抗β_(2)糖蛋白1抗体检测结果差异化的研究进展

抗磷脂综合征(APS)是一种由抗磷脂结合蛋白自身抗体引发的自身免疫性疾病,临床特点为动静脉血栓形成、习惯性流产或死胎等,实验室检查可见抗磷脂抗体(aPL)阳性。抗β_(2)糖蛋白1抗体(anti-β_(2)-GP1)作为一种aPL,在APS的诊断中起着重要作用。但由于anti-β_(2)-GP1的极度异质性,导致目前国内外均未形成统一的检测标准,并且不同厂家商品化试剂盒的检测差异巨大,会影响临床医师的判断,给临床诊断带来一定的困扰。该研究就anti-β_(2)-GP1检测差异化的研究进展进行综述。

穴位贴敷联合补肾活血法对复发性流产病人外周血中抗β2糖蛋白Ⅰ抗体、血小板功能的有效性分析

目的:探究穴位贴敷联合补肾活血法对复发性流产病人的有效性分析。方法:选取复发性流产病人90例,将其随机分为西药组(A组)、西药+中药组(B组)、西药+中医综合治疗组(C组),每组30例。A组:口服阿司匹林;B组:口服阿司匹林同时给予补肾活血中药;C组在B组的基础上应用穴位贴敷;均至孕12周。观察3组病人治疗前后临床疗效、血清人绒毛促性腺激素(hCG)、孕酮(P)、抗心磷脂抗体(ACA)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(Anti-β2-GPⅠ)及B超情况等。结果:治疗后,3组疗效差异有统计学意义(P<0.05);C组疗效高于A、B组(P<0.05~P<0.01)。治疗后,3组病人hCG与P较同组治疗前明显升高(P<0.01),C组明显高于A、B组(P<0.01)。治疗后,B、C组病人ACA及Anti-β2-GPI阳性率均较同组治疗前降低(P<0.05),A组与治疗前比较降低程度差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,3组ACA和Anti-β2-GPI阳性率比较,差异均有统计学意义(P>0.05),其中C组低于A组和B组(P<0.05)。治疗后,3组血小板功能均有所改善,D-二聚体(D-D)水平明显低于治疗前(P<0.01),C组D-D水平明显低于A、B组(P<0.01),B组明显低于A组(P<0.01)。结论:穴位贴敷联合补肾活血法对复发性流产病人治疗具有显著疗效,可有效改善病人激素水平及血小板功能,提高病人治愈率,值得在临床应用。

血清抗精子抗体、抗心磷脂抗体及抗β_(2)糖蛋白抗体I对多囊卵巢综合征患者冻融胚胎移植治疗后流产的评估价值

目的探讨血清抗精子抗体(ASAb)、抗心磷脂抗体(ACA)及抗β_(2)糖蛋白抗体I(A-β_(2)-GPI)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者行冻融胚胎移植(FET)治疗后流产的评估价值,为临床上妊娠不良结局进行预防和控制提供参考依据。方法回顾性分析2020年1月至2021年6月于玉林市妇幼保健院首次行FET治疗的159例PCOS患者的临床资料,根据妊娠结局分为流产组(34例)与活产组(125例)。通过单因素、多因素Logistic回归分析PCOS患者行FET治疗后流产的危险因素,进一步用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清ASAb、ACA及A-β_(2)-GPI预测PCOS患者行FET治疗后流产的价值。结果单因素分析结果显示,流产组患者血清ASAb、ACA、A-β_(2)-GPI水平均高于活产组;多因素Logistic回归分析显示,ASAb、ACA、A-β_(2)-GPI升高均是PCOS患者行FET治疗后流产的独立危险因素(均P<0.05);ROC曲线分析显示,ASAb、ACA、A-β_(2)-GPI对PCOS患者FET治疗后流产的预测评估曲线下面积(AUC)分别为0.831、0.775、0.898,其中A-β_(2)-GPI敏感度、特异度相对较高,分别为0.822、0.904。结论PCOS患者多伴有ASAb、ACA、A-β_(2)-GPI水平升高,进而使PCOS患者容易引发流产,血清ASAb、ACA、A-β_(2)-GPI均对FET治疗后流产有一定的预测价值,临床上应针对性进行干预,降低PCOS患者流产风险。

抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β_2糖蛋白1抗体在系统性红斑狼疮患者中的意义

目的探讨抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者中的意义。方法分别采用化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附法检测372例SLE患者、80例其他结缔组织病患者及60例健康体检者血清中抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体。同时分析这4个指标与SLE及其病情严重程度的相关性。结果在检测的372例SLE患者组中,抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体的阳性率分别为31.45%、14.52%、10.22%和29.03%,其表达水平分别为(90.39±35.43)U/ml、(41.25±23.16)U/ml、(32.27±15.77)U/ml、(61.42±21.69)U/ml,与SLEDAI积分呈正相关(P<0.05)。在80例疾病对照组中,抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体的阳性率分别为7.50%、2.50%、0和1.25%。而在60例正常对照组中,4项检测结果均为阴性。抗IgG型心磷脂抗体阳性与血小板减少、白细胞减少、血栓形成、习惯性流产和肾脏病变有关;抗IgM型心磷脂抗体阳性与血小板减少、白细胞减少、血栓形成和肾脏病变有关;抗IgA型心磷脂抗体阳性与血小板减少、血栓形成和肾脏病变有关;抗β_2糖蛋白1抗体阳性与血小板减少、白细胞减少、溶血性贫血、血栓形成、习惯性流产和肾脏病变有关。结论抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β_2糖蛋白1抗体在SLE的发病及病情发展中起到了非常重要的作用,定量和联合检测对SLE的诊断、病情严重程度的评价、判断预后及疗效观察等均有重要的临床意义。

兔抗人β_2糖蛋白Ⅰ多克隆抗体的制备与鉴定

目的制备兔抗人β2糖蛋白Ⅰ多克隆抗体,并鉴定抗体的特异性及功能活性。方法以纯化的人血浆β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)免疫新西兰大白兔,获得抗血清;利用Protein A及β2-GPI亲和层析柱纯化血清中总IgG和抗β2-GPI多克隆抗体;用免疫双向扩散试验(IDD)、ELISA和western-blot等方法鉴定抗体。结果IDD及ELISA鉴定抗体效价分别达到16和1×105;western-blot显示纯化的总IgG和抗β2-GPI抗体与β2-GPI蛋白均有特异反应条带;且抗体与β2-GPI复合物能够刺激单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)活性。结论成功获得并纯化兔抗人β2-GPI多克隆抗体,为进一步研究β2-GPI/抗β2-GPI复合物在抗磷脂抗体综合征血栓形成机制中的作用建立了基础。

抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体与反复自然流产的关系

目的:探讨抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β2-GPⅠantibody)与反复自然流产(RSA)的关系。方法:采用酶联免疫吸附法检测81例RSA患者和39例正常妇女血清中anti-β2-GPⅠ的水平。结果:RSA组anti-β2-GPⅠ及其IgG型抗体阳性率分别为42.0%和40.8%,显著高于对照组(7.7%)(P<0.01,P<0.05);IgM型抗体阳性率与对照组比较差异无显著性(P>0.05);早期与中晚期RSA两组间及RSA 2次与RSA≥3次两组间阳性率比较差异均无显著性(P>0.05)。结论:anti-β2-GPⅠ与RSA有关,可作为RSA免疫因素的辅助诊断指标。

氧化修饰的β_2-糖蛋白-1诱导抗心磷脂抗体的产生

目的：探讨蛋白质的氧化修饰与体内抗磷脂抗体产生的关系。方法：首先，在体外以次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶氧化系统氧化大鼠β_2-GP1，然后以氧化的β_2-GP1（oxβ_2－GP1）免疫同种大鼠，最后以ELISA方法检测被免疫大鼠β_2-GP1血清中的抗心磷脂抗体（ACA）。结果：氧化的β_2-GP1免疫的大鼠血清中产生高滴度的ACA。结论：β_2－GP1的氧化修饰在ACA的产生上可能起十分重要的作用。

