs的杂交瘤细胞株β2,该杂交瘤细胞株的染色体数为99～108。进一步研究发现,其培养液和腹水滴度为1∶29和1∶215,其MAbs分类为IgG1/κ,Western blot显示纯化的MAbs及标准anti-β2GPⅠ与β2GPⅠ均有反应条带,具有较好的特异性。结论:成功获得并纯化β2GPⅠ单克隆抗体,为进一步研究β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ复合物在抗磷脂综合征中的作用奠定了基础。

抗心磷脂抗体、抗β_(2)糖蛋白Ⅰ抗体、抗dsDNA抗体、抗C1q抗体在复发性流产诊断中的价值分析

目的探讨与抗磷脂综合征(APS)相关的抗心磷脂抗体(ACA)和抗β_(2)糖蛋白Ⅰ抗体(A-β_(2)GPⅠ)各3种分型抗体以及与系统性红斑狼疮(SLE)相关的抗dsDNA抗体和抗C1q抗体在复发性流产(RM)诊断中的价值分析。方法试验分为RM实验组和健康对照组两组研究对象,通过运用SPSS23.0软件统计分析比较两组研究对象的ACA、A-β_(2)GPⅠ、抗dsDNA抗体、抗C1q抗体的均值和阳性率;采用ROC曲线分析AUC数值,并探讨几种诊断指标的诊断价值;并采用人工方法通过计算公式分别统计计算各指标的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果RM组的ACA-IgM、A-β_(2)GPⅠ-IgM、抗dsDNA抗体、抗C1q抗体的均值和阳性率与健康对照组相比具有显著性差异(P<0.01);ROC曲线结果分析显示,RM组A-β_(2)GPⅠ-IgM诊断效能较突出,AUC值可达0.897,其余3项检测指标诊断效能一般。结论ACA-IgM、A-β_(2)GPⅠ-IgM、抗dsDNA抗体和抗C1q抗体均与RM密切相关,对RM具有一定的诊断效能,可以作为诊断RM的血清学指标。

β2 GPⅠ及其抗体与抗磷脂综合征的研究进展

抗磷脂综合征（APS）是一种以血栓形成和（或）习惯性流产为临床特征的自身免疫性疾病。β2糖蛋白Ⅰ（β2 GPⅠ）是该病的主要抗原，抗β2 GPⅠ抗体是以β2 GPⅠ为靶抗原的自身抗体。研究表明，β2 GPⅠ及其自身抗体在 APS血栓形成的致病过程中起到重要作用。目前 APS的诊断与治疗也越来越受到人们的重视，检测抗β2 GPⅠDⅠ抗体能特异性诊断APS，分子水平的研究也成为治疗 APS的新方向。该文就β2 GPⅠ、抗β2 GPⅠ抗体与 APS的相关性进展作以综述。

抗HLA-I/II抗体、抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体与不孕和流产的关系

目的探讨抗HLA-I/II抗体、抗心磷脂抗体(ACA)和抗β2糖蛋白1(β2GP1)抗体与不孕和流产的关系。方法选取2011～2012年在本院就诊的不孕症患者550例、复发性流产患者1650例和正常分娩者150例。对各组分别进行抗HLA-I/II抗体、抗心磷脂抗体和抗β2GP1抗体检测,并将阳性率进行比较。结果不孕组抗HLA-I/II阴性率、ACA和抗β2GP1阳性率分别为76.0%、19.3%和17.5%;RSA组抗HLA-I/II阴性率、ACA和抗β2GP1阳性率分别为85.0%、23.5%和22.7%;均显著高于对照组,P<0.05。结论抗HLA-I/II抗体、抗心磷脂抗体和抗β2GP1抗体是引起不孕和复发性流产的重要因素。

β_2GP_1的分子生物学性状及临床研究进展

抗磷脂抗体的同辅因子β＿２ＧＰ＿１是一分子量约５０ＫＤ的糖蛋白，由３２６个氨基酸组成，可分为５个功能区，其磷脂结合部位位于Ｃｙｓ１８２～Ｃｙｓ２８８。许多事实在明自身免疫性疾病患者血清中的抗磷脂抗体所针对的抗原可能不是诸如心磷脂、磷脂醚乙醇胺等磷脂，而是直接针对其同辅因子β＿２ＧＰ＿１，或者是针对与磷脂结合后其空间构象变化了的β＿２ＧＰ＿１。β＿２ＧＰ＿１的抗原表位位于第５功能区。β＿２ＧＰ＿１的抗原表位及磷脂结合部位的研究，对于揭示抗磷脂抗体综合征的本质、感染及自身免疫所致的抗磷脂抗体阳性结果的鉴别及其异质性的研究具有重要意义。

