快速斑点酶标法检测抗丝聚蛋白抗体

目的建立一种快速、简便的抗丝聚蛋白抗体（anti-filaggrin antibody,AFA）的检测方法。方法采用快速斑点酶标法（Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA）检测15份AFA阳性的类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者和15份AFA阴性的正常健康者血清的AFA。检测中采用不同浓度的丝聚蛋白、不同的封闭液、不同浓度的酶标抗体,摸索检测条件。确定检测条件后,采用R-Dot-ELISA和ELISA法检测100例RA患者和150例包括系统性红斑狼疮（SLE）、强直性脊柱炎等非RA的自身免疫病患者和50例健康者血清的AFA,比较两种方法检测AFA的一致性,并判断R-Dot-ELISA检测AFA对RA的诊断价值。结果丝聚蛋白浓度为40-160μg/m L,封闭液为含1%BSA和10%小牛血清的PBS,酶标抗体稀释度为1∶80-1∶320是较合适的检测条件。R-Dot-ELISA与ELISA法检测AFA,结果一致率为98%（r=0.947,P〈0.05）,对RA诊断的敏感度、特异度等统计学指标无差异。结论 R-Dot-ELISA检测AFA快速、简便,且对RA的诊断具有较高的敏感性及特异性,适用于基层流行病学调查和临床快速诊断。

ELISA法检测血清抗丝聚蛋白抗体对类风湿性关节炎的诊断价值

目的探讨ELISA法检测血清抗丝聚蛋白抗体(AFA)对类风湿性关节炎(RA)的诊断价值。方法分别采用ELISA法和免疫荧光法检测RA(RA组,50例)、系统性红斑狼疮(SLE组,20例)、强直性脊柱炎(AS组,20例)患者和健康者(C组,20例)的血清AFA,比较两种方法检测血清AFA对RA诊断的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确率。结果 ELISA法和免疫荧光法检测AFA阳性率:RA组为74%和52%,SLE组为15%和0,AS组为5%和10%,C组均为0。ELISA法检测AFA对RA诊断的敏感度高于免疫荧光法(P<0.05),两种方法检测AFA对RA诊断的特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确率无统计学差异。两种方法检测AFA的结果密切相关(r=0.63,P<0.05)。结论 ELISA法检测血清AFA对RA有较高的诊断价值。

检测抗聚丝蛋白抗体在类风湿关节炎诊断中的意义

目的探讨抗聚丝蛋白抗体(AFA)对类风湿关节炎(RA)诊断的价值,并比较与RA的其他早期诊断指标的相关性。方法从人表皮细胞中提取并部分纯化聚丝蛋白(filaggrin)抗原,用于免疫印迹检测(Western blot)103例RA血清标本和140例对照血清,包括系统性红斑狼疮(SLE)、干燥综合征(SS)、骨性关节炎(OA)95份及正常人45份。APF和AKA用间接免疫荧光法检测。结果103例RA病人的AFA阳性率、特异性分别为35.9%,93.7%,显著高于疾病对照组和正常人(P<0.001)。在AFA阳性的37例中,AKA也阳性的为26例,重叠率为70.3%;APF亦阳性的为31例,重叠率为83.8%,AFA与AKA、APF之间存在相关性。结论AFA对RA具有很高的特异性。AFA的检测可用于RA的临床诊断。AFA与APF及AKA有相关性,但不能完全取代它们的检测。

几种自身抗体辅助诊断类风湿关节炎临床应用评价

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是以关节慢性炎症为主的自身免疫性疾病,疾病后期患者关节致残率很高。预防和减少骨关节破坏,减少致残率并提高患者的生活质量,关键在于对RA患者进行早期诊断和早期治疗。本研究检测RA患者血清中类风湿因子（rheumatoid factors,RF）、抗环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide,CCP）抗体、抗RA33抗体、抗核周因子（antiperinuclear factor,APF）、

