血清癌胚抗原细胞角蛋白19的可溶性片段纤维蛋白原D-二聚体和前白蛋白与非小细胞肺癌化疗患者预后的相关性分析

目的分析血清癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19的可溶性片段(CYFRA21-1)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)和前白蛋白(PAB)与非小细胞肺癌(NSCLC)化疗患者预后的相关性。方法采取回顾性研究,选择2021年6月至2023年6月医院收治120例行化疗治疗的NSCLC患者临床资料作为研究对象。均接受顺铂+吉西他滨(GD)方案化疗,随访12个月,根据随访期间存活情况进行分组,将存活患者临床资料纳入预后良好组,将病死患者临床资料纳入预后不良组。患者入院时均接受血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D和PAB检测,统计患者基线资料。采用双变量相关性Pearson(N)分析,血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D、PAB水平与NSCLC化疗患者生存期的关系;二元Logistic回归分析血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D、PAB水平与NSCLC化疗患者预后不良之间的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D、PAB水平预测NSCLC化疗患者预后不良的价值;采用样条函数与Logistics回归相结合的限制性立方样条法分析血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D、PAB水平与NSCLC化疗患者预后不良的剂量反应关系。结果预后不良组分化程度为低分化、临床分期为Ⅲ~Ⅳ期患者占比高于预后良好组,CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D高于预后良好组,PAB低于预后良好组(P<0.05);采用双变量相关性Pearson(N)分析显示,血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D水平与NSCLC化疗患者生存期呈负相关(P<0.05),血清PAB水平与NSCLC化疗患者生存期呈正相关(P<0.05);二元Logistic回归分析结果显示,血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D高表达是NSCLC化疗患者预后不良的危险因素(OR>1,P<0.05),血清PAB高表达是NSCLC化疗患者预后不良的保护因素(OR<1,P<0.05);绘制ROC曲线结果显示,血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D、PAB水平预测NSCLC化疗患者预后情况的曲线下面积(AUC)均>0.70,有一定预测价值;NSCLC化疗患者血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D水平与NSCLC化疗患者预后不良呈正相关,特别当血清CEA>24.53μg/ml、CYFRA21-1>7.82μg/ml、FIB>3.99 g/L、D-D>1.05μg/ml时,NSCLC化疗患者预后不良风险随血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D水平升高而升高,NSCLC化疗患者PAB水平与NSCLC化疗患者预后不良呈负相关,当血清PAB<209.76 g/L时,NSCLC化疗患者预后不良风险随PAB水平降低而升高。结论血清CEA、CYFRA21-1、FIB、D-D和PAB水平与NSCLC化疗患者预后关系密切,上述指标可有效预测NSCLC化疗患者预后不良风险。

荔枝落果中A型低聚原花青素抑制类甜蛋白促炎机制

以荔枝落果中的A型低聚原花青素为研究对象,探讨其对荔枝类甜蛋白(litchi thaumatin-like protein,LcTLP)促炎的抑制机理。采用乙醇提取、大孔吸附树脂纯化以及制备液相色谱仪等从荔枝落果中分离得到A型低聚原花青素(A-type oligomeric proanthocyanidins,A-OPC)纯化物,并对A-OPC结构鉴定,主要成分为原花青素A2、2个A型原花青素三聚体和1个A型四聚体,纯度达88.69%。利用LcTLP诱导构建RAW264.7细胞炎症模型,A-OPC的添加可抑制LcTLP诱导RAW264.7细胞的一氧化氮、细胞炎症因子白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α的分泌,在120μg/mL质量浓度下,抑制率分别可达58.38%、39.80%和86.31%(P<0.01)。蛋白免疫印迹分析发现,在120μg/mL质量浓度下A-OPC可降低诱导型一氧化氮合酶和环氧合酶2的表达量,并显著降低p65、核因子κB抑制蛋白、c-Jun氨基末端激酶、细胞外信号调节蛋白激酶和p38的磷酸化水平,说明A-OPC通过下调核转录因子-κB和丝裂原活化蛋白激酶通路中下游蛋白的磷酸化水平抑制LcTLP诱导的炎症反应。