抗心磷脂抗体 抗β2糖蛋白Ⅰ抗体 抗dsDNA抗体及抗C1q抗体在不孕症诊断中的价值

目的 探讨与抗磷脂综合征(APS)相关的抗心磷脂抗体(ACA)和抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(A-β2GPⅠ)各3种分型抗体及与系统性红斑狼疮(SLE)相关的抗dsDNA抗体和抗C1q抗体在不孕症诊断中的价值。方法 选取2018年9月—2020年8月份在天津市第五中心医院就诊的70例不孕症患者作为不孕症观察组,选取同期62例正处于孕期的健康人作为健康对照组。通过运用SPSS 23.0软件统计分析比较两组研究对象的ACA、A-β2GPⅠ、抗dsDNA抗体及抗C1q抗体的均值和阳性率;采用ROC曲线分析AUC数值,并探讨几种诊断指标的诊断价值;并采用人工方法通过计算公式分别统计计算各指标的灵敏度、特异度及阳性预测值和阴性预测值。结果 不孕症组的ACA-IgM、A-β2GPⅠ-IgM、抗dsDNA抗体及抗C1q抗体的均值分别为(8.88±1.80)MPLU/ml、(14.75±3.00)AU/ml、(11.31±1.58)IU/ml及(14.90±2.64)AU/ml,阳性率分别为31.43%、28.57%、18.57%及27.14%,与健康对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.01);ROC曲线结果分析显示,不孕症组诊断效能相近,AUC值均在0.65~0.75之间。结论 ACA-IgM、A-β2GPⅠ-IgM、抗dsDNA抗体及抗C1q抗体均与不孕症密切相关,对不孕症具有一定的诊断效能,可以作为诊断不孕症的血清学指标。

抗磷脂抗体所针对的抗原β_2GP_1的分子克隆表达及临床应用

目的：用分子生物学的方法克隆表达抗磷脂抗体所针对的抗原β２ＧＰ１，并研究抗β２ＧＰ１抗体的临床意义。方法：用ＲＴＰＣＲ的方法从肝细胞中克隆出β２ＧＰ１ｃＤＮＡ，并构建重组载体，用纯化的重组β２ＧＰ１为抗原建立抗β２ＧＰ１的ＥＬＩＳＡ方法。结果：ＩｇＧ类抗β２ＧＰ１与ＩｇＧ类抗心磷脂抗体的检测结果间呈正相关关系（ｒ＝０６６７），抗β２ＧＰ１抗体阳性组患者与阴性组患者的血栓等临床症状的发生率有显著性差异（Ｐ＝０００２４０８）。结论：抗β２ＧＰ１抗体的检测对自身免疫性疾病患者的血栓等症状有预测价值，其特异性比常规抗心磷脂抗体的方法为高。

不同亚型抗磷脂抗体表达D二聚体与妊娠期高血压患者不良妊娠结局的关系

目的探讨血清中不同亚型抗磷脂抗体及D二聚体水平与妊娠期高血压患者不良妊娠结局的关系。方法选取2017年1月至2018年12月陕西省人民医院住院分娩的130例妊娠晚期妊娠期高血压患者为研究对象,根据妊娠结局将36例不良妊娠结局患者设为观察组,将94例妊娠结局良好患者设为对照组。比较两组血清抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,ACA)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(抗β2-GPⅠ抗体)滴度、LAR值及D二聚体水平差异,分析不同亚型抗磷脂抗体及D二聚体的表达与妊娠结局的关系。结果观察组血清ACA、抗β2-GPⅠ抗体滴度、LAR值及D二聚体水平均明显高于对照组(P<0.05)。logistic回归分析显示,血清ACA、抗β2-GPⅠ抗体、LAR值及D二聚体水平升高是导致妊娠期高血压患者不良妊娠结局的重要危险因素(P<0.05)。血清ACA、抗β2-GPⅠ抗体、LAR值及D-二聚体预测妊娠期高血压患者不良妊娠结局的ROC曲线下面积分别为0.844、0.821、0.824、0.818。结论血清抗磷脂抗体及D二聚体水平升高是妊娠期高血压患者不良妊娠结局的重要因素,检测抗磷脂抗体水平及D二聚体水平有助于对妊娠期高血压患者妊娠结局的预测。