肽酰基精氨酸脱亚氨酶-4、抗环瓜氨酸肽抗体联合检测在类风湿关节炎诊断中的应用价值

目的:研究肽酰基精氨酸脱亚胺酶-4(PADI-4)、抗环瓜氨酸抗体(抗CCP抗体)联合检测在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。方法:用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测58例RA患者(RA组)、40例其他风湿性疾病患者(非RA组)和30名健康志愿者(健康对照组)的血清PADI-4、抗CCP抗体、抗聚角蛋白傲丝蛋白抗体(AFA)、抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(抗MCV抗体)和抗RA33抗体的浓度,并对其受试者工作特征曲线、灵敏度、特异度、相关性和诊断效能进行分析。结果:RA患者血清中PADI-4、抗CCP抗体、AFA、抗MCV抗体和抗RA33抗体的浓度均显著高于非RA组和健康对照组(P<0.01);采用受试者工作特征曲线,PADI-4和抗CCP抗体诊断RA的最佳临界值为1.284 U/L和26.365 RU/m L,此时的灵敏度为62.1%和81.1%,特异度为91.4%和95.7%;PADI-4与AFA、抗RA33抗体、抗MCV抗体均呈明显正相关关系(P<0.01);PADI-4与抗CCP抗体无相关关系(P>0.05)。在多种抗体联合检测中,PADI-4、抗CCP抗体均为阳性诊断RA的特异度高达100.0%,单项检测PADI-4为91.4%,抗CCP抗体为95.7%。结论:PADI-4、抗CCP抗体联合检测能提高RA的特异性和灵敏度,有助于对RA的诊断。

类风湿关节炎五种自身抗体的检测及其诊断意义

目的分析在类风湿关节炎(RA)中抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、抗核周因子抗体(APF)、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)、抗RA33抗体和类风湿因子(RF)在诊断中的意义。方法选取RA组63例,非RA组67例,正常对照组30例,进行相关实验指标测定,并对结果进行统计学分析。结果抗CCP抗体、APF、AFA、抗RA33抗体、RF在RA诊断中的敏感度为87.3%、55.6%、38.1%、27.0%、69.8%;特异度为91.0%、92.5%、94.0%、91.0%、79.1%;联合检测五个指标,出现其中一种抗体阳性者63例(100%),两种阳性者54例(85.7%),三种阳性者34例(54.0%),四种阳性者18例(28.6%),五种检测均阳性者6例(9.5%)。在非RA中,无四种以上抗体检测阳性者。抗CCP抗体阳性组和阴性组患者在肿胀关节数、压痛关节数、DAS28评分、RF滴度,骨侵蚀发生率方面差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗CCP抗体对RA的诊断有较高的敏感度和特异度。联合检测多种血清学指标,有助于RA的诊断和鉴别诊断。抗CCP抗体与RA的骨侵蚀和病情活动度有关。

联合检测AFA与抗CCP抗体RF对评估类风湿关节炎的临床意义

目的：①检测类风湿关节炎（RA）患者血清抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）、抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体及类风湿因子（RF），比较单独检测和联合检测对RA诊断的敏感性，特异性，阳性预测值。②比较AFA、抗CCP抗体阳性组与阴性组间关节指数、晨僵时间，血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP），X线骨侵蚀之间的关系。③分析引起骨侵蚀的危险因素。方法：RA组92例血清标本来自2003年10月～2005年1月就诊于内蒙古医学院附属医院内科门诊及住院患者。AFA、抗CCP抗体用酶联免疫吸附法（ELISA），RF、CRP用液相终点散射沉淀法。结果：①AFA、抗CCP抗体阳性率与对照组有统计学意义（P〈0．05）。②AFA、抗CCP抗体、RF联合检测的敏感性降低，特异性、阳性预测值较单独检测明显升高（P〈0．05）。③AFA、抗CCP抗体阳性组病情活动指标与阴性对照组差异有统计学意义（P〈0．05），抗CCP抗体阳性是RA发生骨侵蚀的危险因素之一。结论：抗CCP抗体、AFA有共同的抗原决定簇，存在相关性，但不完全重叠。临床上与RF联合检测有助于提高RA的早期诊断、预测病情的活动性及严重程度。具有广泛的临床应用前景。

AFA、抗CCP抗体RF对类风湿关节炎诊断及病情评估的意义(英文)