人β_2糖蛋白1的重组表达及对抗磷脂抗体综合征患者血清诱导内皮细胞产生ICAM-1的影响

目的:探讨重组人β2糖蛋白1(hrβ2-GP1)对抗磷脂抗体综合征(APS)患者血清诱导内皮细胞系产生细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响。方法:应用pQE30表达载体表达hrβ2-GP1,Western blotting对重组蛋白进行鉴定;应用hrβ2-GP1处理前后的APS患者血清分别与内皮细胞株EA.hy926共孵育,细胞ELISA和RT-PCR方法分析处理前后EA.hy926表达ICAM-1的变化。结果:成功构建pQE30-hβ2-GP1,并对表达产物进行了纯化和鉴定,所获得的蛋白与预期的大小一致,并具有人β2-GP1的抗原性;rhβ2-GP1处理后的APS患者血清与处理前比较,与其孵育的内皮细胞系EA.hy926表达ICAM-1在蛋白和mRNA水平均明显降低,这种抑制作用随着rhβ2-GP1的浓度增加而逐渐增强。结论:抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2GP1)促进内皮细胞系EA.hy926表达ICAM-1,hrβ2-GP1可中和此作用。

系统性红斑狼疮患者血清抗内皮细胞抗体和抗β_2糖蛋白I抗体水平及其对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的:检测抗内皮细胞抗体(AECA)和抗β2GP-Ⅰ抗体在SLE患者血清中的水平及探讨AECA对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响。方法:收集系统性红斑狼疮(SLE)患者90例和正常对照40例,留取血清,经酶联免疫吸附法(ELISA)检测AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平。收集SLE患者部分临床指标,分析AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平与临床指标间的关系。将不同浓度AECA的SLE患者血清加入HUVEC培养基,应用四唑盐比色试验(MTT)法检测各组OD值判断内皮细胞增殖状态。结果:SLE患者血清中AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平显著高于正常对照组(P<0.01)。在90例SLE患者中33例抗β2GP-Ⅰ抗体阳性,该33例SLE患者对应的AE-CA、APTT水平和SLE活动评分(SLEDAI)积分均显著高于其余57例SLE患者(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。同时该33例患者AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平呈高度正相关(r=0.984,P<0.01),AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平均与SLE-DAI呈正相关(P<0.05),抗β2GP-Ⅰ抗体水平与凝血酶原时间(PT)间存在正相关(r=0.349,P<0.05)。空白对照组、健康对照血清组和低浓度AECA血清组间OD值无差异,而高浓度AECA血清组OD值显著低于以上3组(P<0.05)。结论:AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体与SLE疾病活动相关,AECA在体外对HUVEC增殖有抑制作用。

抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体诱导血液单核细胞表达组织因子活性的机制探讨

目的:探讨抗β2糖蛋白Ⅰ(抗β2GPⅠ)抗体诱导血液单核细胞表达组织因子(TF)活性的机制。方法:利用纯化的抗磷脂综合征(APS)患者血清IgG、单克隆抗β2GPⅠ抗体、抗Annexin A2抗体等刺激血液单核细胞及单核细胞株,通过凝血因子Ⅹa的生成量,判断细胞TF活性的表达;利用W estern杂交技术检测单核细胞膜表面AnnexinA2的表达;采用免疫细胞化学染色判断单核细胞膜表面Annexin A2、β2GPⅠ、抗β2GPⅠ抗体的结合情况。结果:APS患者血清IgG和抗β2GPⅠ抗体显著增强单核细胞TF的表达;单核细胞膜表达的Annexin A2与β2GPⅠ/抗β2GPⅠ结合成复合物,引发细胞TF表达增强;抗Annexin A2抗体可抑制复合物的这种作用。结论:细胞表面Annexin A2介导β2GPⅠ/抗β2GPⅠ诱导单核细胞表达TF活性,是APS血栓形成的机理之一。