检测抗聚丝蛋白抗体在类风湿关节炎诊断中的意义

目的探讨抗聚丝蛋白抗体(AFA)对类风湿关节炎(RA)诊断的价值,并比较与RA的其他早期诊断指标的相关性。方法从人表皮细胞中提取并部分纯化聚丝蛋白(filaggrin)抗原,用于免疫印迹检测(Western blot)103例RA血清标本和140例对照血清,包括系统性红斑狼疮(SLE)、干燥综合征(SS)、骨性关节炎(OA)95份及正常人45份。APF和AKA用间接免疫荧光法检测。结果103例RA病人的AFA阳性率、特异性分别为35.9%,93.7%,显著高于疾病对照组和正常人(P<0.001)。在AFA阳性的37例中,AKA也阳性的为26例,重叠率为70.3%;APF亦阳性的为31例,重叠率为83.8%,AFA与AKA、APF之间存在相关性。结论AFA对RA具有很高的特异性。AFA的检测可用于RA的临床诊断。AFA与APF及AKA有相关性,但不能完全取代它们的检测。

重组人β2糖蛋白1第一结构域二聚体作为抗磷脂抗体综合征B细胞耐受原的初步探讨

目的:探讨重组人β2糖蛋白1第一结构域二聚体(rhβ2-GP1-DⅠ2)对重组人β2糖蛋白1(rhβ2-GP1)免疫小鼠β2-GP1特异性B细胞反应的抑制作用。方法:应用固相ELISA方法,检测静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2后免疫小鼠产生的抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-GP1)滴度及anti-β2-GP1产生水平比率;应用ELISPOT方法,检测静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2后免疫小鼠脾脏β2-GP1特异性抗体形成细胞(AFC)数量。结果:静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2后,与对照组比较,rhβ2-GP1免疫小鼠βanti-β2-GP1滴度明显降低(P<0.01),anti-β2-GP1产生水平比率下降,β2-GP1特异性AFC数量明显减少(P<0.01)。结论:静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2能够抑制rhβ2-GP1免疫小鼠β2-GP1特异性B细胞的反应能力。

快速斑点酶标法检测抗丝聚蛋白抗体

目的建立一种快速、简便的抗丝聚蛋白抗体（anti-filaggrin antibody,AFA）的检测方法。方法采用快速斑点酶标法（Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA）检测15份AFA阳性的类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者和15份AFA阴性的正常健康者血清的AFA。检测中采用不同浓度的丝聚蛋白、不同的封闭液、不同浓度的酶标抗体,摸索检测条件。确定检测条件后,采用R-Dot-ELISA和ELISA法检测100例RA患者和150例包括系统性红斑狼疮（SLE）、强直性脊柱炎等非RA的自身免疫病患者和50例健康者血清的AFA,比较两种方法检测AFA的一致性,并判断R-Dot-ELISA检测AFA对RA的诊断价值。结果丝聚蛋白浓度为40-160μg/m L,封闭液为含1%BSA和10%小牛血清的PBS,酶标抗体稀释度为1∶80-1∶320是较合适的检测条件。R-Dot-ELISA与ELISA法检测AFA,结果一致率为98%（r=0.947,P〈0.05）,对RA诊断的敏感度、特异度等统计学指标无差异。结论 R-Dot-ELISA检测AFA快速、简便,且对RA的诊断具有较高的敏感性及特异性,适用于基层流行病学调查和临床快速诊断。

抗心磷脂抗体、脂蛋白(a)、D-二聚体和纤维蛋白原的检测在冠心病中的临床意义

目的 :探讨抗心磷脂抗体 (ACA)、脂蛋白 (a) (LP(a) )、D -二聚体 (DD)和纤维蛋白原 (Fg)与冠心病 (CHD)的关系。方法 :检测 32例急性心肌梗塞 (AMI)、2 5例不稳定型心绞痛 (UAP)、2 0例稳定型心绞痛 (SAP)患者血清ACA、LP(a)和血浆DD、Fg的浓度。另外选择健康人群 5 0例作为对照组 (CG)。结果 :(1 )CHD患者ACA阳性率、LP(a)、DD和Fg浓度明显高于健康对照组 (CG) (P <0 .0 1 ) ;(2 )CHD各型之间ACA阳性率、LP(a)、DD和Fg浓度差异也有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;(3)AMI溶栓后梗死相关动脉 (IRA)再通者的ACA阳性率、LP(a)和Fg浓度明显下降 ,DD在早期明显升高 (P <0 .0 1 )。结论 :测定抗心磷脂抗体、脂蛋白 (a)、D

甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 EGF片段多克隆抗体的制备及鉴定

目的制备甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MBL-associated serine protease-2,MASP-2)EGF功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定,为后续研究奠定基础。方法利用带有EGF基因片段的p GEX-6P-2原核载体诱导表达GST-EGF融合蛋白,并采用商品化GST-Beads进行纯化;将纯化的融合蛋白作为抗原,与弗氏完全佐剂充分混合后,免疫5周龄BALB/c雌性健康小鼠,制备多克隆抗体;利用琼脂双扩散法检测多克隆抗体的效价,并进一步应用Western blot鉴定多克隆抗体的特异性及效价。结果成功表达并纯化EGF蛋白,以此成功制备出特异性强的GST-EGF融合蛋白的多克隆抗体,与其他蛋白无交叉反应;琼脂双扩散法检测的EGF抗体效价为1∶8;Western blot检测的EGF抗体效价大于1∶2 000。结论成功制备出具有特异性强且效价高的GST-EGF蛋白的多克隆抗体。

猪发育期牙胚釉原蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备

目的 制备猪釉质蛋白多克隆抗体 ,为釉原蛋白的检测提供条件。方法 选择 1月龄乳猪 ,分离埋于上下颌骨内的牙胚 ,刮取牙胚表面干酪样尚未完全矿化的釉质基质 ,通过盐酸胍抽提及SephadexG_2 0 0柱层析分离纯化猪发育期牙胚釉原蛋白 ,联合免疫家兔 ,抗血清经DE_5 2纤维素纯化 ,并经ELISA测定抗体效价。结果 SDS_PAGE电泳结果发现采用SephadexG_2 0 0葡聚糖凝胶过滤能达到较为理想的釉原蛋白分离纯化效果 ,用所提纯的猪釉原蛋白免疫家兔 ,成功地制得兔抗猪釉原蛋白抗血清 ,抗血清稀释达 1∶32 0 0 0时 ,采用ELISA法仍有明显的抗原抗体反应。结论 本实验成功制备得到抗釉原蛋白多克隆抗体 ,为釉原蛋白的检测提供了条件。

家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂Bmserpin 6的原核表达及对酚氧化酶原活性和抗菌肽表达的调控作用

丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)对昆虫的免疫反应起重要调节作用。根据家蚕基因组数据库序列设计引物,从家蚕幼虫血细胞中克隆了Bmserpin6的编码基因,并构建重组表达载体,在大肠杆菌中成功表达了重组Bmserpin6蛋白。将纯化的重组Bmserpin6注射家蚕5龄幼虫后6 h提取家蚕血液制备血清,检测血清样品中的酚氧化酶原活性显著下降(P<0.05)。体腔注射重组Bmserpin6后的家蚕5龄幼虫再通过微球菌诱导蚕体内抗菌肽gloverin2基因的表达,结果显示幼虫脂肪体和血细胞中的gloverin2基因表达显著下调(P<0.05)。依据上述结果推测:体外表达的重组Bmserpin6可以调节蚕体内2个重要的免疫途径,即抑制蚕体酚氧化酶原的激活和外源细菌诱导的蚕体抗菌肽的产生。