目的:①检测类风湿关节炎(RA)病人血清抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及类风湿因子(RF),比较单独检测和联合检测对RA诊断的敏感性、特异性、阳性预测值.②比较AFA、抗CCP抗体阳性组与阴性组间关节指数、晨僵时间、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、X线骨侵蚀之间的关系.③分析引起骨侵蚀的危险因素.方法:RA组92例血清标本来自2003-10～2005-01就诊于内蒙古医学院附属医院内科门诊及住院病人.AFA、抗CCP抗体用酶联免疫吸附法(ELISA),RF、CRP用液相终点散射沉淀法.结果:①AFA、抗CCP抗体阳性率与对照组有统计学意义(P＜0.05).②AFA、抗CCP抗体、RF联合检测的敏感性降低,特异性、阳性预测值较单独检测明显升高(P＜0.05).③AFA、抗CCP抗体阳性组病情活动指标与阴性对照组差异有统计学意义(P＜0.05),抗CCP抗体阳性是RA发生骨侵蚀的危险因素之一.结论:抗CCP抗体、AFA有共同的抗原决定簇,存在相关性,但不完全重叠.临床上与RF联合检测有助于提高RA的早期诊断、预测病情的活动性及严重程度,具有广泛的临床应用前景.

类风湿性关节炎自身抗体及其临床意义

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的致畸性系统性自身免疫性疾病,滑膜炎持久反复发作关节内软骨和骨质被破坏关节功能障碍是RA的主要临床特征。其病因和发病机制尚未阐明,患者在发病两年内即可出现不可逆的骨关节破坏,最后将导致关节强直、畸形和功能丧失。大量研究显示多种自身抗体对于RA早期诊断和鉴别诊断,了解病情发展,监测药物治疗效果,判断疾病的严重程度和预后均有重要价值。现将RA患者自身抗体的研究进展综述如下。

抗聚角蛋白微丝蛋白抗体的检测在类风湿关节炎诊断中的意义

目的 探讨抗聚角蛋白微丝蛋白抗体 (AFA)对RA诊断的意义 ,并比较其与抗核周因子抗体 (APF) ,抗角蛋白抗体 (AKA)以及HLA DR4之间的相关性。方法 用免疫印迹法 (WB)检测 15 7例类风湿关节炎 (RA)血清标本和 10 4例对照血清 ,包括系统性红斑狼疮 (SLE)、干燥综合征(SS)、骨关节炎 (OA)等的AFA。APF和AKA用间接免疫荧光法检测。结果 15 7例RA病人的AFA敏感性和特异性分别为 36 3% ,93 4% ,与疾病对照组和正常对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。 5 7例AFA阳性的血清中 ,其中AKA同时阳性的有 36例 ,重叠率为 6 3 2 % ;APF同时阳性的有 38例 ,重叠率为 6 6 7% ;HLA DR4同时阳性的有 30例 ,重叠率为 5 2 6 %。统计学分析证实AFA与AKA、APF及HLA DR4之间有相关性。结论 AFA对RA具有很高的特异性 ,可用于RA的临床诊断。AFA与APF、AKA及HLA DR4有相关性。AFA不能完全替代APF和AKA ,三项临床检测可互相补充 。

抗聚丝蛋白抗体诊断类风湿性关节炎的Meta分析

目的评价抗聚丝蛋白抗体(AFA)对类风湿性关节炎(RA)诊断的准确性。方法计算机检索PubMed(1966～2010.8)、Cochrane Library(2010年第8期)、EMbase(1974～2010.8)、中国生物医学文献数据库(1978～2010.8)、CNKI(1994～2010.8)、VIP(1989～2010.8)和中华医学会数字化期刊库(1997～2010.8)等,并追索纳入研究的参考文献,查找AFA与修订的RA分类标准(ACR)比较诊断类风湿性关节炎的诊断性试验,依据QUADAS质量评价标准评价纳入研究的质量,采用Meta-Disc 1.4软件进行Meta分析。结果共纳入18篇文献,6 971例受试者。Meta分析结果显示:与ACR相比,AFA诊断RA的合并敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、诊断OR值和SROC分别为0.52(0.50,0.54)、0.93(0.92,0.94)、7.11(5.35,9.45)、0.53(0.48,0.60)、13.82(9.93,19.24)和0.8347。结论应用免疫印迹和ELISA法检测AFA时,其对RA的诊断效能高,有一定的临床应用前景。