β_2糖蛋白1多肽抗体的制备与应用

目的 利用人工合成β2糖蛋白1（β2GP1）多肽制备针对人源、鼠源β2GP1的多克隆抗体, 并鉴定抗体的特异性及致病性。方法 应用Fmoc法化学合成β2GP1 N端第35~51位氨基酸的多肽, 将合成后的多肽与钥孔血蓝蛋白（KLH）偶联, 免疫新西兰大白兔制备抗血清, 蛋白G纯化得到抗β2GP1多肽抗体, 利用ELISA和Western blot法鉴定其效价和特异性。体外实验使用抗β2GP1多肽抗体/β2GP1复合物刺激C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞一定时间, 收集细胞总RNA和总蛋白, 实时定量PCR、Western blot法分别检测细胞组织因子（TF）mRNA和蛋白表达; Western blot法检测细胞p38、磷酸化p38、核因子κB p65（NF-κB p65）及磷酸化NF-κB p65表达情况; 体内实验采用C3H/HeN小鼠腹腔注射抗β2GP1多肽抗体建立实验性抗磷脂综合征（EAPS）模型, 检测小鼠外周血抗β2GP1抗体滴度及部分凝血活酶时间（APTT）。结果 化学合成β2GP1多肽的纯度为94％, 达到免疫用抗原标准。偶联KLH后免疫新西兰大白兔, 其抗血清效价大于1∶32 000。Western blot结果显示抗β2GP1多肽抗体可特异性识别人源和鼠源β2GP1条带, 双抗夹心ELISA检测表明该多肽抗体可与β2GP1隐蔽表位特异性结合。体外实验显示抗β2GP1多肽抗体/β2GP1复合物能够增强小鼠腹腔巨噬细胞p38、 NF-κB p65磷酸化, 诱导细胞TF mRNA及蛋白表达。体内实验成功建立EAPS小鼠模型, 小鼠外周血抗β2GP1抗体滴度大于1∶3200, APTT明显缩短。结论 所制备的抗β2GP1多肽抗体可识别人源和鼠源β2GP1分子, 能与β2GP1隐蔽抗原特异性结合且具有致病效应。

清热活血方对β_2-糖蛋白诱导的抗心磷脂抗体产生的影响及机理研究

目的:观察清热活血方对β_2-糖蛋白(β_2-GPI)诱导的抗心磷脂抗体(aCL)产生的影响,探讨清热活血方对抗磷脂抗体综合征(APS)的治疗作用及可能的作用机制。方法:4周龄的30只雌性昆明种小鼠被随机分为3组:A组(用药组)、B组(模型组)、C组(正常对照组);A组用清热活血方5g/(kg·d)灌胃;14d后,A、B两组多部位皮下注射β_2-GPI;检查血清aCL、外周血T细胞亚群和IL-2生物活性。结果:A组各周血清aCL OD值均较B组有不同程度降低(P<0.01)。与B组相比,A组可明显降低T_H/T_s比值(P<0.01),可使不同稀释度的IL-2活性明显降低(P<0.01)。经双变量直线分析,T_H/T_S比值和IL-2生物活性呈正相关(P<0.01)。结论:清热活血方可抑制β_2-GPI诱导的aCL的产生,其作用机理可能是抑制T_H/T_S比值和IL-2生物活性的升高。

不孕不育妇女血清中抗心磷脂抗体、抗β_2糖蛋白1抗体和抗精子抗体的检测价值

目的:探讨抗心磷脂抗体(ACA)、抗β2糖蛋白1抗体(抗β2-GP1抗体)以及抗精子抗体(AsAb)在女性不孕不育患者中的检测价值。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)和间接免疫荧光法检测102例女性不孕不育患者血清中ACA、抗β2-GP1抗体和AsAb。结果:女性不孕不育患者AsAb阳性率为35.2%,其阳性率明显高于对照组(P<0.05);ACA总阳性率为31.4%,其中ACA-IgG、ACA-IgM和ACA-IgA抗体阳性率分别为24.5%、14.7%和5.8%;抗β2-GP1抗体的总阳性率为29.4%,其中抗β2-GP1-IgG、抗β2-GP1-IgM和抗β2-GP1-IgA抗体阳性率分别为21.5%、12.7%和3.9%。ACA和抗β2-GP1抗体的IgG、IgM阳性率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACA、抗β2-GP1抗体和AsAb是引起免疫性不孕不育症的重要原因,其检测有助于免疫性不孕不育症的诊断。

系统性红斑狼疮患者血浆内皮微粒和抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体的检测

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）是一种自身免疫性疾病,可引起全身多脏器损害,临床上常出现静脉血栓、血小板减少、溶血性贫血及神经系统改变等表现,研究表明SLE的许多临床表现与血栓形成密切相关,而内皮功能障碍在血栓形成中亦扮演着重要角色,内皮微粒（endothelial mi-croparticles，EMP）是内皮细胞凋亡或激活时释放的亚微米级颗粒，检测血浆中EMPs的水平是新近提出的评估内皮功能障碍的方法。