血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体检测法的建立与应用

目的建立血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的ELISA法,探讨其在类风湿关节炎(RA)患者中的应用价值。方法以自提可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(soluble chicken collagen type Ⅱ,SCCⅡ)作为包被抗原,优化实验条件,建立抗Ⅱ型胶原蛋白抗体间接ELISA法。对124例RA病人和54例健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体进行检测。结果血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的检测条件为:SCCⅡ包被浓度为20μg/ml;以含10%羊血清的缓冲液进行封闭、稀释血清和酶标抗体;采用双波长(450nm/630nm)进行测定。RA患者和健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体阳性率分别为19.35%(24/124)和1.85%(1/54),两组有明显的统计学差异(P<0.01)。结论以SCCⅡ为包被抗原检测抗Ⅱ型胶原蛋白抗体可作为判断RA患者病情的一个辅助诊断指标。

抗环瓜氨酸肽、纤维蛋白原和D-二聚体与类风湿关节炎患者病情活动性的关系研究

目的探讨抗环瓜氨酸肽（CCP）、纤维蛋白原（Fg）和D-二聚体与类风湿关节炎（RA）患者病情活动性的关系。方法选取2014年1~12月湖北医药学院附属十堰市人民医院60例RA患者为研究对象（RA组）,同时选取60例正常体检者为对照组,采用酶联免疫吸附试验法测定CCP、Fg及D-二聚体水平。结果 RA组患者CCP、Fg及D-二聚体水平高于对照组,差异有统计学意义[（59±22）U/L比（15±4）U/L,（3.80±0.18）g/L比（2.78±0.29）g/L,（963±112）μg/L比（321±23）μg/L,P〈0.01]。RA组低活动度及高活动度患者CCP、Fg及D-二聚体水平显著高于RA缓解期[（60±5）U/L、（83±5）U/L比（35±5）U/L,（3.56±0.29）g/L、（4.78±0.36）g/L比（2.98±0.42）g/L,（789±92）μg/L、（1245±110）μg/L比（499±85）μg/L],差异有统计学意义（P〈0.01）。RA患者血浆CCP、Fg、D-二聚体与病情活动度指数（DAS）呈正相关（r=0.396,0.412,0.426,P〈0.05）。结论 RA患者血清CCP、Fg及D-二聚体水平显著高于正常人群,且与疾病活动度有密切的关系,提示纤溶系统激活可能在RA疾病发生及进展中起到重要的作用。

血清胃蛋白酶原、血清胃泌素-17与抗幽门螺杆菌IgG抗体在萎缩性胃炎及胃癌筛查中的应用价值

近年来研究发现，血清胃蛋白酶原、血清胃泌素-17与抗幽门螺杆菌抗体在萎缩性胃炎及胃癌筛查中具有应用价值，甚至认为这些指标是胃黏膜血清学活检，现将有关进展简述如下。

口服抗凝剂治疗患者血浆纤维蛋白原、纤维蛋白单体和D-二聚体检测的临床意义

目的：探讨口服抗凝剂治疗患者抗凝剂剂量稳定,而国际标准化比值（INR）发生变化时血浆中纤维蛋白原（FIB）、纤维蛋白单体（FM）和D-二聚体（D-D）变化的临床意义。方法：采集42例INR稳定于1.4～3.0口服抗凝剂治疗患者前后2次间隔1个月以上的血液及30例正常对照组血液,分别采用一期凝固法检测血浆凝血酶原时间（PT）、Clouse法检测FIB、免疫比浊法检测FM和D-D。根据患者前后两次INR值的变化分为INR降低组和INR升高组,比较2组FIB、D-D、FM的变化;根据INR值不同范围分为INR〈1.8组、INR 1.8～2.5组、INR 2.5～3.0组,比较3组FIB、D-D、FM的变化。结果：20例口服抗凝剂患者INR降低后FIB、D-D、FM均显著升高,差异有统计学意义（均P〈0.001）;22例口服抗凝剂患者INR升高后FIB、D-D、FM与INR升高前差异无统计学意义（均P〉0.05）;INR〈1.8组FIB、D-D、FM均明显高于INR 1.8～2.5组、INR 2.5～3.0组和正常对照组,差异有统计学意义（均P〈0.05）;其他各组间各参数差异无统计学意义（均P〉0.05）。结论：口服抗凝剂治疗患者在做PT-INR监测的同时检测FIB、FM、D-D含量可更好地了解患者体内凝血功能状态,有效预防出血或血栓形成。