间接免疫荧光法和免疫印迹法联合检测抗聚角蛋白微丝蛋白抗体对类风湿关节炎的诊断价值

目的探讨用间接免疫荧光(IIF)和免疫印迹(IB)两种方法联合检测抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AKA/AFA)对类风湿关节炎(RA)诊断的价值。方法对401份血清标本进行检测,包括185例RA,164例非RA的风湿病患者,52名健康对照。以Wistar大鼠食管中段角质层冰冻切片为底物,用IIF法检测抗角蛋白抗体(AKA/AFA),以人乳腺癌上皮提取的聚角蛋白微丝蛋白为抗原,用IB法检测AFA。结果IIF法、IB法及两种方法联合检测AFA的敏感性分别为36.7%、46.5%、56.2%,特异性分别为94.5%、95.7%、93.3%,两种方法联合检测阳性预测值90.4%,阴性预测值65.4%。联合检测较IIF法单独检测敏感性增加20%,经χ2检验差异有显著性(P<0.01);联合检测较IB法单独检测敏感性增加10%,经χ2检验差异无显著性(P=0.058);而联合检测没有降低其特异性(P>0.05;P>0.05)。在164例非RA病人对照组中,两种方法联合检测AFA阳性11例,1年追踪观察结果显示,其中3例符合1987年ACR的RA的诊断标准4条以上,另外3例符合3条。结论AFA是RA的特异性血清学标记,IIF法和IB法检测AFA有相似的诊断价值,特异性高而敏感性低;两种方法检测结果相关,但不重叠;联合使用两种方法检测AFA有助于提高RA诊断的敏感性。

血清GPI、抗CCP抗体、抗MCV抗体和AFA联合检测在类风湿关节炎诊断中的临床分析

目的:评价葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)在类风湿关节炎(RA)诊断中的意义,并比较多种指标联合检测在RA诊断中的意义。方法:对178例确诊为RA的患者进行血清学指标检测,并进行回顾性分析。血清GPI、抗CCP抗体、抗MCV抗体、AFA检测均采用酶联免疫吸附法,采用χ~2检验和Pearson相关分析对多种指标在RA诊断中的价值及相关性进行比较,并对不同指标间的联合检测进行讨论分析。结果:GPI、抗CCP抗体、抗MCV抗体和AFA在RA组的特异性和灵敏度分别为65.00%和70.22%、95.00%和84.83%、78.33%和72.47%、75.71%和63.48%。RA组中GPI、抗CCP抗体、抗MCV抗体和AFA阳性率分别为70.22%、84.83%、72.47%、63.48%,显著高于对照组的11.67%、5.00%、21.67%、13.33%,差异有统计学意义(P<0.001);任意3种或4种指标联合检测特异性较高,但敏感度降低,明显低于单项检测抗CCP抗体,差异有统计学意义(P<0.001);任意3种或4种指标联合检测较单一指标检测均具有较高的阳性率,差异有统计学意义(P<0.001),尤其是GPI+抗CCP抗体+抗MCV抗体+AFA联合检测,RA组中阳性率可达96.07%。结论:GPI、抗CCP抗体、抗MCV抗体和AFA均可作为RA诊断的血清学指标,多种血清学指标联合检测有助于提升RA诊断的阳性率。

抗聚角蛋白微丝蛋白抗体在早期类风湿关节炎中的意义

目的研究抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)在早期类风湿关节炎(RA)的意义。方法对275例血清样本,包括112例早期RA,113例未明确诊断的早期关节炎,50名健康对照,以免疫印迹法(IB)检测AFA。结果A FA在早期R A组,未确诊早期关节炎组及健康对照组中的检出率分别为68.8%,16.8%,0。经χ检验,早期R A组显著高于未确诊早期关节炎组(χ=59.918,P=0.000)。AFA对早期RA的22敏感性为72%,特异性为94%。AFA阳性组的平均年龄、平均发病年龄高于阴性组(P=0.037,P=0.043)。AFA与年龄有关。AFA与抗核周因子抗体(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及抗Sa抗体均有相关性。AFA与早期R A患者的疾病活动性和严重度无关。AFA阳性率在超早期R A(病程<6个月)与早期RA(6月≤病程<1年)病例中差异无统计学意义。结论A FA存在于RA疾病的早期,对早期RA诊断有较好的敏感性和特异性,并且对RA的诊断有很好的预测性。AFA与疾病活动度、功能状态可能无关;AFA与A PF、A KA、抗CCP抗体及抗Sa抗体均有相关性,但不完全重叠,可互相补充。