Toll样受体4增强β2糖蛋白1免疫小鼠B细胞的活化

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在β2糖蛋白Ⅰ(β2GP1)免疫的小鼠中,对B细胞活化过程的影响。方法将C3H/HeN(TLR4正常型)和C3H/HeJ(TLR4缺陷型)2种小鼠随机分为β2GP1免疫组和生理盐水对照组,分别注射β2GP1或等量的生理盐水进行免疫。采用皮下多点注射进行初次免疫,2次腹腔注射加强免疫,最后冲击免疫的方法免疫小鼠。采用间接ELISA检测小鼠血清中抗β2GP1抗体的效价;HE染色观察小鼠脾脏生发中心数量及大小的变化;免疫组织化学法观察脾脏生发中心内的CD40配体(CD40L)表达;流式细胞术检测小鼠脾脏B淋巴细胞中共刺激分子CD80和CD86的水平变化。结果经β2GP1免疫后,2种小鼠血清中均出现高效价的抗β2GP1抗体,且C3H/HeN血清效价高于C3H/HeJ小鼠。与生理盐水对照组相比,2种小鼠经β2GP1刺激后,CD40L、CD19+CD80+细胞和CD19+CD86+细胞的数量均显著增加;但C3H/He J小鼠CD40L,CD19+CD80+细胞和CD19+CD86+细胞的数量低于C3H/He N小鼠。经β2GP1刺激的小鼠脾脏生发中心,比生理盐水组更大更多,C3H/HeN小鼠的生发中心的数量多于C3H/HeJ小鼠。结论 TLR4增强β2GP1免疫小鼠B细胞的活化。

抗磷脂抗体与结直肠肿瘤血栓形成的相关性研究

目的研究抗磷脂抗体与结直肠肿瘤血栓形成的关系,可以早期发现肿瘤,预防恶性血栓事件的发生,为治疗提供依据。方法本实验选取结直肠肿瘤的患者99例,良性25例,恶性74例,排除自身免疫病史,均经过手术、化疗及手术+化疗等方式的治疗,将其分为良性肿瘤组(对照组)与恶性肿瘤组,恶性肿瘤组分为治疗前和治疗后两组。结果采集患者治疗前后的血液标本,应用酶联免疫法测定ACL-IgG、ACL-IgM、anti-β2GPI,用凝固法测LA,应用SPSS19.0进行比较数据统计处理和分析。结论(1)恶性肿瘤组治疗前anti-β2GPI水平高于良性肿瘤组,差异有统计学意义(P<0.05)。良性肿瘤组和治疗前恶性肿瘤组LA、ACL-IgG、ACL-IgM水平差异无统计学意义(P>0.05)。(2)恶性肿瘤组经过手术、化疗、手术+化疗治疗的患者LA和anti-β2GPI低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),经过手术治疗的患者ACL-IgG,IgM低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。

六种肝抗原自身抗体检测在自身免疫性肝病诊断中的应用研究

采用免疫印迹法检测抗自身免疫性肝病自身抗体组合六项。共检测例数208例。自身免疫性肝病患者中,自身免疫性肝炎(AIH)组36例(未分型),原发性胆汁性肝硬化(PBC)组14例,原发硬化性胆管炎(PSC)组2例;非自身免疫性肝病组156例(肝功能异常,经排外自身免疫性肝病及病毒性肝炎患者);对照组:随机收集35名健康体检者血清作正常对照,男14例,女21例。AIH组中抗核抗体(ANA)阳性率61.11%,LKM1阳性率38.88%,LC1阳性率13.88%,SLA/LP阳性率19.44%;PBC组中ANA阳性率64.28%,AMA M2阳性率92.85%,Sp100阳性率57.14%,gp210阳性率31.25%;非自身免疫性肝病组中ANA阳性率2.56%,LC1阳性率0.64%;对照组未检出。自身免疫性肝病组的阳性检出率明显高于非自身免疫性肝病组,差异有统计学意义(χ2=11.9,P<0.05)。自身免疫性肝病抗体六项及抗核抗体,对自身免疫性肝病的诊断和分型及治疗和预后有价值。