抗TGF-β2抗体对滤过泡瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的观察抗转化生长因子-β2(TGF-β2)抗体对体外培养的滤过泡成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法利用手术修复人眼小梁切除术后失败滤过泡修复时切除下来的瘢痕组织进行组织块培养,获得成纤维细胞(FB)。将0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用于FB24h以及0.14μg/mL(半数抑制率质量浓度,IC50)抗体作用0、24、48、72h,通过生物化学显色法、RT-PCR法检测抗TGF-β2抗体对成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达量。结果在FB中加入0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用24h及IC50质量浓度处理0、24、48、72h,结果显示随着抗TGF-β2抗体质量浓度增加及作用时间延长,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达依次减少,羟脯氨酸(HPr)及胶原含量逐渐降低(P<0.05)。结论抗TGF-β2抗体能减少Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达及合成。

血清胃蛋白酶原和抗幽门螺杆菌IgG抗体对消化性溃疡的诊断意义

目的对消化性溃疡患者体内抗幽门螺杆菌(Hp)IgG抗体及血清胃蛋白酶原(PG)水平变化的临床意义进行分析和探讨。方法选择2012年12月至2014年12月于该院接受治疗的50例消化性溃疡的患者为试验组,选取同期至该院接受健康体检的50例健康体检者为对照组,采用胶乳增强免疫透射比浊法对研究对象的血清PG进行检测,采用酶联免疫吸附试验对两组研究对象的血清抗Hp IgG抗体水平检测,分析两组的血清PG水平变化情况及血清抗Hp IgG抗体水平。结果试验组PGⅡ水平为(25.32±7.42)ng/mL、PGⅠ水平为(179.31±53.24)ng/mL、血清胃蛋白酶原比值(PGR)为7.92±2.01,对照组的PGⅡ水平为(12.34±3.23)ng/mL、PGⅠ为(56.37±14.35)ng/mL、PGR为(3.89±0.97),试验组均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。试验组抗Hp IgG抗体阳性率为76.00%,明显高于对照组的28.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。抗Hp IgG抗体阳性患者的PGⅡ、PGⅠ及PGR水平明显高于抗Hp IgG抗体阴性患者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论抗Hp IgG抗体及血清PG水平变化有利于对消化性溃疡做出诊断,具有重要临床价值。

桂北壮族和汉族急性缺血性脑卒中患者116例脂蛋白α、纤维蛋白原、抗心磷脂抗体的对比分析

目的探讨桂北地区壮族和汉族急性缺血性脑卒中(AIS)患者脂蛋白α[LP(α)]、纤维蛋白原(Fib)、抗心磷脂抗体(ACLA)水平变化及差别。方法共检测AIS患者116例,其中壮族42例,汉族74例。据梗死面积分为腔隙性梗死组33例(壮族12例、汉族21例)、非腔隙性梗死组83例(壮族30例、汉族53例),正常对照组54例(壮族20例、汉族34例)。分别测定LP(α)、Fib和ACLA水平。结果AIS组血清LP(α)和Fib水平明显高于对照组(P<0.01),但两者无相关性(r=-0.067,P>0.05);壮族与汉族患者差异无统计学意义(P>0.05);AIS组ACLA阳性率明显高于对照组(P<0.05),但两民族患者差异无统计学意义(P>0.05);非腔隙性梗死组与腔隙性梗死组血清LP(α)和ACLA比较差异有统计学意义(前者P<0.05,后者P<0.01),而血清Fib水平比较无统计学意义(P>0.05);两民族患者差异无统计学意义(P>0.05)。结论LP(α)、Fib和ACLA在缺血性脑卒中患者中明显增高,是急性缺血性脑卒中临床事件的独立危险因素,对临床评估缺血性脑卒中危险性及梗死面积有一定意义。上述指标在桂北地区壮族与汉族患者无差异。