过敏性紫癜及过敏性紫癜性肾炎患者中抗β2糖蛋白1抗体水平的研究

目的通过研究比较过敏型紫癜非肾炎患者、过敏性紫癜性肾炎患者与健康人群中抗β2-GP1抗体水平变化,来明确抗β2-GP1抗体在过敏性紫癜及过敏性紫癜性肾炎发病过程中是否有相关性。同时比较抗β2-GP1抗体阳性与阴性患者中,红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)水平,来明确抗β2-GP1抗体与炎症指标的相关性。方法将80例过敏性紫癜患者根据是否有肾炎,分为40例过敏性紫癜非肾炎组及40例过敏性紫癜性肾炎组。40例健康者作为健康对照组。采用酶联免疫吸附法检测,比较3组血清中抗β2-GP1抗体阳性率。并比较过敏性紫癜患者中,抗β2-GP1抗体患者与非阳性患者中ESR、CRP水平。结果过敏性紫癜非肾炎组较健康对照组抗β2-GP1抗体阳性率明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);过敏性紫癜性肾炎组较过敏性紫癜非肾炎组抗β2-GP1抗体阳性率明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。过敏性紫癜非肾炎组及肾炎组中抗β2-GP1抗体阳性患者较抗体阴性患者的ESR、CRP水平明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论抗β2-GP1抗体可能与过敏性紫癜及过敏性紫癜性肾炎有相关性,可能参与炎症反应。

抗β_2糖蛋白1抗体、基质金属蛋白酶9与川崎病相关性及临床意义

目的观察川崎病急性期患儿血清抗β2糖蛋白1(β2GP1)抗体、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,探讨其与川崎病相关性及临床意义。方法采用ELISA法检测47例川崎病患儿血清抗β2GP1抗体、MMP-9水平,应用SPSS11.5软件进行数据分析。30例同期住院、年龄相仿的感染性疾病患儿为发热对照组,均除外心、肝、肾、血液及风湿性疾病。结果47例川崎病患儿中并发冠状动脉病变者17例。川崎病组和对照组血清中抗β2GP1抗体水平分别为(7.46±2.13)U/ml和(4.38±0.43)U/ml;MMP-9分别为(886.62±92.72)ng/ml和(460±179.59)ng/ml,两组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);川崎病组中冠状动脉损伤与冠状动脉正常患儿血清抗β2GP1抗体分别为(8.83±0.89)U/ml和(6.18±1.42)U/ml,MMP-9分别为(948.62±81.76)ng/ml和(872.00±34.74)ng/ml,两组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);川崎病组血清中抗β2GP1抗体、MMP-9水平呈显著正相关(r=0.665,P<0.05)。结论抗β2GP1抗体、MMP-9在川崎病急性期尤其伴冠状动脉病变时明显升高,两者在川崎病发生、发展过程中具有协同作用,是川崎病冠状动脉损伤血清学重要指标。

抗β2-糖蛋白1抗体的临床意义

抗β2-糖蛋白1抗体(aβ2-GP1)是以磷脂结合蛋白为靶抗原的抗磷脂抗体。20世纪90年代初,三个研究小组同时发现抗磷脂综合征病人的抗心磷脂抗体识别的是血浆中的β2-糖蛋白1 (β2-GP1),而非心磷脂,由此打开了研究者对β2-GP1的兴趣大门。随着研究进展,目前发现aβ2-GP1在多种疾病的发生发展中起着十分重要的作用。本文将对aβ2-GP1在多种临床疾病中的意义作一综述。

育龄期妇女抗心磷脂抗体和抗β_2-糖蛋白1抗体检测及临床应用

抗磷脂抗体综合征（ASP）是常见的疾病,易引起习惯性流产、早产、死胎等症状.临床上,依赖病人表现和磷脂抗体（aPL）来确诊.aPL有多种,其中最重要、最具代表性的aPL是抗心磷脂抗体（aCL）和抗β2-糖蛋白1 （β2-GP1）抗体.……