抗磷脂抗体与原发性胆汁性肝硬化相关性的荟萃分析

目的评价抗磷脂抗体(antiphospholipid antibodies,APL)和原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)的相关性。方法计算机检索Pub Med、Medline Embase、CNKI及万方数据库,获取APL与PBC关联性的研究,APL包括抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibodies,ACL)、抗β2GPⅠ抗体(anti-beta 2-glycoproteinⅠantibody,anti-β2GPⅠ)和狼疮抗凝物(lupus anticoagulant,LA)。结果共纳入PBC与ACL、抗β2GPⅠ抗体关联的文献6篇,没有发现LA阳性的文章,累计PBC患者380例,健康对照组495名,自身免疫性肝炎(antoimmune hepatitis,AIH)165例,原发性硬化性胆管炎(primary sclerosing cholangitis,PSC)78例。Meta分析结果表明,PBC患者ACL和抗β2GPⅠ抗体阳性率均明显高于健康对照组(OR=12.06,95%CI:3.61~40.26;OR=38.46,95%CI:16.16~91.55)。PBC患者ACL和抗β2GPⅠ抗体阳性率均低于AIH患者(OR=0.43,95%CI:0.26~0.71;OR=0.48,95%CI:0.32~0.73),与PSC相比,两种抗体阳性率差异无统计学意义(OR=1.91,95%CI:0.98~3.71;OR=1.27,95%CI:0.55~2.97)。结论 PBC与ACL和抗β2GPⅠ抗体存在显著关联,它在PBC发展进程中所起的作用有待进一步研究。

妊娠晚期孕妇抗心磷脂抗体和抗β2GP1抗体对血栓形成性疾病的预测价值

目的探讨妊娠晚期孕妇抗心磷脂抗体(ACL)和抗β2GP1抗体对血栓形成性疾病的预测价值。方法选取2017年5月-2019年5月在天津市北辰区中医医院接受正常产检的妊娠晚期孕妇68例为妊娠晚期孕妇组,并同期选取该院接受健康体检的健康者20例作为健康对照组,对入组人员凝血、纤溶、抗心磷脂以及抗β2GP1抗体水平进行分析,探讨抗心磷脂以及抗β2GP1抗体水平与妊娠晚期孕妇血栓形成性疾病的相关性。结果妊娠晚期孕妇PAgT、D-D以及FIB均高于对照组,PT、ATⅢ均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),APTT与对照组差异无统计学意义(P>0.05);妊娠晚期孕妇ACL-IgG、ACL-IgM以及抗β2GP1抗体均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),ACL-IgA与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。妊娠晚期孕妇ACL-IgG、ACL-IgM阳性患者PAgT、D-D以及FIB均低于ACL-IgG、ACL-IgM阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05),ACL-IgG、ACL-IgM阳性患者PT与ACL-IgG、ACL-IgM阴性患者差异无统计学意义(P>0.05)。妊娠晚期孕妇抗β2GP1抗体阳性患者PAgT、D-D以及FIB均低于抗β2GP1抗体阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05),抗β2GP1抗体阳性患者PT与抗β2GP1抗体阴性患者差异无统计学意义(P>0.05)。妊娠晚期孕妇ACL-IgG、ACL-IgM以及抗β2GP1抗体与患者PAgT、D-D以及ATⅢ存在正相关性(P<0.05),妊娠晚期孕妇ACL-IgG、ACL-IgM以及抗β2GP1抗体与患者FIB呈负相关性(P<0.05)。结论妊娠晚期孕妇存在抗心磷脂(ACL-IgG、ACL-IgM)以及抗β2GP1水平升高情况,而抗心磷脂(ACL-IgG、ACL-IgM)以及抗β2GP1水平与患者凝血、纤溶指标存在明显相关性,进而增加患者血栓性疾病发生率。