脑梗死患者D-二聚体、抗心磷脂抗体与脂蛋白(a)的变化及其意义探讨

目的探讨脑梗死患者血清中抗心磷脂抗体(ACA)、D-二聚体(D-Dimer)、脂蛋白a(Lp(a))含量变化与脑梗死的关系和意义。方法采用ELISA法和免疫比浊法测定脑梗死患者63例,疾病对照组65例,正常对照组38例血清中ACA,D-Dimer,Lp(a)的变化特点。结果脑梗死组ACA及ACA-IgG、D-Dimer,Lp(a)含量高于正常对照组(P<0.01)。脑梗死组ACA-IgM与疾病对照组比较差异无显著性意义(P>0.05),疾病对照组ACA及ACA-IgG、ACA-IgM、Lp(a)与正常对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。大面积脑梗死患者的D-Dimer,Lp(a)含量高于小面积脑梗死组(P<0.01,P<0.05)。ACA阳性组D-Dimer,Lp(a)的含量高于ACA阴性组(P<0.01)。结论血中ACA,D-Dimer,Lp(a)的含量变化与脑梗死的发生、发展有密切关系,是脑梗死的重要危险因素,可作为脑梗死诊断、治疗、预后判断的重要实验室指标。

聚凝胺法、试管抗人球蛋白法和微柱凝胶法检测Rh混合抗体的灵敏性分析

目的:对比分析聚凝胺法、试管抗人球蛋白法和微柱凝胶法检测Rh混合抗体的灵敏性。方法:采用聚凝胺法、抗人球蛋白法和微柱凝胶法对抗筛阳性标本进行抗体鉴定。结果:在6份标本中,试管抗人球法检出4份单一抗体,微柱凝胶法检出5份单一抗体,两种检测方法均漏检了弱的抗E、抗c、抗e抗体,而聚凝胺法检出6份混合抗体。结论:采用试管抗人球蛋白法和微柱凝胶法进行抗体鉴定均可能会漏检弱的Rh抗体,而采用聚凝胺法对Rh系统抗体进行检测的灵敏度更高,对提高输血的安全性及疗效具有十分积极的意义。

血栓患者抗心磷脂抗体与纤维蛋白原关系

目的 :观察血栓患者抗心磷脂抗体 (ACA)与纤维蛋白原 (Fg)之间的关系。方法 :应用间接ELISA法检测 10 2例血栓患者和 6 0例正常人血清中的ACA水平 ,并同时在生化分析仪上测定Fg含量。结果 :急性心肌梗死、脑梗死、肾病综合征ACA阳性率分别为 38.2 %、33.3%、31.3% ,6 0份正常人血清全呈阴性 (Fg<4 .0g/L)。 35例ACA阳性患者中Fg同时升高的有 12例。结论 :3组血栓患者ACA阳性率均高于正常对照组 ,各种血栓患者 3种Ig类别ACA阳性检出率无显著差异 ,实验组存在一定程度的Fg含量的升高 ,其中尤以ACA阳性者为甚 (P <0 .0 1)。ACA与Fg含量的升高都会加重或加快微血管血栓的形成。

抗胰蛋白酶原激活肽单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备抗胰蛋白酶原激活肽(TAP)单克隆抗体(TAP McAb),并进行初步鉴定.方法将人工合成的TAP与血蓝蛋白(KLH)交联作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,有限稀释法筛选出能稳定分泌TAP McAb的杂交瘤细胞株,并对单克隆抗体进行鉴定.结果细胞融合率85.03%,经4次克隆化后获得10株能稳定分泌TAP McAb的杂交瘤细胞株,经免疫球蛋白亚类鉴定,除1株为IgG1外,其余9株均为IgM类;染色体数目为92～101条;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测杂交瘤细胞培养上清效价为1:20～1:160,腹水效价为1:3 200 ～1:25 600;特异性试验表明,抗TAP单克隆抗体与牛血清白蛋白(BSA)、人白蛋白、胰蛋白酶、淀粉酶均无交叉反应;中和抑制试验表明,培养上清及腹水中的抗体能明显被合成多肽TAP及为急性胰腺炎患者尿液所中和;对其中5株细胞株进行相对亲和力分析结果表明,2C3>8C6>6H7>6F7>8B10.结论成功制备了抗TAP单克隆抗体,为建立敏感、特异的TAP免疫检测方法奠定了基础.