一种国产抗环瓜氨酸肽抗体酶联免疫吸附试验检测试剂盒的评价

近年来，国内外均有研究报道抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗体（AKA）和抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）的共同抗原决定簇环瓜氨酸肽（CCP）对类风湿关节炎（RA）具有较高的特异性和敏感性，这对早期诊断RA具有重要意义，被视为RA新的血清学指标。目前，开展抗CCP抗体检测项目的国内医院用的都是国外产品，因国外产品价格偏高。限制了其广泛使用。

脱亚胺基重组鼠聚微丝蛋白抗体在类风湿关节炎活动性评价中的意义

目的探讨脱亚胺基重组鼠聚微丝蛋白抗体（ArFA）在类风湿关节炎（RA）病情活动性判断中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别测定61例活动性RA患者和48例非活动性RA患者血清中ArFA，并检测红细胞沉降率（ESR）、类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP），记录关节压痛数、肿胀数、晨僵时间等RA病情活动性评价指标。同时比较20例RA患者治疗前后ArFA的水平变化。结果RA活动组的ArFA抗体水平较非活动组高[（130±35）U／L与（66±25）U／L，P=0．004]，治疗后ArFA水平较治疗前有明显下降（79．8U／ml与118．2U／ml，P=0．000）。结论ArFA可以反映RA病情的活动性，可作为RA临床活动评价指标之一。

人表皮聚角蛋白微丝蛋白的提取及其在类风湿关节炎诊断中的应用

目的 建立从人表皮提取聚角蛋白微丝蛋白 (filaggrin)抗原的方法 ,检测抗filaggrin抗体 (AFA)在类风湿关节炎 (RA)中的分布 ,探讨AFA对早期RA诊断的价值。方法 从人表皮细胞中提取并部分纯化filaggrin抗原 ,经SDS PAGE后用免疫印迹法检测 (Westernblot) 10 3例类风湿关节炎 (RA)血清和 140例对照血清 ,包括系统性红斑狼疮 (SLE)、干燥综合征 (SS)、骨关节炎 (OA)等。结果 本研究方法提取的filaggrin能作为AFA免疫印迹检测的抗原。 10 3例RA病人中AFA敏感性和特异性分别为 35 9%、93 7% ,与疾病对照组和正常对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 从人表皮提取和部分纯化filaggrin抗原 ,能满足免疫印迹检测的要求。用免疫印迹法检测RA患者的AFA抗体 ,对RA有较好的敏感性和特异性 ,可临床用于RA的诊断。由于基因的变异性 ,不同个体的filaggrin表达强弱不同。

抗环瓜氨酸肽抗体在类风湿关节炎发病机制病情进展及治疗监测中的意义

20世纪末，随着对类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）研究的深入，逐步发现抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗体（AKA）以及抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）对RA的诊断具有高度特异性，且这些抗体在化学结构上具相关性，抗原决定簇中都含有瓜氨酸。瓜氨酸是一种稀有氨基酸，来源于翻译后酶修饰的精氨酸残基。2000年，荷兰Schellekens等将上述由19个氨基酸残基组成的一条瓜氨酸肽链中的两个丝氨酸替换成半胱氨酸，

自拟三乌通络汤合针灸治疗活动期类风湿关节炎疗效观察

目的观察自拟三乌通络汤合针灸治疗活动期类风湿关节炎的疗效。方法将148例活动期类风湿关节炎患者随机分为2组,对照组74例给予甲氨蝶呤+来氟米特治疗,观察组74例在此基础上辅以自拟三乌通络汤合针灸治疗,观察2组治疗前后主要证候积分、晨僵时间、休息疼痛VSA评分、关节肿胀个数、手部握力、关节压痛个数、28处关节疾病活动度(DAS28)评分、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)及抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)水平变化,统计2组近期疗效和不良反应发生情况。结果2组治疗后主要证候积分、晨僵时间、休息疼痛VSA评分、关节肿胀个数、关节压痛个数、DAS28评分、TNF-α、抗CCP及AFA水平均显著降低(P均<0.05),且观察组均明显低于对照组(P均<0.05);2组手部握力及IL-4、IL-10水平均显著提高(P均<0.05),且观察组均显著高于对照组(P均<0.05);观察组临床总有效率显著高于对照组(P<0.05);2组不良反应均较轻。结论自拟三乌通络汤合针灸及西药治疗类风湿关节炎能够有效缓解相关症状体征,减轻关节损伤,调节炎性细胞因子、抗环瓜氨酸肽抗体及抗聚角蛋白微丝蛋白抗体水平,且安全。